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2 Système de stockage CryoPure CryoPure Qualité certifiée Les tubes CryoPure sont soumis à des tests rigoureux qui permettent de s assurer de l absence de tout contaminant potentiel qui pourrait endommager les matériaux et composants cellulaires pendant la période de conservation vitale 0énic floli, 0f 4.jfOW With Us) :1 1ftagenic Ayant satisfait avec succès aux critères rigoureux des tests, les tubes CryoPure sont certifiés comme suit V Non-pyrogénique V Non-cytotoxique V Marquage CE / IVD V Non-mutagénique V Stérile Conçus pour être polyvalents et pratiques Le système de stockage CryoPure est disponible dans une gamme de volumes allant de 1,2 ml à 5 ml pour couvrir les volumes couramment utilisés. Les tubes CryoPure autostables répondent aux tailles standards des cryoboîtes et des supports aluminium. Un fond à ailettes permet la manipulation d une seule main dans le CryoRack 40 et la plupart des portoirs pour tubes cryogéniques. Les bouchons à vis QuickSeal, spéciale ment étudiés, permettent une ouverture sûre et rapide en un seul tour ainsi qu une fermeture en position finale définie, ce qui élimine tout risque de trop serrer le bouchon. Le fond interne du tube CryoPure est conçu pour permettre la récupération aisée de la totalité de l échantillon. 111 SARSTEDT

3 Améliorer votre Cryoconservatïon Exceptionnelle souplesse d emploi Disponibles dans une gamme de volumes allant de 1,2 à 5,0 ml, les tubes CryoPure hautement transparents sont conçus avec un bouchon à vis de sécurité, à filetage externe, pour diminuer les risques de contamination. Pour un stockage plus compact dans nos cryo boîtes de format 10 xl 0, un tube CryoPure de 2,0 ml avec un bouchon à vis à filetage interne et un joint torique en silicone, est disponible. Le profil interne et optimisé du fond du tube permet une récupération aisée et totale de l échantillon. Design ergonomique Les bouchons à vis QuickSeal permettent une ouverture et une fermeture sûres et rapides en un seul tour. La conception des tubes avec des ailettes permet leur manipulation aisée d une seule main dans le CryoRack 40 et la plupart des autres portoirs. Options pour codage couleur 5 couleurs de bouchons et 5 couleurs de pastilles d identification permettent jusqu à 25 options différentes pour le codage couleur. i I SARSTEDT

4 2, Références de commande Tubes CryoPure de 1,2 ml avec filetage externe Blanc 1,0 ml 50 I Sac / Boîte / Carton Rouge 1,0 ml 50 I Sac / Boîte / Carton Jaune 1,0 ml 50 I Sac / Boîte / Carton Vert 1,0 ml 50 I Sac / Boîte / Carton Violet 1,0 ml 50 / Sac / Boîte / Carton mixte couleurs... 1,0 ml 50/ Sac / Boîte / Carton Tubes CryoPure de 2,0 ml avec filetage externe Blanc 1,8 ml 50 / Sac / Boîte / Carton Rouge 1,8 ml 50 / Sac / Boîte I Carton Jaune 1,8 ml 50 / Sac / Boîte I Carton Vert 1,8 ml 50 I Sac / Boîte I Carton Violet 1,8 ml 50 / Sac / Boîte / Carton mixte couleurs... 1,8 ml 50 / Sac / Boîte / Carton Tubes CryoPure de 5,0 ml avec filetage externe Blanc 4,5 ml 25 / Sac / Boîte Rouge 4,5 ml 25 / Sac / Boîte Jaune 4,5 ml 25/ Sac / Boîte Vert 4,5 ml 25 I Sac / Boîte Violet 4,5 ml 25 / Sac / Boîte mixte couleurs... 4,5 ml 25 / Sac I Boîte / Carton 1000 I Carton 1000/ Carton 1000 I Carton 1000 / Carton / Carton Tubes CryoPure de 2,0 ml avec filetage interne et joint torique en silicone Blanc 1,6 ml 50 / Sac / Boîte / Carton Rouge 1,6 ml 50 / Sac / Boîte I Carton Jaune 1,6 ml 50 / Sac - / Boîte / Carton Vert 1,6 ml 50 I Sac / Boîte I Carton Violet 1,6 ml 50 / Sac / Boîte / Carton mixte couleurs... 1,6 ml 50 / Sac - / Boîte / Carton Inserts de couleur pour tubes CryoPure Référence Couleur Conditionnement Blanc 100 / Sac / Carton Rouge 100 / Sac / Carton Jaune 100 / Sac I Carton Vert 100 / Sac I Carton Violet 100 / Sac I Carton mixte couleurs / Sac - 5 couleurs / 2500 / Carton Gamme de Cryo boîtes pour stockage à basse température Compatibles avec les tubes 1,2 - ml 3,5-5,0 ml Format 5x5 9x9 10x10 9x9 Capacité de stockage Taille des boîtes (LxlxH)enmm 75x75x x 132x x 132x53 132x132x95 Filetage interne et externe Filetage interne Filetage interne et externe Convient pour tubes avec r r Boîtes : Référence Rouge Jaune Fluo Bleue Conditionnement 5 I Sachet 5 / Sachet 5 I Sachet 5 / Sachet 20 / Carton 20 I Carton 20 / Carton 20 / Carton i I SARSTEDT

5 Efficace et fiable Cryo boîtes pour stockage à basse température Boîtes de stockage en polycarbonate résistant, de haute qualité pour stockage en congélation jusqu à -196 C Codage numérique de chaque position de tube pour une identification rapide des échantillons Couvercle transparent et base colorée avec de larges ouvertures pour une ventilation rapide Gamme complète de boîtes pour recevoir des cryo tubes standards de 1,2 /2,0/3,5 et 5,0 ml Boîtes à compartiments de formats multiples (5 x 5, 9 x 9, 10 x 10) pour de larges possibilités de stockage Autoclavable à 121 C, 20 min. Codage numérique CryoRack 40 / Portoir de travail Peut recevoir 40 tubes (4 rangées de 10 positions) Système autobloquant avec le fond des tubes qui permet une manipulation facile d une seule main Code couleur alphanumérique des échantillons pour une identification facile Pastilles caoutchouc anti dérapantes Autoclavable, 121 C, 20 min. Référence de commande CryoRack 40 Référence Conditionnement lisac 10/Carton

6 Protocole standard de décongélation Retirer rapidement les tubes CryoPure du container à azote liquide et les placer dans un bain marie à 37 C avec un couvercle. Après décongelation, désinfecter rapidement les tubes avec de l alcool à 70 %. Sécher et transférer la suspension cellulaire dans un tube à contrifuger de 15 ml (par ex. référence N ). Ajouter un milieu de culture et centrifuger les cellules (5 min., 350 x g, à tempéra ture ambiante). Jeter le surnageant et remettre en suspension à nouveau les cellules dans un milieu de culture frais approprié. Transférer dans un flacon de culture cellulaire et incuber. SARSTEDT France Route de Gray Instructions de sécurité et Guide d emploi Attention Pour des raisons de sécurité, les tubes CryoPure doivent toujours être stockés dans la phase gazeuse de l azote liquide. Durant le processus de réfrigération, un vide se crée à l intérieur des tubes. Le volume du vide dépend du volume de remplissage (volume de congélation). Lorsque les tubes CryoPure sont stockés dans de l azote liquide, celui-ci peut pénétrer dans les tubes et remplir le vide créé à l intérieur. Pendant la sortie et/ou la décongélation des tubes, l azote liquide revient en phase gazeuse et provoque l apparition d une pression interne. Par conséquence, du matériel infectieux peut être libéré ou les tubes peuvent exploser. De l azote contaminé pénétrant dans les tubes peut aussi endommager les composants cellulaires de l échantillon. Toujours veiller à respecter les consignes de sécurité adéquates lors de la manipulation des tubes CryoPure: Stocker les tubes en phase gazeuse uniquement. Remplir les tubes jusqu à la marque de remplissage. Fermer le bouchon à vis à la force de la main. Eviter de trop serrer et ne pas utiliser d outil. Porter des vêtements de protection, une protection pour le visage, des lunettes et des gants. Mettre les tubes dans un contenant (par ex. au bain marie) avec un couvercle pendant le processus de décongélation. Veuillez aussi vous conformer aux consignes de sécurité en vigueur dans votre laboratoire! Protocole standard pour la congélation de cellules de mammifères Rincer les cellules avec du PBS. Enlever les cellules selon la méthode appropriée dépendant du type de cellule (par ex. traitement de la couche cellulaire avec une solution à base dedta, de trypsine ou trypsine - EDTA) Arrêter la réaction avec un milieu de culture cellulaire contenant du sérum. Compter les cellules au moyen d une cellule à numération de Neubauer. Centrifuger les cellules (5 mm, 350 x g, à température ambiante), jeter le surnageant. Suspendre à nouveau le culot cellulaire dans un milieu de culture contenant du sérum afin d obtenir une concentration cellulaire d environ i0 cellules/ml. Ajouter 1 volume de milieu réfrigéré doublement concentré (par ex. 50% de milieu 30% de FCS, 20% de DMSO). Le nombre de cellules doit être au moins d environ 5 x 106 cellules/ml. Z.l. des Plantes Marnay Tél.: Fax: info.fr@sarstedt.com SARSTEDT Remplir les tubes CryoPure jusqu à la marque de remplissage Congeler les échantillons à -80 C dans un contenant isolant qui assure un cycle de refroidissement de 1 C/min. Les cellules doivent être conservées à -80 C pendant au moins 6 heures. Selon le type cellulaire, les cellules peuvent aussi être viables plusieurs jours à -80 C. Transférer les tubes dans un réservoir d azote liquide.