Mécanismes cellulaires et moléculaires d activation de la pompe à sodium dans les modèles expérimentaux de syndrome néphrotique

Transcription

1 Mécanismes cellulaires et moléculaires d activation de la pompe à sodium dans les modèles expérimentaux de syndrome néphrotique G. Deschênes 1, E. Feraille 2 et A. Doucet 3 1 Service de néphrologie pédiatrique, Hôpital Armand-Trousseau, Paris; 2 Fondation pour recherches médicales, Genève; 3 URA CNRS 1859, CEA Saclay, Gif-sur-Yvette Résumé Summary Les œdèmes du syndrome néphrotique traduisent une accumulation de sodium dans le volume extracellulaire et une expansion compensatrice aux seuls dépens du compartiment interstitiel. L accumulation de sodium dans le volume extracellulaire est secondaire à l inadéquation de la balance sodée entre l élimination urinaire et la quantité ingérée avec l alimentation. La rétention rénale de sodium est secondaire à une augmentation de la réabsorption du sodium dans le canal collecteur en rapport avec une activation de la pompe à sodium. Cette activation est consécutive à une induction transcriptionnelle et une augmentation de la quantité de pompes à sodium adressées à la surface de la cellule principale. Elle détermine l effondrement de l élimination urinaire de sodium, la positivation de la balance sodée et la constitution d un volume d ascite avec lesquels elle est étroitement corrélée. Mots-clés: Aminonucléoside de puromycine Sodium potassium adenosine triphosphatase Œdèmes Canal collecteur cortical. Edema represent an abnormal expansion of the intersitial compartment which belong to the extracellular volume. This interstitial expansion is linked to the accumulation of sodium in the extracellular volume due to an imbalance between sodium intake and urinary sodium output. The stimulation of tubular sodium reabsorption is located in the collecting duct where a stimulation of sodium pump hydrolytic activity has been evidenced. The excess of sodium pump hydrolytic activity is associated with an overexpression of the α subunit of the sodium pump at the cell surface and a transcriptional induction of α and β subunits mrnas. This overexpression is synchronized with the decrease of the final urinary sodium excretion, the positivation of sodium balance and the period of ascites formation. Key words: nephrosis Sodium potassium adenosine triphosphatase Edema Cortical collecting duct. Le syndrome néphrotique représente l ensemble des perturbations systémiques qui résultent d une protéinurie massive, supérieure à 50 mg/kg/jour et responsable d une hypoalbuminémie inférieure à 30 g/l chez l homme. Parmi ces perturbations, les œdèmes et les épanchements contenus dans les séreuses sont liés à une expansion anormale du volume extracellulaire. 1 Celui-ci est composé d une solution de sels de sodium caractérisée par l invariabilité de sa pression osmotique dans les conditions physiologiques. Il est constitué par le compartiment interstitiel et le volume plasmatique qui sont séparés par la paroi capillaire. Les œdèmes traduisent une accumulation du sodium et une expansion compensatrice aux seuls dépens du compartiment interstitiel alors que le volume plasmatique est paradoxalement normal ou très légèrement augmenté. 2,3 Cette asymétrie d expansion des deux compartiments du volume extracellulaire est liée à un excès de transfert de fluide de la lumière capillaire vers l interstitium. L accumulation de sodium dans le volume extracellulaire est secondaire à l inadéquation entre l élimination urinaire de sodium et la quantité ingérée avec l alimentation. Les modifications de la filtration glomérulaire ne sont pas impliquées dans cette rétention rénale de sodium qui est secondaire à un excès de réabsorption tubulaire. 4,5 La pompe à sodium est le moteur du transfert transépithélial de sodium dans tous les segments de l appareil tubulaire concernés par cette réabsorption. 6 Une stimulation de l activité hydrolytique maximale de la pompe à sodium a été mise en évidence sur des tubes collecteurs corticaux obtenus par microdissection chez des rats néphrotiques (syndrome néphrotique secondaire à une injection d aminonucléoside de puromycine []) en période de protéinurie et d ascite. 7,8 Cette stimulation a été confirmée par la mesure de l influx de rubidium dans les conditions physiologiques de fonctionnement de la cellule principale. 7 Une étude approfondie de la pompe à sodium au cours du syndrome néphrotique expérimental a secondairement permis: 1) de préciser la localisation tubulaire de la rétention de sodium; 2) de décrire les mécanismes cellulaires à l origine de l activation de la Néphrologie Vol. 24 n , pp

2 pompe à sodium et 3) d établir les corrélations entre les désordres moléculaires et les troubles fonctionnels biologiques et cliniques liés à la dérégulation de l homéostasie du sodium. Localisation tubulaire de la rétention de sodium La localisation de la rétention tubulaire de sodium a été cernée dans les modèles expérimentaux de syndrome néphrotique à l aide de techniques de microponction in vivo et de microperfusion in vitro de segments tubulaires isolés. La microponction des segments tubulaires superficiels d un rein exposé au (le modèle unilatéral permet d avoir chez le même animal un rein protéinurique et un rein contrôle) montre que le débit de sodium délivré au tube collecteur n est pas différent dans le rein protéinurique et dans le rein normal (fig. 1). 5 Par contre, l urine finale du rein protéinurique contient trois fois moins de sodium que l urine du rein normal. Ce résultat suggère que la stimulation de la réabsorption tubulaire du sodium a exclusivement lieu dans le canal collecteur. 5 La quantité de sodium filtrée par les glomérules est significativement abaissée mais cette réduction est en fait compensée par une diminution proportionnelle de la quantité de sodium réabsorbée dans le tubule proximal. 5 Un tel abaissement de la réabsorption tubulaire proximale de sodium a également été mis en évidence par des méthodes indirectes chez les malades néphrotiques. 9 Des expériences de microperfusion de tubes collecteurs corticaux isolés à partir de reins de rats avec un syndrome néphrotique expérimental induit par l injection intrapéritonéale de, ont montré que le transport transépithélial de sodium est significativement augmenté, alors qu il est normalement nul dans ces conditions expérimentales ex-vivo. La stimulation de ce transfert ionique est associée à la négativation du potentiel transépithélial dans le tube collecteur par rapport à un tubule collecteur pris chez un rat contrôle (tableau I). 10 La réabsorption transépithéliale de sodium est fondée sur la polarité des cellules tubulaires. Le sodium est activement pompé hors des cellules, au pôle basal, par la pompe à sodium. La diminution du sodium intracellulaire favorise un flux passif de sodium au pôle apical, de la lumière urinaire vers la cellule, par des transporteurs de sodium spécifiques de chaque segment: l échangeur sodium-proton dans le tube contourné proximal, le cotransporteur Na-K-2Cl (inhibé par le furosémide) dans la partie large de l anse de Henle, le cotransporteur Na-Cl (inhibé par les thiazides) dans le tube contourné distal, et le canal sodium épithélial (ENaC, inhibé par l amiloride) dans la partie corticale et médullaire externe du canal collecteur (fig. 2). 6 La stimulation de la réabsorption de sodium dans le tube collecteur au cours du syndrome néphrotique repose sur l activation conjointe de la pompe à sodium et du canal sodium épithélial mais le propos de cet article est exclusivement limité aux mécanismes d activation de la pompe à sodium. La figure 3 rassemble les résultats de trois méthodes d étude de la pompe à sodium dans les différents segments tubulaires: la mesure de son activité hydrolytique maximale (a), sa quantification totale par Westernblot (b), et l analyse de son expression cellulaire par immunohistochimie (c). Ces résultats démontrent que l activation de la pompe à sodium dans l appareil tubulaire rénal ne concerne que le tube collecteur cortical au cours du syndrome néphrotique expérimental ,74 0,78 0,32 5,6 8,2 3,8 4,4 0,31 0,24 REIN CONTRÔLE 0,08 REIN NÉPHROTIQUE Flux tubulaire de sodium en nanomole/min Tableau I: Débit de sodium et potentiel transépithéliaux dans le tube collecteur cortical. Fig. 1: Microponction des segments tubulaires superficiels dans un modèle unilatéral de protéinurie induite par le. Le est injecté dans l artère rénale gauche après cathétérisation et mise en place d un drainage de l effluent veineux pendant la perfusion afin de protéger le rein droit de toute contamination. Après quelques jours d évolution, le rein gauche excrète une quantité massive de protéine alors que le rein droit conserve une fonction normale et n excrète pas de protéines. Les rats ainsi traités ne développent pas d hypoalbuminémie et ne constituent pas de volume d ascite. Chaque rat permet ainsi l étude d un rein protéinurique et d un rein contrôle vascularisés par un même flux sanguin aortique. Le schéma représente le débit de sodium intraluminal exprimé en nmole/min dans tous les segments superficiels accessibles à la microponction. La quantité de sodium délivrée à l entrée du tube collecteur est identique dans le rein protéinurique et le rein contrôle alors que la quantité de sodium dans l urine finale est divisé par un facteur 3 pour le rein protéinurique. (D après Ichikawa et coll. J Clin Invest 1983; 71: ). J Na (pmol.mm -1.min -1 ) V T (mv) Normal p Normal p CCD Basal - 8 ± 8 < 0,01 40 ± 8-0,3 ± 0,5 < 0,01-14,0 ± 2,3 p ns < 0,01 ns p <,01 Amiloride -10 ± 14 ns 1 ± 4 + 0,8 ± 0,3 ns - 3,2 ± 1,3 p ns p <,01 Recovery ND ND + 0,1 ± 0,5 0,01-10,2 ± 2,6 Néphrologie Vol. 24 n

3 Fig. 2: Organisation moléculaire du transport de sodium dans le tube collecteur cortical. Le tube collecteur cortical est une structure composite faite de 3 types cellulaires différents (les cellules intercalaires sont dédiées au transport du bicarbonate et du chlore et ne sont pas représentées). La cellule principale est impliquée dans le transport croisé du sodium et du potassium énergisé par la Na,K-ATPase basolatérale. Au pôle apical, le sodium entre passivement dans la cellule par le canal sodium épithélial ENaC alors que le potassium sort passivement de la cellule par le canal potassium ROMK 1 identique à celui présent dans la partie large de l anse de Henle. Les principaux régulateurs de ce système sont l aldostérone et la vasopressine. La cellule principale est également le siège de la réabsorption d eau en réponse à la vasopressine (système moléculaire non représenté). Fig. 3: Segmentation tubulaire de l activation de la pompe à sodium au cours du syndrome néphrotique. a) L activité hydrolytique de la pompe est mesurée sur des échantillons purs de chaque segment tubulaire obtenus par microdissection après une digestion ménagée du parenchyme rénal par la collagénase. La membrane plasmique des segments tubulaires est perméabilisée par un choc osmotique et une congélation brutale puis l activité hydrolytique est mesurée dans les conditions du V max par la libération du 32 P en position gamma d un ATP radioactif. L activité hydrolytique est exprimée en pmol/min/mm de tubule. C est une représentation de la quantité de pompe à sodium exprimée à la surface de la cellule. TCP : tube contourné proximal; MTAL : partie large de l anse de Henle; TCC : tube collecteur cortical; TCME: tube collecteur médullaire externe; **: p < 0,01. Seul le tube collecteur cortical montre une activation significative de la pompe à sodium chez les rats. b) La quantité cellulaire totale de pompe à sodium a été mesurée après la lyse des suspensions tubulaires pures, migration en électrophorèse SDS- PAGE et électrotransfert sur membrane PVDF utilisée pour la révélation spécifique des protéines par un anticorps polyclonal dirigé contre la sous-unité α de la pompe à sodium (Western-blot). La quantification est faite par densitométrie des films photographiques. La quantité de pompe est exprimée en unité arbitraire par rapport aux contrôles. Seul le tube collecteur cortical montre une augmentation significative de la quantité de pompe à sodium chez les rats. c) Les résultats de l étude immunocytochimique des coupes de rein avec un anticorps dirigé spécifiquement contre la sous-unité α de la pompe à sodium sont cohérents avec ceux de l activité hydrolytique et du Westernblot. Chez le rat normal (c.a), l intensité du signal dans le tube collecteur (*) est à peine plus prononcée que celle du tube contourné proximal (P) et significativement moins que dans la partie large de l anse de Henle (T). Chez le rat (c.b), le marquage de la pompe à sodium dans le tube collecteur cortical est aussi intense que dans l anse de Henle mais son épaisseur est moins importante. Le marquage de la pompe à sodium n est pas modifié dans le tube contourné proximal et l anse de Henle entre les rats et les rats contrôles. (D après Deschênes G, et coll. J Am Soc Nephrol 2001; 12: ) Néphrologie Vol. 24 n

4 Mécanismes cellulaires de l activation de la pompe à sodium La pompe à sodium a une fonction commune à toutes les cellules de mammifères qui consiste à maintenir une asymétrie entre la composition du milieu intracellulaire (dont la force ionique est principalement constituée de sels de potassium) et celle du milieu extracellulaire (dont la force ionique est principalement constituée par les sels de sodium) aux dépens d une consommation énergétique secondaire à l hydrolyse de la liaison ester-phosphate en position γ de l ATP. 12 Elle assure également des fonctions spécifiques dans des tissus différenciés. Dans le rein, la pompe est la force motrice de la réabsorption tubulaire rénale du sodium et, par des mécanismes de couplage, de l eau et de nombreux autres solutés. Cette fonction d absorption est adaptable par plusieurs mécanismes moléculaires et cellulaires: 1) la concentration intracellulaire de sodium est à l origine d une régulation directe de l activité enzymatique de type allostérique; 2) l état de phosphorylation de la sous-unité α modifie son affinité pour le sodium; 3) la cellule principale du tube collecteur est capable de mobiliser une réserve fonctionnelle intracellulaire de pompe à sodium au pôle basolatéral et/ou d accroître le nombre de transcrits des sous-unités de la pompe sous l influence de plusieurs voies de signalisation: l aldostérone, la vasopressine et la concentration intracellulaire de sodium. 12,13 La figure 4a montre que, dans le syndrome néphrotique induit par le, l activation de la pompe à sodium est associée à une augmentation de la réserve fonctionnelle intracellulaire et à un accroissement de son expression à la surface de la membrane plasmique en rapport avec une induction transcriptionnelle (fig. 4b). 11 Corrélations moléculaires et fonctionnelles La figure 5 regroupe les résultats de plusieurs séries expérimentales étudiant la cinétique de l excrétion urinaire de sodium et de protéines (graphique du haut, A), la balance sodée et le volume d ascite (graphique du milieu, B) et l activité hydrolytique de la pompe à sodium (graphique du bas, C) chez le rat après une injection intrapéritonéale unique de. Plusieurs corrélations entre les événements cliniques, biologiques et moléculaires ont été mises en évidence par la superposition de ces courbes: Le profil d excrétion urinaire de sodium évolue en trois phases après l injection de. A J1, la natriurèse s élève significativement au-dessus de son niveau de base puis s abaisse en deux étapes: un niveau intermédiaire à J3 et J4 (environ 10 mmol Na/mmol créatinine) avant l apparition d une protéinurie massive, cell surface a-subunit (%of control) A B Surface pool * CONTROL CONTROL CONTROL * Intracellular pool (x1000mrna/mm CCD) Contrôle α 361 ± ± 94 p < 0,005 β 554 ± ± 64 p < 0, intracellular-subunit (%of total) Fig. 4: Mécanismes cellulaires de l activation de la pompe à sodium dans le tube collecteur cortical au cours du syndrome néphrotique. a,b) L expression de la pompe à sodium à la surface de la cellule épithéliale principale a été spécifiquement étudiée en incubant une suspension des tubes collecteurs corticaux avec une solution de biotine substituée pour empêcher sa diffusion à l intérieur de la cellule. Après un processus de lyse de la suspension tubulaire, les protéines de surface sont séparées par chromatographie d affinité sur une colonne de streptavidine. Le produit de l élution de ces colonnes est déposé sur un gel de polyacrylamide pour subir une migration électrophorétique en conditions dénaturantes puis un électrotransfert sur une membrane PVDF utilisable pour la révélation spécifique par un anticorps dirigé contre la sous-unité α de la pompe à sodium. La membrane est ensuite traitée pour générer un signal lumineux par chémiluminescence (Western-blot). La figure (A) est la reproduction d un film photographique montrant 3 paires d échantillons contrôle-néphrotique () avec une accentuation visible du signal chez les rats néphrotiques par rapport aux rats contrôles. Le surnageant de la chromatographie contenant les protéines intracellulaires peut être utilisé pour générer une membrane de Western-blot et étudier la réserve intracellulaire de pompe à sodium. La figure (B) est une quantification des taches révélées sur le film photographique par analyse numérique de l image. Chaque échantillon de rat néphrotique est apparié et rapporté à la densité d un rat contrôle et les résultats sont exprimés en % de concentration du rat contrôle. Les résultats de ces expérimentations montrent une augmentation de la quantité de pompe à sodium dans la membrane plasmique et dans l espace intracellulaire. c) Les suspensions tubulaires pures peuvent également servir pour une extraction des ARN messagers qui sont analysés par un processus de PCR quantitative après transcription réverse. Les résultats sont exprimés par nombre de copies d ARN messagers par mm de tubule collecteur cortical (la suspension tubulaire est photographiée et mesurée avant d être utilisée). La PCR quantitative montre un doublement de la quantité d ARN messagers des sous-unités α et β de la pompe à sodium chez les rats néphrotiques. (D après Deschênes G, et coll. J Am Soc Nephrol 2001; 12: ). Néphrologie Vol. 24 n

5 Fig. 5: Corrélations cliniques, biologiques et moléculaires au cours du syndrome néphrotique a) La figure (A) est consacrée aux événements biologiques qui suivent l injection intrapéritonéale unique de (J0) chez des rats hébergés dans des cages métaboliques. Les cercles pleins ( ) montrent l évolution de la protéinurie qui apparaît à J5 et s établit en plateau à J6. Les carrés vides ( ) montrent l évolution de l excrétion urinaire de sodium chez les rats injectés avec du et les triangles pleins ( ) chez un groupe contrôle injecté avec l excipient et nourris avec une quantité appariée de granules par rapport au rats. Le résultat important concerne le profil d excrétion urinaire qui s abaisse anormalement deux jours avant l apparition de la protéinurie et devient presque nul après son apparition. b) La figure (B) est consacrée aux événements cliniques qui suivent l injection de. Les plots noirs sont une représentation quantitative de la balance sodée calculée comme la différence entre les entrées alimentaires et les sorties urinaires. Les losanges pleins ( ) figurent l évolution du volume d ascite mesuré après sacrifice et laparotomie abdominale en recueillant le liquide péritonéal sur un papier absorbant qui est pesé avant et après imbibition. La balance sodée est positive dès J2 traduisant l accumulation de sodium chez l animal malade mais le volume d ascite s accroît brutalement, conjointement avec l apparition de la protéinurie et l effondrement de l excrétion urinaire de sodium à son plus bas niveau. c) La figure (C) représente la cinétique d activation de l activité hydrolytique de la pompe à sodium au sein du tube collecteur cortical dans les jours qui suivent l injection intrapéritonéale de. La courbe évolue en miroir de celle de l excrétion urinaire de sodium (figure A) pendant toute la période qui précède et qui accompagne la formation du volume d ascite. (D après Deschênes G, Doucet A. J Am Soc Nephrol 2000;11: ). puis un niveau minimal à J5 et J6 (~ 2 mmol Na/mmol créatinine) au moment où la protéinurie s élève significativement. La balance sodée (graphique du milieu) évolue parallèlement et se positive à un niveau intermédiaire entre J3 et J4 puis à un niveau maximum à J5 et J6. Le volume d ascite s accroît de façon linéaire jusqu à J5 puis est brutalement multiplié par trois lorsque la protéinurie atteint son niveau maximum à J6. 2. La cinétique de l excrétion urinaire de sodium et de l activité de la pompe à sodium dans le canal collecteur cortical évolue selon des profils réciproques pendant toute la période de constitution de la protéinurie et de l ascite (entre J0 et J8). La corrélation entre ces deux variables est très significative (fig. 6a). Au-delà de cette période, alors que la protéinurie atteint un plateau, la natriurèse se positive brutalement malgré la rémanence d une activité hydrolytique élevée de la pompe à sodium pendant plusieurs jours. A J12, la natriurèse est suffisante pour équilibrer la balance sodée, le volume d ascite a été complètement résorbé et l activité hydrolytique de la pompe à sodium a rejoint son niveau de base. Fig. 6: Corrélations statistiques entre l excrétion urinaire de sodium et l activité hydrolytique de la pompe à sodium dans le tube collecteur cortical. La figure (A) montre la régression linéaire entre les points d excrétion urinaire du sodium et d activité hydrolytique de la pompe à sodium représentés dans la figure 5 (5A et 5C). Le coefficient de régression à 0,91 (p < 0,001) montre une corrélation importante entre ces deux paramètres biologiques du métabolisme du sodium. Les figures (B) et (C) montrent une régression similaire et significative dans deux autres modèles expérimentaux de syndrome néphrotique dont l évolution biologique, clinique et moléculaire a été étudiée de manière exactement identique au modèle de syndrome néphrotique induit par le (données non représentées).dddd (D après Deschênes G, Doucet A. J Am Soc Nephrol 2000 ; 11: ). Néphrologie Vol. 24 n

6 3. Une étude similaire de la néphrose induite par l adriamycine et la glomérulonéphrite extramembraneuse qui sont deux autres modèles expérimentaux de syndrome néphrotique marqués par le développement d un volume d ascite, montre une corrélation significative entre l activité hydrolytique de la pompe à sodium dans le tube collecteur cortical et l excrétion urinaire finale de sodium (fig. 6b). Ces résultats suggèrent que ce mécanisme actif responsable de la rétention rénale de sodium pourrait être commun à toutes les formes étiologiques de syndrome néphrotique. L étroite corrélation entre l excrétion urinaire finale de sodium et l activité hydrolytique de la pompe à sodium dans le tube collecteur cortical suggère que l activité de transport du sodium dans ce segment tubulaire détermine l élimination urinaire du sodium au cours du syndrome néphrotique. Cette conclusion est d autant plus probable que la sécrétion de sodium par le tube collecteur médullaire interne en réponse au facteur atrial natriurétique est inhibée au cours du syndrome néphrotique 15,16 et ne permet plus à ce segment tubulaire, situé en aval du site de rétention rénale de sodium, de modifier la concentration de sodium dans l urine. En conclusion L augmentation de la réabsorption du sodium dans le canal collecteur cortical au cours du syndrome néphrotique est consécutive à une induction transcriptionnelle et une augmentation de la quantité de pompes à sodium adressées à la surface de la cellule principale. Cette activation détermine l effondrement de l excrétion urinaire de sodium, la positivation de la balance sodée et la constitution d un volume d ascite lorsque la protéinurie atteint son plateau. Adresse de correspondance: Dr Georges Deschênes Service de néphrologie pédiatrique Hôpital Armand-Trousseau F Paris Cedex 1. Cameron J. The nephrotic syndrome: Management, complications and physiopathology. In: Davison A, Cameron J, Grünfeld J, Kerr D, Ritz E, Wiinearls C (eds) Oxford Textbook of Nephrology, Vol 1. Oxford: Oxford Medical Publications, 1998; Références 2. Koomans HA, Braam B, Geers AB, Roos JC, Dorhout Mees EJ. The importance of plasma protein for blood volume and blood pressure homeostasis. Kidney Int 1986; 30: Geers AB, Koomans HA, Boer P, Dorhout Mees EJ. Plasma and blood volumes in patients with the nephrotic syndrome. Nephron 1984; 38: Firth JD, Raine AE, Ledingham JG. Abnormal sodium handling occurs in the isolated perfused kidney of the nephrotic rat. Clin Sci (Lond) 1989; 76: Ichikawa I, Rennke HG, Hoyer JR, Badr KF, Schor N, Troy JL, Lechene CP, Brenner BM. Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome. J Clin Invest 1983; 71: Morel F, Doucet A. Functional segmentation of the nephron. In: Seldin D, Giebisch G (eds), The Kidney: Physiology and Pathophysiology. New York: Raven Press Ltd, 1992; Feraille E, Vogt B, Rousselot M, Barlet-Bas C, Cheval L, Doucet A, Favre H. Mechanism of enhanced Na-K-ATPase activity in cortical collecting duct from rats with nephrotic syndrome. J Clin Invest 1993; 91: Vogt B, Favre H. Na+,K(+)-ATPase activity and hormones in single nephron segments from nephrotic rats. Clin Sci (Colch) 1991; 80: Grausz H, Lieberman R, Earley LE. Effect of plasma albumin on sodium reabsorption in patients with nephrotic syndrome. Kidney Int 1972; 1: Deschênes G, Wittner M, Stefano A, Jounier S, Doucet A. Collecting duct is a site of sodium retention in nephrosis: A rationale for amiloride therapy. J Am Soc Nephrol 2001; 12: Deschênes G, Gonin S, Zolty E, Cheval L, Rousselot M, Martin P, Verbavatz J, Feraille E, Doucet A. Increased synthesis and AVP unresponsiveness of Na,K-ATPase in collecting duct from nephrotic rats. J Am Soc Nephrol 2001; 12: Feraille E, Doucet A. Sodium-potassium-adenosinetriphosphatase-dependent sodium transport in the kidney: Hormonal control. Physiol Rev 2001; 81: Gonin S, Deschênes G, Roger F, Bens M, Martin PY, Carpentier JL, Vandewalle A, Doucet A, Feraille E. Cyclic AMP increases cell surface expression of functional Na,K-ATPase units in mammalian cortical collecting duct principal cells. Mol Biol Cell 2001; 12: Deschênes G, Doucet A. Collecting duct (Na+/K+)-ATPase activity is correlated with urinary sodium excretion in rat nephrotic syndromes. J Am Soc Nephrol 2000; 11: Perico N, Delaini F, Lupini C, Benigni A, Galbusera M, Boccardo P, Remuzzi G. Blunted excretory response to atrial natriuretic peptide in experimental nephrosis. Kidney Int 1989; 36: Valentin JP, Ying WZ, Couser WG, Humphreys MH. Extrarenal resistance to atrial natriuretic peptide in rats with experimental nephrotic syndrome. Am J Physiol 1998; 274: F556-F63. Date de soumission : mai 2002 Date d acceptation : novembre 2002 Néphrologie Vol. 24 n