Méthodes de détermination de la migration globale dans )es aliments gras: eomparaison entre la méthode iodométrique et gas-ehromatographique

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1 Méthodes de détermination de a migration gobae dans )es aiments gras: eomparaison entre a méthode iodométrique et gas-ehromatographique L. ROSSI, A. SAMPAOLO et L. GRAMICCJONI Laboratoires de Chimie, Istituto Superiore di Sanità, Rome, Itaic Dans un rapport séparé ( 1 ) nous avons précisé a nécessité d'une méthodc de détermination de a migration gobae des matériaux différents orsqu'is sont pacés en contact avec dcs denrées aimentaires graisses. A ce but certaines méthodes ont été proposées et en particuier une méthode a fait objet d 'étudc et dc controe expérimentac par a Commission «Anayscs et Extraction» d es Bureaux nternationaux Techniqucs - Matières Pastiques ( 2 ). Bien quc nous n 'avons pas participé d'une façon directe aux travaux coaboratifs dans a Commission ci-dessus, nous avons égaemcnt expérimenté a méthode proposée, en 'appiquant à ccrtains types de caoutch ouc et de matièr cs pastiques. Par conséquent on a pu eonstater que a méthode exige a standardisation pus poussée et détaiée, étant donné que de 'uniformité ahsouc des modaités opératoires déeouc a possibiité dc minimiser a variahiité remarquabe des résutats qu'on pcut obtenir. Pourtant, on a d 'ahord vérifìé expérimentacmcnt a m éthode proposée, en particuier en r apport aux points suivant : - pré-conditionnément d c 'échantion à examiner; - modaités dc contact de 'éehantion avec 'huie de tourneso; - extraction par sovant et détermination iodométriquc dc 'huie ahsorbée par 'échantion; - réproductihiité des résutats dans a détermination de 'huie au moycn du dosage de 'index d'iode; - infuence de 'essai témoin (échantion mis en eontact directement avee e sovant) sur es r ésutats de a migration gobae. On a considéré aussi 'éventuaité que 'échantion contient des suhstanees capabes de r éagir avec 'iode et que ces substances peuvent etre Ann. at. Supcr. Sanità (1.972), '

2 ROSSI, SAM'AO ~ O E T GRAMICCIONI 433 cédées d 'une manière différente à 'huie et au sovant respectivement, peut-atre en raison de différents phénomènes de gonfement de ' échantion. Dans ces cas a détermination de a migration gobae, utiisant a mésure différentiee de 'index d 'iode, peut r ésuter atérée. C'est pour ccà qu'on a étudié a possibiité de substituer a détermination iodométrique de 'huie par a détermination gaschromatographique, basée sur un composant de 'huie. I s'agit d 'une méthode ayant une spéciìcité pus marquée et par conséquent i résute raisonahe juger que a possibiité d'interférences possibes soit effectivement imitée. Pourtant, es rechèrches effectuées pour comparer a méthode iodométrique et a méthode gaschromatographique ont suivi e schéma ci-après:. PHASE COMMUNE DETE RMINATION IODOMETRIQUE - 3. DETE RMINATION GASCHROMATOGRAPHIQUE -4. COMPARAI SON DES RESULTATS. Phase commune (Prise d'essai, pré-conditionnement, contact, extraction de 'huie ab:.orbée). En généra, Ics indica tions fournies par a m éthode proposée ( 2 ) on t été trouvées vaabes. Pourtant, au dcà de ces indications à, on peut noter Ics remarques suivant : a) Prise d'essai. E tant donnée a différente nature ces matériaux à cxaminer, au icu d'assumer a référencc d'un échantion de 10 grams, sdon es dernières suggestions confìdentiees de M. Paière, serait pus opportun de prévoir que e matériau en examen est coupé en 4 morceaux de dimensions 2,5 X O cm, qui sont rincés à 'eau distiée et essuyés au papier-fitre et ensuite pésés. Le avage n'est pas opportun dans es cas de ma tériaux absorbant 'eau. b) Pré-conditionnement. Dans certains cas, à savoir es poyamidcs et es peimùes ou feuies cejuosiques pouvant absorber humidité, e préconditionncment peut jouer un roe qu'on ne doit pas négiger. Pour d'autres matériaux, t es que e poyéthyène, poypropyène, poyst yrène, e préconditionnement est r ésuté tout à fait superfu, parce que son infuence maximae est t oujours au dessous ces erreurs expérimentaux. Dans e cas du caoutchouc 'infnence du pré-conditionnement est variabe seon e type en examen. Pourtant on peut concure que, en principe, i faut prévoir e préconditionnement de 'échantion d 'anayse, au hut de normaiser ' humidité, sauf a facuté de n'en tenir pas compte pour es matériaux dont 'absorption d'humidité de 'ambient est pratiquement nue. 9. H t11. U t. Super. Sa nitì 1:977) 8,

3 D ETER3fT~ATON Of' CLOBAI. MICI!A110'i c) Contact entre 'écwntion et L"hui'. Au but c.c norroaiser e& mo (ait.és oporatoircr; on jugc néc~ss nirc dc préciscr t rapport surfacefvottm r: cn d'autr <' t ermcs, a surfncc totae dc 200 cro 2 est mise en contact a\'c< 100 mi d'btùc do tourncso. Pourtant. dan" ccs conditions, e rapport sur faccfvoumc est éga à 2. Lorsquc a durée du contact est décou1~c (10 jours à 4()0C), es 4 mor ceaux sont soigneuscment cssuyés au papier-fìjtre "h.atman o. L Si OLL a adopté e pré condition.ncmcnt a u préaabc, on doit e répétcr dans <. H memcs conditiom: iniiquét s ci-de... su!' et en uite e 4 morccaux ;.ont pésés ensembe. d) Extmction de 'hie absorbe par 'écwntion. E tant donnf: 'iutéré i extrajrc, autant que possih, scuement 'huie, on a pu confir mcr qu'i est pus opportun adopter comme sovant d 'extraction e trichjore-trifuoréthanc au icu du tétrachorurt dc- CRrbou. qui pcut cxtrair' une quantité pus argc dc composants. Pourtant, cs morccaux ont été wj., dan.s un t fìoe, cn contact :n cc 100 m do sovant et soumis à 'agitatiou automatique pcndant 48 h cttrcs. On a pu constacr qu unc cxtraction, cn généra, est suffisante, sauf ccrtain cas, tc!-> quc t caoutcbouc, dans esqncb 'extraction doit étrc répétéc jusqu 'à rabs('i.('(' d e 'hui dan& 'extrnit. Dans ces cas on rrunit cs cxtraits. A part. on Joit cffcctucr 'extrartion paraèh, dans e. meme.. con ditions adoptécs pour 'échantìon après contact avec 'huic, sur un éd1au tion tt<moin. 2. Déwrmination iodométriqtte de 'huie absorbée por 'échantion. On a obscrvé entièremcnt e~ m oda itt~s indi4uécs dnns a méthodc proposéc. Au but de a comparaison vouuc, a moitié dc 'cxtrait a été réser vf.e pou:r a détcrmination gaschromatographique. 3. Détumination 8aschromatograptique de 'huie absorbée por 'échantion. a) Préparation des esters méthyiques des acides gras. (Toute a ver rerie doit etrc avée soigncusement au préaabc avec éther dc pétroc). toitié de 'extrait n été évaporéc dans un évaporateur rotati! sous vide d'cau, à 40oC. Le résidu a été répris par 10 mj dc soution 4 % (p/p) d'acide sujfurique cn méthano. On a fait bouiir à réfux pendant 3 heures. Le réfrigérant était fourui d 'essiccatcur à ge dc siice. La sout ion a été transférée <e a fioe d'évaporation dans W étan noir fourni dc robinet en poytét rafuorétyène, en ajoutant 100 m d'eau distiée. L'cxtraction a été effectuéc deux fois à 'aide d'éther de pétroe Ann. at. Super. S11111!A (:972), 43:! 430

4 BOSSI, SAXPAOLO BT CBAXICCIONI 435 (p.eb. 30-SOOC), cbaque fois avcc 25 m1 de sovant, avec agitation à main de 3 minutes. Les soutions d'étber r éunies dans un étannoir ont été avées avec 4 aiquotes successives de 20 m d'cau distiée. J.es dcrnières traces d'eau ont été éiminées en ajoutant dans 'étannoir 3-4 g dc suphate de sodium anhydre. La soution d'éther a été transférée dans une fio e ù évaporatioo, cn ajoutant 10 m d'éther au but de aver 'étannoir. Dc nouvrau on a 1:Jiminé e sovant à 400C, sous vide d'eau. ~ o... Q,... ~ ;:, Q. ~ -~ {)... o Q, ~ :f: {) '" v "' ";:, c:r- f -;;; Q. ";:, ~ {) <: ù "' '""' Q, ;:,.!: '" o Q,.~ v.,... U F ig.. - GaKbromato~ramrne des estrrs mfthyiques des ocidcs gros. O m1n Le rf. idu a été répris avec tm voume d'éthcr de pétroe (p.eb C) tc que a concentration ùe 'bue soit de 1/mg/m environ. Une déterrnination préiminaire gaschromatogr aphiquc peut oriener sur a diution opportune.

5 4-36 DETEJfiNA.TION OF CLOBAL XIGRATION b) Dosage gaschromatographique. La soution d 'éther de pétroe a été soumisc au dosage gaschromatographique dans es conditions suivant: Coonne : en accier inoxydabe, 2,5 mm X 3 m rempie avec succinate de diéthyèmegyco20% sur gas-chrom P AW, mcsh. Detector: ionisation dc famme. Températures : coonne 195oC. injectcur 3200C. détector 1550C. Gas de transport : heium, 25 m/min. Voume de soution injcctée : 3 p.. Le dosagc de 'huie est obténu en utiisant un des esters méthyiques, à savoir 'ester m éthyique de 'acide inoéique, dont e pourcentage dans 'huie de tourneso adoptéc a été déterminé à part. Dans a Fig. on reporte, a titre d 'exempe, un des gaschromatogrammes obtenus. 4. Comparaison des resutats obtenus par es deux méthodes de détermination. a) Reproductibiité dans a détermination de 'huie en soi-méme. On a préparé une soution contenant 10 mg d'huie de tourneso par m. De cette soution, 5 aiquotes de m ont été examinées par iodométrie et 5 aiquotes de m ont été examinées par gaschromatogrape. Les résutats respectifs son donnés dans e Tabeau. TA.BLEAU Reproductibiité de a détermination de 'huie en eoi-meme, par iodométrie et par guchromatographie 1- HtiiLE PaUt"fTJ! nf8 JonoMf1»Jit GA!C8R4. MATOC&APWt"': O IO ,9 126,9 139,6 139,6 139,6 290,0 283, 5 280,8 286,2 286,2.~oyenne ± D.S. 134,5 ± 3,1 285,3 ± 4,8 A nn. 1 1t. Supcr. Sanitd (1.97Z, t32~ 39

6 ROSSI, SAMPAOLO ET GRAiiCCIONI 437 De ces résutats on peut rééver que es deux méthodes donuent une vaabe réproductibiité et qu'eotr'ees i n'y a pas une difi'érence r emnrqunbe au oiveau de 'huie considéré. Cependant, a méthode gaschromatographique permet de déterminer des quantités d'huie meme inférieures à 0,1 mg, ce qui n'est pas possibe nvec a méthode iodométrique, meme si on adopte des soutions 0,01 N. b) Détermination de a migration gobae. Les deux méthodes de détermination ont été appiquées à des types difi'érents de matières pastiques et de caoutchouc. Les déterminations ont été effectuées sur des aiquotes des memes cxtraits obténus seon e point ci-dessus. Les résutats respectifs sont incw dans e Tabeau 2. Doonées de migration gobae daoji 'bue de tourneso, IO jour à 400C V aeurs moyenues ± sém.idispersion max. ; entre crochet& e nomhre des déterminotions eectuées ECRAN 'r LLON Er.u sssua m m )fic An O:< CLo u.a (m fdm') M. &&Seuomoto' r hiquc )1. iodom~trique P oyèthyhe b. d. 0,5 ( ) 10,5 ± 2,8() u. d. Poypropyène 0,5 1, 2 ± 0,6 (3) 1,3 ± 0, 6 (3) ABS 1,0 4,6 ± 0,6 (5) 3,0 ± 1,6 (5) CeUophane. 0,04 7, 4 ± ' 7 (6) 6,6± 1,3 (6) Poystyrène crista 0,4-1,3 ± 0,6 (2) 1,9 ± 0, 5 (2) Poyatyrène choc. 0,4-1,5 ± 0,5 (2) 0,5 ± 0, 5 (2) Cooutchouc P37/ 70 (n.itrie butad.) Co~;~cho~c.PS7 Ì1oF. (~v~c.pht~a~ 0,5 < > 45,0 ± ~.o (3) H,O ± 3,9 (3) 1 tee) ( ) ,5 ( ) 150,9 ± 11,5 (3) rja9, 7 ± 1,2 (3) 1 i_ ( ) DILI1 ""' eu oo n'a pu t~rw comp~ de E. bie quo E * O ('). ( ) Dana eu cas on a efj'eetu6, au deu de a prfmju.. e.s tracioo, d'autru eauactiom, chacuno do 2 :tru~ a\ eo SO m de to-va:nt; 80% de 11:mi1e totae: av11it 8t' extrait d.aju a pr601ibe es:r t tio. Considérations généraes Au dcà des considérations déjà faites en rapport aux points particuiers traités, en ce qui concerne a phase commune (prise d'essai, préconditiounement, contact, extraction), d'un point de vue généra i st:m be justifìé d'attirer 'attention sur d'autres considérations. à savoir : a) Les deux méthodes de détermination de 'huie montrent une correspondance significative. La méthode iodométrique est sans doute pus vite et pus simpe. La méthode gaschromatographique est pus spécifique t.nrc. J at. Super. Sanit.:\ ) 8, ~

7 438 DETERMINATJON OF CLOBAL :&IIGJIATION et rcstrcint beaucoup a possibiité de substances intcrférantes, c'est-à-dire peut donncr des résutats pus certains. b) En particuicr, avec a méthode de 'index d 'iode i y a incertitude dans es cas où 'extrait témoin consomme dc 'iode (E :f: 0), parcc qu'on ne peut pas etre certains si a correction doit etre appiquée ou non; et, dans 'affirmative, en quee mésure étant donné qu'on ne peut pas savoir si es substances consommant iode migrcnt ou non m emc dans 'huic. c) La méthode gaschromatographique peut resoudre cettc inccrtituùe, justcmcnt en raison de sa spécificité, basée sur a détermination de 'acide inoéiquc, sous forme de son ester méthyiquc. Dans tous es cas cxaminés es cxtraits des échantions témoins n 'ont jamais donné des piques interférants et en tout cas, meme si cette éventuait é très improbabe se vérifiat, i serait toujours possibe dc choisir 'ester méthyiquc d'm autrc acide gras pour déterminer 'huie. d) C'est pour ceà que, sur a base de a eomparaison avee es résutats gaschromatographiques, nous avons eu a possibiité de décider qh" pour Ics échantions de caoutchouc examinés (Tabeau 2) on ne devait pas apporter a corrcetion, bien que E :f: O. En effct, ce-ci résutc très cairement du Tabeau 3. i i i!! TABLEAU 3 Infuence de a correction E sur a migration M, seon a méthode iodométrique et gaschromatographique E CB.\NT ILLOX E (mgfd m') oùométrie c. c. eorrigé odométric \1 (mgfdm'} non corrigé 54,0 o - 4,9 49,1 44,8 p 3if70 53,6 o - 8,6 45,0 41,0 52,3 o - 11,3 41,0 37,0 J 47,9 o 98,6 146,5 147,9 P 37/70 F 48,0 o 116,7 164,7 157,8 48,6 o 93,6 141,6 143,3 G. C. - e) Sur a base de 'expériencc acquise on jugc que es méthodes offrent toutes es deux des avantages peut-etre compementaires. La simpicité de a méthode iodométrique, associéc avec a spécificité de a méthodc gaschromatographique pcut resoudre ccrtains cas particuiers pus doutcux et pus difficies à interpréter. On rémercie M. e Prof. L. Boniforti pour son àssistence précieuse et compétente dans es récherches gaschromatographiques. A nn. Jst. S up ~r. Sanità. (19n ) 8, 43~ '

8 ROSSI, SAXPAOLO ET GRAJ(ICCIONI 439 Résumé. - Les Auteurs exposent es résutats de a comparaison expérimentae effectuée, en ce qui concerne a détermination de 'huie reténue par 'echantion, au but de a détermination de a migration gobae dans es aiments gras, entre a méthode basée sur a m esure de 'indice d'iode et a méthode gaschromatograpbique par eux mise à point. Des dift'érents types de matières pastiques, de caoutchoucs et de ceophanes ont été soumis à 'examen. Les résutats sont tout à fait comparabes dans es cas où 'éehantion ne donne pas ieu à eonsommation d'iode. Dans es cas où ceà se réaise, a méthode gaschromatographique peut indiquer exactement si et dans quee mesure on doit affecter d'une correction es données de migration obtenues par a méthode iodométrique. On peut concure que es deux m éthodes peuvent bien s'intégrer, a prémière, pus simpe et repide, comme méthode courante, et a deuxième, pus spécifiquc, eomme méthode de rmérence dans es cas de doute. Summary (Metwds for the tktermination of goba migration in f atty.foods : comparison between iodometric and gaschromatographic methods). - The Authors present the resuts of the experimenta comparison b etween the method based on the measure of the iodine index and the gaschromatographic m ethod that was set up by themscves; object of the comparison was the determination of the amount of oi r etained by tbe sampe, after tbe determination of goba migration into fatty foods. Dift'erent types of pastic materias, rubbers and ccophanes were examined. The resuts are perfecty comparabe whcn the sampe does not consume iodine. When iodine consumption is present, the gaschromatographic m ethod can indicate whcther and to what e"'1:ent a correction has to be appied. I t can be concuded that the two methods can integrate each other; the first, simper and quiker, can be used as a routine method, and the seeond, which is more specific, can h e used as a rcferen ce method in un certain cases. REFERENCES ( 1 ) S AMPAOLO A., L. GRAMICCIONI, L. Rossr, G. E sposito & R. B INETTI. A nn. Isc. Super. Sanicd, (1972). (2) Bureaux nternationaux Techniques - Matières Pastiques - Commission «Anayses et Extraction», Doc. 71/1252 (1971). A nn. 1st. Super. Sanitd <:972) a, '32-39

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