1) Informations Techniques. - a) Comment ça marche? - b) Purification - c) Contrôle Qualité. 2) Synthèse Standard
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- Léonard Ducharme
- il y a 8 ans
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1 1) Informations Techniques - a) Comment ça marche? - b) Purification - c) Contrôle Qualité 2) Synthèse Standard - a) Peptides Standards - b) Peptides Modifiés - c) Envois et Délais de Livraison - d) Comment commander? 3) Réactifs de Synthèse de Peptides et Produits Dérivés Informations Techniques GeneCust utilise la synthèse en phase solide selon la chimie Fmoc et peut synthétiser plusieurs centaines de peptides simultanément à l'aide de synthétiseurs automatiques. Une gamme de différents niveaux de pureté, de quantités et de modifications est disponible. Comment ça marche? Les peptides sont synthétisés chimiquement selon la stratégie Fmoc. La méthode Fmoc est basée sur l'utilisation de groupements protecteurs orthogonaux, tels que le groupement base-labile N-Fmoc pour protéger les groupements Amine, des groupements protecteurs des chaînes latérales ou des agents de ligation à la résine. Cycle de Synthèse Durant la synthèse en phase solide, l'acide aminé en C-terminal du peptide d'intérêt doit être lié 1 / 8
2 à un support insoluble via son groupement carboxyl. Puis, le groupement protecteur de la fonction amine est éliminé. Un excès du second acide aminé est introduit. Après le couplage, l'excès de réactif est éliminé par lavage et les groupements protecteurs sont éliminés de l'extrémité N-terminale du dipeptide, afin de permettre l'addition du troisième acide aminé. Ce processus est répété jusqu'à obtention de la séquence désirée. Vous trouverez ci-dessous le détail des 4 étapes du processus : - - Etape 1 : Chargement de la résine : La première étape consiste à lier le premier acide aminé (protégé en N-terminal) au support solide via son extrémité C-terminale par une liaison ester ou amide selon la nature du groupement C-terminal (acide ou amide). Après le couplage, les groupements hydroxyl de la résine n'ayant pas réagit, sont protégés par de l'anhydride benzoïque ou de l'anhydride acétique. - - Etape 2 : Libération de la fonction amine (Fmoc deprotection) : Le groupement protecteur Fmoc est éliminé à l'aide d'un court traitement avec 20% de pipéridine dans du DMF (diméthylformamide). La réaction est complète en 10 min. - - Etape 3 : Couplage (Coupling reaction) : Un large excès d'acides aminés est utilisé (environ 2-10 fois la capacité de la résine). Les extrémités de ces acides aminés sont activées via leurs groupements carboxy pour la formation de liaisons amide ou ester. Souvent, ceci est rendu possible par l'utilisation de réactifs de couplage (PyBOP, TBTU or HBTU). L'excès d'acides aminés implique un excès de réactifs (généralement mm) pour assurer une diffusion efficace. Le temps nécessaire à une complète acylation dépend de la nature du résidu activé, de la séquence peptidique liée à la résine et de la concentration en réactifs. - - Etape 4 : Clivage Final (Final cleavage) : De l'acide trifluoroacétique (TFA) concentré est largement utilisé pour le clivage du peptide de la résine et pour l'élimination des groupements protecteurs des chaînes latérales. 2 / 8
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4 Purification Nous vous proposons des peptides de haute qualité fait par des experts et livrés avec tous leurs documents : * Chromatogramme HPLC * Spectre de masse * Rapport de Synthèse Une large gamme de degrés de pureté est disponible : - - Crude peptide - - Immunograde peptide (pureté >75%): le peptide crude est précipité et lavé plusieurs fois pour une extraction complète des impuretés organiques et pour éliminer le maximum de produits secondaires. Une étape d'h.p.l.c. standard est également réalisée. Ce niveau de pureté est généralement suffisant pour produire ou tester des anticorps. - - Peptides purifiés (pureté >85%): des purifications supplémentaires par H.P.L.C. permettent l'élimination des peptides resultant de réactions de couplage incomplètes, peptides pour lesquels il manque un ou plusieurs acides aminés. Les degrés > à 85 % peuvent être utilisés pour la production d'antisérum, la titration d'anticorps par ELISA et pour la production d'anticorps monoclonaux. - - Peptides hautement purifiés (pureté >95%): ce degré de pureté est nécessaire pour la plupart des études biologiques ou enzymatiques. - - Un degrés de pureté > 98% peut vous être proposé sur simple demande. Contrôle Qualité 4 / 8
5 Le spectromètre de masse permet de vérifier la composition du peptide et l'hplc en phase inverse assure la pureté du peptide. Chaque produit envoyé, l'est avec un Certificat d'analyse comprenant des informations sur le numéro de lot, le produit lui-même, les données d'analyse. Nous accordons une importance capitale à la qualité de nos produits. Nous cherchons sans cesse à améliorer notre système de qualité. Dans ce but, les suggestions de nos clients sont toujours les bienvenues. Synthèse de Peptides Standards Peptides Standards GeneCust est expérimenté pour la synthèse de peptides de haute qualité standards ou incluant différentes modifications. Nous pouvons vous proposer des peptides : * des plus simples aux plus complexes * linéaires ou cycliques * des longues séquences : > 140 mers * de la plus petite (mgs) à la plus grande échelle (kgs) * Différents degrés de pureté (désalé, >75%, >85%, >90%, >95%, >98% et même >99%) Vous trouverez notre liste de prix pour la synthèse de peptides dans la rubrique "liste de prix". 5 / 8
6 Peptides Modifiés GeneCust vous propose une large gamme de modifications (de la biotinylation à la phosphorylation, marquages au fluorochromes, et plus encore...). Toutes ces modifications sont présen dans la rubrique "liste de prix". S'il y a un marquage ou une modification que vous ne voyez pas dans notre liste, n'hésitez pas à nous contacter, nous serons peut être à même de vous la fournir. Envois et Délais de Livraison Les peptides sont envoyés sous forme lyophilisée dans un délai de 3 à 4 semaines. Les délais pour des commandes plus importantes ou pour des peptides modifiés sont susceptibles de prendre quelques jours de plus. N'hésitez pas à nous contacter pour plus d'informations sur les délais de livraisons. Frais de port via des transporteurs express : Pour l'europe : 35,00 Devis et Commandes Pour un devis gratuit, contactez nous via info@genecust.com ou par téléphone ( ) ou fax ( ). Pour passer commande, merci de télécharger et de compléter notre formulaire Excel et de l'envoyer à info@genecust.com. Note : Réactifs de Synthèse de Peptides et Produits Dérivés GeneCust vous propose une large gamme de produits chimiques et biochimiques, et 6 / 8
7 notamment des réactifs pour la synthèse de peptides et des produits dérivés : * Agents de couplage * Réactifs de marquage * Linkers pour synthèse en phase solide * N-Protecting Reagents * Unusual Amino Acids * Amino Acids Derivatives * Fmoc-Amino Acids (added 17 new products) * Z-Amino Acids * Amino Alcohols * N-Methyl amino acids * Fmoc-amino acids attached to Wang Resin 7 / 8
8 * Amino acids attached to 2-Chlorotrityl-Chloride-Resin * Résines Pour découvrir l'ensemble de nos produits, retrouvez notre catalogue dans la rubrique "liste de prix". 8 / 8
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