ETUDES BPL ou NON BPL AIDE A LA CONCEPTION DE PROTOCOLES AIDE A L INTERPRETATION DES RESULTATS

Transcription

1 Pharmaceutique

2 ETUDES BPL ou NON BPL AIDE A LA CONCEPTION DE PROTOCOLES AIDE A L INTERPRETATION DES RESULTATS BIOANALYSES BIOPHARMACIE PERMEABILITE ABSORPTION

3 VOS PROJETS AMELIORATIONS : Biodisponibilite Absorption Modification ou Validations du type de transfert Développement de nouvelles formes SUR Nouvelles formes immédiates Nouvelles formes orales lentes Formes lipidiques ( SEDDS, SMEDDS) Cyclodextrines (Partenaire «In-Cyclo») Patchs et Crèmes Lotions Formes dépôts nasales Sprays Formes buccales (capsules, comprimés patchs)

4 BIOANALYSES Dosages principes actifs et métabolites Biogalénique Etudes de stabilité en milieux biologiques Liquides gastro-intestinaux humains Pharmacocinétique Toxicologie

5 BIOPHARMACIE Classification BCS

6 Préformulation pka LogP LogD Solubilités physiologiques ph dépendance Température dépendance Test de dissolution ph dépendance Octanol/tampon Perméabilités toutes muqueuses et barrières Etudes in vitro, in vivo, ex vivo

7 PERMEABILITE ABSORPTION 1 Perméabilité Apparente intestinale en chambre de Ussing Recherche des fenêtres d absorption Détermination de la perméabilité apparente à travers différents segments. Duodénum Jéjunum Iléon Côlon Détermination de l influence de la P-gp (efflux) Détermination perméabilité apparente sur côlon humain. Perméabilité apparente sur CaCO-2

8 Fonctionnement d une chambre de USSING

9 Mécanismes de transfert intestinal Sur intestin retourné de rat : Modèle de Chowan et Amaro Détermination du type de transfert à doses croissantes (3 Log) Actif Passif Recherche des fenêtres d absorption Perméabilité effective (Pe) Perfusion duodénale sur rat anesthésié Modèle de Barr et Riogelman A doses croissantes et débit constant Recueil de la solution perfusée Prélèvements sanguins Détermination de la Pe et de la fraction absorbée Fa Etude des fenêtres d absorption

10 Absorption intestinale Sac intestinal ligaturé sur rat anesthésié Prélèvements sanguins en veine porte et périphérie Modèle de Levine et Pelikan Influence des excipients sur l absorption des molécules fragiles peu perméables ou peu solubles Etude de l influence des compositions sur le contrôle de la vitesse d absorption Etude de l influence de la vitesse d absorption sur L intensité de l effet de 1 er passage hépatique Etude de fenêtres d absorption Recherche de l influence des excipients actifs sur la vitesse d absorption (accélération-inhibition) et sur l efflux (compétition avec Vérapamil

11 Flux transdermiques Etudes IN VITRO / IN VIVO TOPIQUES : Pénétration + Distribution TRANSDERMIQUES : Perméabilité + Absorption + Métabolisme ETUDE DE FLUX TRANSDERMIQUES SUR CELLULES DE FRANZ CINETIQUE 0-24H ETUDE DE L INFLUENCE D UNE COMPOSITION SUR LE PASSAGE TRANSCUTANE SOLVANTS CO-SOLVANTS ACCELERATEURS CONCENTRATIONS EN PRINCIPE ACTIF EXCIPIENTS EXPLANTS HUMAINS FRAIS STRATUM CORNEUM PEAU ENTIERE PEAU DERMATOMEE PEAU HUMAINE RECONSTITUEE BALANCE DES MASSES MESURE DE LA PIE FLUX DE CAFEINE TEMOIN

12 Profil de Biodisponibilité Absolue des formes dépots Sur rat voie sous-cutanée ou intramusculaire Injection intraveineuse de référence du principe actif et injection intratissulaire de la forme dépôt (2 bras) Prélèvements sanguins Détermination de la biodisponibilité absolue Caractérisation du profil pharmacocinétique complet aux deux premiers jours, puis contrôle des niveaux sanguins journaliers pendant la durée présumée de la libération. Sceening de Biodisponibilité des formes dépots Sur rat voie sous-cutanée ou intramusculaire Injection de différents prototypes à tester (plusieurs bras) Détermination comparative des niveaux sanguins obtenus Le 1 er jour, puis à l équilibre, et à la fin de la durée présumée Détermination des surfaces sous courbes plasmatiques

13 ETUDE DE PASSAGE TRANSUNGUEAL MESURE DE FLUX FIXATION INTRAUNGUEALE REMANENCE ETUDE DE PASSAGE TRANSMUQUEUX in vitro (Nasale et Buccale) MA 1 2 Sur muqueuse de Porc, bœuf MESURE DE FLUX JS BL : LAME BASALE JS : JONCTION SERREE MA : MEMBRANE APICALE MB : MEMBRANE BASALE VS : VOIE SYSTEMIQUE 1 : TRANSPORT PASSIF LIPOPHILE 2 : TRANSPORT PASSIF HYDROPHILE MB BL VS

14 SCREENING D ABSORPTION NASALE Sur rat anesthésié Méthode du dépôt nasale ou en perfusion (Modèle de HIRAI) Prélèvements sanguins Détermination de l absorption par rapport à une référence I.V Recherche des conditions de ph, composition Influence du type de sel sur la perméabilité SCREENING D ABSORPTION BUCCALE Sur rat anesthésié Modèle de HIRAI modifié Prélèvements sanguins Détermination de l absorption par rapport à une référence I.V Recherche des conditions de ph, composition Influence du type de sel sur la perméabilité

15 PASSAGE TRANS-OCULAIRE IN VIVO Sur lapins roux ou albinos Etudes de pharmacocinétiques extra oculaires (cornée, conjonctives, cristallin, humeur aqueuse) Etudes de pharmacocinétiques intra oculaires (corps vitré, rétine ) Passage trans-sclérotique PASSAGE TRANS-OCULAIRE IN VITRO Etudes de passage trans-sclérotique en cellules de Franz Ou chambre d Ussing modifiée (Biogalenys)

16 Intra oculaire R SC HA CN HV. C C : Cornée Cn : Cristallin HA : Humeur aqueuse HV : Humeur vitrée R : Rétine SC : Sclérotique Fixation Perméation Cinétique Coupe Simplifié d un œil humain - Biogalenys

17 ETUDE DE BIODISPONIBILITE ABSOLUE VOIE ORALE Sur rat voie IV et gavage oral d une solution De principe actif à 3 doses croissantes Prélèvements sanguins Détermination des paramètres apparents et intrinsèques De la biodisponibilité I.V. et orale Profil de l entrée systémique du principe actif (référence orale) DISSOLUTION ET BIODISPONIBILITE RELATIVE IN VIVO VOIE ORALE Sur rat voie orale Principe actif : solution, poudre, plusieurs préparations sèches Prélèvements sanguins Détermination de la biodisponibilité relative et ses paramètres apparents et intrinsèques Profil de dissolution gastro-intestinal du principe actif formulé

18 PHAMACOCINETIQUE HUMAINE ETUDES DE PERFUSION INTESTINALE SUR VOLONTAIRES SAINS ETUDES DE BIODISPONIBILITE (estomac, jéjunum, iléon, caecum) Marqueurs non absorbables Cinétique sanguine et urinaire ETUDES DE BIOEQUIVALENCE BIOEFFICACITE Sur volontaires Sains Partenariat : Pr DECHELOTTE (Chef de service CHU Rouen) CIC : Centre d Investigations Cliniques (CHU ROUEN, 01 Rue de Germont Rouen)