Contribution à la connaissance du lait de chamelle: Essai de caractérisation des protéines par éléctrophorèse sur gel de polyacrylamide ( PAGE ).

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1 Contribution à la connaissance du lait de chamelle: Essai de caractérisation des protéines par éléctrophorèse sur gel de polyacrylamide ( PAGE ). BADAOUI. 1, D SIBOUKEUR O. 1, MATI A. 2 1: Institut d Agronomie Saharienne. Centre Universitaire de Ouargla 2: Laboratoire de biochimie analytique et biotechnologie. Université de Tizi_Ouzou Introduction De part sa composition équilibrée en nutriments de base et sa richesse en vitamines et minéraux, le lait occupe une place stratégique dans l alimentation quotidienne de l homme. La consommation de ce produit noble, par les algériens a connu une évolution continue depuis l indépendance. La poussée démographique et l amélioration du niveau de vie des algériens en sont responsables. Face à l insuffisance de la production nationale, l état recourt chaque année à l importation de lait et dérivés pour satisfaire les besoins de la population. La moindre ressource en lait, celui de la chamelle en l occurrence, devrait par conséquent être prise en considération et contribuer à accroître la disponibilité de ce produit et ses dérivés sur le marché. Dans les régions sahariennes caractérisées par des conditions agro-climatiques défavorables,la présence du dromadaire reste capitale. Ce dernier a la capacité de transformer les maigres ressources alimentaires, souvent inexploitables par d autres espèces en produits nobles tels que la viande et le lait. Le lait camelin constitue depuis des temps immémoraux, le produit nourricier des populations du sud du pays, des nomades en particulier, qui le consomment à l état cru ou sous forme de produit fermenté. Ce produit semble en plus, présenter des vertus thérapeutiques au point où les hôpitaux israéliens le réservent aux prématurés sur lesquels il opère de véritables miracles ( LAZARD, 1995). Spécifiquement du terroir,,ll est appelé à se développer et à se heurter à des procédés technologiques visant une diversification de son utilisation. Afin d avoir une idée plus précise des particularités et des capacités de transformation de ce lait, nous nous sommes intéressés à l identification et à la caractérisation de ses différentes protéines par des techniques éléctrophorétiques sur gel de polyacrylamide( PAGE native, PAGE urée et PAGE SDS). I_ Matériel et méthodes Le lait de chamelle ( Camelus dromedarius ), est un lait de mélange provenant de la région de HASSI MESSAOUD.Il est issu de la traite de 7 chamelles de rang de lactation différent appartenant à la population Saharaoui. Les échantillons de lait ont été lyophylisés au niveau du laboratoire de biochimie appliquée de l Université de Tizi-Ouzou. Le lait de vache lyophylisé, utilisé comme référence dans cette étude, ainsi que celui de chamelle de la région de Tamanrasset proviennent du laboratoire cité précedemment. 1-Isolement des proteines du lait Les protéines ont été isolées conformément au protocole réprésenté dans la figure 1 PAGE13 2- Conduite de l électrophorèse Les séparations éléctrophorétiques ont été réalisées en mini cuve Hoefer SE 200/ SE Electrophorèse en milieu non dissociant ( PAGE native ). Les étapes suivies pour la réalisation d une PAGE native sont indiquées dans la figure 2 PAGE18 402

2 2-2 Electrophorèse en milieu dissociant en présence d urée ( PAGE SDS ) Les étapes suivies pour la réalisation d une PAGE- SDS sont indiquées dans la figure 3 PAGE Electrophorèse en milieu dissociant en présence urée ( PAGE urée ) Les étapes suivies pour la réalisation d une PAGE- urée sont indiquées dans la figure 4 PAGE 20 II Résultats et discussion 1-Eléctrophorèse en milieu non dissociant ( PAGE native ). Ce type d électrophorèse est particulièrement adapté à la séparation des protéines du lactosérum.en l absence d agent dissociant tels que le SDS et l urée ou de réducteurs tel que le mercaptoéthanol, les caseines ne sont pas dissociées. Le diagramme éléctrophorétique obtenu est représenté dans la figure 5 PAGE 43 Le lactosérum du lait de chamelle montre 3 groupes de bandes principales B2: Immunoglobulines B3: Sérum albumine B5: - lactalbumine Celui du lait de vache en montre 4; alors que toutes les proteines sériques du lait bovin sont présentes, nous constatons l absence de la bande correspondant à la -lactoglobuline (B et variante A) dans le lait de chamelle ( Pistes P2 à P7 ). Ceci rapproche le lait de chamelle de celui de la femme dépouvu de -lactoglobuline, principal composant allergénique du lait chez le nourrisson; Les profils éléctrophorétiques revèlent la présence d une bande B3 pour les différents échantillons de lactosérum du lait de chamelle( pistes P2 à P9 ),alors qu elle est absente dans ceux du lait de vache Il s agit probablement d une proteine particulière au lait camelin. 2- Electrophorèse en milieu dissociant en présence d urée ( PAGE SDS ). En milieu dissociant, en présence de dodécyl-sulfate de sodium et du 2- mercapto-éthanol ( PAGE SDS ), les profils éléctrophorétiques des caseines montrent quelques différences assez notables entre les caseines des laits camelin et bovin d une part et d autre part entre les caseines du lait de chamelle originaires de Ouargla et Tamanrasset. Ainsi, aucune fraction caseique assimilable à la caseine n a pu être retrouvée dans le lait camelin à la différence du lait bovin et le lait en provenance de Tamanrasset se distingue par la présence d un variant génétique S2- Cn T. D autre-part, la caractérisation des proteines du lait camelin en PAGE SDS par l estimation de leur masse moléculaire indique des valeurs estimées )à , et Da pour la sérumalbumine, l lactalbumine et la nouvelle proteine lactosérique respectivement. Par ailleurs, les fractions caseiques du lait de chamelle sont caractérisées par des masses moléculaires égales Da pour S1- Cn, Da pour S2- Cn, Da pour - Cn et Da pour S2- Cn T. 2-3 Electrophorèse en milieu dissociant en présence urée ( PAGE urée ) Enfin, l électrophorèse en milieu dissociant en présence d urée ( PAGE urée ) a confirmé la séparation des fractions caseiques du lait camelin en 3 composants majeurs et selon leur mobilité éléctrophorétiques croissantes : - Cn, S2- Cn et S1- Cn respectivement et a confirmer l absence de la fraction caseique assimilable à la caseine dans le lait camelin. Conclusion L espèce cameline dont la particularité réside dans le fait qu elle résiste à nos conditions agroécologiques souvent défavorables pour d autres espèces, mérite une attention particulière, si l on veut réduire la dépendance alimentaire de notre pays et combler le déficit proteique de l alimentation. 403

3 Notre intêret pour le lait de cette espèce se justifie par le peu de travaux scientifiques consacrés de par le monde au lait camelin et par la particularité et l importance de ce produit noble pour la population du sud du pays. Nous nous sommes intéressé, entre autres, au proteines en réalisant une étude quantitative et une séparation par électrophorèse des différentes fractions. Les résultats obtenus ont permi de mettre en évidence la richesse proteique de ce lait prartiquement équivalente à celle du lait bovin. Le comportement éléctrophorétique a revelé des différences notables tant dans le nombre d entités proteiques que dans leurs niveaux de migration. 404

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