RSV IA. Trousses de PCR en temps réel M.W.S. r-gene DIAGNOSTIC DES INFECTIONS RESPIRATOIRES PARAMÈTRES DÉTECTÉS :
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- Antonin Lamontagne
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1 DIAGNOSTIC DES INFECTIONS RESPIRATOIRES HSV HPIV Legionella pne umophila IB Bordetella pertussis RSV IA VZV Chlamydophila pneumoniae Mycoplasma pneumoniae HBoV Trousses de PCR en temps réel M.W.S. r-gene PARAMÈTRES DÉTECTÉS : Virus de la grippe de type A Virus de la grippe de type B Coronavirus humain (229E, NL63, HKU1, OC43) Virus Respiratoire Syncytial (A,B) Métapneumovirus humain (A,B) Virus parainfl uenza (1,2,3,4) Rhinovirus (A,B,C) Entérovirus (A,B,C,D) Adénovirus (A,B,C,D,E,F,G) Bocavirus (1,2,3,4) Chlamydophila pneumoniae Mycoplasma pneumoniae Legionella pneumophila Bordetella pertussis Bordetella parapertussis HSV VZV CMV EBV HHV6 Contrôle cellulaire
2 CONTEXTE CLINIQUE CARACTÉRISTIQUES La gamme respiratoire MWS r-gene est une gamme composée de trousses complètes de PCR en temps réel pour le dépistage des agents infectieux responsables de pathologies respiratoires. La gamme respiratoire MWS r-gene permet de détecter de nombreux pathogènes respiratoires au sein d une même série. Les infections respiratoires aigües sont responsables de nombreuses hospitalisations, en particulier chez les nourrissons et les jeunes enfants, et sont dues majoritairement à des pathogènes d origine bactérienne ou virale. Les pneumopathies les plus graves, potentiellement mortelles, sont rencontrées principalement chez les jeunes enfants, les personnes âgées, les personnes immunodéfi cientes ou fragilisées (maladie chronique, cancer, soins intensifs...). Etablir un diagnostic d urgence, rapide et fi able, est essentiel pour la prise en charge des patients (ex : antibiothérapie adaptée) et pour empêcher la diffusion de l infection. Les symptomatologies étant similaires, identifi er l agent infectieux nécessite des techniques de diagnostic in vitro appropriées. Les méthodes de culture conventionnelles ne permettent pas d établir un diagnostic exhaustif ; certains virus et bactéries intracellulaires n étant pas ou peu cultivables. La détection multiplexe permet le diagnostic de double voire de triple infections, pouvant avoir des conséquences sur la sévérité de la maladie et sur la stratégie thérapeutique. Les pathogènes respiratoires présentent des saisonnalités variables : certains sont présents tout au long de l année, tandis que d autres ne le sont que lors de pics épidémiques. Ce profi l saisonnier marqué permet d envisager des stratégies de diagnostic adaptées à la saison (hiver/ été), privilégiant la recherche des pathogènes les plus probables en 1ère intention, et laissant la recherche systématique des autres pathogènes en 2ème intention. L établissement rapide d un diagnostic permet de limiter les coûts liés à l hospitalisation et aux traitements non adaptés. DÉPISTAGE Trousses complètes utilisant la technologie 5 nucléase TaqMan pour la détection de nombreux pathogènes essentiellement à tropisme respiratoire. Possibilité de détecter simultanément : CMV, EBV, HSV1, HSV2, VZV, HHV6... grâce à un programme d amplification commun avec la gamme MWS r-gene. POLYVALENCE Possibilité de tester de 1 à plus de 40 pathogènes selon les combinaisons choisies. Diagnostic «à la carte» selon un protocole commun pour les pathogènes à ADN ou à ARN. Résultats en 1 h 30 après extraction. Possibilité de réaliser plusieurs séries dans la même journée. Possibilité de rechercher ensemble ou séparément les virus et les bactéries. CARACTERISTIQUES Amplification en duplex. GAMME MWS r-gene POINTS CLES Présence d un contrôle cellulaire pour la validation de la qualité du prélèvement et de la technique. Présence d un contrôle positif, d un contrôle négatif et d un contrôle interne (extraction/inhibition) avec la trousse Bordetella R-gene. CONCLUSION La gamme respiratoire MWS r-gene est un outil de diagnostic qui vous permet de réaliser un dépistage bactérien ou viral en PCR temps réel.
3 CARACTÉRISTIQUES MWS r-gene Plusieurs trousses complètes Détection multi-cibles Technologie 5 nucléase Taqman Conditions universelles Réactifs prêts à l emploi MWS r-gene Détection des pathogènes ADN - AdV/hBoV r-gene - Chla*/Myco pneumo r-gene Contenu des trousses Prémix spécifique d amplification Contrôle négatif (eau qualité PCR) Contrôle positif spécifique à chaque pathogène MWS r-gene Détection des pathogènes ARN 1 - Infl uenza A/B r-gene - RSV/hMPV r-gene - Rhino&EV/Cc r-gene - HCoV/HPIV r-gene Contenu des trousses Reverse Transcriptase Prémix spécifique d amplification Contrôle négatif (eau qualité PCR) Contrôle positif spécifique à chaque pathogène Descriptif Influenza A/B RSV/hMPV Rhino&EV/Cc AdV/hBoV Chla*/Myco pneumo HCoV/HPIV r-gene r-gene r-gene r-gene r-gene r-gene Ref Ref Ref Ref Ref Ref Principe du test Détection en duplex des pathogènes respiratoires par PCR en temps réel Technologie Techniques des sondes d hydrolyse 5 Nucléase TaqMan Gènes ciblés Infl uenza A: VRS: Rhino&EV: Adenovirus: C. Pneumoniae HCoV Gène M codant pour Gène N codant pour región 5 Gène Hexon Gène OMP2 codant Gène N codant pour une protéine matricielle une Nucléoprotéine Non Codante pour une protéine une Nucléoprotéine membranaire de surface Infl uenza B: hmpv: Contrôle cellulaire : Bocavirus M. Pneumoniae HPIV Gène M codant pour Gène M codant pour Gène HPRT1 Gènes NS1 et VP1 Gène P1 codant pour la Gène N codant pour une protéine matricielle une protéine matricielle Cytadhésine une Nucléoprotéine Pathogènes détectés Infl uenza A VRS A, VRS B, hmpv Rinovirus A,B, C AdV A, B, C, D, E, F, G Chlamydophila Coronavirus humain Infl uenza B hmpv B Enterovirus A, B, C, D hbov 1, 2, 3, 4 Pneumoniae 229E, NL63, HKU1, OC43 Mycoplasma Parainfl uenza Pneumoniae 1, 2, 3, 4 Type d échantillon Prélèvements respiratoires Contrôles inclus Contrôle positif, contrôle négatif, contrôle cellulaire** Délai d obtention des résultats 1h30 après extraction Nombre de tests 60 tests Conservation -18 C/-22 C Instruments validés Extraction : NucliSENS easymag (biomérieux) Amplifi cation : ABI 7500 Fast (Applied Biosystem), MagNA Pure Compact (Roche Diagnostics), QiaSymphony (Qiagen) Dx Real-Time System (Bio-Rad), StepOne (Applied Biosystem), LC480 (Roche), Stratagene (Agilent), Versant kpcr AD (Siemens) Rotor-Gene (Qiagen) Statut Pour diagnostic in vitro. Marquage CE en Europe 1 Ce produit contient la SuperScript III Reverse Transcriptase qui fait l objet d un ou plusieurs brevets américains ou demandes de brevet américains en cours ou des équivalents non américains correspondants, appartenant à la société Life Technologies Corporation et vendu conformément à un accord entre la société Life Technologies Corporation et Argene. Le prix d achat de ce produit inclut des droits limités, nominatifs sous les brevets précédents qui permet son utilisation selon les revendications des brevets pour des activités de détection des virus humains pour un usage diagnostic. Aucun autre droit n est transmis, y compris aucun droit d utiliser ce produit pour des applications médicos-légales. Les informations complémentaires sur l acquisition de droits sous des brevets appartenant à la Société Life Technologies Corporation peuvent être obtenues en contactant le Département Licence, Life Technologies Corporation, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, CA (760) outlicensing@lifetech.com» * Produits appartenant à la liste B LNE/G-MED ** Seulement dans le coffret
4 POINTS CLÉS des trousses de PCR en temps réel La gamme respiratoire MWS r-gene multiplexe PCR permet de détecter la majorité des pathogènes respiratoires en fonction de la combinaison de votre choix! Les autres trousses R-gene... Les trousses R-gene fonctionnent sur le programme PCR de MWS r-gene. Fonctionnement Réactifs prêts à l emploi RT PCR en une étape Programme d amplification commun pour les pathogènes ADN ou ARN Environ 2h30 entre le traitement des échantillons et l obtention des résultats Caractéristiques Marquage CE Tests standardisés avec contrôle positif, négatif et cellulaire inclus Technologie 5 nucléase Taqman Codes couleurs pour une identification rapide des produits et des réactifs Fabrication conforme aux exigences des normes ISO 9001et ISO Polyvalence - CMV R-gene * - CMV HHV6, 7, 8 R-gene * - Adenovius R-gene Détection de plus de 40 pathogènes Possibilité de tester un ou plusieurs pathogènes en fonction de la combinaison choisie Trousses validées sur de nombreux systèmes d extraction automatisés Trousses validées sur les principales plateformes de PCR temps réel Trousses validées sur de nombreux types de prélèvements - HSV1, HSV2, VZV R-gene - EBV R-gene - BK Virus R-gene - Bordetella R-gene - Bordetella parapertussis r-gene * Produits appartenant à la liste B LNE/G-MED
5 Principe des trousses MWS r-gene Échantillon 10µLExtrait Contrôle positif 10µL + 10µLExtrait Eau Contrôle Négatif 15µL Prémix d amplification 15µL Prémix d amplification 15µL Prémix d amplification 530nm 560nm Pathogène 1 Pathogène 2 ou Contrôle Cellulaire 530nm Pathogène 1 560nm Pathogène 2 ou Contrôle Cellulaire 530nm 560nm Pathogène 1 Pathogène 2 ou Contrôle Cellulaire NB : MWS r-gene peut aussi être utilisé avec les produits complémentaires DICO Extra r-gene ou RICO Extra r-gene CONTRÔLE CELLULAIRE Le CELL Control r-gene est un outil de diagnostic pour la vérification de la présence de cellules dans un échantillon ainsi que leur quantification, grâce à la détection du gène de ménage HPRT1. Associé à une quantification virale, le résultat final peut être exprimé en quantification relative, en nombre de copies de virus par cellule et permet de comparer les résultats successifs d un patient pour le suivi d un traitement.
6 Mai 2013 / /007/FR/A / Document non contractuel. biomérieux se réserve le droit de modifier les caractéristiques indiquées sans préavis. BIOMERIEUX, le logo bleu et ARGENE, easymag, NucliSENS et R-gene sont des marques déposées ou des dénominations commerciales qui appartiennent à biomérieux S.A. ou à l une de ses filiales / biomérieux SA RCS Lyon / Photos : Comeuroconcept, C. Ganet / Imprimé en France / THERA Conseil / RCS Lyon B biomérieux S.A Marcy l Etoile France Tel. : +33 (0) Fax : +33 (0) NOM DU PRODUIT CONDITIONNEMENT REF Détection des pathogènes respiratoires Infl uenza A/B r-gene 60 tests RSV/hMPV r-gene 60 tests Rhino&EV/Cc r-gene 60 tests AdV/hBoV r-gene 60 tests Chla/Myco pneumo r-gene * 60 tests HCoV/HPIV r-gene 60 tests Bordetella R-gene 60 tests B Bordetella parapertussis r-gene 60 tests Infl uenza A (M) Group&H1N12009 r-gene 60 tests Trousses R-gene HSV1 HSV2 VZV R-gene 180 tests B EBV R-gene 90 tests B CMV HHV6,7,8 R-gene * 140 tests B CMV R-gene * 90 tests B BK Virus R-gene 90 tests B Enterovirus R-gene 90 tests B Adenovirus R-gene 90 tests B Produits complémentaires CELL Control r-gene 60 tests DICO Extra r-gene 60 tests RICO Extra r-gene 60 tests Quanti FluA QS r-gene 30 tests * Produits appartenant à la liste B LNE/G-MED Pour plus d informations, contactez votre représentant biomérieux local. biomérieux fabrique ses réactifs en conformité avec les normes ccgmp et ISO 13485, biomérieux a conclu un accord de licence sur la PCR en temps réel avec les sociétés F.Hoffmann-La Roche Ltd et Roche Molecular Systems, Inc. En conséquence, l achat de ces produits permet à l acheteur d effectuer l amplifi cation et la détection de séquences d acides nucléiques avec les méthodes décrites dans certains brevets de Roche («5 Nuclease Detection patents and Chemically-Modifi ed Hot Start Enzymes patents») afi n de réaliser un diagnostic in vitro humain. L achat de ces produits ne confère aucun droit général ni aucune licence d aucun type, différent de ce droit spécifi que d utilisation. Utilisation diagnostic in vitro, marquage CE en Europe Lire attentivement les instructions fi gurant sur l étiquetage et/ou la notice d utilisation des produits de diagnostic in-vitro mentionnés.
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