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2 La SELARL PAGES regroupe les laboratoires de biologie médicale des sites de GANGES, de SAINT HIPPOLYTE DU FORT et du VIGAN. La SELARL PAGES, acteur dans le domaine de la santé publique, propose à ses clients des analyses de biologie humaine à visée diagnostique, préventive, de suivi thérapeutique, et des analyses d hygiène hospitalière. Le laboratoire est heureux de vous adresser son Manuel de prélèvement. Ce document a été élaboré pour vous offrir le meilleur service dans la prise en charge de nos patients communs Nous vous présentons cette version du «guide du préleveur», intitulé Manuel des Prélèvements. L objectif de ce manuel de prélèvement, qui comporte l ensemble des analyses réalisables dans nos laboratoires, est d expliciter le plus simplement et exhaustivement possible les différentes informations nécessaires à la phase pré-analytique selon les nouvelles exigences réglementaires (ordonnance du 16 janvier 2010). Parmi ces exigences, et notamment celles de la norme ISO EN NF 15189, les conditions de réalisation et de transmission des prélèvements biologiques constituent une étape importante impliquant une étroite collaboration entre les préleveurs et le laboratoire. Le respect de ces exigences est essentiel pour garantir des résultats d analyses fiables. Cette version comporte un éventail très large des analyses réalisables par les Laboratoires PAGES ou les laboratoires spécialisés avec lesquels nous coopérons. Ce Manuel, sans être exhaustif se veut le plus complet possible afin de vous offrir le meilleur service pour la prise en charge de nos patients communs. Votre implication et votre participation à cette étape pré-analytique nous permettent, ensemble, d améliorer le service rendu aux patients. Nous souhaitons donc que ce Manuel de prélèvement vous apporte une aide utile et précieuse dans votre pratique professionnelle. Il vous est toujours possible de contacter les laboratoires pour toutes informations complémentaires. Nous sommes également attentifs à toutes remarques ou suggestions de votre part qui aideraient à l amélioration de ce document. La Direction du laboratoire Dr PAGES Christian Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 2 sur 51

3 Table des matières Le Laboratoire PAGES... 4 Laboratoires de biologie médicale de Ganges... 5 Laboratoire de biologie médicale... 6 de Saint Hippolyte du Fort... 6 Laboratoire de biologie médicale du Vigan... 7 Organisation du Laboratoire... 8 Vos interlocuteurs... 9 Les Missions Les Services Le Transport des prélèvements : Un Service de qualité Une gamme étendue d analyses La Veille Sanitaire et technologique Les autres domaines de compétences Les Résultats Analyses et prélèvements Matériel de prélèvement Identification des prélèvements et échantillons Conditionnement du matériel de prélèvement autre Matériel périmé L Ordonnance et la fiche de prélèvement Ordonnance Fiche de prélèvement (cf. Annexe 3) Le prélèvement sanguin Préparation du patient : Prélèvement à réaliser impérativement au laboratoire : Fiche de consentement et d attestation de consultation obligatoire Déroulement du prélèvement sanguin Autres prélèvements Prélèvements bactériologiques Hygiène et sécurité Elimination du matériel Accident d exposition au sang (A.E.S) Transport et conservation avant analyse Examens Urgents Stockage des échantillons et rajout d analyse Liste des analyses et Conditions particulières Les Urines La Bactériologie: Conduite à tenir en cas d accident d exposition au sang Conduite à tenir en cas d incident de prélèvement Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 3 sur 51

4 Le Laboratoire PAGES Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 4 sur 51

5 Laboratoires de biologie médicale de Ganges Centre médical de l Olivette 10 Rue de l Olivette Téléphone : GANGES Fax : Horaire d ouverture : - du lundi au vendredi de 8 heures à 19 heures - le samedi de 8 heures à 13 heures 4 Rue Jeu de Ballon : Téléphone : Fax : Horaire d ouverture : - du lundi au vendredi de 8h - 12 heures et 15h - 18 heures Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 5 sur 51

6 Laboratoire de biologie médicale de Saint Hippolyte du Fort Place des enfants de Troupe Téléphone : Saint Hippolyte du Fort Fax : Horaire d ouverture : - du lundi au vendredi : 8h 12 heures / 15h 18 heures - samedi : 8h 12 heures Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 6 sur 51

7 Laboratoire de biologie médicale du Vigan 9 Rue sous le quai Téléphone : Le Vigan Fax : Horaire d ouverture : - du lundi au vendredi : 8 h 12h15 / 16h 18 heures - le samedi : 8h 12h Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 7 sur 51

8 Organisation du Laboratoire Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 8 sur 51

9 Vos interlocuteurs Biologiste : PAGES Christian Pharmacien biologiste Site du Vigan MESBAH Bekaï Pharmacien biologiste Site de Saint Hippolyte du Fort GALTIER Françoise Pharmacien biologiste Site de Saint Hippolyte du Fort PAGES Olivier Médecin biologiste Site de Ganges PAGES BONFORT Andrée Pharmacien biologiste Site de Ganges BARRANDE Thérèse Marie Pharmacien biologiste Site de Ganges Techniciens(nes) de laboratoire : BERNABEU Line CAIZERGUES Martine GUIBAL Corinne JOHNSON Thomas NAVARETTE Elizabeth OSWALD Nicole ROUSSEL Hélène THIBAULT Martine VENOT-PAGES Brigitte Site de Ganges Site de Ganges Site de Ganges Site du Vigan Site de Ganges Site de Ganges Site de Ganges Site de Ganges Site de Ganges Secrétaires médicales : ALLEGRE Chantal BARRAL Bernadette BRUN Marie Hélène LIEGEOIS Claire PLAGNIOL Christine QUATRAIN Patricia SALZE Monique Site de Ganges Site du Vigan Site de Ganges Site de Saint Hippolyte du Fort Site de Ganges Site du Vigan Site de Ganges Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 9 sur 51

10 Les Missions - l accueil des patients - l information des conditions nécessaires à la réalisation des prélèvements et des analyses - la réalisation des prélèvements en coopération avec les médecins et les infirmiers (ères) extérieurs. - l exécution des analyses avec fiabilité et exactitude - la validation des analyses - la transmission des résultats aux patients et prescripteurs, - interprétations et conseil Ces services, ce savoir-faire et cette compétence vous sont proposés par le laboratoire PAGES Les Services L équipe des laboratoires est composée : - de biologistes, médecins et pharmaciens, anciens internes des hôpitaux, - de techniciens (nes), - de représentants de la direction pour la qualité, - de secrétaires, - de personnel de maintenance, de coursiers. Tous sont soumis au secret professionnel. Le personnel est recruté selon les exigences réglementaires et est habilité sur site : il suit un processus de formation initiale, complémentaire de la formation théorique. A l issue de cette étape, il est autorisé à effectuer certaines activités. Le Transport des prélèvements : Les prélèvements effectués par des infirmières libérales ou médecins sont acheminés vers les laboratoires par des coursiers, au moyen de véhicules spécialement équipés, dans le respect de la réglementation ADR. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 10 sur 51

11 Un Service de qualité Une gamme étendue d analyses De nombreuses analyses sont effectuées sur le plateau Technique : - des analyses de biologie humaine à visée diagnostique ou de suivi thérapeutique de biochimie clinique (glycémie, cholestérol, ionogramme, etc.) d hémostase (INR, etc.) d hématologie, cytologie sanguine et d immunohématologie (numération formule sanguine, RAI, etc.) de bactériologie, parasitologie et mycologie (examen cytobactériologique des urines, de selles, de prélèvements de toute origine en général, de dermatophytes, etc.) de sérologie et d immunologie (sérodiagnostic de la rubéole, syphilis, VIH, toxoplasmose, bilans hormonologiques, hépatites A, B, C, etc.) de spermiologie (spermogramme, spermoculture). - des analyses vétérinaires - des analyses permettant des contrôles d hygiène hospitalière - des analyses d eau (potabilité chimique) La Veille Sanitaire et technologique Les laboratoires Pages participent à la veille sanitaire (ascendante et descendante), assurent une veille technologique permanente, permettant de connaître et mettre en oeuvre des méthodes nouvelles, performantes, à la pointe de la technologie. Les biologistes participent à des manifestations scientifiques et adhèrent à plusieurs réseaux : - CLIN Hôpital local et Centre Thérapeutique médical Notre Dame de la Rouvière. - CLIN du CSSR "Les Châtaigniers" à Molière Cavaillac. Les autres domaines de compétences - les bilans d assurances - la médecine de santé au travail - la participation aux enquêtes épidémiologiques - les demandes individuelles des patients Les Résultats Avis et interprétation : l expertise des biologistes Les biologistes : - peuvent donner à votre demande des commentaires concernant les résultats. Votre médecin est le seul interlocuteur pour les interpréter en fonction de la clinique et de la thérapeutique éventuelle. - informent votre médecin des résultats pathologiques ou ayant un caractère d urgence. - peuvent définir en concertation avec ce dernier des examens complémentaires à effectuer. Dans tous les cas, vous en êtes informé. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 11 sur 51

12 La transmission des résultats : confidentialité et fiabilité Conformément à la législation, seul le compte-rendu sur papier à en tête du laboratoire fait foi. Transmission des résultats au prescripteur Les comptes-rendus d analyses lui sont systématiquement transmis (sauf demande contraire) par : - le courrier postal - le service coursiers du laboratoire Les résultats d analyses peuvent leur être également faxés ou communiqués par téléphone ou transmis par voie électronique cryptée : - à la demande du patient - à la demande du prescripteur - à l initiative du biologiste Des règles sont établies afin de préserver la confidentialité des informations transmises. Transmission des résultats au patient Les comptes-rendus d analyses peuvent : - lui être remis personnellement ou à un tiers sous pli cacheté au laboratoire (le patient prend la responsabilité de mandater une tierce personne) - lui être envoyé par courrier postal, par mail sécurisé. - lui être transmis via un correspondant du laboratoire (pharmacies, cabinet IDE) sous pli cacheté Les résultats d analyses : - peuvent être communiqués par téléphone (la secrétaire procède alors à un contrôle sommaire de l identité de l interlocuteur). - certains ne sont pas communiqués par téléphone - d autres le sont seulement après communication du numéro de dossier et de la date de naissance du patient (diagnostic de grossesse, par exemple) - la transmission par fax est possible après accord écrit de l interlocuteur. La transmission des résultats d analyses à destination des patients mineurs, à destination de la Médecine de Santé au Travail, et des compagnies d assurances est soumise à une réglementation précise, respectée par le laboratoire. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 12 sur 51

13 Analyses et prélèvements Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 13 sur 51

14 Matériel de prélèvement Les Tubes : Tube citrate de sodium 9NC Tube sec avec gel séparateur de sérum Tube sec sans additif Tube fluorure de sodium Tube EDTA K2 Tube Héparinate de lithium Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 14 sur 51

15 Choix Simplifié des tubes de prélèvement Si tests de COAGULATION (TP-INR, TCA, Fibrinogène ) Tube citrate Si IONOGRAMME seul (+/- glycémie) Tube héparinate de lithium Si une des analyses suivantes : CHIMIE, IMMUNOLOGIE ET SEROLOGIE, HORMONOLOGIE, MARQUEURS TUMORAUX Tube héparinate de lithium + Tube sec T avec séparateur + Si GLYCEMIE Tube fluorure Si NFS, Plaquettes, Réticulocytes, VS HBA1C, GROUPES SANGUINS, Typage lymphocytaire, Groupage HLA Tube EDTA Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 15 sur 51

16 Que faut-il prélever? EDTA NFS, VS, Réticulocytes BNP, Marqueurs cardiaques HbA1c 1 autre tube si groupe (!!! DDN!!!) 2 tubes en plus si ARN virale (hépatite C, B) Hépariné Ionogramme, Urée, créatinine, CRP, Fer, EAL (chol, Trigly..) Glycémie, Calcémie, phosphore Tuc sec avec gel séparateur Enzymologie et protéine Ferritine, PSA, TSH, T4, T3, Vitamines (D,B12,B9) Sérologie (hépatite, VIH, Toxo, rubéole, syphilis.) Anticorps Hormonologie Citrate = Coagulation INR ou TP TCA ou TCK Fibrinogène Fluor Glycémie, cycle glycémique Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 16 sur 51

17 Ordre de remplissage des tubes Les aiguilles de prélèvement : Aiguille de prélèvement - aiguille jaune Vacutainer BD : 38mm 9/10 20G - aiguille verte Vacutainer BD : 38mm 8/10 21G - aiguille noire Vacutainer BD : 38mm 7/10 22G - Aiguille à ailettes Sécurité BD Safety Lok 19mm 8/10 verte (pour prélèvement difficile) - Aiguille à ailettes bleu (pédiatrique) BD Safety Lok (23G) Adaptateur BD Vacutainer Stérile Usage unique Luer mâle Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 17 sur 51

18 Autre Matériel de prélèvement Flacon pour le recueil des urines : ECBU, Compte d Addis, urines des 24 heures, biochimie urinaire. Flacon avec acide borique Urines des 24h : ECBU (intérêts pour la conservation par blocage du développement bactérien) Flacon sans acide borique : - ECBU : prise en charge rapide (<2h) - Recherche de sucre, de protéine, de sang, de nitrite dans les urines - Dosage urinaire biochimique ATTENTION : Pensez à identifier NOM / Prénom et date de naissance du patient Ecouvillon avec milieux de transport : Ecouvillons Ecouvillon sans milieux de transport : ATTENTION : Pensez à identifier NOM / Prénom et date de naissance du patient Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 18 sur 51

19 Flacons divers Flacons à hémoculture aérobie et anaérobie : A demander directement au laboratoire Réceptacle pour spermioculture et spermocytogramme : A demander directement au laboratoire Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 19 sur 51

20 Identification des prélèvements et échantillons Tout prélèvement et échantillon transmis, quelque soit l analyse, doit impérativement comporter : - Nom patronymique - Nom marital - Prénom - Sexe (M ou F) - Date de naissance - Date et heure de prélèvement peuvent être mentionnées sur la fiche de prélèvement de biologie médicale Ces indications, vérifiées par le préleveur doivent être parfaitement lisibles. Ces éléments sont utilisés pour différencier les homonymes, lier le patient à ses antériorités et attribuer les valeurs de références adaptées (homme # femme # enfant). «Attention certains patients peuvent présenter les mêmes nom, prénom et date de naissance, d où la nécessité de préciser l adresse et voire le lieu de naissance, pour la validation des cartes de groupages sanguins». Points de non conformités Toute ambiguïté dans l identification des échantillons primaires entraîne une non conformité qui peut aboutir à la non réalisation des analyses. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 20 sur 51

21 Conditionnement des tubes de prélèvement Ces tubes sont conditionnés dans des boites de prélèvement conformes à la législation. Nous fournissons : Soit des boites de prélèvement standard qui contiennent également 1 aiguilles, un corps de pompe, une lingette alcoolisée, un pansement, une liste simplifiée des analyses les plus courantes avec au verso, des recommandations pour l utilisation du matériel de sécurité (aiguilles Eclipse et unité de prélèvement). Soit des boites pour prélèvements difficiles (sur demande motivée) Elles contiennent en plus du matériel classique soit des unités de prélèvements (ailette) avec tube neutre de purge, soit des seringues. 1 BOITE = 1 PATIENT Chaque boite est à l usage exclusif d un seul patient. Ne jamais grouper à l intérieur d une même boite ou d une même poche les échantillons provenant de patients différents. Conditionnement du matériel de prélèvement autre Chaque kit de prélèvement comprend : - une fiche de prélèvement, - une fiche d instruction pour le prélèvement et éventuellement de renseignements cliniques spécifiques. ECBU (Examen cytobactériologique des urines) : Les flacons sont dans une double poche avec un buvard absorbant. Prélèvement de selles (coproculture, examen parasitologique des selles) : Les flacons sont dans une double poche. Prélèvements bactériologiques superficiels : L écouvillon avec milieu de transport est emballé dans une pochette identifiée au nom du laboratoire. Prélèvements urétro-génitaux : Le matériel est conditionné dans une boite spéciale prélèvement gynécologique avec : Un écouvillon avec milieu de transport «Amies», permettant chez la femme d utiliser un seul écouvillon pour le prélèvement du col et des culs de sac vaginaux. Un flacon d urines. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 21 sur 51

22 Sécrétions broncho-pulmonaires : Les flacons stériles sont dans une double poche avec un buvard absorbant. Hémocultures Le matériel est dans une boite spécifique hémoculture avec : un flacon aérobie, un flacon anaérobie, le corps de pompe adapté, une unité de prélèvement (ailette). En fonction des prescriptions médicales, le matériel suivant est utilisé : flacons pour recueil d urines de 24 heures, flacons pour compte d Addis, lames pour Scotch test (recherche d oxyure ). flacons pour recueil de sperme (analyse : spermogramme, spermoculture), Matériel périmé Le matériel de prélèvement vous est remis avec une date de péremption éloignée. En cas d usage peu fréquent ou de stock non renouvelé, il se peut que les dates de péremption soient dépassées. Nous vous rappelons qu il est de votre responsabilité de vérifier que le matériel ne soit pas périmé au moment de son utilisation. En présence de matériel périmé, remettre celui-ci à la coursière du laboratoire ou le ramener directement au laboratoire en spécifiant bien qu il s agit de matériel périmé. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 22 sur 51

23 L Ordonnance et la fiche de prélèvement Ordonnance L ordonnance est à joindre avec la fiche de prélèvement. L ordonnance doit obligatoirement comporter : Identification du patient, Nom et prénom du médecin prescripteur, Numéro d identification du prescripteur, Adresse complète du prescripteur, Téléphone et/ou fax du prescripteur, Date et signature du prescripteur. En l absence d ordonnance, les informations ci-dessus seront reportées sur la fiche de prélèvement. Fiche de prélèvement (cf. Annexe 3) Toutes les rubriques de la fiche doivent être impérativement renseignées : Identification du patient : Remplir les différents champs : Prélèvement : Nom, Prénom, Date de naissance, Sexe, Nom de jeune fille, Adresse. Les réponses sont OBLIGATOIRES : Identité du préleveur, Date et heure du prélèvement, Nombre de tubes prélevés, en répondant dans les cases en fonction de la nature du ou des tubes prélevés. Examens demandés A remplir en l absence d ordonnance jointe. Dans le cas d utilisation de cette fiche comme ordonnance, ne pas oublier la signature et le tampon du médecin prescripteur. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 23 sur 51

24 Renseignements cliniques et Traitement Renseigner si possible : la raison du prélèvement, le contexte clinique, le traitement suivi, le poids, si le dosage de créatinine est demandé, en cas de dosage de médicaments, indiquer la posologie, l heure et la date de la dernière prise, ainsi que le poids et la taille du patient. Résultats : Cocher la case : «Au laboratoire» si le patient vient chercher son résultat, «A poster» au patient, «Par mail sécurisé» au patient, indiquer l adresse mail, «A faxer» au médecin uniquement, «URGENT» s il s agit d une urgence médicale. Renseignements administratifs : Ils sont indispensables pour la transmission aux organismes payeurs : régime obligatoire, régime complémentaire, numéro de sécurité sociale, nom et prénom de l assuré si le patient n est pas l assuré. Points de non conformités Toute ambiguïté dans l identification du patient, toute fiche de prélèvement incomplète, l absence de prescription, entraînent une non conformité qui peut aboutir à la non réalisation des analyses. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 24 sur 51

25 Préparation du patient : Le prélèvement sanguin Le jeûne assure une meilleure qualité des sérums et des plasmas. Durant le jeûne, il est possible de boire un verre d eau. Il est recommandé de prendre un repas léger la veille au soir. L état de jeûne est un des éléments permettant la bonne exécution technique des analyses et une interprétation pertinente des résultats. Il existe deux causes d erreurs en l absence de jeûne, soit par influence directe, soit par artéfact analytique dû à la lipémie. Il est généralement admis que toute variation inférieure à 5% peut être considérée comme négligeable. Une période de jeûne stricte d au moins 12 heures est indispensable pour le dosage des triglycérides, du bilan lipidique, du phosphore, voire du glucose (jeûne à 10 h). De nombreux autres dosages nécessitent un état de jeûne d au moins 4 heures tels que l albumine, l acide urique, le fer, les transaminases, l amylase, la créatinine, l urée (cf. Annexe 1 «Liste des analyses et conditions particulières»). Pour les autres analyses ne nécessitant pas un état de jeûne, il est toutefois recommandé d effectuer le prélèvement, si possible, au moins 2 heures après un repas pauvre en matières grasses. Des horaires de prélèvement sont à respecter pour certaines analyses : La prolactine se prélève après 20 minutes de repos sur pool le matin après 9h (au moins 2h après le lever). Le cortisol doit être prélevé entre 8h et 9h du matin. Les hormones : FSH, LH, Oestradiol doivent être prélevées préférentiellement le matin et selon la période du cycle précisé par le prescripteur (entre le 3e et le 5e jour du cycle en cas d exploration de la réserve ovarienne). Chez une patiente en aménorrhée, il n y a pas de jour particulier. Les principaux horaires particuliers sont mentionnés dans la liste des analyses (Annexe 1). Conformément à la nomenclature des actes de biologie médicale, le dosage de Médicaments nécessite l obtention de renseignements à reporter sur la fiche de prélèvement : les renseignements spécifiques au médicament : - nom du médicament, - dose journalière, - date et heure de la dernière prise. la date et l heure du prélèvement, l âge, la taille, le poids du sujet, les raisons de la prescription : recherche d efficacité et/ou toxicité, la date du début de traitement et/ou de la modification de la posologie. Un régime alimentaire particulier est parfois indispensable pour la réalisation de certaines analyses. La nécessité d un régime peut être visualisée dans la liste des analyses (annexe 1). Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 25 sur 51

26 Prélèvement à réaliser impérativement au laboratoire : Les prélèvements demandés par la préfecture car l identité du patient doit être certifiée par le biologiste responsable de la réalisation des analyses. Les pools d hormonologie et tests dynamiques. Les prélèvements nécessitant une congélation très rapide du sérum ou du plasma. (cf. Annexe 1) Les prélèvements pour la recherche de toxiques urinaires. Fiche de consentement et d attestation de consultation obligatoire Recherche de Cytogénétique, Génétique moléculaire, Dépistage du risque de Trisomie 21. N.B. : Les fiches de consentements sont fournies sur demande par le laboratoire. Déroulement du prélèvement sanguin Discrétion et confidentialité sont nécessaires. Le patient doit être confortablement installé. Vérification systématique de l identité du patient avant le prélèvement. Identification des tubes. Le port de gant est recommandé. Le choix du site de ponction doit être soigneux. Ne jamais prélever sur un bras qui est perfusé. Désinfection large du site de ponction. La ponction de sang veineux doit être réalisée rapidement et sans douleur importante. Le garrot ne doit être utilisé que pour faire saillir la veine. Son maintien en place ne doit pas excéder 1 minute et il doit être relâché dès que le sang s écoule dans le 1er tube. Lors du prélèvement, les tubes sont positionnés en dessous du point de ponction avec l étiquette orientée vers le bas pour pouvoir visualiser l arrivée du sang dans le tube. Le tube citraté (bouchon bleu) doit impérativement être bien rempli pour respecter le rapport sang/anticoagulant (9 volumes de sang pour 1 volume d anticoagulant). Ce tube présente un indicateur de remplissage minimum (bande bleu foncée en haut à gauche de l étiquette ) qui apporte une solution fiable, simple et visible pour contrôler le remplissage suffisant du tube, selon le critère d'acceptabilité recommandé (recommandations GEHT ). Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 26 sur 51

27 Veiller également au bon remplissage des autres tubes A chaque changement de tube, homogénéiser par plusieurs retournements lents (6 à 8) tous les tubes. Enlever l aiguille puis comprimer la veine avec un coton. Maintenir une pression ferme durant au moins une minute pour éviter la formation d un hématome. Mettre un pansement. Signaler sur la fiche de prélèvement tout problème survenu au cours du prélèvement. RAPPEL : Choix Simplifié des tubes de prélèvement Si tests de COAGULATION (TP-INR, TCA, Fibrinogène ) Tube citrate Si IONOGRAMME seul (+/- glycémie) Tube héparinate de lithium Si une des analyses suivantes : CHIMIE, IMMUNOLOGIE ET SEROLOGIE, HORMONOLOGIE, MARQUEURS TUMORAUX Tube héparinate de lithium + Tube sec avec séparateur T + Si GLYCEMIE Tube fluorure Si NFS, Plaquettes, Réticulocytes, VS HBA1C, GROUPES SANGUINS, Typage lymphocytaire, Groupage HLA Tube EDTA Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 27 sur 51

28 Prélèvements bactériologiques Les prélèvements bactériologiques sont : o Soit à visée diagnostique : Autres prélèvements Leurs résultats conduisent à l instauration d un traitement. On peut distinguer : les prélèvements provenant de zones normalement stériles (urines, tissus profonds, sang, pus profonds, liquide céphalo-rachidien, prélèvements peropératoires ). Ces échantillons sont d interprétation facile. la recherche systématique d une bactérie pathogène nommément désignée dans un contexte clinique bien défini : - Streptocoque A (Streptococcus pyogenes) et Angine, - Chlamydiae trachomatis et IST, - Mycobacterium tuberculosis et tuberculose, - Streptocoque B (Streptococcus agalactiae) et Grossesse, - Bactérie entéropathogène (Salmonella spp, Campylobacter spp, ) et Diarrhée. Ces échantillons posent peu de problèmes même s ils sont contaminés par les flores commensales. les prélèvements provenant de zones non stériles (peau, muqueuse, plaies,.). Ces prélèvements superficiels sont d obtention plus aisée, mais ils sont d interprétation plus délicate. o Soit à visée épidémiologique : Prélèvements destinés à prévenir la survenue d infections nosocomiales : - Recherche de Bactérie Multi Résistante (BMR). Recherche systématique d une bactérie nommément désignée : - Staphylocoque doré au niveau nasopharyngé dans certaines professions. Prélèvement destiné à connaitre la flore résidente d un service hospitalier ou d une maison de retraite. Pour tout prélèvement bactériologique, il est indispensable de connaitre : la nature exacte du site prélevé, si possible, les renseignements cliniques, si une antibiothérapie est déjà en cours la date et l heure du prélèvement. Ces éléments sont essentiels pour l interprétation des résultats. Comme pour les prélèvements sanguins, l identification des prélèvements bactériologiques doit être complète et sans équivoque. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 28 sur 51

29 Points de non conformités Les échantillons bactériologiques dont les garanties de qualité sont insuffisantes ne seront pas acceptés et, conformément à la réglementation, les motifs du refus seront portés à la connaissance du prescripteur et du patient. Les fiches d instructions pour les prélèvements bactériologiques sont disponibles en Annexe 1. Pour les prélèvements réalisés par le patient lui-même, les préconisations sont décrites sur les bons de renseignements cliniques fournis avec le kit de prélèvement. Il est impératif que le patient suive ces recommandations. Le laboratoire se tient à la disposition de chaque patient pour lui fournir de plus amples explications. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 29 sur 51

30 Elimination du matériel Hygiène et sécurité Conformément à la législation en vigueur, l élimination des déchets à risque infectieux (DASRI) est à la charge du préleveur (décret n du 6 novembre 1997). La filière d élimination des déchets doit être conduite de manière à ne pas compromettre la santé et la sécurité des préleveurs, du personnel de collecte, du personnel de laboratoire et à ne pas polluer l environnement. Pour leur élimination, les matériels utilisés pour les prélèvements sont classés en deux catégories : o les matériels piquants ou coupants doivent être obligatoirement recueillis dans des récipients conformes à la réglementation (Réf. NF X ) (décret précité) ; o les autres matériels qui constituent des déchets d activités de soins à risque infectieux au sens du décret n doivent être éliminés conformément à la réglementation en vigueur (décret précité). Points de non conformités : - L absence d élimination du matériel piquant ou coupant dans un récipient conforme à la réglementation. - L absence d élimination des déchets d activités de soins à risque infectieux Le non respect de l élimination du matériel utilisé expose le personnel du laboratoire au risque d AES (Accident d Exposition au Sang). Accident d exposition au sang (A.E.S) La personne victime d un AES doit être immédiatement adressée aux urgences du centre hospitalier le plus proche, une déclaration d accident du travail doit être envoyée dans les 24 heures à la sécurité sociale ainsi qu une notification de l accident au service de la médecine du travail dont dépend la personne. Une procédure de conduite à tenir en cas d AES est jointe en annexe (Annexe 2). Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 30 sur 51

31 Transport et conservation avant analyse Le transport des échantillons doit respecter des règles qui assurent l intégrité de l échantillon et la sécurité des personnels. Ces règles sont retranscrites dans des documents internes au laboratoire, fournis en annexe 3. Elles fixent les conditions particulières de délai de transport, de température de conservation et d intégrité de l emballage des échantillons biologiques. Tous les prélèvements nécessitent d être transportés à température ambiante (entre 15 C et 25 C) sauf les ECBU et les coprocultures. Les ECBU et les coprocultures sont recueillis dans des flacons qui doivent être placés au frais (+5 C +/-3 C) permettant une conservation pendant 24 heures pour les ECBU, et 12 heures pour les coprocultures. Concernant la recherche de parasites dans les selles (parasitologie des selles), le délais de transmission doit être très court, à température ambiante, notamment pour l examen extemporané des amibes (recherche des formes végétatives). Des délais maximum de transmission au laboratoire sont définis : le délai de 6 heures est applicable aux analyses les plus courantes sauf le ionogramme et le TCA (4 heures) et pour certains paramètres dont le délai de conservation est très court. Lorsque le délai de conservation très court est incompatible avec un transport trop long, il est signifié dans le tableau des analyses que le prélèvement doit être effectué au laboratoire. L étiquetage et la résistance des emballages fournis par le laboratoire sont conformes à la réglementation en vigueur concernant le transport des matières dangereuses (arrêté du 5 décembre 1996 relatif au transport des marchandises dangereuses par route, modifié par les arrêtés du 16 décembre 1997, du 27 février 1998 et du 17 décembre 1998). Ces règles s appliquent quels que soient la qualité du préleveur, l origine des prélèvements et le mode de transport utilisé. Points de non conformités Le non respect des délais de transmission, des conditions de température en fonction des échantillons et de l intégrité de l emballage de ces échantillons. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 31 sur 51

32 Examens Urgents Lorsqu un examen est urgent : le prescripteur le signale, sur la fiche de prélèvement, cocher la case «URGENT», Pas d exigence de jeûne ou d horaire : Les examens étant prescrits dans le but d une action rapide face à une éventuelle perturbation majeure, les modalités d interprétation sont adaptées à l urgence, Acheminement immédiat au laboratoire afin de traiter les échantillons et communiquer les résultats le plus rapidement possible. Stockage des échantillons et rajout d analyse Le détail du stockage des échantillons est décrit dans un document à disposition du personnel du laboratoire. Dans ce document sont énoncés la température de stockage des échantillons après analyses, les analyses complémentaires éventuellement réalisables, les délais pour prescrire ces analyses complémentaires. Ces informations sont disponibles sur appel au laboratoire. Le stockage des échantillons permet également de pouvoir répéter les analyses en cas de : défaillance analytique d un automate, défaillance détectée après la validation analytique des résultats, pour vérification des résultats ou de l identité inscrite sur le tube. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 32 sur 51

33 Liste des analyses et Conditions particulières Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 33 sur 51

34 Légende pour les prélèvements sanguins : Tubes Symboles EDTA Héparinate de lithium Tubes Citrate de sodium Fluor Sec sans séparateur Sec avec séparateur S : analyse nécessitant la conservation d une sérothèque (volume suffisant) Délais de rendu des résultats : applicables hors urgence. : Analyses considérées comme urgentes - x 2 : nombre de tube nécessaire pour cette analyse * : analyse transmise (seules les analyses les plus fréquentes sont répertoriées dans le tableau ci-dessous) au laboratoire Cerba (Paris). Tubes spéciaux (à demander au laboratoire) : Tubes ACD-B Aprotinine K3E Tubes Tube CTAD Tube citrate ½ volume (prélèvement difficile) Symboles Pour toutes analyses ne figurant pas sur ce référentiel, n hésitez pas à contacter le laboratoire pour plus d informations. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 34 sur 51

35 Le Sang (Classement par ordre alphabétique) Analyse Tube(s) Délais de rendu des résultats Conditions particulières 1-25 OH vitamine D * 17α hydro-progestérone * x1 x 1 5 à 7j A congeler rapidement pour envoi. Volume minimum : 3mL Envoi au laboratoire Cerba Paris Envoi au laboratoire Cerba Paris ACE S Acide Urique A JEUN de préférence ADN viral hépatite B (quantification) * x2 5 à 7j ALAT (TGP) Transaminase Envoi au laboratoire Cerba Paris A JEUN de préférence Albumine Amylase Anti-ccp Anticorps anti-endomysium * x 1 Anticorps anti-hbc (Hépatite B) S A JEUN de préférence A JEUN de préférence Envoi au laboratoire Cerba Paris Anticorps anti-hbs (Hépatite B) Anticorps anti-hcv (Hépatite C) Anticorps antithyroglobuline Anticorps anti-nucléaire S S J3 Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 35 sur 51

36 Anticorps antithyroperoxydase Anticorps antitransglutaminase * x 1 5 à 7 j Antigène / Anticorps anti- VIH (sérologie) S Envoi au laboratoire Cerba Paris Antigène HBs (Hépatite B) Apo-lipoprotéine A1 A JEUN >12h ASLO (Ac anti streptolysine) Apo-lipoprotéine B A JEUN >12h ARN viral VHC * x2 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris ASAT (TGO) Transaminase A JEUN de préférence Bilirubine libre Bilirubine conjuguée Transmission <4h Bicarbonate (RA ou réserve alcaline) Transmission <4h Bilirubine totale Transmission <4h BNP CA 125 CA 15.3 CA 19.9 S S S Calcitonine (thyrocalcitonine) * x1 5 à 7j Calcium A congeler rapidement Envoi au laboratoire Cerba Paris A JEUN Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 36 sur 51

37 CDT (transférrine carboxydéficiente) * x 1 5 à 7j Chlore Envoi au laboratoire Cerba Paris Cholestérol A JEUN >12h CKMB Clairance de la créatinine (Cockcroft) Cf. Créatinine CMV sérologie : IgG (cytomégalovirus) Transport rapide au laboratoire CMV sérologie : IgM cytomégalovirus) Transport rapide au laboratoire Coefficient de saturation de la transferrine Cortisol Le matin à 8h ou cycle CPK Créatine Kinase (CK) Créatinine A JEUN de préférence, Préciser le poids du patient CRP CTX * x1 5 à 7j A congeler rapidement Envoi au laboratoire Cerba Paris D-Dimère Déhydroépiandrostèrone * x 1 5 à 7 j Volume minimum : 3ml Envoi au laboratoire Cerba Paris Delta-4-Androstènedione * x 1 5 à 7 j Envoi au laboratoire Cerba Paris Dépakinémie Préciser l heure de prise, la posologie et le nom de la substance Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 37 sur 51

38 Digoxinémie EBV (Sérologie Epstein Barr Virus, Mononucléose infectieuse) Electrophorèse des protéines (EPP) Estradiol Exploration des anomalies lipidiques (EAL) Facteur Rhumatoïde Fer Ferritine Fibrinogène Folates sériques (acide folique ou Vitamine B9) FSH Gamma GT J2 Préciser l heure de prise, la posologie et le nom de la substance Préciser le jour du cycle ou aménorrhée A JEUN >12h A JEUN de préférence le matin (cycle nycthéméral) Tube rempli au minimum à 80% A JEUN >12h Préciser le jour du cycle ou aménorrhée Glycémie Groupe sanguin * x1 5 à 7 j Haptoglobine * 5 à 7j A JEUN >12h Sauf cycle ou post prandiale : 1h30 à 2heures après le repas Identification complète obligatoire : nom, prénom, nom de jeune fille ; DDN Envoi au laboratoire Cerba Paris HAVAb-IgG (Hépatite A) HAVAb-IgM (Hépatite A) HDL cholestérol A JEUN >12h Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 38 sur 51

39 Hémoglobine Glycosylée (HbA1c) Hémogramme (NFS Plaquette) HGPO ou test de charge en glucose A JEUN, prélèvement au laboratoire HLA B27 * Immunoélectrophorèse des protéines x1 5 à 7j Eviter les veilles de weekend ou jours fériés (du lundi au jeudi) Transmission au laboratoire avant 12h Immunoglobuline E spécifique * 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Immunoglobuline A/G/M/E (totale) INR (TP) Insulinémie * x 1 5 à 7j Tube rempli au minimum à 80% Préciser l anticoagulant, la dose et la cible Envoi au laboratoire Cerba Paris Ionogramme (Na, K) Transmission au laboratoire < 4 heures Ionogramme complet (Na, K, Cl, réserve alcaline, Protéine) Transmission au laboratoire < 4 heures K + (potassium) Transmission au laboratoire < 4 heures LDH LDL Cholestérol A JEUN >12h LH Préciser le jour du cycle ou aménorrhée Lipase A JEUN de préférence Lithium Lyme (maladie de) (sérologie Ig M / IgG) * x 1 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 39 sur 51

40 Marqueur maternelle plasmatique (T21) * x 1 5 à 7j Magnésium intra érythrocytaire * x 1 5 à 7j Magnésium plasmatique Feuillet d information / consentement obligatoire Envoi au laboratoire OC biologie à Clémentville, Montpellier Envoi au laboratoire Cerba Paris MDRD Microfilaire (recherche dans le sang) MNI test Myoglobine NA + (Sodium) Numération formule sanguine (NFS) Paludisme Phadiatop Phosphatase alcaline (PAL) Phosphore Plaquette Calcul de la filtration glomérulaire en fonction de la créatininémie (Cf. créatinine) Prélèvement à midi ou à minuit Information sur le séjour : lieux, durée, date de retour, prise de chimioprophylaxie A JEUN >12h le matin au laboratoire (cycle nycthéméral) Pré-albumine * 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Progestérone Prolactine Protéine (protides totaux) Préciser le jour du cycle ou aménorrhée Prélèvement au laboratoire Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 40 sur 51

41 PSA libre PSA total PTH intacte Eviter les manipulations prostatiques avant le prélèvement Eviter les manipulations prostatiques avant le prélèvement A JEUN de préférence le matin Recherche d agglutinines irrégulières (R.A.I) Identification complète du patient : nom, prénom, nom de jeune fille, DDN Recherche d hélicobacter Pylori. Hélikit. * Flacons spéciaux A faire au laboratoire Envoi au laboratoire Cerba Paris Réserve alcaline Transmission <4h Réticulocytes Rougeole (sérologie) * x1 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Rubéole IgG Sérologie Chlamydiae * S x 1 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Sérologie Coqueluche * x1 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris Sérologie toxoplasmose S Préciser si grossesse (si oui la date de début de grossesse) Syphilis S T3 libre, T4 libre A JEUN de préférence, précisé traitement TCA / TCK Tube rempli au minimum à 80% Test de charge glucosé 75g / 2h Prélèvement au laboratoire Test de O Sullivan : test de charge glucosé 50g / 1h Prélèvement au laboratoire Testostérone Le matin Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 41 sur 51

42 Testostérone biodisponible * Envoi au laboratoire Cerba Paris TP (INR) Transferrine Tube rempli au minimum à 80% Préciser l anticoagulant, la dose et la cible Triglycérides A JEUN >12h Trophatop Troponine TSH us Urée A JEUN de préférence Vitamine B12 Vitamine D (25-OH vitamine D) VS (Vitesse de sédimentation) αfp (alpha foeto protéine) β2 microglobuline * x1 5 à 7j Envoi au laboratoire Cerba Paris βhcg S Préciser la date des dernières règles Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 42 sur 51

43 Les Urines Analyses Prélèvement Délais de rendu des résultats Albumine Echantillon ou sur 24h Acide urique Echantillon ou sur 24h Amylase Echantillon ou sur 24h Recherche de parasite Echantillon (Bilharziose) Calcium Echantillon ou sur 24h Cannabis Echantillon Cortisol Urines des 24h Créatinine Echantillon ou sur 24h Chlamydiae (1 er jet d urine) Echantillon J5 J7 Cytologie urinaire Echantillon ou sur 24h Glucose Echantillon ou sur 24h Ionogramme Echantillon ou sur 24h Nitrite Echantillon Microalbumine Echantillon ou sur 24h Ph urinaire Echantillon Phosphore Echantillon ou sur 24h Potassium (Kaliurie) Echantillon ou sur 24h Protéine Echantillon ou sur 24h Sodium (Natriurue) Echantillon ou sur 24h Sang (recherche d hématurie) Echantillon ou sur 24h Toxiques urinaires * Echantillon J5 J7 Urée Echantillon ou sur 24h Clairance de la créatine mesurée Urines des 24h Conditions particulières Urines du matin (fin de miction) ou après effort Envoi au laboratoire Cerba Paris Sur échantillon : 1ere miction souhaitable. Eviter le prélèvement si fièvre ou effort physique intense Envoi au laboratoire Cerba Paris (autre que cannabis) Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 43 sur 51

44 La Bactériologie: Analyse Coproculture Prélèvement Pot à selle Délais de rendu des résultats J3 Conditions particulières Prélèvement réalisé si possible avant le début de l'antibiothérapie. Une seule coproculture est en général suffisante. Transport dans l'heure sinon Conservation < 12h à + 5 C (+/-3 C) ECBU (examen cytobactériologique des urines) Gorge (ORL) Hémoculture Pot à urines avec ou sans acide borique Ecouvillons Flacons J3 J3 Issue de la procédure C2-MO-02 Après lavage hygiénique des mains et toilette soigneuse de la région vulvaire chez la femme et du méat chez l'homme suivi d'un rinçage à l'eau. Éliminer le 1er jet (20ml) pour ne recueillir dans un flacon stérile que les 20-30ml suivants en prenant soin de ne pas toucher le bord supérieur du flacon. Chez le patient sondé, pas de recueil dans le sac collecteur. Le recueil se fait par ponction sur le site spécifique du dispositif de sonde après désinfection. Enfant de moins de 2 à 3 ans, si possible prélever au milieu du jet après désinfection soigneuse de la vulve ou du prépuce et du gland. Sinon en cas de mise en place d'un collecteur d'urine, celui-ci doit être placé au mieux au laboratoire après désinfection préalable de la vulve, du prépuce, du gland et du périnée. Ce dispositif ne doit pas être laissé en place plus de 30 mn. Passé ce délai, le dispositif doit être remplacé par un collecteur neuf. Sondage urinaire aller/retour à l'aide d'une sonde de petit calibre : acceptable que chez la femme si le recueil des urines lors de la miction est impossible. Conservation : < 2h à température ambiante ou < 24h à + 5 C (+/-3 C), jusqu à 48h à 5 (+/-3 C) si prélèvement sur flacon avec acide borique Angine : écouvillonage des amygdales ou de l'amygdale atteinte en cas d'amygdalite unilatérale. En l'absence d'amygdale, prélever au niveau des piliers du voile du palais. Ulcération ou exsudat : prélever à ce niveau Suspicion diphtérie : prélèvement sur la périphérie ou sous les fausses membranes. Suspicion gonocoque ou meningocoque : ensemenc. rapide avec milieu de transport indispensable. Candida : prélèvement au niveau de la langue, du palais et de la face interne des joues. Conservation : Ecouvillon avec milieu de transport <12h à température ambiante ; < 2H à température ambiante si recherche gonocoque ou méningocoque Suivre le protocole de prélèvement fourni avec les flacons. Conservation : < 24h à température ambiante. Il est préférable d'acheminer les flacons le plus Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 44 sur 51

45 Liquide d épanchement Nasal Oculaire Peau et phanère recherche de bactérie Flacons stérile Ecouvillons J3 J3 J3 (puis si recherche dermatophyte s : 1 mois) rapidement possible au laboratoire afin qu'ils soient incubés dés que possible. Désinfection de type chirurgical. Ponction à l'aiguille de gros diamètre montée sur une seringue. Chasser l'air et obturer la seringue. Conservation : Transport inférieur à 4h à température ambiante. En cas de transport supérieur à 4h, ensemencer des flacons d'hémocultures, en prenant soin de garder un aliquote du prélèvement pour les examens microscopiques et chimiques. Prélèvement effectué par écouvillonnage. Conservation : Ecouvillon avec milieu de transport < 12h à température ambiante Conjonctive : frottis conjonctival avec recueil des secrétions et du pus conjonctival prélevé dans l'angle interne de l'oeil. Cornée : Grattage sur la base et les berges de l'ulcère à l'aide d'un écouvillon. Prélèvement à la lampe à fente par un ophtalmologiste. Endophtalmie, nécrose rétinienne, uvéite : Prélèvement spécialisé par un ophtalmologiste Annexes de l'oeil : dacryocystite Prélèvement au niveau du canal lacrymal. Paupières : Si recherche de Demodex, arracher quelques cils à la pince le long des paupières supérieures et inférieures. Déposer les cils dans une boite de Petri stérile afin de dénombrer les Demodex. Conservation : Ecouvillon avec milieu de transport < 12h à température ambiante Préciser la nature de la lésion. Sur peau saine ou lésion non suintante : Prélever à l'aide d'un écouvillon préalablement imbibé d'eau physiologique stérile. Sur lésions cutanées superficielles (impétigo, bulle, furoncle ). Prélever à l'écouvillon au niveau de la lésion après avoir nettoyé la zone cutanée aux alentours au sérum physiologique stérile. Inflammation cutanée, érysipèle, hypodermite: Désinfecter le site (type chirurgical) puis prélevé par ponction à l'aiguille en injectant puis respirant dans la lésion un peu de sérum physiologique stérile. Aspirer ensuite 1 ml d'eau physiologique dans la seringue pour éviter tout dessèchement et boucher stérilement. Abcès fermé, suppuration close: Désinfecter le site (type chirurgical) puis prélever par ponction à l'aiguille de gros diamètre montée sur seringue. Chasser l'air puis obturer stérilement. Fistule: désinfection de la peau de type chirurgical, puis prélever la partie le plus profonde de la fistule par aspiration à partir d'un cathéter semi rigide monté sur seringue. Aspirer ensuite si nécessaire 1ml de sérum physiologique stérile pour éviter tout dessèchement. Plaies, Escarres, lésions nécrotiques: A prélever lorsque signes d'accompagnements locaux (douleurs, inflammation péri-ulcéreuse). Nettoyer la plaie, éliminer les exsudats, débrider les tissus nécrosés, si nécessaire appliquer un antiseptique cutané, laisser Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 45 sur 51

46 Prélèvement urétral / vaginal Sperme Sécrétions bronchopulmonaire Ecouvillon Flacons spéciaux Flacons stérile J3 J2 J3 sécher, puis rincer au sérum physiologique stérile. Cureter le bord actif de la lésion. Le prélèvement par aspiration avec une aiguille montée sur seringue est préférable au prélèvement sur écouvillon. Ecoulement de sérosités: Aspiration avec une aiguille montée sur seringue et boucher stérilement. Morsures: Pratiquer plusieurs écouvillonnages profonds, ou mieux aspirer le liquide présent dans le blessure à l'aide d'un cathéter semi rigide monté sur seringue; Aspirer ensuite 1 ml d'eau physiologique dans la seringue pour éviter tout desséchement. Conservation : Prélèvement sur écouvillons avec milieux de transport : < 12h à température ambiante Prélèvement sur seringue : < 4h à température ambiante Effectuer le prélèvement avec le matériel contenu dans les boites pour prélèvements génitaux. Suivre le protocole inclus dans ces boites. Transport rapide au laboratoire. Conservation: VAGINAL, URETRAL: Le prélèvement au laboratoire est toujours préférable. Ecouvillons avec milieux de transport : < 24h à température ambiante. Ne pas réfrigérer. CHLAMYDIAE PAR PCR : Si plt sur écouvillon dans milieu de transport spécifique Conservation : < 5j à température ambiante si prélèvement sur 1er jet d'urines : < 12h non congelé MYCOPLASMES GENITAUX : < 2h à température ambiante SYPHILIS: Prélèvement uniquement au laboratoire Prélèvement au laboratoire si possible Conservation : < 2h à température ambiante Éviter la présence de salive source de contamination par les bactéries commensales salivaires. Expectoration, protocole rigoureux : le matin, au réveil, après rinçage de la bouche avec un verre d'eau, lors d'un effort de toux, aidé si besoin d'une kinésithérapie. Recueillir le prélèvement dans les pots prévus à cet effet. En milieu hospitalier, les prélèvements par Brossage bronchique protégé, Lavage broncho-alvéolaire, aspiration endotrachéale et Mini-lavage sont préférés à l'expectoration. Conservation : < 2h à température ambiante Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 46 sur 51

47 Annexe 2 Conduite à tenir en cas d accident d exposition au sang (Issue de la l instruction BQ-009-INS-01) 4 étapes successives obligatoires. Cessez l activité en cours le plus rapidement possible. 1. Soins locaux à faire immédiatement - Piqûre, coupure, morsure, contact avec peau lésée : nettoyage immédiat à l eau et au savon, puis rinçage. Désinfection par trempage pendant au moins 5 minutes avec AMUKINE, ou DAKIN ou Polyvidone Iodé ou alcool à Projection sur muqueuse ou yeux : enlever lentilles si portage, rincage au sérum physiologique pendant au moins 5 minutes. Prévenir le médecin dans tous les cas (médecin de garde). 2. Evaluation du risque infectieux (en particulier VIH en urgence) Vérification en urgence du statut sérologique du patient source avec son accord (sérologie VIH, Hépatite B et C). Demander en urgence au laboratoire la sérologie VIH (test rapide, résultat en 1h) : 4 possibilités : a. VIH connu positif au test rapide, VIH négatif mais patient à risque, patient source non identifié (Ex : aiguille traînante) : 9h à 17h : Allo médecin référents VIH au CHU de Nîmes (Dr Mauboussin, Rouanet, Barbuat, Prof. Sotto : ) ou en garde ou week-end : Médecin des urgences (ex CHU Nîmes : ) pour prise en charge avec si nécessaire traitement prophylactique en urgence (trithérapie type Combivir et Viracept : début de traitement possible à NDR) puis déclaration de l accident (cf. chapitre 3). b. VIH négatif au test rapide et pas de notion de malade à risque : Déclaration de l accident c. Malade source Ag HbS positif Si agent non immunisé : gammaglobuline anti HbS dans les 12 heures et déclaration de l accident d. Malade source VHC positif : Prévenir la médecine du travail pour un suivi adapté. Déclaration de l accident. Manuel de prélèvement LBM PAGES V2 Page 47 sur 51

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