APPEL D OFFRES RELATIF A LA FOURNITURE ET A LA MISE EN SERVICE D UN LC-MS/MS (CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE COUPLEE A LA SPECTROMETRIE DE MASSE EN TANDEM)

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1 Réf 15/ CAHIER DES CHARGES APPEL D OFFRES RELATIF A LA FOURNITURE ET A LA MISE EN SERVICE D UN LC-MS/MS (CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE COUPLEE A LA SPECTROMETRIE DE MASSE EN TANDEM)

2 Sommaire PARTIE I - CONDITIONS D APPEL D OFFRES... 3 Article 1 - Spécifications techniques du système LC-MS/MS... 3 Article 2 - Modalités de contrôle des performances du système par l Ifremer... 6 Article 3 - Informations techniques supplémentaires requises par l Ifremer... 8 Article 4 - Présentation de l offre PARTIE II - CONDITIONS ESSENTIELLES DU CONTRAT DE FOURNITURE Article 1 : Délai et lieu de livraison- Pénalités de retard Article 2 : Prix Modalités de paiement Article 3 : Procédure de réception Article 4 - Réception Conformité Article 5 - Garantie Maintenance Article 6 - Formation initiale et perfectionnement Article 7 - Assistance technique ANNEXES... 13

3 Préambule Le présent appel d offres a pour objet la fourniture, le paramétrage, la livraison, l installation, ainsi que la mise en service d un système complet de Chromatographie Liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS) au profit de l Ifremer. Ce système permettra l analyse qualitative et quantitative de polluants organiques persistants dans différentes matrices de l'environnement marin. Cette fourniture inclut également des prestations de formation du personnel à l utilisation, au fonctionnement et à l entretien courant du système LC-MS/MS ainsi qu une garantie pièces, main d œuvre et déplacement. Les candidats détailleront les modalités et la durée de cette garantie. Une durée de trois (3) années est demandée par l Ifremer. Ce système sera installé sur le Centre Ifremer de Nantes, Bâtiment scientifique, 1 er étage, salle S101 du laboratoire en zone à contamination contrôlée, aux frais et risques du fournisseur. Le présent cahier des charges définit les performances minimales requises pour cet équipement et les engagements essentiels souscrits par le fournisseur qui seront repris dans le cadre du contrat de fourniture. PARTIE I - CONDITIONS D APPEL D OFFRES Article 1 - Spécifications techniques du système LC-MS/MS La configuration minimale du système LC-MS/MS est décrite ci-dessous sous forme de cinq unités formant un ensemble indivisible : 1) une chaîne UHPLC permettant de fonctionner à très haute pression ; 2) une interface d ionisation ; 3) un spectromètre de masse de type triple quadripôle ou équivalent, autorisant un basculement entre les modes d ionisation positif et négatif, une fragmentation multi étages (MSn, n 2) ; 4) des outils logiciels d interprétation des données et d élucidation structurale ; 5) un générateur d azote. Unité 1 : une chaîne UHPLC permettant de fonctionner à très haute pression comprenant : Une pompe binaire à quatre voies haute pression avec une grande précision pour les faibles débits : de 0,01 à 2 ml/min permettant de travailler en mode gradient ou isocratique ; Un dégazeur ;

4 Un passeur d échantillons thermostaté comportant un plateau pour flacons de 2 ml et permettant des injections de 0,1 µl à 100 µl ; Un compartiment à colonne thermostaté ; Un système de pilotage de la chaîne LC indépendant. Unité 2 : une interface d ionisation à pression atmosphérique permutable Electronébulisation (ESI) : Une source d ionisation par électronébulisation (ESI) permettant l acquisition de signaux en modes positif et négatif au cours d une même analyse ; Une interface à pression atmosphérique facilement démontable sans remise à pression atmosphérique du détecteur avec possibilité de réglage des tensions de la source informatisée. Unité 3 : un spectromètre de masse de type triple quadripôles ou équivalent permettant la fragmentation de molécules MS n (n 2) comprenant : Un analyseur avec les caractéristiques suivantes : o une gamme de masse m/z o un mode d analyse permettant d obtenir des spectres de masse (MS) et des spectres MS n (n 2) après fragmentation ainsi que la combinaison de modes au cours d une même analyse; Un système de pompage constitué de pompes primaires à palette type EDWARDS complétées par un ensemble de pompage de type turbomoléculaire assurant le vide secondaire et intégrant des indicateurs visuels de l état du système ; Une cellule de collision qui devra permettre l analyse MS/MS haut débit, sans conséquence marquée sur la sensibilité, et absence d effets mémoires même à faibles valeurs de «dwell time». Unité 4 : un ensemble informatique & des outils logiciels d interprétation des données et d élucidation structurale permettant les tâches et comprenant les éléments décrits ci-dessous : Le contrôle et le pilotage complets de l ensemble du système LC-MS/MS incluant les conditions de pompage, l interface, la programmation des températures, les différents éléments de la chaîne UHPLC et du spectromètre de masse ; Le réglage précis du spectromètre de masse en mode manuel et automatique ; L acquisition et le retraitement des données sur deux unités informatiques séparées ;

5 L enchaînement de différentes méthodes d acquisition LC-MS/MS dans une même séquence d analyses ; Les interfaces informatiques appropriées incluant des cartes réseau intranet et internet permettant le transfert des données à partir d autres postes informatiques ; Deux postes informatiques, dont un pour le retraitement de données, comprenant chacun : o Processeur : Quad core de 3.5 GHZ (au minimum) o Mémoire vive : 8 Go de RAM (au minimum) o Disque dur de 1 To (au minimum) o 2 cartes réseau de 1 Gb/s (au minimum) o Carte graphique avec mémoire interne (au minimum) 1 Go pouvant gérer 2 écrans o Lecteur DVD RW o Système d'exploitation Windows 7 Édition Professionnel US 64 bits o 4 ports USB3 dont un en façade (au minimum) o 1 écran plat 19" o 1 clavier o 1 souris ; Un logiciel d acquisition des données permettant : o Le contrôle de la partie UHPLC et du détecteur MS/MS de manière intégrée ; o L optimisation de l ionisation, de la transmission des ions et de la fragmentation ; o La vérification des performances du système pendant une longue séquence d acquisition des données ; Un logiciel permettant le traitement des données (identification et quantification), incluant les fonctions de contrôle et d évaluation de la qualité des données ; Un logiciel d aide à l élucidation structurale de composés inconnus ; préciser si le logiciel est intégré dans le logiciel de pilotage du spectromètre de masse ; La partie traitement des données doit permettre l édition de rapports personnalisés, la création de bibliothèques de spectres et la recherche dans ces bibliothèques. Le logiciel de traitement des données doit pouvoir être installé sur plusieurs postes informatiques afin de permettre le retraitement simultané des données par plusieurs utilisateurs ; Il est entendu que les logiciels seront fournis dans leur version la plus récente. Les conditions de mise à jour devront être précisées ; Pack logiciel Microsoft Office intégrant Excel, Power Point, Word ; Une imprimante laser pouvant fonctionner en réseau.

6 Unité 5 : un générateur d azote permettant l alimentation du LC-MS/MS Le générateur d azote devra intégrer un compresseur d air et permettre de fournir un débit d azote en adéquation avec les spécifications techniques du système LC-MS/MS. Article 2 - Modalités de contrôle des performances du système par l Ifremer Les performances demandées seront évaluées en termes de sensibilité, de répétabilité, de reproductibilité et d'évaluation de la contamination instrumentale. Les exigences varient en fonction des molécules recherchées. Les candidats seront soumis à un protocole d évaluation des performances en utilisant sept solutions étalons de concentrations croissantes pour deux familles de contaminants (les composés perfluorés, étude de huit composés parmi les seize présents dans les solutions étalons; le 1,2,5,6,9,10-hexabromocyclododécane, étude des trois isomères α, β et γ). La liste des composés et leurs concentrations dans les solutions étalons sont données en annexe (annexes 1,2,3,4). Un échantillon de matrice biologique pour chaque famille de contaminants organiques fera également l objet d une évaluation. Les échantillons tests (14 solutions étalons et 2 échantillons de matrice biologique) seront préparés au Laboratoire de Biogéochimie des Contaminants Organiques de l Ifremer à Nantes. Le volume de chaque échantillon test sera de 250 µl, permettant un nombre suffisant d injections pour réaliser cette étude de performances (volume d injection : 10µL). Ces échantillons seront disponibles sur demande des candidats du 3 août au 9 septembre 2015, et envoyés aux frais de l Ifremer. Les candidats devront contacter le laboratoire (dont les coordonnées figurent à l article 7.5 du règlement de consultation) pour demander ces échantillons et préciser les conditions d envoi (adresse, personne à contacter, etc ). A titre indicatif, les conditions analytiques standards pour l'analyse des échantillons par LC-MS/MS seront fournies avec les échantillons tests. Le fournisseur pourra, s il le juge opportun, modifier ces conditions en indiquant les modifications mises en oeuvre. Le fournisseur utilisera ses propres consommables (y compris les solutions standard pour les optimisations spectrométriques et chromatographiques, les solvants, les colonnes, etc...) pour la réalisation des tests. Les résultats devront être transmis avec l offre technique et financière. Ce protocole d évaluation sans frais consiste à : Analyser les solutions étalons et l échantillon de matrice pour les deux familles de contaminants ;

7 Fournir, avec les résultats de l analyse, un dossier détaillé complet en précisant pour chaque application : o les conditions expérimentales : de chromatographie (phase stationnaire, phase mobile, gradient d élution, débit, pression), d injection (volume injecté), d analyse (paramètres de la source d ionisation et de l analyseur) ; o les chromatogrammes obtenus nous permettant d évaluer la résolution des pics chromatographiques et d apprécier la sensibilité sur solution étalon et sur matrice; o la linéarité : évaluée sur la base du rapport composé natif (analyte) sur étalon marqué au 13C ; o la sensibilité sur solution étalon : évaluée sur les composés présents dans la solution étalon de plus faible concentration, en calculant un rapport S/N en mode "peak to peak" sur les 2 transitions MRM les plus intenses; o la sensibilité sur matrice : évaluée sur les composés détectés dans l échantillon, en calculant un rapport S/N en mode "peak to peak" sur les 2 transitions MRM les plus intenses; o la répétabilité sur solution étalon, évaluée par : le coefficient de variation de la réponse des étalons marqués au 13C obtenu après injection de l ensemble des solutions étalons (concentration en étalons marqués identique dans chacune des solutions étalons) le jour 1 (7 valeurs) ; le coefficient de variation de la réponse des étalons marqués au 13C obtenu après injection de l ensemble des solutions étalons le jour 2 (7 valeurs); le coefficient de variation de la réponse des composés natifs pour sept (7) injections d une solution étalon (Cal1- PFC pour les PFC et Cal10-HBCDD pour les HBCDD) le jour 1 (7 valeurs); le coefficient de variation de la réponse des composés natifs pour sept (7) injections d une solution étalon (Cal1- PFC pour les PFC et Cal10-HBCDD pour les HBCDD) le jour 2 (7 valeurs). o La répétabilité sur matrice, évaluée par : le coefficient de variation de la réponse des composés natifs détectés pour sept (7) injections le jour 1 (7 valeurs); le coefficient de variation de la réponse des composés natifs détectés pour sept (7) injections le jour 2 (7 valeurs); o La reproductibilité sur standard, évaluée par :

8 le coefficient de variation de la réponse des étalons marqués au 13C dans l ensemble des solutions étalons injectées les jours 1 et 2 ; le coefficient de variation de la réponse des composés natifs pour sept (7) injections d une solution étalon (Cal1- PFC et Cal10-HBCDD) les jours 1 et 2. o La reproductibilité sur matrice, évaluée par le coefficient de variation de la réponse des composés natifs détectés pour sept (7) injections les jours 1 et 2. o La contamination instrumentale, évaluée sur : Les solutions étalons Cal0-PFC pour les PFC et Cal0- HBCDD pour les HBCDD ; l injection d un mélange de solvant préparé par le fournisseur (mélange méthanol/eau 50/50 v/v pour les PFC et méthanol/eau 80/20 v/v pour les HBCDD). o La contamination croisée, évaluée par l injection d un mélange de solvant préparé par le fournisseur (mélange méthanol/eau 50/50 v/v pour les PFC et méthanol/eau 80/20 v/v pour les HBCDD) après l injection de la solution étalon la plus concentrée : Cal10-PFC pour les PFC et Cal200-HBCDD pour les HBCDD. Les modalités de contrôle de performance incluent les tests effectués par le candidat dans ses locaux. Les résultats de démonstration des performances requises par l Ifremer (qui font partie des critères de choix précisés dans le règlement de consultation) seront présentés de façon explicite dans l offre technique et financière. Article 3 - Informations techniques supplémentaires requises par l Ifremer Chaque offre technique devra préciser les informations techniques suivantes : 3.1. Caractéristiques physiques et fonctionnement Le candidat devra décrire les caractéristiques de son matériel : Caractéristiques physiques des différents modules (dimensions, poids, alimentation). Particularité des différents modules composant le système : Passeur automatique : principe de fonctionnement, vitesse et volumes d injection, rinçage de l aiguille, nombre de positions (échantillons et contrôles), et autres performances dont capacité à recevoir des flacons de 2ml. Pompes: principes de fonctionnement, plage de débit, spécificité, performance (bruit de fond généré par exemple)

9 Thermostat : préciser la plage de température, la capacité à accueillir une ou plusieurs colonnes, les spécificités (ex précision de la température) Décrire la géométrie des sources d ionisation Décrire l intérêt des autres sources proposées, leurs caractéristiques et modes de fonctionnement. Procédure et délai pour le changement de source (préciser s il y a ou non obligation de couper le vide). Décrire l interface et son mode de fonctionnement. Analyseur : décrire le principe de fonctionnement, performances, vitesse de balayage, sensibilité, linéarité, résolution, sélectivité, bruit de fond. Modes d acquisition possibles : ions parents, ions fils, réactions sélectives et perte de neutre à préciser. Fréquence de calibration de l appareillage suivant la cadence d injection. Décrire la nature des pompes nécessaires (à vide, turbo moléculaire, etc) ainsi que les précautions d utilisation et les raccordements à prévoir. Pompe seringue pour introduction directe ou en infusion : préciser si elle peut ou non être pilotée par le logiciel. Préciser également les modalités de contrôle assurant la fiabilité des résultats obtenus. Préciser la nature du/des gaz nécessaires au fonctionnement de l appareil et la distance maximale entre le générateur de gaz et l équipement. Préciser la nature des travaux (électricité, approvisionnement argon et azote ) à réaliser dans les locaux de l Ifremer nécessaire à l installation du système. Les conditions environnementales de fonctionnement : température, humidité, courant électrique (nombre de prises nécessaires, puissance à prévoir, nécessité de courant ondulé), autres fluides et leurs qualités (azote, argon ) devront être précisées dans la réponse à l'appel d'offres. Tout équipement ou travaux supplémentaires par rapport à ceux annoncés seront à la charge du candidat retenu. Les candidats devront justifier des différents tests du système ainsi que des avantages et inconvénients qui leur semblent majeurs concernant la technologie du système. Les possibilités d évolution du système proposé devront être présentées Informatique Indiquer la nature de la configuration du PC : marque, type processeur, vitesse, mémoire cachée, taille mémoire RAM, capacité disque, nature du contrôleur disque, écran (taille), carte graphique, carte son, réseau, mode de système de sauvegarde possible (interne/externe), type imprimante, vitesse d impression, autres accessoires éventuels. Description du logiciel : nature des logiciels de base, principales fonctions du logiciel de dernière génération et les détailler (pilotage, acquisition et traitement des chromatogrammes pour identification et quantification (externe

10 ou avec étalon interne...), nature des informations pouvant figurer sur un rapport Décrire les éléments relatifs à la maintenance du système : Les éléments faisant l'objet d'un entretien ou d'un remplacement régulier, la fréquence des interventions, leur nature, si elles peuvent être réalisées par le laboratoire ou s'il faut une intervention du fournisseur. Indiquer les temps d'immobilisation du matériel, le coût des pièces détachées, la possibilité d'assistance (téléphonique, SAV). Pour la maintenance nécessitant l'intervention du fournisseur, indiquer le coût des différents contrats annuels. Les garanties offertes (délai d'intervention, main d'œuvre,...). La localisation du service après-vente. En cas de panne grave induisant une immobilisation longue du matériel, indiquer les solutions transitoires mises en place et sous quels délais. Pour le cas où nous ne choisirions pas un contrat de maintenance, indiquer : le coût moyen du déplacement du SAV, le délai d'intervention, le coût horaire. Préciser les protocoles de contrôle nécessaires au suivi métrologique de tous les éléments qui le nécessitent. Indiquer la nature et l'étendue des formations proposées dans le cadre d'un achat d'un système LC-MS/MS : sur site juste après la réception technique et ultérieurement. Article 4 - Présentation de l offre Le fournisseur présentera une offre financière et technique détaillée, dite de base, répondant au mieux aux spécifications définies aux articles 1 à 3 et, précisant les coûts de chaque unité listée à l article 1. Les prix seront en Euros, hors taxes. Le cas échéant les coûts des options seront également détaillés. Le fournisseur pourra présenter une variante à son offre de base, présentant des solutions techniques alternatives et précisant le coût unitaire des éléments constitutifs de cette variante.

11 PARTIE II - CONDITIONS ESSENTIELLES DU CONTRAT DE FOURNITURE Si l Ifremer décide de confier la fourniture du système LC-MS/MS à un candidat, le contrat conclu par l Ifremer et le fournisseur retenu contiendra les stipulations contractuelles suivantes : Article 5 : Délai et lieu de livraison- Pénalités de retard Le Système sera livré par le fournisseur au centre Ifremer de Nantes, transport et assurances compris. Date de livraison : le 25 novembre 2015 au plus tard. Délai de l installation : deux (2) semaines, à compter de la signature du bon de livraison. En cas de retard dans la livraison, et après mise en demeure de s exécuter adressée au fournisseur par l Ifremer, ce dernier pourra appliquer au fournisseur des pénalités égales à 1% du montant du contrat par jour de retard. Ces pénalités seront plafonnées à 10% du montant du contrat et viendront en déduction de ce montant. Si le cumul de ces pénalités atteignait le plafond de 10% précité, l Ifremer pourra résilier le présent contrat, en notifiant sa décision au fournisseur par courrier recommandé avec AR Article 6 : Prix Modalités de paiement Le prix sera forfaitaire et ferme, exprimé en Euros, et comprendra tous les frais supportés par le fournisseur. Article 7 : Procédure de réception L Ifremer effectuera une procédure de réception du système LC-MS/MS, dans ses locaux, en présence d un représentant habilité du fournisseur. Article 8 - Réception Conformité Une vérification sera effectuée sur le lieu de livraison par les représentants du fournisseur et de l Ifremer. A l issue des travaux d installation du système LC-MS/MS et de ses accessoires, le fournisseur et l Ifremer procéderont sur site à des tests de réception technique afin de vérifier sa conformité avec les spécifications techniques contractuelles de l équipement. L Ifremer vérifiera les performances à partir des analyses réalisées conformément aux termes de l Article 2 du présent cahier des

12 charges. Les tests effectués à partir des mêmes échantillons que ceux utilisés lors de la phase de sélection du fournisseur (Cf article 2). Si ces tests sont satisfaisants, la réception sera formalisée par la signature d un procès-verbal signé par les deux parties. La réception du système LC-MS/MS entraînera son transfert de propriété au profit de l Ifremer. En cas d échec de ces tests, l Ifremer sera en droit de résilier le contrat. Article 9 - Garantie Maintenance Le fournisseur garantit le système LC-MS/MS qu il installe contre tout vice de conception, de matière, de fabrication, d assemblage et de fonctionnement des éléments matériels et logiciels, pendant une durée de trois (3) ans, à compter de la date de transfert de propriété de l équipement au profit de l Ifremer. Le fournisseur doit présenter les conditions de maintenance selon les différentes options disponibles pour l ensemble des composants matériels et logiciels du système LC-MS/MS (à l expiration de la durée de garantie). Article 10 - Formation initiale et perfectionnement Le fournisseur s engage à assurer une formation à l utilisation du système LC-MS/MS en tenant compte des éléments suivants : Lieu : la formation sera réalisée sur le Centre Ifremer de Nantes Nombre de personnes à former : six (6) Contenu : formation du personnel à l utilisation et au fonctionnement du système LC-MS/MS, des différents logiciels et des opérations de maintenance courante. Nombre de sessions : deux sessions. La première session (2 à 3 jours) aura lieu dès le prononcé de la réception technique du système LC-MS/MS. L autre session aura lieu dans un délai d un an après la réception, à des dates à convenir d un commun accord entre le fournisseur et l Ifremer. Article 11 - Assistance technique Le fournisseur s'engage à fournir à l'ifremer l'assistance technique gratuite nécessaire au bon fonctionnement du système LC-MS/MS pendant la période de garantie de trois (3) ans à compter de la date de réception du système LC-MS/MS.

13 ANNEXES Annexe 1 : Liste des composés perfluorés et de leurs étalons marqués présents dans les solutions étalons Analyte Acide perfluorobutanoïque Acide perfluoropentanoïque Acide perfluorohexanoïque Acide perfluoroheptanoïque Acide perfluorooctanoïque* Acide perfluorononanoïque* Acide perfluorodecanoïque* Acide perfluoroundecanoïque* Acide perfluorododecanoïque* Acide perfluorotridecanoïque* Acide perfluorotetradecanoïque* Acide perfluorobutanesulfonique Acide perfluorohexanesulfonique Acide perfluoroheptanesulfonique Acide perfluorooctanesulfonique* Acide perfluorodecanesulfonique Acronyme analyte PFBA PFPA PFHxA PFHpA PFOA PFNA PFDA PFUnA PFDoA PFTrDA PFTeDA PFBS PFHxS PFHpA PFOS PFDS * : Analytes à étudier pour le contrôle des performances Etalon Acide perfluoro-n-[1,2,3,4-13c4]butanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c5]hexanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c5]hexanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c5]hexanoique Acide perfluoro-n-[1,2,3,4-13c4]octanoique Acide perfluoro-n- [13C5]nonanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c2]decanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c2]undecanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c2]dodecanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c2]dodecanoique Acide perfluoro-n-[1,2-13c2]dodecanoique Acide perfluro [18O2]hexanesulfonique Acide perfluro [18O2]hexanesulfonique Acide perfluoro-1-[1,2,3,4-13c4]octanesulfonate Acide perfluoro-1-[1,2,3,4-13c4]octanesulfonate Acide perfluoro-1-[1,2,3,4-13c4]octanesulfonate Acronyme étalon PFBA 13C4 PFHxA 13C2 PFHxA 13C2 PFHxA 13C2 PFOA 13C4 PFNA 13C5 PFDA 13C2 PFUnA 13C2 PFDoA 13C2 PFDoA 13C2 PFDoA 13C2 PFHxS 18O2 PFHxS 18O2 PFOS 13C4 PFOS 13C4 PFOS 13C4

14 Annexe 2 : Liste des hexabromocyclododécanes et de leurs étalons marqués à étudier Analyte Acronyme analyte Etalon α-hexabromocyclododécane* α-hbcdd α-hexabromo[13c12]cyclododécane β-hexabromocyclododécane* β-hbcdd β -hexabromo[13c12]cyclododécane γ-hexabromocyclododécane* γ-hbcdd γ-hexabromo[13c12]cyclododécane * : Analytes à étudier pour le contrôle des performances Acronyme étalon α-hbcdd 13C12 β-hbcdd 13C12 γ-hbcdd 13C12

15 Annexe 3 : Concentration en composés perfluorés des solutions standards à étudier Identifiant Concentration Concentration analytes en pg/µl étalons en pg/µl Cal0-PFC 0 10 Cal0.05-PFC Cal0.1-PFC Cal0.5-PFC Cal1-PFC 1 10 Cal5-PFC 5 10 Cal10-PFC 10 10

16 Annexe 4 : Concentration en HBCDD des solutions standards à étudier Identifiant Concentration analytes en pg/µl Concentration étalons en pg/µl Cal0-HBCDD Cal0.5-HBCDD Cal1-HBCDD Cal5-HBCDD Cal10-HBCDD Cal50-HBCDD Cal200-HBCDD