RIDASCREEN siga. Réf. G09035

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1 RIDASCREEN siga Réf. G09035 R-Biopharm AG, An der neuen Bergstraße 17, D Darmstadt, Allemagne Tél. : +49 (0) / Fax : +49 (0)

2 1. Application Pour usage diagnostique in vitro. RIDASCREEN siga est un test immunoenzymatique destiné à la détermination quantitative des IgA sécrétoires (IgAs) humaines dans des échantillons de selles. 2. Résumé et explication du test Les IgA constituent les immunoglobulines humaines les plus hétérogènes. Présentes dans les fluides corporels externes, elles constituent une importante barrière de défense contre les pathogènes. La concentration en IgAs dans les fèces permet de tirer des conclusions quant à l'état des défenses immunitaires de la muqueuse intestinale. Les IgA se présentent sous les formes monomérique (IgAm), polymérique (IgAp) et dimérique sécrétoire (IgAs). Les IgA sécrétoires (IgAs) se composent de deux molécules d'iga monomériques, d'une chaîne en J et d'un composant sécrétoire (SC). Le composant sécrétoire est un polypeptide ayant une masse moléculaire de 70 kda, qui est synthétisé par les cellules épithéliales des muqueuses des voies gastro-intestinales, respiratoires et urogénitales, ainsi que des glandes salivaires, lacrymales et mammaires. Les cellules plasmatiques présentes dans l'espace sous-endothélial des muqueuses sécrètent un complexe composé de deux molécules d'iga reliées entre elles par la protéine en J. Ce complexe se lie ensuite au composant sécrétoire, qui se trouve à la surface de la cellule épithéliale. Après s'être liées, les IgAs sont transportées de manière sélective dans la cellule épithéliale grâce aux récepteurs épithéliaux, puis excrétées à la surface des muqueuses par exocytose. Les IgA sécrétoires (IgAs) sont ainsi transportées en grandes quantités vers la surface des muqueuses intestinales, par exemple. Les IgA sécrétoires peuvent toutefois se trouver également dans d'autres sécrétions corporelles, notamment le lait maternel, la salive, les larmes, ainsi que le mucus nasal et trachéobronchique. La détermination des concentrations en IgAs dans les selles peut fournir des informations sur l'état fonctionnel du tissu lymphoïde associé au tube digestif (GALT), qui constitue le système immunitaire de l'intestin. Les IgAs constituent un indicateur des performances sécrétoires et du niveau de stimulation des cellules plasmatiques dans la sous-muqueuse intestinale. Une carence en IgAs est le signe d'une activité réduite des défenses immunitaires des muqueuses intestinale, tandis qu'une hausse du taux d'igas indique que l'activité du système immunitaire intestinal accrue. Compte-tenu des propriétés anti-inflammatoires puissantes des IgA, une augmentation des concentrations fécales en IgAs indique la présence de réactions inflammatoires locales dans la muqueuse intestinale. RIDASCREEN siga pour une détection rapide et fiable : RIDASCREEN siga

3 État fonctionnel des tissus lymphoïdes associés au tube digestif o Taux d'igas réduits : activité réduite des défenses immunitaires de la muqueuse o Taux d'igas accrus : activité accrue des défenses immunitaires de la muqueuse Preuve de dysfonctionnement de la barrière immunologique de la muqueuse intestinale (sensibilité accrue aux infections, allergies) Inflammation locale de la muqueuse intestinale Maladies auto-immunes 3. Principe du test Le test RIDASCREEN siga a recours à des anticorps spécifiques dans le cadre d'une méthode de type sandwich. Des anticorps polyclonaux dirigés contre les épitopes des IgAs humaines sont appliqués à la surface du puits de la microplaque. Une suspension de l'échantillon de selles à tester est pipetée dans un puits de la microplaque, puis incubée. Une seconde phase d'incubation avec un anticorps monoclonal conjugué à de la peroxydase de raifort suit l'étape de lavage. En présence d'igas, un complexe en sandwich se forme à partir d'anticorps immobilisés, de l'antigène IgAs et d'anticorps conjugués. Les anticorps marqués à l'enzyme non liés sont éliminés au cours de l'étape de lavage suivante. Si le test est positif, l'enzyme liée change de couleur après l'ajout du substrat : précédemment incolore dans les puits de la microplaque, elle devient bleue. Lors de l'ajout du réactif d'arrêt, la couleur passe du bleu au jaune. L'absorbance est proportionnelle à la concentration en IgAs dans l'échantillon. 4. Réactifs fournis Une trousse suffit pour 96 déterminations. Plate 96 dét. Microplaque, 12 barrettes à micropuits (sécables) sur le support ; revêtue d'anticorps polyclonaux (lapin) dirigés contre les IgAs humaines Extract 100 ml Tampon d'extraction et de dilution (10x) ; pour l'extraction et la première dilution des échantillons de selles ; solution de NaCl tamponnée au phosphate ; contient 0,1 % de Tween et 0,1 % de NaN 3 Diluent ml Tampon de dilution d'échantillon ; solution de NaCl tamponnée à la protéine ; contient 0,1 % de NaN 3 ; prêt à l'emploi ; rouge Wash 100 ml Tampon de lavage (concentré 10 fois) ; solution de NaCl tamponnée au phosphate ; contient 0,1 % de thimérosal et 0,1 % de détergent RIDASCREEN siga

4 Calibrator couvercle transparent High control + 1 ml Étalon (pour l'étalonnage standard) ; contient 0,1 % de NaN 3 ; prêt à l'emploi 1 ml Contrôle élevé ; contient 0,1 % de NaN 3 ; prêt à l'emploi couvercle rouge Low control + 1 ml Contrôle faible ; contient 0,1 % de NaN 3 ; prêt à l'emploi couvercle vert Conjugate 12 ml Anticorps monoclonal dirigé contre les IgAs humaines (souris) conjugué à de la peroxydase dans une solution protéique stabilisée ; prêt à l'emploi SeroSC 12 ml Substrat ; peroxyde d'hydrogène / tétraméthylbenzidine (TMB) ; prêt à l'emploi SeroStop 12 ml Réactif d'arrêt ; acide sulfurique 1 N ; prêt à l'emploi 5. Instructions de conservation Tous les réactifs doivent être conservés entre 2 et 8 C. Dans ces conditions, ils peuvent être utilisés jusqu'à la date de péremption imprimée sur l'étiquette. Les tampons de lavage et d'extraction dilués peuvent être utilisés pendant 4 semaines au maximum lorsqu'ils sont conservés entre 2 et 8 C. La contamination microbienne doit être évitée. Après la date de péremption, la qualité n'est plus garantie. Le sachet en aluminium contenant les barrettes à micropuits doit être ouvert sans arracher le joint d'étanchéité. Les barrettes à micropuits qui ne sont pas nécessaires doivent être remises immédiatement dans le sachet en aluminium et conservées entre 2 et 8 C. Le substrat incolore doit également être protégé de la lumière directe pour éviter qu'il ne se décompose ou ne bleuisse sous l'effet d'une auto-oxydation. Lorsque le substrat est bleu, il ne doit pas être utilisé. 6. Autres réactifs et matériel nécessaires 6.1. Réactifs - Eau distillée ou désionisée 6.2. Accessoires - Micro-balance - Malaxeur au vortex (facultatif, voir rubrique 9.4.) - Micropipettes pour volumes de 50 à 100 µl et 1 ml - Éprouvette graduée (1000 ml) RIDASCREEN siga

5 - Chronomètre - Laveur de microplaque ou pipette multicanaux (300 µl) - Lecteur de microplaque (450 nm ; longueur d'onde de référence 620 nm) - Papier filtre (serviettes de laboratoire) - Conteneur de déchets contenant 0,5 % de solution d'hypochlorite 7. Précautions à prendre par l'utilisateur Exclusivement réservé au diagnostic in vitro. Ce test ne doit être réalisé que par un personnel de laboratoire formé. Les consignes de travail dans des laboratoires médicaux doivent être appliquées et les instructions d'exécution du test doivent être respectées à la lettre. Les échantillons de selles doivent être traités comme potentiellement infectieux et manipulés conformément aux règlements de sécurité nationaux. Les échantillons ou réactifs ne doivent pas être pipetés à la bouche et tout contact avec une peau ou des membranes muqueuses lésées doit être évité. Porter des gants jetables pour manipuler les échantillons et se laver les mains une fois le test terminé. Ne pas fumer, manger ni boire dans les zones où des échantillons ou des réactifs de test sont utilisés. Le tampon de lavage contient du thimérosal à 0,1 % comme conservateur. Cette substance ne doit pas entrer en contact avec la peau et les membranes muqueuses. L'étalon, le contrôle élevé, le contrôle faible et les tampons d'extraction et de dilution d'échantillon contiennent 0,1 % de NaN 3 comme conservateur. Cette substance ne doit pas entrer en contact avec la peau ou les membranes muqueuses. Le peroxyde d'hydrogène (substrat) peut provoquer des brûlures. Le manipuler avec prudence. Le réactif d'arrêt contient de l'acide sulfurique 1 N. Éviter tout contact avec la peau et les vêtements. Si la peau est contaminée par le réactif, la rincer à l'eau. Tous les réactifs et matériaux entrant en contact avec des échantillons potentiellement infectieux doivent être traités avec des désinfectants adaptés ou passés en autoclave à 121 C pendant au moins 1 heure. MISE EN GARDE : Pour éviter que des gaz toxiques ne se forment, tout déchet liquide contenant du réactif d'arrêt doit être neutralisé avant d'ajouter la solution d'hypochlorite. 8. Prélèvement et conservation des échantillons Les échantillons de selles doivent être transportés réfrigérés, dans la mesure du possible, et conservés entre 2 et 8 C avant le test. Nous recommandons de préparer immédiatement l'échantillon ou de le conserver à -20 C ou une température inférieure. RIDASCREEN siga

6 Éviter de congeler et décongeler les échantillons plusieurs fois. Les échantillons de selles ne doivent pas être recueillis dans des conteneurs de transport renfermant un milieu de transport et des conservateurs, du sérum animal, des ions métal, des agents oxydants ou des détergents car ces substances peuvent interférer avec le test RIDASCREEN siga. 9. Procédure de test 9.1. Informations générales Tous les réactifs et la microplaque doivent être ramenés à température ambiante (20-25 C) avant utilisation. Les barrettes à micropuits ne doivent pas être retirées du sachet en aluminium avant d'avoir atteint la température ambiante. Les réactifs doivent être bien mélangés juste avant leur utilisation. Après utilisation, les barrettes à micropuits (placées dans des sachets fermés hermétiquement) et les réactifs doivent être conservés entre 2 et 8 C. Une fois utilisées, elles ne doivent pas être réutilisées. Les réactifs et les barrettes à micropuits ne doivent pas être utilisés si l'emballage est endommagé ou si les flacons fuient. Pour éviter toute contamination croisée, les échantillons ne doivent pas entrer en contact direct avec les composants de la trousse. Le test ne doit pas être réalisé à la lumière directe du soleil. Nous recommandons de couvrir la microplaque ou de placer un film dessus pour éviter toute perte par évaporation Préparation du tampon de lavage Mélanger 1 volume de concentré de tampon de lavage Wash avec 9 volumes d'eau distillée (1:10). Verser 100 ml de concentré dans une éprouvette graduée de 1000 ml, puis compléter le volume avec de l'eau distillée jusqu'à 1000 ml. Les cristaux éventuellement présents dans le concentré doivent être dissouts au préalable, en les réchauffant dans un bain d'eau à 37 C Préparation du tampon d'extraction Mélanger 1 volume de concentré de tampon d'extraction Extract avec 9 volumes d'eau distillée (1:10). Verser 100 ml de concentré dans une éprouvette graduée de 1000 ml, puis compléter le volume avec de l'eau distillée jusqu'à 1000 ml. Les cristaux éventuellement présents dans le concentré doivent être dissouts au préalable, en les réchauffant dans un bain d'eau à 37 C. 9,4. Préparation des échantillons Pesée et mise en suspension de l'échantillon Nous recommandons de conserver l'échantillon à -20 C jusqu'à la préparation. Les échantillons congelés doivent être ramenés lentement à température ambiante. RIDASCREEN siga

7 Peser précisément 100 mg d'échantillon de selles dans un tube à essai étiqueté, puis ajouter exactement 5 ml de tampon d'extraction dilué à l'aide d'une pipette (dilution 1:50). Il est également possible de peser entre 80 et 130 mg de selles, puis de les mettre en suspension dans un volume réduit ou augmenté en conséquence (voir tableau 1) de tampon d'extraction dilué (pour s'assurer que le rapport de dilution [1:50] est constant). Tableau 1 : Quantités de tampon d'extraction dilué requises en fonction de la quantité de selles pesée (facteur de dilution constant de 1:50) Poids [mg] Volume [ml] Lors de la remise en suspension de l'échantillon de selles dans un volume fixe de 5 ml de tampon d'extraction, le facteur de dilution variable doit être pris en compte dans l'évaluation (voir tableau 2). Tableau 2 : Caractéristique du facteur de dilution en cas d'ajout fixe de tampon d'extraction dilué (5 ml), en fonction de la quantité de selles pesée Poids [mg] Facteur de dilution [ml] Quelle que soit la méthode employée pour peser l'échantillon, la suspension de selles est homogénéisée en la mélangeant complètement dans un malaxeur au vortex. Si les selles sont RIDASCREEN siga

8 liquides, utiliser une pipette pour prélever précisément 100 µl et les mettre en suspension dans exactement 5 ml de tampon d'extraction dilué. La suspension homogénéisée doit ensuite être centrifugée à plus de 3000 g pendant 10 minutes pour sédimenter les grosses particules de selles. Le surnageant de l'extrait doit être dilué en vue d'une utilisation immédiate dans le test. Il est recommandé de conserver le surnageant aliquoté à -20 C ou une température inférieure Dilution manuelle de l'échantillon Diluer 50 µl du surnageant clarifié (voir rubrique 9.4.1) dans 950 µl de tampon d'extraction dilué (1:20), puis passer l'échantillon au vortex. Ensuite, réaliser une nouvelle dilution en diluant 100 µl de la première dilution avec 900 µl de tampon de dilution d'échantillon RIDASCREEN Diluent 3 (1:10) et passer l'échantillon au vortex. La dilution finale de l'échantillon de selles (1:10 000) est appliquée au test. Une autre méthode de traitement et d'homogénéisation de l'échantillon adaptée, décrite précédemment, consiste à utiliser le système de préparation d'échantillon fourni par la société Roche Diagnostics, Mannheim (réf. : ). C'est avec plaisir que R-Biopharm AG fournira, sur demande, des instructions spéciales concernant l'utilisation de cette méthode Dilution automatique de l'échantillon Lorsque le test est réalisé sur un système DSX-ELISA entièrement automatisé de Dynex, R- Biopharm AG fournit le journal de mesures nécessaire et installe l'application sur le système. L'échantillon est ensuite dilué automatiquement comme expliqué ci-dessous. Le système ELISA automatique pipette un volume de 25 µl du surnageant clarifié dans une plaque à puits profonds, puis le dilue dans 975 µl de tampon d'extraction dilué (1:40). Deux cycles de mélange sont maintenant réalisés. Le nombre de barrettes de microtitrage nécessaire est introduit dans le support de la plaque de microtitrage RIDASCREEN siga Plate. Chaque volume de 20 µl de dilution d'échantillon est transféré de la plaque à puits profonds dans la plaque de microtitrage RIDASCREEN siga Plate, puis dilué avec 80 µl de diluant d'échantillon RIDASCREEN Diluent 3 (1:5 ; dilution finale 1:10 000). Contacter R-Biopharm AG pour obtenir des instructions sur la réalisation du test sur d'autres systèmes de pipetage ELISA automatiques Première incubation Après avoir placé un nombre de puits suffisant dans le support, ajouter 100 µl d'étalon Calibrator (en double), de tampon de dilution d'échantillon Diluent 3 (= contrôle négatif), de RIDASCREEN siga

9 contrôle positif élevé Control + et des suspensions de selles à analyser dans les puits qui conviennent. Le cas échéant, ajouter également 100 µl du contrôle faible Low control + dans les puits appropriés. Ensuite, incuber la plaque à température ambiante (20-25 C) pendant 1 heure Premier lavage Il est important de réaliser le lavage soigneusement pour obtenir des résultats corrects et donc, de respecter les instructions à la lettre. La substance incubée dans les puits doit être vidée dans un conteneur de déchets contenant une solution d'hypochlorite à des fins de désinfection. Retourner la plaque et la tapoter vigoureusement contre un papier absorbant pour s'assurer que tout le liquide a été retiré des micropuits. Ensuite, laver la plaque 5 fois systématiquement avec 300 µl de tampon de lavage dilué (voir la rubrique 9.2). Retourner la plaque et la tapoter vigoureusement contre un papier absorbant pour s'assurer que tout le liquide a été retiré des micropuits. Lorsqu'un laveur de microplaque est utilisé, s'assurer qu'il est correctement réglé par rapport au type de microplaque utilisée. En outre, une suspension de selles qui contient encore des particules avant le premier lavage doit être homogénéisée manuellement par centrifugation pour éviter d'obstruer les aiguilles de lavage. S'assurer également que tout le liquide est aspiré à chaque étape de lavage. Après le dernier lavage, retourner la plaque et la tapoter vigoureusement contre un papier absorbant pour s'assurer que tout le liquide a été retiré des micropuits Seconde incubation Ajouter 100 µl de conjugué Conjugate dans chaque puits. Ensuite, incuber la plaque à température ambiante (20-25 C) pendant 1 heure Second lavage La substance incubée dans les puits doit être vidée dans un conteneur de déchets contenant une solution d'hypochlorite à des fins de désinfection. Retourner la plaque et la tapoter vigoureusement contre un papier absorbant pour s'assurer que tout le liquide a été retiré des micropuits. Ensuite, laver la plaque 5 fois systématiquement avec 300 µl de tampon de lavage dilué. Retourner la plaque et la tapoter vigoureusement contre un papier absorbant pour s'assurer que tout le liquide a été retiré des micropuits Troisième incubation Ajouter 100 µl de substrat SeroSC dans chaque puits. Ensuite, incuber la plaque à température ambiante (20-25 C), dans le noir, pendant 15 minutes. Puis, arrêter la réaction en ajoutant 50 µl de réactif d'arrêt SeroStop dans chaque puits. RIDASCREEN siga

10 Après un mélange soigneux (en tapotant légèrement le côté de la plaque), mesurer l'absorbance à 450 nm (longueur d'onde de référence 620 nm) dans un lecteur de plaque. Remarque : Avec des échantillons de patients très positifs; le substrat peut développer un précipité noir. Ces échantillons doivent être dilués selon un rapport 1:10 (dilution finale de l'échantillon de selles : 1: ), puis à nouveau analysés (voir la rubrique 9.5.). 10. Contrôle qualité signes de réactif périmé À des fins de contrôle qualité, l'étalon Calibrator (en double), le tampon de dilution d'échantillon Diluent 3 servant de contrôle négatif et le contrôle élevé Control + doivent être utilisés à chaque test. L'utilisation du contrôle faible Low control + est facultative. Le test s'est bien déroulé si l'extinction (DO) du contrôle négatif à 450 nm / 620 nm est inférieure à 0,05 et que l'extinction déterminée (DO) de l'étalon se situe dans la plage spécifique au lot indiquée sur la fiche technique jointe. Le contrôle élevé doit se situer dans la plage de concentrations spécifique au lot inscrite sur la fiche technique. Si le test RIDASCREEN siga est utilisé sur des appareils de traitement ELISA, la valeur DO mesurée de l'étalon Calibrator peut être différente de celle indiquée sur la fiche technique spécifique au lot, selon l'instrument utilisé. Le contrôle élevé est donc décisif pour la validité des résultats et doit toujours être employé lorsque le test est pratiqué sur des appareils de traitement ELISA. L'utilisation du contrôle faible Low control + est facultative. Des valeurs qui diffèrent de celles requises et un substrat trouble ou bleu avant d'être ajouté dans les puits peuvent être des signes indiquant que les réactifs sont périmés. En cas d'écart par rapport aux valeurs indiquées, les points suivants doivent être contrôlés avant de recommencer le test : Date de péremption des réactifs utilisés Capacité de fonctionnement de l'équipement utilisé (par ex. étalonnage) Procédure de test correcte Inspection visuelle des composants de la trousse à la recherche d'une contamination ou de fuites ; une solution de substrat devenue bleue ne doit pas être utilisée. Si les conditions ne sont toujours pas satisfaites après avoir recommencé le test, contacter le fabricant ou un distributeur R-Biopharm local. 11. Évaluation et interprétation Quantification à un point selon la loi log-logistique à 4 paramètres La concentration d'igas en µg/g de selles est déterminée avec le test RIDASCREEN siga, selon la loi log-logistique à 4 paramètres (4PL). RIDASCREEN siga

11 Le logiciel d'évaluation RIDA SOFT Win.net est nécessaire pour calculer les résultats. RIDA SOFT Win.net ou une mise à jour sont disponibles auprès de R-Biopharm AG ou du distributeur R-Biopharm local. Les paramètres (A - D) de la courbe d'étalonnage requis pour le calcul 4PL et la valeur théorique de l'étalon, du contrôle élevé et du contrôle faible sont répertoriés sur la fiche technique spécifique au lot jointe à la trousse et doivent être comparés aux valeurs indiquées dans le logiciel d'évaluation avant chaque mesure. R-Biopharm AG a déterminé la courbe d'étalonnage (y compris les paramètres A - D), ainsi que la valeur théorique et la plage autorisée de l'étalon, du contrôle élevé et du contrôle faible dans des conditions optimales pour chaque lot de trousses lors du contrôle qualité final. L'étalon est testé en routine afin de compenser les fluctuations de test et de contrôler la qualité de chaque analyse. Le contrôle élevé est décisif pour la validité des résultats du test. La valeur moyenne de la double détermination du contrôle et de l'étalon et sa valeur théorique permet au logiciel RIDA SOFT Win.net de calculer un facteur de correction F en interne puis de le rapprocher de l'absorbance pour les échantillons de selles. Une évaluation sûre et fiable des résultats de test peut être réalisée dans le cadre des limites de la courbe d'étalonnage. Un autre logiciel d'évaluation disposant de la loi log-logistique à 4 paramètres peut également être utilisé en tant qu'alternative au RIDA SOFT Win.net Résultat du test La plage d'igas normale se situe entre 100 et 1200 µg IgAs/g de selles. Si les résultats sont inférieurs à 100 µg d'igas / g de selles, les patients ont des taux d'igas réduits. S'ils sont supérieurs à µg d'igas / g de selles, les patients ont des taux d'igas accrus. Nous recommandons à chaque laboratoire d'établir sa propre plage de valeurs standard. 12. Limites de la méthode RIDASCREEN siga détecte les épitopes d'igas humaines dans les échantillons de selles. Le diagnostic ne doit pas exclusivement reposer sur la détermination de la concentration en IgAs, mais prendre en compte les antécédents et symptômes cliniques. 13. Performances Limite de détection La limite de détection de RIDASCREEN siga a été calculée en ajoutant la valeur de B 0, plus deux fois son écart-type. La valeur B 0 correspond à la moyenne de plusieurs déterminations (n=84) du contrôle négatif (=Diluent 3). RIDASCREEN siga

12 La limite de détection des IgAs humaines est donc de 171 µg/g (17,1 ng/ml) de selles Précision La reproductibilité intra-test de RIDASCREEN siga a été déterminée avec plusieurs déterminations réalisées sur des jours différents. Ces mesures de concentrations en IgAs ont été déterminées à partir des valeurs de DO. La valeur moyenne (VM), l'écart-type (ET) et le coefficient de variation (CV) ont été calculés pour chaque échantillon. Les résultats sont répertoriés dans les tableaux 3 et 4. Tableau 3 : Reproductibilité intra-test (n=16) Intra-test RIDASCREEN siga 1. Concentration [660 µg/g] 2. Concentration [1500 µg/g] VM (DO) ET 45,6 55,80 CV % 6,8 4,0 Tableau 4 : Reproductibilité inter-test (n=8) Inter-test RIDASCREEN siga 1. Concentration [660 µg/g] 2. Concentration [1500 µg/g] VM (DO) ET 79,7 85,5 CV % 11,8 5, Linéarité Pour contrôler la linéarité des dilutions séries de RIDASCREEN siga, des séries de plusieurs échantillons de selles contenant des IgA ont été préparées. Les poids de l'échantillon, la suspension et la première dilution d'échantillon ont été déterminés comme indiqué dans le manuel (voir rubrique 9.4.). Les séries de dilution série ont été préparées avec le tampon de dilution d'échantillon RIDASCREEN Diluent 3. Les concentrations déterminées dans le test ont été calculées par rapport aux concentrations attendues. Les résultats sont répertoriés dans le tableau 5. RIDASCREEN siga

13 Tableau 5 : Linéarité Échantillon Dilution Concentration déterminée (µg/g) Concentration prévue (µg/g) Concentration déterminée / prévue 1: ,00 1: ,00 403,50 101% 1: ,50 201,75 103% 1: ,25 100,88 103% 1: ,69 50,44 114% VM 105% 1: ,00 1: ,50 587,50 98% 1: ,25 293,75 95% 1: ,38 146,88 100% 1: ,69 73,44 102% VM 99% 1: ,00 1: ,50 189,00 107% 1: ,25 94,50 113% 1: ,75 47,25 124% 1: ,63 - VM 115% VM (total) 106% RIDASCREEN siga

14 14. Bibliographie 1. Brand S, Gerritzen A. Evaluation eines neuen Enzym-Immuno-Assays zum Nachweis von sekretorischem IgA im Stuhl. Poster DGKL Brandtzaeg P. Update on mucosal immunoglobulin A in gastrointestinal disease. Curr Opinion Gastroent 2010; 26: Goldblum RM. The role of IgA in local immune protection. J Clin Immun 1990; 10(6): 64S- 71S. 4. Mestecky Y et al. Intestinal IgA: novel views on its function in the defence of the largest mucosal surface. Gut 1999; 44: Motegi Y et al. Role of secretory component, and eosinophils in mucosal inflammation. Int Arch Allergy Immunol 2000;122(suppl 1): Rüssmann H et al. IgA/IgM and secretory immunity. Sepsis 1999; 3: Russel MW et al. Molecular heterogeneity of human IgA antibodies during an immune response. Clin Exp Immunol 1992; 87: 1-6. RIDASCREEN siga

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