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1 system fr 25-OH Vitamin D 3L /R01 B3L OH Vitamin D Service Clients : Retrouvez le contact de votre Service Clients Abbott sur Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas strictement respectées. Légende des symboles utilisés Référence Dispositif médical de diagnostic in vitro Numéro de lot Date d'expiration Numéro de série Conserver entre 2 et 8 C Consulter les instructions d'utilisation Fabricant Numéro de contrôle Cupules réactionnelles Godets-échantillons Septum Bouchons de remplacement Mise en garde : Peut provoquer une réaction allergique Contient de l'azide de sodium. Au contact d'un acide, dégage un gaz très toxique. Contient du méthanol Assay CD-ROM - WW (excluding US) - Addition E CD-ROM de dosages - version internationale (à l'exception des Etats-Unis) - Addition E L'explication complète des symboles utilisés pour la dénomination des composants se trouve à la partie REACTIFS. 1

2 DENOMINATION ARCHITECT 25-OH Vitamin D DOMAINE D'APPLICATION ARCHITECT 25-OH Vitamin D est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la détermination quantitative de la 25-hydroxyvitamine D (25-OH vitamine D) dans le sérum et le plasma humains. Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est utilisé comme aide dans l'évaluation de l auto-suffisance en vitamine D. RESUME ET EXPLICATION DU TEST La vitamine D est une pro-hormone stéroïde liposoluble, principalement synthétisée dans la peau sous l'action des rayons solaires à partir du 7-déhydrocholestérol. Les deux formes biologiquement pertinentes de la vitamine D sont la vitamine D 3 (cholécalciférol) et la vitamine D 2 (ergocalciférol). Ces deux formes de vitamine D (D 3 et D 2 ) sont apportées à l'organisme par le biais de l'alimentation, la vitamine D 2 étant une source artificielle. Pourtant, seulement 10 à 20 % des besoins en vitamine D proviennent de l'alimentation. 1 Les vitamines D 3 et D 2 peuvent être contenues dans des suppléments vitaminiques. La vitamine D doit subir deux hydroxylations pour devenir l'hormone active 1,25-(OH) 2 -vitamine D (calcitriol). La première hydroxylation a lieu dans le foie et permet de convertir la vitamine D en 25 OH vitamine D. La deuxième hydroxylation qui a lieu dans les reins et de nombreuses autres cellules du corps, permet de convertir la 25-OH vitamine D en 1,25-(OH) 2 -vitamine D biologiquement active. La plupart des cellules expriment le récepteur de la vitamine D et environ 3 % du génome humain est régulé de manière directe ou indirecte par le système endocrinien de la vitamine D 1. La 25-OH vitamine D est la forme principale de stockage de la vitamine D ; elle est présente dans le sang à des concentrations jusqu'à fois supérieures à celles de la forme active de la vitamine D 1,25-(OH) 2 -vitamine D. La demivie de la 25-OH vitamine D est de 2 à 3 semaines contre 4 heures pour la 1,25-(OH) 2 -vitamine D. La 25-OH vitamine D est donc l'analyte de choix pour la détermination du statut en vitamine D 2,3. Des études épidémiologiques ont mis en évidence une prévalence globale élevée de l'insuffisance et de la carence en vitamine D 4. La détermination du statut de la vitamine D permet si nécessaire la mise en place de mesures préventives et thérapeutiques 5,6,7. La carence en vitamine D est une cause courante de l'hyperparathyroïdie secondaire et de maladies associées à un métabolisme osseux altéré (comme le rachitisme, l'ostéoporose et l'ostéomalacie) 2,8,9. Des concentrations faibles en 25-OH vitamine D dans le sang (carence en vitamine D) sont associées à un risque accru de développer des maladies chroniques, dont les cancers courants, les maladies autoimmunes ou infectieuses ou les problèmes cardiovasculaires 1,2,6,8, PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT 25-OH Vitamin D est un dosage immunologique en une étape retardée, avec pré-traitement de l'échantillon, pour la détermination quantitative de la vitamine D dans le sérum et le plasma humains. Il utilise la technologie CMIA avec des protocoles de dosage flexibles, appelée Chemiflex. L'échantillon et le réactif de pré-traitement sont mis en présence. Le diluant de dosage et les microparticules paramagnétiques recouvertes d'anticorps anti-vitamine D sont ajoutés à une partie aliquote de l'échantillon pré-traité pour créer le mélange réactionnel. La vitamine D présente dans l'échantillon se lie aux microparticules recouvertes d'anticorps anti-vitamine D. Après incubation, le conjugué sous forme d'un complexe d'igg anti-biotine / vitamine D biotinylée marqué à l'acridinium est ajouté au mélange réactionnel et se lie aux sites de liaison libres sur les microparticules recouvertes d'anticorps anti-vitamine D. Après lavage, les solutions de préactivation et d'activation sont ajoutées au mélange réactionnel. La réaction chimiluminescente qui en résulte est mesurée en unités relatives de lumière (URL). Il existe une relation indirecte entre la quantité de vitamine D présente dans l'échantillon et les URL détectées par le système optique ARCHITECT i System. Pour de plus amples informations concernant le système et la technologie du dosage, se référer au Chapitre 3 du Manuel Technique ARCHITECT. REACTIFS Kit de réactifs, 100 tests/500 tests REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ou utilisables sur tous les analyseurs ARCHITECT i Systems. Contacter le distributeur local. ARCHITECT Reagent Kit (3L52-25 ou 3L52-35) 1 flacon (6,6 ml pour le flacon de 100 tests / 27,0 ml pour le flacon de 500 tests) de microparticules recouvertes d'anticorps IgG anti-vitamine D humaine (mouton, polyclonal) dans du tampon TRIS. Concentration minimale : 0,05 % de particules solides. Conservateurs : ProClin 300 et ProClin flacon (5,9 ml pour le flacon de 100 tests / 26,3 ml pour le flacon de 500 tests) de conjugué sous forme d'un complexe d'igg anti-biotine (souris, monoclonales) et de vitamine D biotinylée, marqué à l'acridinium dans du tampon BIS-TRIS HCl avec des stabilisants de protéine (gamma globuline bovine) et du détergent. Concentration minimale : 1,2 μg/ml d'anticorps IgG anti-biotine et 0,1 μg/ml de vit- D-biotine. Conservateur : azide de sodium. 1 flacon (4,9 ml pour le flacon de 100 tests / 21,2 ml pour le flacon de 500 tests) de diluant de dosage contenant du tampon acide acétique avec de l'edta. Conservateurs : ProClin 300 et ProClin flacon (10,0 ml pour le flacon de 100 tests / 50,9 ml pour le flacon de 500 tests) de réactif de pré-traitement 1 contenant du tampon méthanol triéthanolamine et de l'acide 8-anilino- 1-naphtalène sulfonate (ANSA). 1 flacon (5,9 ml pour le flacon de 100 tests / 26,3 ml pour le flacon de 500 tests) de réactif de pré-traitement 2 contenant du tampon méthanol triéthanolamine et de l'acide 8-anilino- 1-naphtalène sulfonate (ANSA). Autres réactifs ARCHITECT i Pre-Trigger Solution Solution de préactivation contenant 1,32 % (m/v) d'eau oxygénée. ARCHITECT i Trigger Solution Solution d'activation contenant de l'hydroxyde de sodium 0,35 N. ARCHITECT i Wash Buffer Tampon de lavage contenant une solution saline tamponnée au phosphate. Conservateurs : agents antimicrobiens. PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI Pour diagnostic in vitro. Suivre scrupuleusement les instructions de cette notice. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas strictement respectées. Mesures de sécurité ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons humains. Il est recommandé de considérer tous les composants d'origine humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon les règles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens". 13 Les produits contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent être manipulés selon les règles de biosécurité de niveau 2 14 ou autres règles de biosécurité en vigueur. 15,16 Ce produit contient de l'azide de sodium ; pour une liste détaillée, se référer à la partie REACTIFS. Au contact d'un acide, dégage un gaz très toxique. Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en prenant toutes précautions d'usage. Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent aux composants ci-après : Microparticules Diluant de dosage 2

3 MISE EN GARDE : Contient des méthylisothiazolones. H317 Prévention P261 P272 P280 Peut provoquer une allergie cutanée. Eviter de respirer les poussières/vapeurs/ aérosols. Les vêtements de travail contaminés ne devraient pas sortir du lieu de travail. Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des yeux. Réponse P302+P352 EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU : Laver abondamment à l'eau. P333+P313 En cas d'irritation ou d'éruption cutanée : Consulter un médecin. P363 Laver les vêtements contaminés avant réutilisation. Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en prenant toutes précautions d'usage. Les mises en garde et précautions suivantes s'appliquent aux composants ci-après : Réactif de prétraitement 1 Réactif de prétraitement 2 DANGER : H226 H332 H370 Prévention P210 P243 P233 P271 P260 P280 Contient du méthanol. Liquides et vapeurs inflammables. Nocif par inhalation. Risque avéré d'effets graves pour les organes. Tenir à l écart de la chaleur/des étincelles/des flammes nues/des surfaces chaudes. Ne pas fumer. Prendre des mesures de précaution contre les décharges électrostatiques. Maintenir le récipient fermé de manière étanche. Utiliser seulement dans un endroit bien ventilé. Ne pas respirer les poussières/vapeurs/aérosols. Porter des gants de protection/des vêtements de protection/un équipement de protection des yeux. P264 Se laver les mains soigneusement après manipulation. Réponse P304+P340 P303+P361+ P353 P307+P311 Conservation P403+P235 P405 EN CAS D'INHALATION : Transporter la victime à l'extérieur et la maintenir au repos dans une position où elle peut confortablement respirer. EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU (ou les cheveux) : Enlever immédiatement les vêtements contaminés. Rincer la peau à l eau/se doucher. EN CAS D'EXPOSITION : Appeler un CENTRE ANTIPOISON ou un médecin. Stocker dans un endroit bien ventilé. Tenir au frais. Garder sous clef. Ne se débarrasser de ce produit et de son récipient qu'en prenant toutes précautions d'usage. Pour de plus amples informations sur l'élimination appropriée de l'azide de sodium et une explication détaillée des mesures de sécurité lors du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Chapitre 8 du Manuel Technique ARCHITECT. Précautions d'emploi Ne pas utiliser les kits de réactifs au-delà de leur date d'expiration. Ne pas mélanger les réactifs provenant d'un même kit ou de kits de réactifs différents. Le conjugué étant sensible à la température, réduire au maximum l'exposition du flacon de conjugué à la température ambiante. Avant de charger l'architect 25-OH Vitamin D Reagent Kit sur l'analyseur pour la première fois, le flacon de microparticules doit être homogénéisé afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont déposées pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l'homogénéisation des microparticules, se référer au paragraphe Procédure du dosage de la partie PROCEDURE de cette notice. Des septums DOIVENT être utilisés afin d'empêcher l'évaporation et la contamination des réactifs et d'assurer leur intégrité. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si les septums ne sont pas utilisés conformément aux instructions de cette notice. Afin d'éviter toute contamination, porter des gants propres lors de la mise en place d'un septum sur un flacon de réactif débouché. Une fois qu'un septum a été placé sur un flacon de réactif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d'éviter toute fuite de réactif et de ne pas fausser les résultats du dosage. Avec le temps, il se peut que des liquides résiduels sèchent à la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucun effet sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les précautions d'emploi lors du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Chapitre 7 du Manuel Technique ARCHITECT. Conditions de conservation L ARCHITECT 25-OH Vitamin D Reagent Kit doit être conservé entre 2 et 8 C en position verticale et peut être utilisé immédiatement après sa sortie du réfrigérateur (2 à 8 C). Les réactifs sont stables jusqu'à leur date d'expiration s'ils sont conservés et manipulés selon les indications du fabricant. Le conjugué étant sensible à la température, réduire au maximum toute exposition du flacon de conjugué à la température ambiante. L ARCHITECT 25-OH Vitamin D Reagent Kit de 100 tests peut être conservé dans l'architect i System pendant 7 jours au maximum. L ARCHITECT 25-OH Vitamin D Reagent Kit de 500 tests peut être conservé dans l'architect i System pendant 14 jours au maximum. Une fois passé le délai maximum de conservation, le kit de réactifs doit être éliminé. Pour de plus amples informations sur le suivi de la stabilité des réactifs chargés à bord de l'analyseur, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Les réactifs peuvent être conservés à l'intérieur ou à l'extérieur de l'architect i System. Si les réactifs sont retirés de l'analyseur, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Pour les réactifs conservés à l'extérieur de l'analyseur, il est recommandé de les placer dans leurs portoirs et emballages d'origine afin de les maintenir dans une position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa conservation au réfrigérateur à l'extérieur de l'analyseur, le kit de réactifs doit être jeté. Pour de plus amples informations sur le déchargement des réactifs, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Indications d'altération des réactifs Un contrôle dont la valeur se situe en dehors des limites spécifiées peut indiquer une altération des réactifs ou des erreurs de technique. Les résultats des échantillons analysés dans la même série ne doivent pas être validés et ces échantillons devront être réanalysés. Une recalibration du dosage peut être nécessaire. Pour de plus amples informations sur le dépannage, se référer au Chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT. FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL CD-ROM requis pour effectuer le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D : System e-assay CD-ROM disponible sur sous Support/Technical Library/ Assay Files ou System Assay CD ROM - WW (excluding US) - Addition E. Le fichier de dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D doit être installé sur l'architect i System avant de réaliser le dosage. Pour de plus amples informations sur l'installation d'un fichier de dosage ainsi que sur la visualisation et la modification des paramètres de dosage, se référer au Chapitre 2 du Manuel Technique ARCHITECT. Pour de plus amples informations sur l'impression des paramètres de dosage, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. 3

4 Pour une explication détaillée du fonctionnement de l'analyseur, se référer au Manuel Technique ARCHITECT. L'unité de résultat par défaut du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est le ng/ml. Pour le rendu des résultats, il est possible de sélectionner une unité alternative, le nmol/l, en réglant le paramètre de dosage Unités de concentration résultat sur nmol/l. Le facteur de conversion utilisé par le système est de 2,5. PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Types d'échantillons Les tubes de prélèvement d'échantillons mentionnés ci-après ont été validés pour être utilisés avec le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D. L'utilisation d'autres types de tubes de prélèvement d'échantillons n'a pas été testée avec ce dosage. Sérum humain (y compris le sérum prélevé sur tubes séparateurs de sérum) Plasma humain prélevé sur : EDTA potassique Héparinate de lithium (poudre ou gel) Héparinate de sodium Le plasma humain prélevé sur citrate de sodium a présenté un biais négatif moyen de -13 % par rapport au sérum. D'autres anticoagulants liquides peuvent également avoir un effet diluant entraînant une baisse des concentrations pour certains échantillons de patients. L'ARCHITECT i System n'est pas configuré pour détecter le type d'échantillon utilisé pour le dosage. Il revient par conséquent à l'utilisateur de vérifier les types d'échantillons utilisés dans le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D. Etats des échantillons Ne pas utiliser d'échantillons présentant les caractéristiques suivantes : inactivés par la chaleur, provenant de pools d'échantillons, présentant une forte hémolyse (> 500 mg/dl d'hémoglobine), présentant une contamination microbienne évidente, prélevés sur des cadavres ou tout autre fluide corporel. Pour obtenir des résultats exacts, les échantillons de sérum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, ni de globules rouges et autres particules en suspension. Les échantillons de sérum provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique peuvent contenir de la fibrine en raison d'une coagulation incomplète. Manipuler les échantillons de patients avec précaution afin d'éviter toute contamination croisée. Il est recommandé d'utiliser des pipettes ou des embouts de pipettes à usage unique. Pour obtenir des résultats optimaux, vérifier que les échantillons ne contiennent pas de bulles. S'ils contiennent des bulles, les éliminer à l'aide d'un bâtonnet avant l'analyse. Utiliser un bâtonnet neuf pour chaque échantillon afin d'éviter toute contamination croisée. Préparation pour l'analyse Pour le traitement des tubes de prélèvement de sérum et de plasma, suivre les instructions données par le fabricant. La séparation gravimétrique n'est pas suffisante pour la préparation des échantillons. Homogénéiser soigneusement les échantillons décongelés en les passant au Vortex à une vitesse faible ou en les retournant 10 fois. Examiner les échantillons. En cas d'apparition de couches ou de stratifications, continuer à mélanger jusqu'à ce que les échantillons soient visiblement homogènes. Afin d'obtenir des résultats cohérents, les échantillons doivent être transférés dans des tubes pour centrifugeuse puis centrifugés à une vitesse x g pendant 10 minutes avant analyse dans les cas suivants : les échantillons contiennent de la fibrine, des globules rouges ou d'autres particules en suspension, les échantillons doivent être réanalysés, les échantillons ont été congelés puis décongelés. Pour l'analyse, transférer l'échantillon clarifié dans un godetéchantillon ou un tube aliquot. Les échantillons centrifugés présentant une couche lipidique en surface doivent être transférés dans un godet-échantillon ou un tube aliquot. Veiller à transférer exclusivement l'échantillon clarifié sans substance lipémique. Conservation Les échantillons peuvent être conservés avec ou sans le caillot ou les globules rouges pendant : 12 jours au maximum entre 2 et 8 C. 72 heures au maximum entre 15 et 30 C. Si le dosage est effectué plus de 12 jours après le prélèvement, séparer le sérum ou le plasma du caillot, ou des globules rouges et le conserver congelé à une température inférieure ou égale à -20 C. Des échantillons conservés congelés pendant 1 mois n'ont pas présenté de différences de performance. Eviter plus de 3 cycles de congélation/décongélation. Transport Avant d'expédier des échantillons, il est recommandé de les séparer du caillot, des globules rouges ou du gel séparateur. Lorsque des échantillons sont expédiés, ils doivent être conditionnés et étiquetés conformément à la législation régissant le transport des échantillons cliniques et des substances infectieuses. Les échantillons peuvent être expédiés à température ambiante, sur de la glace ou sur de la carboglace. Ne pas dépasser les temps de conservation mentionnés ci-dessus. PROCEDURE Matériel fourni 3L52-25 ou -35 ARCHITECT 25-OH Vitamin D Reagent Kit Matériel requis mais non fourni Analyseur ARCHITECT i System 1L66 ARCHITECT i System Assay CD-ROM - WW (excluding US) - Addition E, version 8.0 ou supérieure ou System e-assay CD-ROM disponible sur sous Support/Technical Library/Assay Files 3L52-01 ARCHITECT 25-OH Vitamin D Calibrators 3L52-10 ARCHITECT 25-OH Vitamin D Controls Pipettes ou embouts de pipette (facultatif) pour la distribution des volumes spécifiés dans l'écran Demande de patient ou Demande de contrôle. Pour de plus amples informations sur le matériel requis pour les procédures de maintenance, se référer au Chapitre 9 du Manuel Technique ARCHITECT. Procédure du dosage Avant de charger l'architect 25-OH Vitamin D Reagent Kit sur l'analyseur pour la première fois, le flacon de microparticules doit être homogénéisé afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont déposées pendant le transport. Après le premier chargement des microparticules, aucune homogénéisation supplémentaire n'est nécessaire. Retourner le flacon de microparticules 30 fois. Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises en suspension. S'il reste encore des microparticules collées au flacon, continuer à retourner ce dernier jusqu'à ce qu'elles soient complètement remises en suspension. Si les microparticules ne sont pas remises en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter le Service Clients Abbott. Une fois que les microparticules ont été remises en suspension, placer un septum sur le flacon. Pour toute information sur la mise en place des septums sur les flacons, se référer au paragraphe Précautions d'emploi de cette notice. Charger le kit de réactifs ARCHITECT 25-OH Vitamin D sur l'architect i System. Vérifier que tous les réactifs nécessaires à la réalisation du dosage sont présents. S'assurer que chaque flacon de réactif est muni d'un septum. Si nécessaire, programmer une calibration. Pour de plus amples informations sur les demandes de calibration, se référer au Chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT. 4

5 Demander les analyses. Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse d'échantillons de patients et de contrôles, ainsi que sur les procédures de fonctionnement en général, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Le volume minimum requis dans le godet-échantillon est calculé par le système et imprimé sur le rapport Liste des demandes. Ne pas prélever plus de 10 répliques à partir du même godet-échantillon. Afin de minimiser les effets de l'évaporation, vérifier qu'un volume d'échantillon adéquat est présent dans le godet-échantillon avant d'effectuer le dosage. Echantillon prioritaire : 60 µl pour le premier dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D plus 10 µl pour chaque dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D supplémentaire prélevé sur le même godetéchantillon. Echantillon maintenu 3 heures à bord : 150 µl pour le premier dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D plus 10 µl pour chaque dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D supplémentaire prélevé sur le même godet-échantillon. Echantillon maintenu > 3 heures à bord de l'analyseur : un volume supplémentaire est requis. Pour de plus amples informations sur l'évaporation et les volumes des échantillons, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge échantillon afin de s'assurer que le volume d'échantillon de patient est suffisant. Préparer les calibrateurs et les contrôles. Homogénéiser les calibrateurs et les contrôles ARCHITECT 25- OH Vitamin D en les retournant délicatement avant l'emploi. Pour obtenir les volumes requis de calibrateurs et de contrôles ARCHITECT 25-OH Vitamin D, tenir les flacons à la verticale et distribuer 5 gouttes de chacun des calibrateurs ou 5 gouttes de chacun des contrôles dans les godets-échantillons respectifs. Charger les échantillons. Pour de plus amples informations sur le chargement des échantillons, se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Appuyer sur la touche LANCER. Pour de plus amples informations sur les principes de fonctionnement, se référer au Chapitre 3 du Manuel Technique ARCHITECT. Pour obtenir une performance optimale de l'analyseur, il est important d'effectuer les procédures de maintenance de routine décrites au Chapitre 9 du Manuel Technique ARCHITECT. Si les procédures du laboratoire requièrent une maintenance plus fréquente, se conformer à ces exigences. Procédures de dilution des échantillons Les échantillons présentant une concentration en 25-OH vitamine D > 160,0 ng/ml (> 400,0 nmol/l) seront annotés >160.0 ng/ml ( >400.0 nmol/l ) et peuvent être dilués avec un échantillon à concentration faible en 25-OH vitamine D, soit 10,7 ng/ml ( 26,8 nmol/l). Les dilutions manuelles doivent être réalisées de la manière suivante : Ajouter 100 μl de l'échantillon de patient à 100 μl d'un échantillon à concentration faible en 25-OH vitamine D (dilution au 1/2). Les concentrations sont calculées comme suit : Concentration (échantillon à concentration élevée) = Concentration (échantillon dilué au 1/2) x 2 - Concentration (échantillon à concentration faible) Calibration Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D exige une recalibration à intervalles de 7 jours. Pour effectuer une calibration du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D, analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un échantillon de chaque niveau de contrôle 25-OH vitamin D doit être analysé afin d'évaluer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs des contrôles du dosage se situent dans les limites de concentration spécifiées dans la notice des contrôles. Les calibrateurs doivent être chargés en position prioritaire. Plage de calibration : 0,0 à 160,0 ng/ml (0,0 à 400,0 nmol/l). Pour de plus amples informations sur la procédure de calibration d'un dosage, se référer au Chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT. PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE Le contrôle de qualité recommandé pour le dosage ARCHITECT 25- OH Vitamin D consiste à analyser un échantillon de chaque niveau de contrôle une fois toutes les 24 heures chaque jour d'utilisation. Si les procédures du contrôle de qualité du laboratoire requièrent une utilisation plus fréquente des contrôles pour vérifier les résultats d'analyses, se conformer à ces exigences. Des contrôles supplémentaires peuvent être analysés conformément à la réglementation en vigueur ou aux exigences d'accréditation du dosage ainsi qu'à la procédure de contrôle de qualité du laboratoire. Chaque laboratoire doit définir ses propres limites de contrôles afin de surveiller la performance du dosage. Si la valeur d'un contrôle ne se situe pas dans les limites définies, les résultats des échantillons analysés dans la même série ne doivent pas être validés et devront être réanalysés. Une recalibration peut être nécessaire. Vérification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de vérification des performances du dosage mentionnées dans la notice, se référer à l'annexe B du Manuel Technique ARCHITECT. Le dosage ARCHITECT 25- OH Vitamin D appartient au groupe 2. RESULTATS Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D utilise une méthode de traitement des données par ajustement de la courbe logistique à 4 paramètres (4PLC, pondération en Y) pour créer une courbe de calibration. Calculs L'ARCHITECT i System calcule le signal chimiluminescent moyen des calibrateurs A à F à partir de deux répliques des calibrateurs A à F, génère une courbe de calibration et mémorise le résultat. L'unité de résultat par défaut du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est le ng/ml. Annotations La rubrique Annotations peut contenir des informations sur certains résultats. Une description des annotations qui peuvent apparaître dans cette rubrique est fournie au Chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Intervalle de mesure (domaine de mesure) L intervalle de mesure du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est de 8,0 ng/ml à 160,0 ng/ml (20,0 nmol/l à 400,0 nmol/l). LIMITES DE LA METHODE Si les résultats de vitamine D obtenus ne correspondent pas à l'observation clinique, des tests supplémentaires sont recommandés afin de pouvoir confirmer le résultat. Pour établir un diagnostic, les résultats doivent être utilisés en association avec d'autres données disponibles, telles que les symptômes, les résultats d'autres dosages, les données cliniques, etc. Les anticorps hétérophiles présents dans le sérum humain peuvent réagir avec les immunoglobulines des réactifs, interférant ainsi avec les dosages immunologiques in vitro. 17 Les patients régulièrement en contact avec des animaux ou des produits contenant du sérum d'origine animale peuvent être sujets à cette interférence et fournir de ce fait des valeurs anormales. Pour établir un diagnostic, de plus amples informations peuvent être nécessaires. Les échantillons prélevés sur des patients auxquels ont été administrées des préparations d'anticorps monoclonaux de souris à des fins diagnostiques ou thérapeutiques peuvent contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). 18,19 De tels échantillons peuvent donner des résultats faussement abaissés ou élevés lorsqu'ils sont analysés avec des kits de dosage qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris. 18 VALEURS ATTENDUES Il est recommandé à chaque laboratoire d'établir ses propres valeurs de référence qui peuvent être spécifiques à la population en question, en raison de facteurs géographiques, saisonniers, alimentaires, environnementaux ou individuels. Une étude destinée à déterminer les valeurs de référence a été menée sur la base du protocole C28-A3 20 du Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Des échantillons de sérum prélevés sur une population néerlandaise apparemment en bonne santé, pendant l'été (mois de juin à septembre) et pendant l'hiver (mois de mars à mai, novembre et décembre) ont été analysés en deux répliques à l'aide du dosage ARCHITECT 25- OH Vitamin D. Le groupe d'échantillons de référence a été sélectionné à l'aide d'un questionnaire médical sur la base des critères suivants : sujets âgés de 17 à 60 ans, habitudes alimentaires normales (aucun régime), absence de supplémentation nutritionnelle, absence de maladie osseuse ou de rhumatisme, absence de vacances récentes au soleil ou 5

6 de bains de soleil récents, absence d'un traitement hospitalier actuel, de maladie chronique (notamment de diabète, d'insuffisance rénale, de cholestérolémie). Ont été exclus par ailleurs les sujets présentant des valeurs hors de la normale pour l'i PTH (15,0 68,3 pg/ml) et le calcium (2,10 2,55 mmol/l). Les valeurs obtenues sont résumées dans le tableau suivant.* Saison Sexe Eté Hiver Total Femmes Hommes Unité n ,5 ème percentile 9,5 9,4 9,4 15,7 8,8 ng/ml 97,5 ème percentile 55,5 59,1 52,4 60,3 46,3 ng/ml * Données indicatives ; les résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre et selon les régions géographiques. Actuellement, un débat est un cours sur la plage de référence recommandée de la vitamine D dans le sérum, mais un groupe d'experts a récemment recommandé une plage cible d'au moins 30 à 40 ng/ml 21. CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Les données figurant à la partie CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES ont été obtenues sur un ARCHITECT i2000 SR System. Les résultats de dosage obtenus dans différents laboratoires peuvent varier des données présentées dans cette notice. Reproductibilité Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est conçu de manière à présenter une reproductibilité 10 % (% CV total). Une étude a été menée avec le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D sur la base du protocole EP5-A2 du CLSI 22. Six échantillons dont 3 ARCHITECT 25-OH Vitamin D Controls et 3 panels sériques ont été analysés en double, à l'aide de 2 lots de réactifs, 2 fois par jour, pendant 20 jours sur 1 appareil. Les résultats de cette étude sont résumés dans le tableau suivant. Echant. Contrôle bas Contrôle moyen Contrôle haut Panel de sérum 1 Panel de sérum 2 Panel de sérum 3 Conc. Lot de moy. Intra-série Total réactifs n (ng/ml) E.T. CV (%) E.T. CV (%) ,0 0,709 3,7 0,712 3, ,5 0,589 3,0 0,889 4, ,5 0,873 2,3 1,142 3, ,0 0,879 2,3 1,062 2, ,4 1,470 1,9 2,201 2, ,3 1,485 1,9 2,034 2, ,0 0,714 3,1 0,912 4, ,4 0,548 2,4 0,780 3, ,5 1,095 2,6 1,346 3, ,1 0,668 1,7 1,274 3, ,4 1,088 1,4 2,064 2, ,3 1,242 1,7 1,869 2,6 Linéarité En vue d'établir la plage linéaire du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D, une étude a été menée sur la base du protocole EP6-A du NCCLS 23. Quatre paires d'échantillons ont été préparées avec 11 dilutions pour chaque paire en mélangeant un échantillon à concentration élevée en 25-OH vitamine D (concentration comprise entre 78,4 ng/ml et 165,5 ng/ ml) dans des rapports déterminés avec un échantillon à concentration faible en 25-OH vitamine D (concentration comprise entre 0,2 ng/ml et 10,7 ng/ml) et analysées à l'aide du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D. En utilisant un écart absolu de la linéarité 20 %, une plage linéaire de 9,4 ng/ml à 165,5 ng/ml a été déterminée pour le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D. Domaine de mesure Le domaine de mesure est défini comme étant la plage de valeurs en ng/ml correspondant aux limites de performance acceptable en terme d'imprécision et de biais pour un échantillon non dilué. Pour les études de vérification décrites dans cette notice, la plage était comprise entre 8,0 ng/ml et 160,0 ng/ml (20,0 nmol/l à 400,0 nmol/l). Sensibilité Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D est conçu de manière à présenter une limite du blanc (LoB) 4,0 ng/ml, une limite de détection (LD) 10,0 ng/ml et une limite de quantification (LQ) 20 ng/ml. Sur la base du protocole EP17-A 24 du CLSI, une étude a été menée sur 4 échantillons à concentration zéro (Calibrator A) et 8 échantillons présentant des concentrations en 25-OH vitamine D comprises entre 3,4 ng/ml et 9,5 ng/ ml. Ces échantillons ont été analysés à l'aide de 2 lots de réactifs et de 2 analyseurs lors de 5 séries différentes effectuées sur une période d'au moins 5 jours. Lors de cette étude, la LoB était de 1,9 ng/ml, la LD de 3,1 ng/ ml et la LQ de 8,0 ng/ml. Spécificité La spécificité du dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D a été évaluée en analysant les substances à réactivités croisées figurant dans le tableau ci-dessous. Une étude a été menée avec le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D sur la base du protocole EP7-A2 25 du CLSI. Des parties aliquotes de l'architect 25-OH Vitamin D Calibrator A ont été surchargées avec des substances susceptibles de provoquer une réactivité croisée aux concentrations indiquées avant de déterminer leur concentration en 25- OH vitamine D. Les résultats de cette étude sont résumés dans le tableau suivant. Substance à réactivité croisée potentielle Concentration ng/ml Réactivité croisée (%) a 25-OH vitamine D OH vitamine D Vitamine D 2 (ergocalciférol) ,1 Vitamine D 3 (cholécalciférol) ,3 24,25-(OH) 2 vitamine D ,25-(OH) 2 vitamine D ,6 3-épi 25-OH vitamine D ,7 Paricalcitol (Zemplar) 24 0,4 a Réactivité croisée = (%) Valeur moyenne éch. surchargé (ng/ml) - Valeur moyenne éch. non surchargé (ng/ml) Concentration de la substance à réactivité croisée potentielle (ng/ml) x 100 Interférence Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D a été conçu de manière à présenter une interférence potentielle 10 % avec l'hémoglobine, la bilirubine, les triglycérides, les protéines, le facteur rhumatoïde, les HAMA (anticorps humains anti-souris) et les globules rouges. L'interférence a été démontrée par une étude réalisée conformément au protocole EP7-A2 du CLSI. Les résultats de cette étude sont résumés dans le tableau suivant. Substance potentiellement interférente Plage de récupération (%) a Concentration Hémoglobine b 200 mg/dl Bilirubine 20 mg/dl Triglycérides mg/dl Protéines (albumine humaine) 12 g/dl Facteur rhumatoïde c 400 UI/ml HAMA ng/ml Globules rouges 0,4 % (v/v) a Récupération (%) = Valeur moyenne observée (ng/ml) Valeur moyenne du contrôle (ng/ml) x 100 b Avec des concentrations d'hémoglobine de 200 mg/dl à 500 mg/dl, le pourcentage de récupération était compris entre 90 % et 62 %. c Pour les échantillons avec des concentrations en facteurs rhumatoïdes comprises entre 400 UI/ml et 800 UI/ml, le pourcentage de récupération était compris entre 107 à 118 %. Comparaison des méthodes Le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D a été conçu de manière à fournir un coefficient de corrélation 0,80 pour les échantillons de sérum lors de l'évaluation par rapport au dosage DiaSorin LIAISON 25-OH Vitamin D Total. Une étude a été effectuée sur le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D avec une analyse de régression par la méthode de Passing-Bablok 26. Les données de cette étude sont résumées dans le tableau et le graphique suivants.* 6

7 Méthode de Ordonnée à Coefficient de régression n Pente l'origine corrélation Passing- Bablok a 108 1,02-0,54 0,94 a Méthode de régression linéaire sans hypothèses particulières concernant la distribution des échantillons et des erreurs de mesure. * Données indicatives ; des variables telles que les différences au niveau de la taille d'échantillonnage et des populations d'échantillons peuvent affecter la corrélation du dosage, c'est pourquoi les résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre. Lors de cette évaluation, les échantillons sériques analysés présentaient des concentrations comprises entre 8,2 ng/ml et 70,5 ng/ml par le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D et entre 5,1 ng/ml et 63,2 ng/ml par le dosage DiaSorin LIAISON 25-OH Vitamin D Total. Les échantillons utilisés lors de cette étude provenaient d'un centre de recherche clinique. ARCHITECT 25-OH Vitamin D vs. DiaSorin LIAISON 25-OH Vitamin D Total (Passing-Bablok) (ng/ml) ARCHITECT 25-OH Vitamin D vs. Méthode CPL-SM/SM 25-OH Vitamine D (Passing-Bablok) (ng/ml) DiaSorin LIAISON 25-OH Vitamin D Total (ng/ml) (ng/ml) Les mêmes échantillons ont été mesurés à l'aide d'une méthode chromatographique (CPL-SM/SM) et évalués par rapport au dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D. L'analyse de régression a été effectuée selon la méthode de Passing-Bablok. Les données de cette étude sont résumées dans le tableau et le graphique suivants.* Méthode de Ordonnée à Coefficient de régression n Pente l'origine corrélation Passing- Bablok a 107 1,01-1,45 0,90 a Méthode de régression linéaire sans hypothèses particulières concernant la distribution des échantillons et des erreurs de mesure. * Données indicatives ; des variables telles que les différences au niveau de la taille d'échantillonnage et des populations d'échantillons peuvent affecter la corrélation du dosage, c'est pourquoi les résultats obtenus peuvent varier d'un laboratoire à l'autre et différer de ces données. Par ailleurs, des variables de la méthode par CPL-SM/SM, telle que la technique d'extraction, la méthode d'ionisation, le type de séparation chromatographique et le type de standard interne peuvent avoir un impact sur les résultats CPL-SM/SM. Les résultats obtenus peuvent ainsi varier d'un laboratoire à l'autre et différer de ces données 27. Lors de cette évaluation, les échantillons sériques analysés présentaient des concentrations comprises entre 8,2 ng/ml et 70,5 ng/ml avec le dosage ARCHITECT 25-OH Vitamin D et entre 7,5 ng/ml et 64,4 ng/ml avec la méthode CPL-SM/SM. CPL LC-MS/MS SM/SM 25-OH Vitamin D (ng/ml) (ng/ml) BIBLIOGRAPHIE 1. Pilz S, Vitamin D status and arterial hypertension: a systematic review. Nat. Rev. Cardiol. 2009;6: Souberbielle JC, Evaluating vitamin D status. Implications for preventing and managing osteoporosis and other chronic diseases. Joint Bone Spine 2006;73: Cavalier E, Vitamin D: current status and perspectives. Clin Chem Lab Med 2009; 47(2): Peterlik M, Vitamin D and calcium insufficiency-related chronic diseases: an emerging world-wide public health problem. Int. J. Environ. Res. Public Health 2009;6: Grant WB, Estimated benefit of increased vitamin D status in reducing the economic burden of disease in western Europe. Prog. Biophys. Mol. Biol. 2009;99: Holick MF, Vitamin D deficiency. N. Engl. J. Med. 2007;357: Autier P, Vitamin D supplementation and total mortality: A metaanalysis of randomized controlled trials. Arch Intern Med. 2007; 167(16): Bischoff-Ferrari HA, Estimation of optimal serum concentrations of 25-hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am J Clin Nutr 2006; 84: Steingrimsdottir L, Relationship between serum parathyroid hormone Levels, vitamin D sufficiency, and calcium intake. JAMA 2005;294(18): Grant WB, Current impediments to acceptance of the ultraviolet-bvitamin D-cancer hypothesis. Anticancer Res. 2009;29: Pilz S, Low vitamin D levels predict stroke in patients referred to coronary angiography. Stroke 2008;9: Bischoff-Ferrari HA, Fall prevention with supplemental and active forms of vitamin D: a meta-analysis of randomised controlled trials. BMJ 2009;339:b US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration, 29 CFR Part , Bloodborne pathogens. 14. US Department of Health and Human Services. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 5th ed. Washington, DC: US Government Printing Office; January World Health Organization. Laboratory Biosafety Manual. 3rd ed. Geneva: World Health Organization; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved Guideline Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; Boscato LM, and Stuart MC. Heterophilic antibodies: A problem for all immunoassays. Clin Chem 1988;34:27. 7

8 18. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, et al. Sandwich -type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34: Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45: Clinical and Laboratory Standards Institute. Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline - Third Edition. CLSI Document C28-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Souberbielle JC, Vitamin D and musculoskeletal health, cardiovascular disease, autoimmunity and cancer: Recommendations for clinical practice. Autoimmun Rev 2010;9: Clinical and Laboratory Standards Institute. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods: Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document EP5-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline. NCCLS document EP6-A. Wayne, PA: NCCLS; Clinical and Laboratory Standards Institute. Protocols for Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation: Approved Guideline. CLSI Document EP17-A. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Clinical and Laboratory Standards Institute. Interference Testing in Clinical Chemistry: Approved Guideline - Second Edition. CLSI Document EP7-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, Passing HA, Bablok W. New biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21: Wallace AM, Measurement of 25-hydroxyvitamin D in the clinical laboratory: Current procedures, performance characteristics and limitations. Steroids 2010;75: Les brevets américains suivants s'appliquent à l'architect i System ou à ses composants. Il existe également d'autres brevets et demandes de brevets similaires aux Etats-Unis et dans le monde entier ARCHITECT et Chemiflex sont des marques commerciales d'abbott Laboratories dans plusieurs pays. Toutes les marques commerciales sont la propriété de leurs détenteurs respectifs. ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany Produit par Biokit S.A., Barcelona, Spain pour Abbott Octobre Abbott Laboratories 8