SE245 Caster Gel Double

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1 man uel de l utilisateur Français SE245 Caster Gel Double m SE245-IM/French/Rev.I0/08-12

2 Table des matières Double fonction de Caster Gel et la description...1 Déballage...1 Préparer le lanceur de sorts de gel...2 Construire la pile sandwich de gel et de le placer dans le lanceur...2 Verser le gel...5 Préparation de gel d empilement...6 Après polymérisation...7 Dépannage...8 Entretien et maintenance...8 Informations pour la commande...9 pi

3 Fig 1. Caster Gel double. Le sandwich de gel est maintenu par le dispositif de serrage de coulée. Double fonction de Caster Gel et la description Le Gel Caster SE245 double détient un ou deux verre ou verre/alumine sandwiches plaque de gel pour la coulée des gels d acrylamide. A joints de came le fond du sandwich contre un joint en caoutchouc. Une fois que le gel est formé, sandwichs sont transférées à une mini-hoefer verticale unité pour électrophorèse. Déballage Déballez tous les paquets soigneusement et de comparer le contenu avec la liste de colisage, en s assurant que tous les articles sont arrivés. Si une pièce est manquante, contactez votre bureau de vente local. Inspecter tous les composants pour les dommages qui ont eu lieu alors que l appareil était en transit. Si une partie quelconque semble être endommagé, contactez immédiatement le transporteur. Soyez sûr de garder tous les matériaux d emballage pour dommages et intérêts ou d utiliser si elle s avère nécessaire de retourner l appareil. barre de pression Retour bloquer Fonderie ensemble de serrage (2) vis de serrage Silicone joints en caoutchouc (2 de chaque côté; 1 blanc sous-joints et 1 noir sur-joint) Coulée berceau Cames (4) Tirez sur cames de démonter le lanceur p1

4 Préparer le lanceur de sorts de gel 1 Démonter le lanceur de sorts: Tirer sur les deux paires de cames noires sur le côté du berceau de coulée et de sortir les deux ensembles de serrage de coulée. Retirez le joint en silicone de caoutchouc noir du fond de son berceau et aussi le joint mousse blanche en dessous. 2 Laver tous les composants de roulettes de gel, de verre et des plaques d alumine et d entretoises avec un détergent doux. Rincez abondamment avec de l eau déminéralisée. Fig 2. Le lieu des entretoises en forme de T sur la plaque à encoches. Fig 3. Aligner les bords inférieurs de plaques et entretoises avec précaution. Construire la pile sandwich de gel et de le placer dans le lanceur 1 Desserrer les 6 vis de serrage sur l ensemble de la coulée et le poser à la verticale sur une surface plane. Faites glisser les deux barres de pression en plastique hors du bloc arrière. 2 Construire chaque sandwich de gel: Pour chaque sandwich, choisissez l une alumine crantée ou plaque de verre, une plaque de verre rectangulaire et deux entretoises. Utilisez uniquement des plaques unchipped. Fixer la plaque à encoches sur une surface plane, déposer une entretoise le long de chaque bord de sorte qu il soit aligné avec l encoche. Monter une plaque de verre sur les entretoises comme indiqué. Le côté long et plat des entretoises en forme de T s insère entre les deux plaques. La partie supérieure du T repose le long des côtés des plaques (figure 2). Alternativement, assembler le sandwich alors qu il est en position debout: aligner les fonds de la plaque sur une surface plane et aligner les entretoises avec les côtés des plaques (figure 3). p2

5 Remarque: Porter des gants pour garder le lanceur de sorts et de plateaux libres de traces de doigts. 3 Faites glisser le sandwich dans le dispositif de serrage de coulée, une plaque crantée en face du bloc arrière, et des fonds de plaques affleurantes à la surface plane. 4 Tout en maintenant le sandwich en place, fixez-le en serrant tous les 6 vis jusqu à ce qu ils soient serrés à la main. (Pour éviter la rupture des plaques, ne serrez pas trop.) 5 Vérifier la plaque d alignement et d espacement. Pour prévenir les fuites, le fond des plaques entretoises et doivent être alignés et le sandwich doit faire saillie légèrement au-dessous du bloc de retour. Régler si nécessaire. 6 Placez la garniture de mousse blanche dans le fond de la fente de coulée et de jeter le joint noir sur elle. 7 Placez le dispositif de serrage dans le berceau de coulée, la vis du côté tourné vers l extérieur. Dans cette position le gel est visible à travers la plaque de verre rectangulaire. 8 Insérer une came dans chaque trou des deux côtés de la station de coulée avec la flèche (extrémité courte) pointant vers le haut. Sceller le sandwich en tournant les deux cames 180 de telle sorte que la flèche pointe vers le bas. p3

6 Fig ,5 cm des plaques de gel serré correctement pour coulage de gel. Si les plaques sont plus de 8 cm, utiliser des pinces à ressort pour fixer la section supérieure des plaques. La plaque à encoches faces du bloc de retour. Les vis face à l extérieur. Sceller le sandwich en tournant les deux cames de telle sorte que l extrémité courte de la came (la flèche) pointe vers le bas. Important! Les fonds de plaques et l entretoise doivent être alignées pour une bonne étanchéité. p4

7 Attention! L acrylamide est une neurotoxine. Toujours porter des gants et observer toutes les procédures de sécurité en laboratoire. Verser le gel 1 Préparer la quantité requise de solution de monomère. Désaérer et ajouter l initiateur et un catalyseur juste avant la coulée du gel. Utiliser une pipette pour fournir la solution dans un coin de la plaque, en prenant soin de ne pas introduire de poches d air. Voir ci-dessous pour le niveau de la solution appropriée en fonction de l application. Pas de gel d empilement Remplir solution à juste en dessous du haut de la plaque à encoches. Si des poches d air former, les retirer avec une pipette ou une seringue. Mettre en place un peigne (avec un léger angle) dans chaque sandwich, en prenant soin de ne pas emprisonner des bulles d air sous les dents. Empilement de gel Remplir solution à 3 cm en dessous du haut de la plaque de verre rectangulaire. Cette hauteur permet 1 cm de gel d empilement ci-dessous les puits. Verser le gel et appliquer une superposition. Après que le gel est polymérisé, la préparation du gel d empilement tel que décrit ci-dessous. Électrophorèse 2-D Remplir solution à environ 1,5 cm en dessous du haut de la plaque de verre rectangulaire et appliquer un revêtement. Cette hauteur permet de 4-5 mm d espace pour la bande IPG et un joint d agarose. 2 Superposer chaque gel avec une mince couche d eau saturée du n-butanol, de l eau, ou un tampon de gel dilué pour minimiser l exposition de la surface supérieure de la solution de gel à l oxygène. Livrer la solution de superposition lentement à partir d une seringue en verre munie d une aiguille de calibre 22. Appliquer la solution à proximité de l entretoise et lui permettre de s écouler à travers la surface nu. 3 Permettre au gel pour polymériser pour un minimum d une heure. p5

8 Préparation de gel d empilement Verser un gel d empilement soit alors que le sandwich est toujours dans la semoule de gel ou après, il est transféré à l unité d électrophorèse (voir les instructions d instruments). La résolution est optimale lorsque le gel d empilement est versé juste avant l électrophorèse. Pour verser un gel d empilement dans la coulée de gel double: 1 Retirez le cache en rinçant le haut du gel à plusieurs reprises avec de l eau distillée. Inversez le lanceur de sorts à égoutter. Pour assurer un contact continu entre les gels de séparation et d empilage, enlever tout liquide résiduel en tamponnant un coin avec un tissu non pelucheux. 2 Calculer le volume de l empilement solution de monomère de gel nécessaire. Préparer la solution de gel d empilement monomère, il désaérer, et ajouter de catalyseur et initiateur. 3 Verser le gel d empilement sur le gel de résolution avec une pipette Pasteur. 4 Mettre en place un peigne (avec un léger angle) dans le sandwich, en prenant soin de ne pas emprisonner de l air sous les dents. Laisser le gel se polymériser. p6

9 Après polymérisation 1 Pour supprimer les peignes (si nécessaire): couvrir le haut du gel avec un tampon 1X gel de séparation ou de stockage, puis de travailler chaque peigne lentement en secouant délicatement il côté à l autre tout en le tirant. 2 Retirer le sandwich de gel depuis le berceau de coulée en dévissant les vis de la barre de pression, d inclinaison vers l avant du sandwich, et en le soulevant. 3 Rincer le sandwich avec de l eau distillée pour enlever le tampon et le gel supplémentaire, puis épongez le sandwich avec un tissu non pelucheux. 4 Pour exécuter des gels: Suivez les instructions qui accompagnent l unité d électrophorèse. Pour stocker des gels: Enveloppez gels individuels dans une pellicule de plastique après l ajout d env. 5 ml de tampon de gel de séparation 1X au début de chaque sandwich. Sinon, mettre un lot de gels dans 1X tampon séparant. Gels conserver à 4 C pour une semaine au maximum. p7

10 Dépannage Fuites sandwich de gel Remplacez les assiettes ébréchées. Vérifier l alignement de plaque et l entretoise et de réaligner si nécessaire. Vérifiez le joint noir pour des coupures ou des fissures et remplacer si nécessaire. Appliquer une fine pellicule de gel Seal dans le coin inférieur extérieur de chaque entretoise. Exemple de puits endommagé ou irrégulier Retirez les poches d air et les bulles avant d insérer les peignes. Coulisser peigne dans la solution à un angle. Si des bulles persistent, retirez peigne, ajouter la solution de plusieurs monomères et réinsérez le peigne. Prévoir un minimum de 1 heure pour la polymérisation des gels d acrylamide. Retirer le peigne à un léger angle et très lentement pour éviter d endommager le gel. Important! Décontaminer l instrument de toute la radioactivité et/ou des agents infectieux avant de retourner l article! Inclure la documentation pour vérifier que cela a été fait. Entretien et maintenance Lavez et rincez tous les composants roulettes immédiatement après usage. Ne pas autoclaver ou chauffer une partie supérieure à 45 C. Ne pas utiliser de solvants organiques, des abrasifs, des solutions de nettoyage puissants ou d acides ou de bases fortes pour nettoyer toute pièce plastique. Ne pas faire tremper les joints. Nettoyer avec un détergent doux, puis laissez sécher à l air. Nettoyez les plaques de verre et les entretoises avec une solution diluée d un détergent de laboratoire tels que RBS-35 (Pierce Chemical Co.), puis rincer abondamment à l eau distillée et du robinet. Les plaques de verre peuvent également être traitées avec (mais pas stockés dans) des solutions de nettoyage acides. p8

11 Informations pour la commande produit quantité code Caster Gel et pièces de rechange SE245 Caster Gel double, complète 1 SE245 Pour 1 ou 2 gels, 10 8, 10,5 Ensemble joint d étanchéité 2 SE246 Coulée ensemble de serrage 1 SE249 Cams, noir 4 SE6005L Pinces, rouge 4 SE252 Gel Seal, 1/4 oz. 1 SE6070 Les plaques de verre et d alumine 10 8 cm, pour SE250 Entaillé plaque d alumine 1 SE202N Entaillées plaques d alumine 10 SE202N-10 Des plaques de verre rectangulaires 10 SE202P ,5 cm, pour SE260 et minive Entaillé plaque d alumine 5 SE262N-5 Entaillées plaques d alumine 5 SE262GN-5 Des plaques de verre rectangulaires 5 SE262P-5 p9

12 Entretoises épaisseur largeur (mm) (cm) quantité code Pour SE250 0, SE2119T , SE2119T , SE2119T Pour SE260 et minive 0,75 10,5 2 SE2619T ,00 10,5 2 SE2619T ,50 10,5 2 SE2619T Peignes nombre puits epaisseur (mm) largeur (mm) quantité code 5 0,75 13,0 1 SE211A ,00 13,0 1 SE211A ,50 13,0 1 SE211A *9* 1,00 5,8 1 SE211A ,75 4,8 1 SE211A ,00 4,8 1 SE211A ,50 4,8 1 SE211A ,00 4,75 1 SE211A ,75 2,9 1 SE211A ,00 2,9 1 SE211A ,50 2,9 1 SE211A * 1,00 2,9 1 SE211A /1 0,75 68/5 1 SE211A-R-,75 1/1 1,00 68/5 1 SE211A-R-1.0 1/1 1,50 68/5 1 SE211A-R-1.5 *Espacement de microtitration Préparative/référence puit p10

13 Hoefer, Inc. 84 October Hill Road Holliston, MA Sans frais: Téléphone: Fax: Web: Hoefer est une marque déposée de Hoefer, Inc. RBS-35 est une marque déposée de Pierce Chemical Co Hoefer, Inc. Tous droits réservés. Imprimé dans le USA. p11