DOSAGE DES CD4/CD8 PAR CMF DANS L INFECTION HIV. Y.Flici, S.Benabdellah, M.Ardjoun. ( Alger, CTSA )

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1 DOSAGE DES CD4/CD8 PAR CMF DANS L INFECTION L HIV Y.Flici, S.Benabdellah, M.Ardjoun. ( Alger, CTSA )

2 GENERALITES L action du VIH sur le système immunitaire se manifeste d au moins deux façons : D une part, les lymphocytes T h (CD4 + ) sont diminués. D autre part les T c (CD8 + ) sont actives et voient leur nombre augmenté. Ceci donne un rapport CD4/CD8 inverse ( généralement g ratio inférieur à 1).

3 DOSAGE DE CD4/CD8 PAR CYTOMETRIE EN FLUX L utilisation largement répandue r de la cytométrie trie en flux permet le dosage des CD4 ET CD8 Le FACSCount est un cytomètre tre en flux spécialement adapté à la numération des lymphocytes T : CD4 +, CD8 + et CD3 + dans le sang non lysé.

4 FACSCount Appareil compact. Système informatique intégr gré. Réactif prêt à l emploi, sous forme de paires de tubes.

5 MODE OPERATOIRE Le sang est collecté dans des tubes EDTA et gardé à température ambiante. FACSCount nécessite l utilisation l d un d contrôle ( sujet hématologiquement h sain) pour le réglage r de l appareil. l

6 MODE OPERATOIRE 1) Dans chaque paire de tubes, mettre 50µl l de sang, bien refermer et agiter légèrement. l 2) Incuber 60 à 120 mn à température ambiante et à l obscurité. 3) Ajouter dans chaque tube 50µl l de la solution de fixation, agiter légèrement. l 4) Ajouter dans les deux paires de contrôle 50µl dans chaque tube de solution de contrôle. 5) La lecture se fait à l aide du FACSCount.

7 POPULATIONS ETUDIEES Notre étude au sein du laboratoire de cytomètrie trie a porté sur le dosage des CD4/CD8 dans deux populations : Une population témoin t de 51 individus adultes, composée e de 24 hommes et 27 femmes agés de 20 à 60 ans. Une population de 113 personnes (51 sidéens et 62 séropositifs) s composée de 23 femmes et 90 hommes agés de 20 à 70 ans (1 cas).

8 RESULTATS DU DOSAGE CD4/CD8/CD3 EN FONCTION DU SEXE DANS LA POPULATION TEMOIN SEXE CD (Cellule/µl) MASCULIN n=24 FEMININ n=27 t* P** Interprétation CD ± ± >0.5 NS CD ± ± <0.01 SIGNIFICATIF CD ± ± >0.50 NS CD4/CD ± ± >0.20 NS *TEST DE STUDENT **PROBABILITE NS=non significatif ddl=48

9 DOSAGE CD4/CD8 EN FONCTION DU SEXE DANS LA POPULATION TEMOIN RATIO CD4/CD8 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 1,6 MASCULIN 1,82 FEMININ

10 RESULTATS DU DOSAGE CD4/CD8/CD3 EN FONCTION DE L AGE L DANS LA POPULATION TEMOIN AGE CD (Cellule/µl) [ [ n=15 [ [ n=15 [ [ n=08 [ [ n=13 CD ± ± ± ± CD ± ± ± ±488.5 CD ± ± ± ±253.7 CD4/CD ± ± ± ± 0.61

11 RESULTATS DU DOSAGE CD4/CD8/CD3 DANS L INFECTION L HIV EN FONCTION DU SEXE SEXE CD (Cellule/µl) MASCULIN n=90 FEMININ n=23 t * P** Interprétation tation CD ± ± > 0.50 NS CD ± ± < 0.50 NS CD ± ± NS CD4/CD ± ± NS *TEST DE STUDENT NS=non significatif **PROBABILITE ddl= 111

12 RESULTATS DU DOSAGE CD4/CD8/CD3 EN FONCTION DE L AGE L DANS LA POPULATION MALADE AGE CD (Cellule/µl) [ [ n=33 [ [ n=29 [ [ n=7 [ [ n=5 CD ± ± ± ± CD ± ± ± ± CD ± ± ± ± CD4/CD ± ± ± ± 0.14

13 POPULATION MALADE EN FONCTION DE L AGEL nombre [ [ [ [ [ [ [ [

14 DOSAGE CD4/CD8 EN FONCTION DU SEXE DANS LA POPULATION HIV RATIO CD4/CD8 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0,45 MASCULIN 0,36 FEMININ

15 COMPARAISON DES CD3/CD4/CD8 ENTRE LA POPULATION TEMOIN ET LA POPULATION MALADE SEXE CD (Cellule/µl) TEMOIN n=51 MALADE n=113 t * P** Interprétation tation CD ± ± < 10-4 TS CD ± ± < 10-6 TTS CD ± ± > 0.50 NS CD4/CD8 1.73± ± < 10-6 TTS *TEST DE STUDENT **PROBABILITE NS=non significatif ddl=162

16 DOSAGE CD3 COMPARANT LES DEUX POPULATIONS 2000 CD TEMOIN TEMOIN MALADE MALADE

17 DOSAGE CD4 COMPARANT LES DEUX POPULATIONS CD TEMOIN TEMOIN MALADE MALADE

18 DOSAGE COMPARANT LE RATIO CD4/CD8 ENTRE LES DEUX POPULATIONS 2 1,8 1,73 1,6 RATIO CD4/CD8 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,43 0,2 0 TEMOIN MALADE

19 DOSAGE COMPARANT LE RATIO CD4/CD8 ENTRE LES DEUX POPULATIONS EN FONCTION DE L AGEL RATIO CD4/CD8 2 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 1,9 1,87 0,22 1,53 0,29 1,59 0,35 0,27 [ [ [ [ [ [ [ [ TEMOIN MALADE

20 51 malades (4 de sexe féminin f et 47 de sexe masculin ) ont bénéficib ficié d un suivi de dosage CD4/CD8 durant les années 2003 à à 10 dosages CD4/CD8 par malade ont été effectués s (de 3 à 6 mois d intervalle d en 5 ans ). Ces malades ont bénéficib ficié parallèlement lement de charges virales HIV par Cobas Amplicor depuis SUIVI DES MALADES DANS L INFECTION L HIV

21 SUIVI DES MALADES DANS L INFECTION HIV Nombre de malades Nombre de prélèvement Pourcentage ( % )

22 QUATRE TYPES DE MALADES SUIVIS Premier Dernier Durée Nombre Taux de CD4 Taux de CD4 de Min-Max Max Min-Max Max malades mois à1 1 ans à 5 ans mois à3 3 ans à 5 ans 27

23 CONCLUSION La valeur du ratio CD4/CD8 dans la population malade ( 0.43 ) est nettement inférieure à celle trouvée dans la population témoin t (1.73 ). Le sexe n a n a aucun effet sur la valeur du ratio dans les deux populations, confirmant ainsi ceux trouve dans la littérature rature.

24 CONCLUSION la CMF est actuellement une méthode m de référence r rence pour le dosage des CD4/CD8. La simplicité de la technique. Rapidité des résultats r (1h 30mn). Son importance dans le suivi et la prise en charge des malades sidéens.