Etat des lieux : Exemple de l infection par le VIH et de la thérapeutique anti-vih
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- Gisèle Desmarais
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1 Etat des lieux : Exemple de l infection par le VIH et de la thérapeutique anti-vih
2 Biomarqueurs : Intérêt dans les infections chroniques PrP-res GAPDH VIH CD4 CVp CVc etc.
3 Infection par le VIH : 3 phases 2 versants Infection Séroconversion Phase asymptomatique ARC/SIDA Décès Lymphocytes T CD4+ ARN VIH Virologique Anticorps anti-env CTL Immunologique Anticorps anti-p semaines 2-12 ans 2-3 ans
4 Infection par le VIH : 3 phases 2 versants Virologique Immunologique 2 types différents de biomarqueurs
5 Biomarqueurs virologiques Antigénémie p24 (Préhistoire) Culture/coculture et isolement du virus (Préhistoire) CV plasmatique 1996 CV cellulaire
6 Biomarqueurs Immunologiques -microglobuline (Préhistoire) CRP Taux lymphocytes T CD4+ circulants
7 Thérapeutique anti-vih CCR5 Antagonist/Entry Inhibitor NRTI, Nucleoside reverse transcriptase inhibitor NNRTI, Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor Integrase Inhibitor PI, protease inhibitor Darunavir Enfuvirtide Atazanavir Emtricitabine Fosamprenavir Tipranavir Maraviroc Raltegravir Etravirine Saquinavir Ritonavir Indinavir Nevirapine Nelfinavir Delavirdine Tenofovir Lopinavir/r Amprenavir Efavirenz Abacavir 3TC AZT ddl ddc d4t CVp
8 Thérapeutique anti-vih Virus libre CCR5 Antagonist/Entry Inhibitor Fusion Binding NRTI, Nucleoside reverse transcriptase inhibitor NNRTI, Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor Transcription inverse Integrase Inhibitor Integration Synthèse protéique et assemblage Bourgeonnement PI, protease inhibitor Maturation
9 Thérapeutique anti-vih Décès 70 à 80 % des patients Charge virale cellulaire Lymphocytes T CD4+ Utilisation d IP Charge virale plasmatique Temps Baisse de la charge virale plasmatique Remontée du nombre de lymphocytes T CD4+ Maintien ou diminution très lente de la charge virale cellulaire
10 Thérapeutique anti-vih 3 ème biomarqueur ou «biomarqueur thérapeutique»
11 Taux, plasmatique et intracellulaire, des anti-vih
12 Taux, plasmatique et intracellulaire, des anti-vih Back et al., 2000 Une concentration insuffisante de molécule conduit à une réplication virale, à l émergence de résistances, et un rebond viral
13 Taux, plasmatique et intracellulaire, des anti-vih Comme un sur-dosage est susceptible d engendrer des effets indésirables Drug concentration TOXICITY EFFICACY (with clinically acceptable toxicity) C trough C trough MEC LACK OF EFFICACY dosing interval C trough time Back et al., 2007
14 Rôle des CYP450 et transporteurs Back et al., 2005 Lee et al., 1998 Métabolisme joue un rôle majeur dans les concentrations circulantes des molécules anti-vih et donc leur efficacité
15 Rôle des CYP450 et transporteurs Rapport Delfraissy
16 Rôle des CYP450 et transporteurs Anticancéreux AZT SAPK/JNK ERO TNF- UV Médicaments Choc thermique Différenciation Facteurs stimulant la voie des MAPK Cascade de Signaux régulés par l EGF UV Médicaments Choc thermique Différenciation fos/jun PKC Cascade MAPK Cytokines type IL-6 AP-1 NF- B NF-IL6 Cytokines type IL-6 Voie de transduction Sp-1 NF-Y à à Influence des molécules anti-vih sur l expression de ces enzymes ou transporteurs
17 Fonctionnalité des lymphocytes T CD4+? Cas particulier des patients en dissociation immuno-virologique 5 25% des patients ne remontent pas leur taux de LT CD4+ alors que leur CVp reste indétectable Persistance de la CV cellulaire Capacité des LT à répondre à un Ag (PPD, TT, CMV) et à se multiplier en réponse à cette activation _ Réponse proliférative ex vivo Régénération des LT CD4+ «naïfs» et «mémoire» et leur niveau d activation (CD45RO/RA, HLA-DR) _ Cytométrie en flux Rôle de la mort apoptotique (CD95, Annexin V) Déplétion centrale (Migrants thymiques via TREC _ PCR) Activation anormale du système immunitaire (Expression des cytokines et Récepteurs solubles aux cytokines)
18 Génotypage Mise en évidence des mutations par séquençages des gènes codant les cibles de la thérapeutique anti-vih actuelle i.e. TI protéase du VIH, gp120/gp41 Trousses commercialisées ou selon recommandations de groupe ANRS AC11 Interprétation à l aide d algorithmes, densifiés au fur et à mesure Distinguer mutations dites de «polymorphisme» souvent sans conséquence et les mutations de résistance Gain de temps / phénotypage, compatible avec un changement rapide de traitement Analyse des résultats délicates
19 Phénotypage (Phénotypage virtuel) Tester la sensibilité de l isolat viral en déterminant la CI50 vis-à-vis des différentes molécules anti-vih actuelles Equipement spécialisé (dont laboratoire de haute sécurité de niveau L3) nécessitant centralisation des échantillons et des tests Frein à la dissémination de ce type de tests Phénotypage virtuel (Virco) = Interprétation phénotypique du génotype via large base de données
20 Biomarqueurs dans l infection par le VIH : Synthèse CVp CVc CD4 Tx plasm. Tx intracell. CYP/Tr. ABC Genot. Phenot. Autres Collaboration étroite entre cliniciens, virologues et pharmacologues Est-ce que que llamélioration de de la la thérapeutique anti-vih passe par par une une suivi biologique & pharmacologique personnalisé plus plus que que par par llidentification de de nouvelles cibles et/ou molécules à visée antirétrovirale?
21 Biomarqueurs communs avec les hépatites virales et les cancers Physiopathologie et mécanismes moléculaires les gouvernant différents En revanche, certaines molécules e.g. dérivés nucléosidiques, structurellement et mécanistiquement identiques Rôle des enzymes du métabolisme sur l échec des thérapeutiques anti-cancéreuses i.e. GST-pi Taux plasmatique des molécules et intracellulaire de leur métabolite actif triphosphorylé dans les cellules (tumeurs non-solides)
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