Cellulaire 1 Culture Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage

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1 2 HTS

2 2 HTS Informations Techniques 1 I 2 Produits pour Culture 1 I 4 Flacons CELLSTAR 1 I 4 Flacons Standard 1 I 4 Flacons à Bouchons Ventilés 1 I 5 Flacons pour Culture en Suspension 1 I 6 Flacons à Bouchons Ventilés pour Culture en Suspension 1 I 6 AutoFlask TM 1 I 7 Boîtes CELLSTAR 1 I 8 Boîtes CELLview TM 1 I 9 Plaques CELLSTAR OneWell Plate TM 1 l Plaques CELLSTAR FourWell Plate TM 1 l Plaques Multipuits CELLSTAR 1 I 11 CELLSTAR 1 I Puits 1 I Puits 1 I Puits 1 I 18 Microplaque SCREENSTAR 1 l 20 Tubes CELLSTAR 1 I 21 CELLSTAR CELLreactor TM 1 l 22 CELLMASTER TM Rollers pour Culture 1 I 23 Rollers en Polystyrène 1 I 24 Rollers en PS 1 I 24 Rollers en PS Bouchon avec filtre 1 I 25 Rollers en PET 1 I 26 Advanced TC TM Supports de Culture 1 I 27 CELLCOAT Supports Coatés avec des Protéines pour Culture 1 I 31 Collagène Type I 1 I 32 PolyLysines 1 I 34 Fibronectine 1 I 37 Laminine 1 I 38 Accessoires 1 I 39 Grattoirs de Cellules 1 I 39 ThinCert TM 1 I 40 Inserts de Culture de Tissus ThinCert TM 1 I 40 Plaque ThinCert TM 1 I 44

3 Culture 1. Gamme de Produits Pour la culture de cellules et de tissus, Greiner BioOne dispose des gammes de produit suivantes: CELLSTAR Supports avec des surfaces physiquement modifiées pour la culture de cellules adhérentes ou en suspension. CELLMASTER Rollers en polystyrène (avec un traitement de surface physique) ou en polyéthylène téréphthalate. Advanced TC Advanced TC consiste en une modification de surface des supports de culture Greiner BioOne, qui vient renforcer l'adhérence cellulaire en particulier pour les cellules délicates. CELLCOAT Supports coatés avec des protéines pour culture cellulaire. Notre gamme de produits CELLSTAR est coatée avec les protéines suivantes: Collagène Type I, PolyDLysine, PolyLLysine, Fibronectine et Laminine. CELLSTAR CELLreactor Bioréacteur miniaturisé pour la culture de cellules en suspension ou sphéroides cellulaires très pratique pour des préparations petites échelles tout en maximisant le nombre d'expérimentations en parallèle. En plus de son application en culture cellulaire, le CELLreactor peut être utilisé pour la culture de bactéries anaérobies, levure ou autres microorganismes ainsi que pour le stockage de composés et liquides nécessitant un échange gazeux. Inserts de Culture ThinCert Supports avec membrane pour plaques multipuits, constitués d une cupule en polystyrène et d une membrane capillaire poreuse scellée en PET. Avec la nouvelle plaque ThinCert, Greiner BioOne offre une solution innovante pour la culture en interphase air liquide. Ses puits profonds créent un volume de milieu disponible plus important pour la culture en interphase air liquide. 2. Matériaux La fabrication de supports pour culture cellulaire fait appel exclusivement à des polystyrènes spécifiques et polyéthylènes téréphtalate comme matières premières. Le polystyrène (PS) est caractérisé par une haute clarté, qui simplifie grandement le contrôle optique de la croissance cellulaire dans les flacons, tubes et rollers. Le polyéthylène téréphthalate (PET) est utilisé pour la fabrication des rollers, de flacons pour milieu de culture et de membranes, compte tenu de ses propriétés mécaniques, optiques et chimiques. 2 HTS 1 2

4 3. Traitement de surface La surface des produits CELLSTAR et CELLMASTER pour les cellules adhérentes est traitée selon une méthode physique spécifique. Ce traitement permet l'incorporation de groupes polaires, comme des groupes carboxy et hydroxy à la surface du plastique, le rendant hydrophile. Ceci améliore significativement l'adhésion des cellules et la fixation des protéines à la surface. Les produits traités culture selon ce procédé sont marqués TC traitement de surface (TC = Tissue Culture), dans le catalogue. Pour la culture de cellules délicates ou placées sous contrainte Greiner BioOne propose la surface Advanced TC. Cette innovation modifie la surface des supports de culture et optimise les caractéristiques et fonctions impliquées dans le renforcement de l'adhérence et du développement cellulaire. Outre les surfaces modifiées physiquement et chimiquement, nous proposons également des supports traités Collagène de type I, PolyDLysine, PolyLLysine, Fibronectine et Laminine. Les traitements avec des protéines de la matrice extracellulaire ou avec des polylysines, favorisent la croissance d'un grand nombre de types cellulaires, incluant les hépatocytes, cellules musculaires, cellules endothéliales/ epithéliales, cellules nerveuses et les cellules transfectées. Ces produits constituent la gamme CELLCOAT. Nos produits pour culture cellulaire en suspension, avec leurs surfaces particulièrement hydrophobes sont parfaitement adaptés aux cellules nonadhérentes et aux hybridomes. 4. Bouchons à vis avec membrane filtrante capillaire hydrophobe Les bouchons vissant à filtre pour flacons culture cellulaire / suspension et rollers possèdent une membrane hydrophobe à pores capillaires brevetée (Fig. 1). La définition et la constance de la taille de pores à 0,2 µm sont obtenues avec une technologie avancée (Fig. 2). Le filtre propose une efficacité optimale dans les échanges gazeux et une protection contre les contaminations. Grâce au couple PET/PTFE, responsable de la résistance mécanique et des propriétés hydrophobes de la membrane, ces qualités sont conservées même en cas de contact de l'intérieur du bouchon par le milieu de culture. 5. Date de péremption / Numéro de lot Tous nos produits pour la culture cellulaire sont marqués avec une date de péremption (bestbefore) et leur numéro de lot. Nous donnons ainsi à nos utilisateurs une transparence sur nos processus de fabrication et rendons possible la traçabilité sur nos produits tout au long de leur fabrication. 6. Contrôle qualité Sur la base de processus de production automatisés avec des contrôles de qualité, nous fournissons des produits de haute qualité pour toutes applications en culture cellulaire. Tous les produits CELLSTAR, CELLMASTER et ThinCert, Advanced TC et CELLview sont stérilisés par irradiation. Nos laboratoires internes contrôlent la stérilité, l'absence d'endotoxines décelable, d'adn et d'arn et d ADN humain. Cytotoxicité Dans beaucoup d expériences, les effets toxiques sur cellules ou cultures de tissus jouent un rôle important et particulièrement dans le domaine diagnostic in vitro. Toute réaction biologique pouvant être engendrée par les matières premières type polystyrène ou polypropylène est suivie, en cultivant des cellules en présence d extraits de polymères. La cytotoxicité est testée sur cellules de mammifères selon la norme EN ISO Tous les produits destinés à la culture de cellules sont analysés pour vérifier l'absence de composés cytotoxiques. Le support est mis au contact d un milieu de culture cellulaire, lui même placé ensuite au contact de cellules sensibles pendant 24 heures. 2 HTS a) b) Figure 1: a) Vue du dessus de la membrane poreuse capillaire (microscopie électronique); b) Coupe de la membrane poreuse capillaire. Les capillaires sont remplis avec du cuivre et le PET est retiré par lavage (microscopie électronique) Pour plus d informations sur les produits Culture Application Note sirnadependent gene silencing on various cell culture surfaces (F071 5) Application Note Improved cultivation / differentiation of embryonic stem cells (F ) Application Note Cultivation and differentiation of hadscs with CELLSTAR and CELLCOAT products (F ) Figure 2: Comparaison entre différentes membranes en fonction de la distribution de la taille des pores 1 3

5 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR Produits pour Culture Flacons CELLSTAR Standard pour Culture Pour la culture cellulaire, Greiner BioOne propose des flacons standard ou à bouchons ventilés avec des surfaces de culture de 25, 75 et 175 cm 2. Les flacons pour culture cellulaire en suspension sont proposés en volumes de 50, 250, 550 et 650 ml. Tous les flacons de culture Greiner BioOne sont réalisés en polystyrène haute qualité. Pour culture cellulaire adhérente, les surfaces des flacons standards et ventilés, sont prétraitées afin d'améliorer l'adhésion et la prolifération La géométrie spécifique de nos flacons pour culture cellulaire rend possible l'atteinte de la couche cellulaire avec un grattoir et permet un accès optimal avec pipettes. Le design approprié du col du flacon réduit le risque de contact entre l'intérieur du bouchon et le milieu, diminuant ainsi le risque de contamination. La nervure d'empilage sur le dessus du flacon permet un empilage facile et sécurisé dans l'incubateur. Chaque côté du flacon possède une graduation pour un remplissage facilité. Flacons Standard pour Culture Adhésion cellulaire optimisée par traitement physique Flacons pour la culture avec bouchons vissant standards (sans filtre) Col incliné Graduations sur les côtés Emballage stérile pelable Proposés en surfaces de 25, 75 et 175 cm 2 Flacons de culture 175 cm 2 forme haute et basse, selon le volume de milieu a) b) Figure 1: Bouchon vissant standard 2 positions a) position ventilation b) position fermée étanche aux gaz Bouchon vissant standard à 2 positions La position ventilée sécurisée est atteinte avec un click audible sur le bouchon. En complément, la position est repérée par la pointe du triangle en vertical et l'impression VENT (Fig. 1). Cela permet une vérification visuelle de la position aérobie même lorsque les flacons sont empilés dans l'incubateur. Si le bouchon est tourné en butée vers la droite, le flacon est fermé étanche aux gaz. Profil du flacon * ) bas haut Surface de développement [cm 2 ] Volume total [ml] Volume de travail [ml] Traitement de la surface Bouchon vissant standard /200 /200 5/120 5/50 4/ * ) avec graduation

6 Flacons CELLSTAR de Culture à Bouchons Ventilés Produits pour Culture CELLSTAR Flacons de Culture à Bouchons Ventilés 2 HTS Adhésion cellulaire optimisée par traitement physique Bouchon ventilé à vis ouverture facile Graduation sur les côtés Emballage stérile et pelable Proposés en surfaces de 25, 75 et 175 cm 2 Flacons de culture 175 cm 2 forme haute et basse, selon le volume de milieu Col incliné Une membrane spécifique poreuse est utilisée pour le bouchon vissant de nos flacons de culture cellulaire ventilés. La porosité définie à 0,2 µm garantit une barrière stérile contre les contaminations. La surface interne de la membrane PET est revêtue de PTFE la rendant hydrophobe et empêchant l humidification de l'intérieur du bouchon par le milieu. Grâce a un débit élevé à travers le filtre, un échange gazeux optimal est possible. Bouchons à vis standard (sans filtre) en supplément dans chaque carton Echanges gazeux optimaux au travers de la membrane Profil du flacon bas haut Surface de développement [cm 2 ] Volume total [ml] Volume de travail [ml] Traitement de la surface Bouchon vissant avec filtre /200 5/120 5/50 4/40 1 5

7 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR Flacons CELLSTAR pour Culture en Suspension Flacons pour Culture en Suspension Surface hydrophobe, idéale pour les cultures en suspension, hybridomes et cellules souches embryonnaires Flacons pour culture en suspension avec bouchon à vis standard (sans filtre) Col incliné Graduations sur les côtés Emballage stérile et pelable Disponible en 50 ml, 250, 550 et 650 ml Bouchons à vis standard blancs en position ventilée ( p. 1 I 4) Profil du flacon bas haut Volume [ml] Traitement de la surface /suspension /suspension /suspension /suspension Bouchon vissant standard blanc blanc blanc blanc /200 5/120 5/50 4/40 Flacons à Bouchons Ventilés pour Culture en Suspension Surface hydrophobe, idéale pour culture en suspension, hybridomes et cellules souches embryonnaires Avec bouchon ventilé vissant Emballage stérile pelable Col incliné Graduations sur les côtés En complément, bouchons standard non ventilés dans chaque carton Profil du flacon Volume [ml] Traitement de la surface /suspension /suspension haut 650 /suspension Bouchon vissant avec filtre blanc /200 blanc 5/120 blanc 4/40 1 6

8 Produits pour Culture CELLSTAR CELLSTAR AutoFlask TM AutoFlask TM 2 HTS Compatible avec une large gamme de systèmes pour culture cellulaire et de pipetage Membrane hydrophobe pour échanges gazeux Format Longueur: 127,76 mm Largeur: 85,48 mm Hauteur: 19,50 mm Septum à entrées multiples prépercé Poche de centrifugation pour séparation des cellules Etiquettes code à barres sur demande Manipulation et pipetage en position horizontale Différents revêtements et modifications de surface disponibles AutoFlask TM Flacon de culture cellulaire pour systèmes automatisés Le format standard microplaque de l'áutoflask TM permet une compatibilité avec la plupart des systèmes robotiques pour Culture Cellullaire et pipetage. Un septum à entrées multiples prépercé accessible par robot (Fig. 1 1) assure la stérilité du contenu du flacon durant toute la manipulation. La poche de centrifugation unique (Fig. 1 2) permet la séparation des cellules et du surnageant dans le flacon et le filtre hydrophobe (intégré) (Fig. 1 3) facilite les échanges gazeux durant la culture des cellules. Un code couleur simple d'utilisation (Fig. 1 4) permet une identification facile de l'autoflask TM. En plus des surfaces traitées et pour la culture en suspension, Greiner BioOne propose également AutoFlask TM disponible avec traitements PolyDLysine ( p. 1 l 34) ou Collagène Type I ( p. 1 l 32) et en surface modifiée Advanced TC TM ( p. 1 l 28). Pour plus d ínformations sur l'autoflask TM Comparative cell growth study using the AutoFlask TM (F ) Figure 1: CELLSTAR AutoFlask TM Description AutoFlask TM AutoFlask TM Traitement de la surface /suspension Surface de développement [cm 2 ] 83,6 83,6 Volume max. [ml] Volume de travail [ml] Code de couleur blanc Etiquetage code à barres /0 /0 1 7

9 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR Boîtes CELLSTAR pour Culture Boîtes pour Culture Adhésion cellulaire optimisée par traitement physique Ergots de ventilation assurant les échanges gazeux Emballage stérile et pelable Disponible en format 35, 60, 94, 0 et 145 mm ø Surfaces de culture de 8,7 à 143 cm 2 Superposition facile Transparence maximale pour une analyse de haute qualité sous microscope Nouveau: Boite diam 35 également disponible avec 4 compartiments Comme tous les autres produits Greiner BioOne, les boîtes pour culture cellulaire, sont fabriquées en suivant nos standards de qualité élevés. Les boîtes sont disponibles dans un large choix de dimensions et surfaces de croissance. Dans le cas des boîtes 57 cm 2 et 143 cm 2, une version haute (20 mm) est également disponible. Pour les côtes exactes de nos boites pour Culture, merci de consulter nos fiches techniques en ligne. ø [mm] x hauteur [mm] x x x x 16 Surface de développement [cm 2 ] Volume total [ml] Volume de travail [ml] 8,7 5 0,93/puits 0,1/puits Ergots Traitement de la surface /740 /740 /600 /480 Nouveau ø [mm] x hauteur [mm] x x 20 Surface de développement [cm 2 ] Volume total [ml] Volume de travail [ml] Ergots Traitement de la surface 15/360 5/

10 Produits de Culture CELLview Boîte de Culture à Fond Verre La boite pour Culture CELLview allie la commodité d'une boîte de culture de taille standard 35 mm en polystyrène à la qualité optique du verre, permettant d obtenir des images en très haute résolution de cultures invitro. Elle est en polystyrène haute qualité avec un fond en verre intégré. La configuration innovante de cette boîte de culture induit une planéité optimale du fond. De plus, le fond plat permet une conductivité thermique optimale en évitant les variations lors de l utilisation sur plateformes chauffantes utilisées en imagerie avec cellules vivantes. La version compartimentée de la boîte de culture CELLview permet l'analyse simultanée de plusieurs lignées cellulaires, de stimulations ou transfections diverses. Les quatre compartiments individualisés ont une surface de croissance de 1,9 cm² chacun, minimisant en conséquence la quantité de cellules et de réactifs nécessaires pour chaque test. En complément de la surface en verre non traitée, Greiner BioOne propose le traitement de surface pour culture de tissus ainsi que celui de la nouvelle surface modifiée Advanced TC ( p. 1 I 27) afin d améliorer la fixation des cellules, éliminant ainsi le besoin de revêtement protéinique dans de nombreux cas X X La haute qualité optique du verre assure une planéité totale et empêche tout phénomène de dépolarisation. Caractéristiques du fond verre: Verre borosilicate achromatique à haute transparence, hydrolytique de classe 1 (DIN ISO 719) Epaisseur du verre 175 µm / 15 µm Transmission spectrale maximale, sans auto fluorescence Planéité exceptionnelle Fabrication conforme aux normes DIN ISO 82551:1986 (Optiques et instruments optiques Microscopes lames en verre) Pour plus d informations sur CELLview TM Application Note Protein localisation using confocal laser scanning microscopy (F073 1) Application Note Live cell imaging on Golgi morpholgy using the CELLview TM dish (F ) CELLview Caractéristiques: La version compartimentée permet l analyse en multiplex Fond verre intégré pour une planéité maximale Plusieurs variantes de traitement de surface de culture et surface modifiée Advanced TC disponibles Applications: Microscopie à contraste de phase Microscopie en fluorescence Imagerie cellules vivantes Microscopie de contraste à interférence différentielle Microscopie en lumière polarisée Hybridation par fluorescence insitu (FISH) 2 HTS Description CELLview CELLview CELLview CELLview CELLview CELLview Boîte de culture Boîte de culture Boîte de culture Boîte de culture Boîte de culture Boîte de culture Fond Nombre de compartiments ø [mm] x hauteur [mm] verre 4 35 x verre 4 35 x verre 4 35 x verre 1 35 x verre 1 35 x verre 1 35 x Surface de culture (cm 2 ) Volume total [ml] Volume de travail [ml] 1,9/compartiment 1,5/compartiment 0,1/0,5* ) 1,9/compartment 1,5/compartiment 0,1/0,5* ) 1,9/compartiment 1,5/compartiment 0,1/0,5* ) 8,7 5 8,7 5 8,7 5 Traitement de surface TC /40 Advanced TC /40 /40 TC /40 Advanced TC /40 /40 * ) 0,1 ml pour l'ensemencement ou la coloration sur la zone en verre; 0,5 ml pour la culture sur l'ensemble du compartiment 1 9

11 Produits pour Culture CELLSTAR 2 HTS CELLSTAR OneWell Plate TM & FourWell Plate TM CELLSTAR OneWell Plate TM Plaque sans puits pour des applications de culture cellulaire CELLSTAR FourWell Plate TM Plaque multipuits pour des applications en microscopie La nouvelle CELLSTAR OneWell Plate peut être utilisée pour la culture intensive de cellules. Les dimensions externes sont conformes aux standards ANSI ce qui permet d utiliser la plaque sur un large pannel robotique. La surface de croissance de 95 cm 2 permet une offre supplémentaire entre les surfaces de croissance de 58 cm 2 (Réf ) et 143 cm 2 (Réf ) déja existantes sur boîtes de culture cellulaire. La manipulation et l encombrement de l incubateur sont améliorés par rapport à une boîte ronde. Les pans coupés sur côté gauche de la plaque et du couvercle assurent une position sécurisée du couvercle. La version traitée culture est fournie avec un traitement de surface propriétaire augmentant le caractère hydrophile de la plaque et facilitant la culture de cellules adhérentes. Comme tous les supports Greiner BioOne CELLSTAR, CELLSTAR OneWell Plate est en polystyrène haute qualité et est garanti stérile, sans pyrogènes, noncytotoxique et exempte de DNase, RNase et ADN humain. En plus des applications cultures cellulaires, CELLSTAR OneWell Plate peut etre utilisée comme un contenant pour liquide multiusages ou un consommable pour la dénaturation, l hybridation et le lavage des membranes (Southern, Northern et Western Blot). La nouvelle CELLSTAR FourWell Plate facilite la culture de cellules et le stockage de lames au sein d une plaque compatible HTS conforme aux standards ANSI. Avec ses 4 subdivisions, la plaque permet l insertion de 4 lames individuelles aux dimensions standard et le déroulement de 4 expériences en parallèle. Les échantillons de cellules et de tissus cultivés sur ces lames peuvent être alimentés rapidement avec de nouveaux milieux et peuvent être examinés directement sous microscope. Par la suite, les échantillons peuvent également être fixés et analysés par des techniques d'immunohistochimie et immunocytochimies. Les pans coupés sur le côté gauche de la plaque et un repérage numérique de chacun des compartiments rendent impossible une inversion ou un mélange des échantillons. Une nervure semicirculaire en haut et en bas de chaque compartiment permet un changement et une manipulation facile des lames. La lame peut toujours être retirée manuellement du compartiment même si elle adhère au fond de la plaque dû aux forces capillaires. Audelà des applications microscopiques indiquées, CELLSTAR FourWell Plate peut aussi servir comme un contenant pour liquide ou un consommable pour la dénaturation, l hybridation et le lavage des membranes (Southern, Northern et Western Blot). OneWell Plate TM FourWell Plate TM Nouveau CELLSTAR OneWell Plate TM (nonstérile) pour des applications en bactériologie p. 4 l Description OneWell Plate TM OneWell Plate TM FourWell Plate TM Nombre de compartiments Longueur x largeur [mm] 127,8 x 85,5 127,8 x 85,5 127,8 x 85,5 Hauteur [mm] 14,4 14,4 14,4 Volume total [ml] 113,7 113,7 18,6/puits Surface de croissance [cm 2 ] Ergots Traitement de la surface Stérile Couvercle 8/32 8/32 8/32 1

12 Produits pour Culture CELLSTAR Plaques Multipuits CELLSTAR pour Culture Plaques Multipuits pour Culture Formats 6, 12, 24, 48 Puits 2 HTS Inserts de Culture de Tissus p. 1 I Les plaques pour la culture cellulaire sont disponibles dans les formats suivants: Avec surface hydrophile (surface traitée culture) pour une meilleure adhérence cellulaire Avec surface hydrophobe pour cultures en suspension et cellules hybridomes Propriétés Haute transparence et faible autofluorescence Le couvercle permet un échange de gaz optimal avec une évaporation très faible Couvercle avec détrompeur, position unique Repérage alphanumérique Emballage pelable Compatibles avec les équipements et systèmes automatisés. Pour de plus amples informations, visitez notre site web. Pour des applications avec un volume plus important, une plaque ThinCert de 6 et 12 puits est disponible p. 1 I 44 Plaques multipuits pour culture cellulaire "adhérente" Format puits puits puits puits Surface de développement/puits [cm 2 ] Volume de travail/puits [ml] Traitement de la surface 9, , ,9 0,5 1,5 1,0 0,5 1 Couvercle * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 Plaques multipuits pour culture en suspension Format Volume max./puits [cm 2 ] puits puits 6, puits 3, puits 1,7 Traitement de la surface /suspension /suspension /suspension /suspension Couvercle * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 * ) avec anneaux de condensation 1 11

13 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR CELLSTAR pour Culture Les microplaques traitées pour la culture cellulaire sont disponibles dans les versions suivantes: 96, 384 et 1536 puits Propriétés Traitement physique de surface pour améliorer l'adhésion cellulaire Compatible avec des systèmes automatisés. Pour de plus amples renseignements, consulter notre site web: /technical_information Repérage alphanumérique Un aperçu de toutes les microplaques 96, 384 et 1536 puits listé dans ce catalogue, est disponible dans l'appendice technique p. A I 3 96 Puits en Polystyrène pour Culture Les microplaques 96 puits en polystyrène pour la culture cellulaire sont disponibles dans les versions suivantes Fond U, V et F (plat) Transparentes, s ou blanches Format standard ou demipuits Blanches ou s à fonds s ( ) Puits cheminée, puits surélevés et anneaux de condensation préviennent les contaminations croisées Avec ou sans couvercle Traitement physique de surface pour améliorer l'adhésion cellulaire Etiquetage code à barres sur demande Propriétés Couvercle permettant une ventilation avec un faible taux d évaporation Haute transparence des microplaques pour une observation maximale au microscope Empilables Repérage alphanumérique Emballage individuel ouverture facile Numéro de lot incrémentiel Profil de puits En fonction de l'application, le profil de puits d'une plaque de culture 96 puits est une caractéristique clé. Pour plus d'informations et de détails sur les profils décrits cidessous consulter p. 2 I 6 1. Fond U Le "U" décrit les puits ayant un fond rond. Angles arrondis pour un pipetage facilité et intégral Adaptés aux analyses / Volume de travail: µl 2. Fond V Le "V" définit les puits à fond coniques. Pipetage facilité Adaptés aux analyses / Volume de travail: µl 3. Fond F / Standard (ST) Le fond "F" définit les puits à fond plats. Propriétés optiques excellentes Mesures optiques précises Applications en microscopie (lecture par le fond) Surface de culture: 32 mm 2 Volume de travail: µl 1 12 Informations techniques détaillées sur les microplaques p. 2 I 2 HTS p. 3 I 2 Immunologie p. 14 I 4 Etiquetage code à barres Littérature complémentaire disponible sur pour Culture Application Note Establishing a cell culture assay based on TRFRET for screening GProteincoupled receptors (F ) Application Note Selection of cell culture surfaces for the adipogenic differentiation of hmscs (F0 003) 4. Fond F / type cheminée Les microplaques de culture cellulaire puits cheminée, comme les microplaques standard ont des puits à fond plat. La différence avec la microplaque de culture standard se situe au niveau des puits qui prennent la forme de cheminée. Chaque puits est individualisé. Le risque de contamination croisée des échantillons est ainsi minimisé. Surface de culture: 34 mm 2 Volume de travail: µl / fond opaque Les microplaques fonds s sont des microplaques avec des puits à parois opaques et un fond pourvu d'un film fin. Par opposition avec nos plaques PS et PP à fond opaque, elles sont idéales pour les applications dans les domaines de la culture cellulaire et de la microscopie en fluorescence ou en luminescence. demipuits Pour de multiples applications, la réduction des volumes est un critère déterminant. En complément des volumes standards 96 puits, la microplaque demipuits est une alternative intéressante à cet effet. Le pipetage manuel est réalisable sans aucun problème et la réduction des volumes pouvant atteindre jusqu à 50 %. Surface de culture: 15 mm 2 Volume de travail: µl Conditionnement en vrac Sur des produits sélectionnés, Greiner BioOne propose également un conditionnement vrac facile à utiliser (Fig. 1). D'autres produits sont disponibles en conditionnement vrac sur demande. Figure 1: Emballage pratique en vrac

14 Produits pour Culture CELLSTAR 650 1XX 96 Puits pour Culture et pour Culture en Suspension en Polystyrène 2 HTS 651 1XX 655 1XX 96 Puits p. 2 I 7 Couvercles et p. 12 I 2 Etiquetage Code à Barres p. 14 I 4 Profil de puits fond U fond U fond U fond V fond V Fond Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface Couvercle 1/0 1/0 /suspension 1/60 1/0 1/0 Profil de puits /puits /puits /puits /puits /puits Fond Couleur cheminée cheminée cheminée cheminée cheminée Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface /suspension Couvercle 1/0 5/0 * ) 1/0 * ) avec anneaux de condensation * ) /160 * ) 1/

15 Produits pour Culture CELLSTAR 2 HTS 96 Puits pour Culture en Polystyrène blanche / Puits p. 2 I 8 Couvercles et p. 12 I 2 Etiquetage Code à Barres p. 14 I Profil de puits /puits cheminée /puits cheminée /puits cheminée /puits cheminée Fond blanc blanc noir noir Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] blanche blanche Traitement de la surface Couvercle * ) * ) /40 8/32 /40 8/32 * ) avec anneaux de condensation 1 14

16 Produits pour Culture CELLSTAR Puits pour Culture en Polystyrène, blanche / 2 HTS 96 Puits p. 2 I 8 Couvercles et, p. 12 I 2 Etiquetage Codes à Barres p. 14 I Profil de puits /puits cheminée /puits cheminée /puits cheminée /puits cheminée Fond Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] blanche 34 blanche Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface/ Couvercle / /40 / * ) 8/32 / /40 / * ) 8/ * ) avec anneaux de condensation 96 Puits DemiPuits pour Culture / blanche /, blanche / 96 Puits DemiPuits p. 2 I 9 Profil de puits demipuits demipuits demipuits demipuits demipuits Fond Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] tranparente blanc blanche noir blanche Traitement de la surface/ Couvercle / 8/32 / 8/32 / 8/32 / 8/32 / 8/

17 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR 384 Puits en Polystyrène pour Culture Les microplaques 384 puits pour culture cellulaire traitées physiquement afin d améliorer l adhésion cellulaire sont disponibles dans les versions suivantes: Transparentes, s et blanches Blanches ou s à fond ( ) Format 384 puits faible volume, Small Volume TM HiBase et LoBase Code à barres sur demande ( p. 14 I 4) Puits en Polystyrène pour Culture / blanche / 384 Puits p. 2 I 13 Couvercles et p. 12 I Etiquetage Code à Barres p. 14 I 4 Propriétés: Couvercles permettant une ventilation avec un faible taux d évaporation Très haute transparence des microplaques permettant une observation au microscope Empilables Repérage alphanumérique des puits Profil de puits Fond Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] blanc blanche blanc blanche noir noir Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface Couvercle /40 8/32 /40 8/32 /40 8/

18 Produits pour Culture CELLSTAR Microplaque 384 Puits en Polystyrène pour Culture, blanche / 2 HTS 384 Puits p. 2 I 14 Couvercles et p. 12 I 2 Etiquetage Code à Barres p. 14 I Profil de puits Fond Couleur blanche blanche Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface Couvercle /40 8/32 /40 8/32 20/ Puits Small Volume TM HiBase / LoBase pour Culture blanche / blanche / 384 Puits p. 2 I Profil de puits Small Volume TM Small Volume TM Small Volume TM Small Volume TM Small Volume TM Small Volume TM Fond blanc noir blanc noir Couleur blanche blanche blanche Surface de développement/puits [mm 2 ] 2,7 2,7 2,7 2,7 2,7 2,7 Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface Couvercle 8/32 8/32 /80 15/60 /80 /80 Géométrie de la plaque HiBase HiBase LoBase LoBase LoBase LoBase Nouveau Nouveau 1 17

19 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR 1536 Puits pour Culture Les microplaques 1536 puits pour culture cellulaire traitées physiquement afin d améliorer l adhésion cellulaire sont disponibles dans les versions suivantes: Transparentes, s et blanches Blanches ou s à fond ( ) Deux versions LoBase et HiBase ( p. 2 I 20) Code à barres sur demande ( p. 14 I 4) 1536 Puits pour Culture HiBase 1536 Puits p. 2 I 20 Couvercles et p. 12 I 2 Etiquetage Code à Barres p. 14 I Profil de puits Fond Couleur Surface de développement/puits [mm 2 ] 2,3 blanc blanche 2,3 blanc blanche 2,3 noir 2,3 noir 2,3 Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface Couvercle Géométrie de la plaque 1/32 HiBase 15/60 HiBase /40 HiBase 15/60 HiBase /40 HiBase Profil de puits Fond Couleur blanche Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] Traitement de la surface 2,3 3 2,3 3 Couvercle Géométrie de la plaque 15/60 HiBase 15/60 HiBase 1 18

20 Produits pour Culture CELLSTAR Puits pour Culture LoBase 2 HTS 1536 Puits p. 2 I 21 Couvercles et p. 12 I 2 Etiquetage Code à Barres p. 14 I 4 Profil de puits Fond Couleur blanche Surface de développement/puits [mm 2 ] Volume de travail/puits [µl] 2,3 3 2,3 3 Traitement de la surface Couvercle 15/60 15/60 Géometrie de la plaque LoBase LoBase 1 19

21 2 HTS Microplaque SCREENSTAR 1536 puits L importance croissante du criblage haut débit HCS permettant l analyse microscopique des cellules, leur croissance et leur signal lors de la mise au point de medicaments a généré un nouveau besoin pour des microplaques spécifiques disposant de caractéristiques optiques de haute qualité. Afin de satisfaire la demande des laboratoires de recherche dans ce domaine, Greiner BioOne a développé les microplaques SCREENSTAR 1536 puits particulièrement adaptées à un usage en microscopie avancée pour la recherche de médicaments. Caractéristiques: Film cyclooléfine 190 µm en fond permettant une résolution optimale même en fort grossissement Film encastré pour un meilleur accès des lentilles à fort grossissement (Fig. 1) Faible bruit de fond notamment en UV bas Surface lisse sans codage alphanumérique pour un montage facile du couvercle ,7 Figure 1: Profil de puits: microplaque 1536 puits SCREENSTAR Volume Total: 17,8 µl Volume de travail: 3 15 µl Surface de croissance: 2,1 mm2 Epaisseur du film de fond: 190 µm Distance fond intérieur du puits à bord de microplaque: 0,7 mm Distance fond extérieur du puits à bord de microplaque: 0,51 mm Microplaque 1536 puits SCREENSTAR Version non stérile, non traitée (réf ) disponible sur demande 1536 puits p. 1 l 18 et 2 l 20 SensoPlateTM 1536 puits p. 2 l 35 Etiquetage Code à Barres p. 14 l 4 Nouveau Le traitement culture cellulaire assure une excellente fixation et croissance des cellules La production en conditions apparentées salle blanche assure une haute qualité optique et un risque minimal de contamination par poussière ou particule Emballage innovant permettant une meilleure protection des microplaques et du fond Applications: Microscopie automatisée pour le criblage HCS Mesures de fluorescence sur lecteurs microplaque en criblage HTS Toutes applications en microscopie: fluorescence, fluorescence confocale, haute densité Produits pour Culture Format puits 1536 Well Profil de puits Fond CO film Couleur Surface de croissance/puits [mm ] 2,1 Volume de travail/puits [µl] 3 15 Traitement de la surface Stérile Couvercle 17/68

22 Produits pour Culture CELLSTAR Tubes CELLSTAR pour Culture Tubes en PS pour Culture 2 HTS 191 1XX Tubes p. 5 I 2 Fabriqués à partir de polystyrène de haute qualité Traitement physique de surface pour améliorer l'adhésion cellulaire Disponibles avec bouchon vissant, bouchon bayonnette ou ventilé deux positions 120 1XX ø [mm] x hauteur [mm] 17 x 0 16,8 x 0 18 x x 95 12,4 x 75 12,4 x 75 Volume [ml] Traitement de la surface ,5 4,5 Jupe Bouchon vissant Bouchon bayonnette* ) Bouchon ventilé 2 positions * ) Ouverture 1/3 de tour 5/00 5/00 1/750 0/1200 1/00 25/

23 2 HTS Produits pour Culture CELLSTAR CELLSTAR CELLreactor Tube Polypropylène 50 ml à bouchon filtrant Le nouveau tube CELLSTAR CELLreactor peut être utilisé comme un bioréacteur miniaturisé pour la culture de cellules en suspension ou sphéroides cellulaires très pratique pour des préparations petites echelles tout en maximisant le nombre d expérimentations en parallèle. Chaque bouchon présente 8 perforations au sein d une membrane filtre certifiée USP Class VI de porosité 0,2 µm afin de garantir une stérilité maximale. Si l aération doit être réduite, les ouvertures peuvent être obturées. L agitation des milieux peut être effectuée avec des équipements de laboratoire standard, minimisant la formation de mousse. Comparé à la culture cellulaire sur flacon ou d autres systèmes, aucun transfert pour la récolte cellulaire n est requis. Le tube est compatible avec un rotor standard 50 ml de centrifugeuse. Outre les applications en culture cellulaire, le tube CELLSTAR CELLreactor peut également être utilisé pour la culture de bactéries aérobies, levure ou autre microorganisme en culture agitée ainsi que le stockage de composés et liquides nécessitant un échange gazeux. Le tube CELLSTAR polypropylène à bouchon standard ( p. 5 l 7) peut être utilisé pour la culture en anaérobie. CELLreactor CELLSTAR tube polypropylène à bouchon standard p. 5 l 7 Nouveau Avantages : Permet un grand nombre d expérimentations en parallèle Volume de travail variable de 1 à 35 ml maximale et excellent échange gazeux Tube conique et récolte interne de cellule Applications: Bioréacteur pour cellules en suspension ou sphéroides cellulaires Culture de bactéries aerobies, levure et microorganismes Stockage de composés et liquides nécessitant un échange gazeux Description Fond CELLreactor TM 50 ml tube conique avec bouchon à fi ltre conique ø [mm] x Hauteur [mm] 30 x 115 Volume [ml] 50 Stérile Couleur Bouchon filtrant Graduation Zone de texte bleu bleue blanche 20/

24 CELLMASTER TM Rollers pour Culture CELLMASTER Rollers pour Culture 2 HTS La culture de cellules en masse est devenue très importante ces dernières années imposant le développement de supports de haute qualité. Cela concerne notamment les rollers pour la production de vaccins ou de protéines recombinantes utilisées dans les approches thérapeutiques. Les rollers CELLMASTER TM sont en polystyrène (PS) et polyéthylène téréphthalate (PET). Ces matériaux, ainsi que ceux utilisés pour les bouchons à vis (HDPE) et les membranes hydrophobes (PET/PTFE) des filtres des bouchons (Fig. 1), sont conformes aux standards de la pharmacopée américaine. Le produit fini est certifié USP Class VI. Tous les rollers sont stérilisés par irradiation selon une méthode validée. Le test pyrogène est réalisé en utilisant le dosage cinétique turbidimétrique «Amoebocyte Lysat Limulus» (LAL) conformément aux directives FDA (12 / 8) avec un niveau de tolérance de 0,03 EU/ml. Les rollers sont fabriqués selon une méthode de moulage en deux phases, il n'existe donc pas de soudure. Ceci élimine tout risque de fuite de liquide du fait d une soudure défectueuse. En fonction de vos conditions de culture, vous pouvez choisir entre des rollers en PS ou en PET Tous les rollers possèdent de hautes qualités optiques et sont très résistants Les rollers sont disponibles en différentes dimensions (116 x 276 mm, 122 x 271 mm, 122 x 275 mm, 122 x 500 mm) avec ou sans stries radiales qui augmentent la surface de culture (850 cm 2, 1700 cm 2, 2125 cm 2, 4250 cm 2 ) Technologie de moulage sans soudures Exempts d'endotoxines détectables, limite de tolérance 0,03 EU/ml Avec graduations entre 150 ml et 2000 ml Numéro de lot et date d expiration garantissant la traçabilité de lot pour les rollers en PS Certification USP Class VI Bouchon vissant de sécurité pour assurer une culture en vase clos et sans contamination Bouchon vissant à pas de vis court pour une ouverture et une fermeture rapides des rollers en PS Figure 1: Bouchon filtrant à vis! Nomenclature CELLMASTER TM Rollers: La gamme roller comprend deux longueurs, courte et longue. Les dimensions sont marquées X (courte) et XL (longue) Chaque roller est disponible en surface lisse ou plissée. Les stries augmentent la surface de culture sans modifier la hauteur du roller Le coefficient précédant X ou XL indique le facteur multiplicatif pour passer de la version lisse (850 cm 2 ) à la version striée La version courte avec une surface striée a une surface 2 fois ou 2,5 fois plus grande (2 X ou 2,5 X) Les versions longues avec une surface striée ont une surface 5 fois plus importante (5 XL) en comparaison de la version courte lisse (1 X) 1 23

25 2 HTS CELLMASTER TM Rollers pour Culture Rollers en Polystyrène Rollers en Polystyrène X X Grande stabilité et clarté optique Traitement physique de surface pour améliorer l adhésion cellulaire Ouverture 2 /3 de tour Filetage pour une ouverture rapide et facile. Les bouchons sont crantés pour une meilleure prise en main Numéro de lot et date de péremption sur chaque roller Stériles, bouchons disponibles en emballage individuel: Bouchon vissant standard (Réf ) Bouchon vissant avec filtre (Réf ) Nomenclature p. 1 I 23 Emballage: vrac sous double ensachage (adapté à l'utilisation en salle blanche) disponible sur demande Description 1 X 1 X 2 X 2 X 2,5 X 2,5 X Surface ø [mm] x hauteur [mm] Surface de développement [cm 2 ] lisse 122 x lisse 122 x plissée 122 x plissée 122 x plissée 122 x plissée 122 x Volume max. [ml] Traitement de la surface Bouchon vissant standard / / /24 24 Description Surface XL lisse XL lisse XL plissée XL plissée ø [mm] x hauteur [mm] Surface de développement [cm 2 ] Volume max. [ml] Traitement de la surface 122 x x x x Bouchon vissant standard 12 1/ /

26 CELLMASTER TM Rollers pour Culture 680 0XX Rollers en Polystyrène Bouchon à Filtre Grande stabilité et clarté optique Traitement physique de surface pour améliorer l adhésion cellulaire Ouverture 2 /3 de tour Filetage pour une ouverture rapide et facile Numéro de lot et date de péremption sur chaque roller Stériles, bouchons disponibles en emballage individuel: Bouchon vissant standard (Réf ) Bouchon vissant avec filtre (Réf ) Nomenclature p. 1 I 23 Emballage: vrac sous double ensachage (adapté à l'utilisation en salle blanche) disponible sur demande 2 HTS Description 1 X 1 X 1 XL 1 XL Col court court long long Surface lisse lisse lisse lisse ø [mm] x hauteur [mm] 122 x x x x 500 Surface de développement [cm 2 ] Volume max. [ml] Traitement de la surface Bouchon vissant à filtre 2/ / Description 2 X 2,5 X 5 XL Col court court long Surface plissée plissée plissée ø [mm] x hauteur [mm] 122 x x x 500 Surface de développement [cm 2 ] Volume max. [ml] Traitement de la surface Bouchon vissant à filtre 2/24 2/24 1/

27 2 HTS CELLMASTER TM Rollers pour Culture Rollers en Polyéthylène Téréphthalate (PET) Rollers en Polyéthylène Téréphthalate (PET) Le PET offre une très grande résistance aux chocs et imperméabilité aux gaz Surface pour adhésion cellulaire importante Tous les rollers PET/PETG ont un bouchon vissant standard Le PETG est un PET glycosylé qui permet d augmenter la stabilité tout en conservant la transparence Trés résistant Nomenclature p. 1 I * ) Description 1 X 1 X 1 X 2 X 2,5 X Matériau Col Surface PET court lisse PET court lisse PET court lisse PETG court plissée PETG court plissée ø [mm] x hauteur [mm] Surface de développement [cm 2 ] Volume max. [ml] 116 x x x x x / /18 * ) graduation 20 5/20 Description Matériau XL PETG XL PETG Col Surface ø [mm] x hauteur [mm] Surface de développement [cm 2 ] long lisse 122 x long plissée 122 x Volume max. [ml]

28 Support de Culture Advanced TC Support de Culture Advanced TC 2 HTS Pour le développement de cellules spécifiques comme les cellules primaires ou délicates ainsi que pour les cellules placées sous contrainte (sans sérum ou avec sérum limité), Greiner BioOne propose la nouvelle surface Advanced TC. Cette innovation modifie la surface de culture afin d optimiser les caractéristiques et fonctions cellulaires. Le renforcement de l adhérence (Fig.1) et un taux de croissance plus élevé (Fig. 2) améliorent et accélèrent la prolifération des cellules. En complément, la surface Advanced TC facilite une adhérence cellulaire uniforme et homogène, augmentant le rendement et réduisant l élimination de cellules, par exemple au cours des étapes automatisées de lavage. Surface Traitée Culture Après 24 h a) b) Advanced TC Surface Après 24 h c) d) Après 48 h Après 48 h L impact positif sur la morphologie des cellules est particulièrement manifeste au cours de la culture de cellules délicates (Fig. 3), de la privation de sérum ou après un stress cellulaire induit par transfection ou transduction. De plus, les cellules cultivées sur surface Advanced TC montrent une activité transgénique plus importante après transfert/insertion de gène (Fig. 4). Le process utilisé en production modifie chimiquement la surface du polymère et assure une qualité consistante et reproductible. Le transport et le stockage pouvant être réalisés à température ambiante, l utilisation est sans contrainte. Applications: Culture de cellules spécifiques et délicates Utilisation en milieu à sérum limité ou sans sérum Différentiation des cellules semiadhérentes Transfection Transduction Automatisation/Screening haut débit Caractéristiques: Augmentation de l adhérence des cellules Fixation uniforme et homogène des cellules Croissance homogène des cellules Morphologie similaire aux conditions in vivo Accroissement du rendement Conditions de culture optimales pour cellules sensibles Permet l utilisation de quantités réduites de sérum ou sans sérum Réduit l élimination de cellules liées aux étapes (automatisées) de lavage Consistance du test améliorée Stockage à température ambiante Péremption: 2 ans a) TC b) Advanced TC Figure 1: Les cellules HEK 293 ont été ensemencées à raison de cellules / puits dans une microplaque 96 puits et cultivées dans un milieu sans sérum à 37 C et 5% de CO 2. Après 48 heures les cellules sont semiadhérentes sur la surface de culture standard (a), tandis que sur surface Advanced TC (b) les cellules HEK 293 présentent une adhérence avancée et conservent leur morphologie. Figure 2: Les cellules SKNMC ont été ensemencées à raison de cellules / puits sur des microplaques 96 puits avec traitement de surface standard (a, b) et Advanced TC (c, d) puis cultivées à 37 C et 5 % de CO 2, durant respectivement 24 et 48 heures. Les cellules ont été colorées afin d identifier les cellules vivantes. En raison de l amélioration de la prolifération, des densités cellulaires plus élevées sont observées sur la surface Advanced TC dans les deux cas. a) TC b) Advanced TC Figure 3: Des cellules HepG2 ont été ensemencées à raison de cellules / puits sur microplaques de 96 puits avec traitement de surface standard (a) et Advanced TC (b), cultivées dans des conditions identiques pendant 48 heures et colorées. On constate que seules les cellules cultivées sur la surface Advanced TC ont une morphologie similaire invivo. Figure 4: Des cellules CHO et HEK 293 ont été ensemencées dans une microplaque 96 puits à raison de cellules / puits et cellules / puits respectivement, cultivées à 37 C et 5 % de CO 2 durant 24 heures. Elles ont ensuite été transfectées avec le vecteur pcmvgluc. Les deux lignées cellulaires présentent une activité de la luciférase augmentée sur surface Advanced TC. Pour plus d informations sur Advanced TC TM Forum No. 12: Advanced TC TM : An innovative surface improving cellular assays (F071 4) Application Report Advanced TC TM for improving the cultivation / differentiation of embryonic stem cells (F ) 1 27

29 Support de Culture Advanced TC 2 HTS Advanced TC TM Flacons de Culture Standard Flacons de Culture à Bouchon ventilé Flacons de Culture Standard p. 1 l 4 Flacons de Culture à Bouchon ventilé p. 1 l 5 Flacons de Culture Standard Profil du Flacon bas haut Surface de croissance [cm²] Volume total [ml] Volume de travail [ml] Advanced TC TM Bouchon Standard bleu /200 bleu 5/120 bleu 5/50 bleu 4/40 Flacon de Culture à Bouchons Ventilés Profil du flacon Surface de croissance [cm²] Volume total [ml] bas haut AutoFlask TM 83,6 1 Volume de travail [ml] Advanced TC TM Bouchon vissant ventilé bleu bleu bleu bleu Code couleur Code à Barres /200 5/120 5/50 4/40 bleu /0 1 28

30 Support de Culture Advanced TC Advanced TC TM Boîtes de Culture Plaques Multi Puits de Culture 2 HTS Boîtes de Culture p. 1 l 8 Advanced TC TM CELLview Boîte de Culture à Fond Verre p. 1 l Plaques Multi Puits de Culture p. 1 l 11 ø [mm] x hauteur [mm] x x x x 20 Surface de croissance [cm²] 8, Volume total [ml] Volume de travail [ml] Ergots Advanced TC TM /740 /600 15/360 5/120 Format puits puits puits puits Surface de croissance/puits [cm²] Volume de travail par puits [ml] Advanced TC TM 9, , ,9 0,5 1,5 1,0 0,5 1 Couvercle * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 * ) 1/0 * ) avec anneaux de condensation 1 29

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