Séro- épidémiologie de la theilériose à Theileria annulata et de la babésiose à Babesia bigemina au Maroc

Transcription

1 ARTICLE ORIGINAL Séro- épidémiologie de la theilériose à Theileria annulata et de la babésiose à Babesia bigemina au Maroc N. EL HAJ, M. KACHANI, M. BOUSLIKHANE, H. OUHELLI, A.T. AHAMI, J. KATENDE et S.P MORZARIA Département de Biologie, Université Ibn Tofail, B.P. 133, Kénitra, Maroc Département de Parasitologie et Maladies Parasitaires, Institut Agronomique et Vétérinaire, Hassan II, B.P. 6202, Rabat-Instituts, Maroc Département de Microbiologie, Immunologie et Maladies contagieuses, Institut Agronomique et Vétérinaire, Hassan II, B.P. 6202, Rabat-Instituts, Maroc Laboratoire de Neurosciences Comportementales et Cognitives, Département de Biologie, Université Ibn Tofail, B.P. 133, Kénitra, Maroc International Livestock Research Institute, P.O. Box 30709, Nairobi, Kenya Auteur chargé de la correspondance : Pr. Malika Kachani ; Téléphone : ; Télécopie: ; E.mail1 : athena. online.co.ma ; E.mail2 : m.kachani@iav.ac.com RÉSUMÉ Une enquête séro-épidémiologique sur les infections par Theileria annulata et Babesia bigemina a été conduite dans cinq des principales régions d élevage bovin laitier au Maroc. Dans chacune des régions, 30 communes et une exploitation par commune ont été sélectionnées en utilisant un échantillonnage en grappe. Un total de 1819 sérums, collecté de tous les animaux présents dans chaque exploitation a été analysé pour détecter les anticorps anti-t. annulata et/ou anti-b. bigemina, au moyen des deux tests sérologiques : immunoperoxydase et ELISA respectivement. La prévalence de T. annulata a été de 41 % à Doukkala, 27 % au Gharb, 66 % au Haouz, 28 % au Loukkoss et 47 % au Tadla. La prévalence de B. bigemina a été de 13 % à Doukkala, 14 % au Gharb et au Loukkos, 16 % au Haouz et 10 % au Tadla. Une proportion de 91 % des élevages étudiés s est avérée séropositive pour T. annulata et 68 % séropositive pour B. bigemina. Au sein de ces élevages, le pourcentage d animaux infectés par les deux protozoaires était de 6 % alors que 51 % des animaux n ont jamais été infectés par Theileria ni par Babesia. D une manière générale, les conditions et les pratiques d élevage dans les régions étudiées ne semblent pas avoir d influence sur la prévalence des deux infections. Ces investigations ont montré que T. annulata et B. bigemina sont prévalentes dans les 5 régions. L information sur les prévalences observées doit être prise en considération pour l élaboration de tout programme de contrôle des maladies transmises par les tiques. MOTS-CLÉS : babésiose - Babesia bigemina - Theilériose tropicale - Theileria annulata - bovins - maladies transmises par les tiques - prévalence - épidémiologie - ELISA - immunoperoxydase. SUMMARY Sero-epidemiology of Theileria annulata and Babesia bigemina infections in Morocco. By N. EL HAJ, M. KACHANI, M. BOUSLIKHANE, H. OUHELLI, A.T. AHAMI, J. KATENDE and S.P. MORZARIA. A sero-epidemiological survey on theileriosis (Theileria annulata infection) and babesiosis (Babesia bigemina infection) was conducted in five of the main dairy cattle areas in Morocco. In each region, a random sample of 30 villages was selected through the cluster method, and one farm was selected in each village. A total of 1819 cattle sera, collected from all animals present in each farm, was tested for anti T. annulata and anti B. bigemina antibodies using two tests, namely immunoperoxydase and ELISA. The prevalence of T. annulata infection was 41 % in Doukkala, 27 % in Gharb, 66 % in Haouz, 28% in Loukkos and 47 % in Tadla. The prevalence of B. bigemina infection was 13 % in Doukkala, 14 % in Gharb and Loukkos, 16 % in Haouz and 10 % in Tadla. 91 % of the herds studied were sero-positive for T. annulata and 68 % were sero-positive for B. bigemina infection. Within these herds, the percentage of infected animals by the two protozoans at the same time was 6 %, while 51 % of animals have never been infected neither by T.annulata nor by B. bigemina. Overall, animal husbandry practices and conditions had no significant influence on the prevalence of both infections. These investigations showed that both T. annulata and B. bigemina are prevalent in the five areas studied. The information on prevalence must be taken into consideration to design any control programme for tick-borne diseases in Morocco. KEY-WORDS : babesiosis - Babesia bigemina - Theileria annulata - tropical theileriosis - tick-borne diseases - prevalence - epidemiology - ELISA - immunoperoxydase. Introduction Parmi les maladies bovines transmises par les tiques, celles causées par les protozoaires du genre Theileria et Babesia constituent une entrave majeure au développement de l élevage bovin en Afrique et dans d autres régions du globe [12]. La theilériose tropicale causée par T. annulata, transmise principalement par les tiques du genre Hyalomma existe dans tout le bassin méditerranéen, au Moyen Orient et au Sud de l Asie [6]. La babésiose à B. bigemina, transmise essentiellement par les tiques du genre Boophilus est très largement distribuée dans toutes les régions tropicales et subtropicales [22]. Au Maroc, la theilériose tropicale est l une des pathologies bovines les plus sévères et les plus importantes économiquement [10]. De nombreuses recherches conduites depuis 1984 ont abouti à la mise au point d un vaccin vivant, à base de lymphocytes infectés par des schizontes de T. annulata [15].

2 190 EL HAJ (N.) ET COLLABORATEURS Différents travaux ont été également entrepris sur la babésiose bovine et ses vecteurs dans différentes régions du pays [2, 19]. Toutefois, les données relatives à l épidémiologie de ces deux infections restent fragmentaires. Leurs prévalences dans les cinq régions d endémie doivent être déterminées avant la mise en place de mesures prophylactiques, par la vaccination et/ou le contrôle des tiques. L objectif de cette étude est d estimer la prévalence de ces deux infections dans 5 des principales régions d élevage bovin au Maroc et d identifier les facteurs de risque, susceptibles de les influencer. Matériel et méthodes 1) RÉGIONS D ÉTUDE L enquête séro-épidémiologique a été effectuée dans cinq des principales régions d élevage bovin au Maroc : Doukkala, Gharb, Haouz, Loukkos et Tadla. Ces régions sont localisées dans la partie Nord-Ouest du pays entre la côte Atlantique à l Ouest et le Rif et les montagnes de l Atlas à l Est (Fig. 1). Toutes ces régions disposent de périmètres irrigués où se concentrent les élevages bovins laitiers en particulier. Elles sont sous l encadrement des Offices Régionaux de Mise en Valeur Agricole (ORMVA) dont l un des principaux objectifs est l amélioration du cheptel bovin local. Le choix de ces régions est lié à l importance de l élevage bovin et sa contribution dans la production laitière. Selon les statistiques officielles du Ministère de l Agriculture, ces régions contiennent 22 % de la population bovine nationale dont 39 % de race améliorée et 9 % de race locale. Leur contribution à la production laitière est de 43 % au niveau national. Dans ces régions, la babésiose et en particulier la theilériose sont considérées, par les autorités vétérinaires, comme étant un facteur limitant au développement de l élevage bovin laitier. 2) PROTOCOLE D ENQUÊTE Chacune des régions a été étudiée séparément en adoptant un échantillonnage en grappe.trente communes ont été sélectionnées par région, de manière aléatoire et simple, à partir de la liste des communes. Une exploitation par commune a été choisie de manière aléatoire à partir d une liste fournie par les vétérinaires, sur la base du dernier recense- Méditerranée Océan Atlantique Régions économiques : 1. Nord Ouest 2. Centre Nord 3. Centre 4. Centre Sud 5. Tensift 6. Est 7. Sud FIGURE 1. Distribution géographique des 5 régions d étude.

3 SÉRO-ÉPIDÉMIOLOGIE DES INFECTIONS PAR THEILERIA ANNULATA ET BABESIA BIGEMINA AU MAROC 191 ment d éleveurs de bovins. Tous les bovins élevés au sein des exploitations visitées ont fait l objet de prélèvements sanguins. Un total de 1819 sérums bovins a été collecté et analysé, au moyen des deux tests sérologiques : un test basé sur l utilisation de la peroxydase sur des éléments figurés (test à l immunoperoxydase) pour identifier les animaux séropositifs pour T. annulata et un test ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) pour révéler les bovins infectés par B. bigemina. Les facteurs liés aux conditions et aux pratiques d élevage, susceptibles d influencer les prévalences des infections ont été identifiés grâce à un questionnaire. Des informations relatives aux conditions et aux pratiques d élevage (conditions agro-hydrologiques, qualité du bâtiment d élevage, pratique de pâturage et/ou de stabulation, traitement et prévention des piroplasmoses) ont été recueillies par entretien direct avec les éleveurs dans chacune des exploitations. 3) ANALYSE SÉROLOGIQUE a) Test à l immunoperoxydase - Antigène : L antigène utilisé dans ce test est le stade macroschizonte de la souche T. annulata Doukkala, isolée par OUHELLI (1986) et maintenue en culture cellulaire dans l azote liquide. Cet antigène a été utilisé à la concentration de cellules /ml, au passage Sérums témoins : Ces sérums positifs ou négatifs pour T. annulata sont issus d animaux ayant servi à vérifier la durée de protection conférée par un vaccin à base de lymphocytes infectés par des schizontes de T. annulata : 4 veaux de race Frisonne ont été vaccinés par injection de lymphocytes infectés par des schizontes de T. annulata Doukkala, à la dose de 10 4 dans 2 ml du milieu RPMI. Ils ont été ensuite infectés par des sporozoïtes de T. annulata à la dose de 1 équivalenttique. Les sérums témoins négatifs ont été prélevés des animaux avant la vaccination (J0) et les sérums témoins positifs ont été prélevés après infection par les sporozoïtes (J28) et dont l analyse par le test d immunofluorescence indirecte (IFI) a révélé la présence d importants titres d anticorps anti- Theileria annulata. - Sérums à tester : Ces sérums ont été prélevés à la veine jugulaire de tous les bovins, existant dans les 150 exploitations visitées. Ils ont été isolés par centrifugation à 3000 g puis stockés à -20 C en deux lots : le premier lot, pour l enquête séro-épidémiologique sur la theilériose à T. annulata et le second lot pour celle sur la babésiose à B. bigemina. - Test : Le test immunoperoxydase, utilisé pour le dépistage de l infection par T. annulata a été développé selon une méthode décrite précédemment par CAMPBELL [5]. La préparation des lames d antigènes a été faite selon la technique préconisée par BURRIDGE et al [4]. Ce test est basé sur l utilisation d une enzyme qui permet la coloration des schizontes. Il est connu pour sa sensibilité et sa spécificité. Il présente l avantage de ne nécessiter qu un microscope photonique. Par ailleurs, la lecture des résultats est plus spécifique et plus objective que pour l IFI et enfin les lames peuvent être stockées pendant une longue durée. Les sérums à tester, dilués au 1 : 160 dans du tampon TBS (Tris buffered saline, (Tris (10X), NHCl (8.5 %)), ph 7.6 ont été incubés à la température ambiante pendant 30 min. Ensuite le deuxième anticorps anti-bovin, conjugué à la biotine (Sigma biotinylated Mouse anti-bovine IgG) a été dilué à 1 : 200 et à 1 : 400, dans le tampon TBS puis additionné et incubé à la température ambiante pendant 30 min. Un complexe biotine-avidine (DAKO ABC complex-hrp), conjugué à l enzyme peroxydase (HRP) qui réagit avec le deuxième anticorps a été ajouté puis incubé durant 30 min à la température ambiante. Le substrat de l enzyme, Diamino Benzidine (Fast DAB), permettant l induction de la coloration a été ajouté et incubé durant 30 min. Les lavages entre les différentes incubations ont été faits au moyen du tampon TBS. A la fin du test, les cellules ont été colorées à l Hématoxyline (Harris s Haematoxylin, (BDH)). La lecture des lames s est faite au moyen d un microscope photonique au grossissement x100. b) ELISA - Antigène : une protéine de 200 kda spécifique du stade mérozoïte de Babesia bigemina a été identifiée comme antigène candidat dans un test ELISA. L ADN qui code pour cette protéine a été cloné, caractérisé et la protéine recombinante exprimée et isolée a réagi fortement avec des sérums issus de bovins infectés expérimentalement par B. bigemina [21]. - Sérums témoins : Trois types de sérums témoins ont été utilisés : Sérum témoin négatif (C - ) : Ces sérums ont été collectés à partir d animaux de race exotique ou de race Boran, nés et élevés dans des conditons indemnes de tiques à l ILRI. L analyse sérologique par l ELISA a révélé l absence d anticorps contre les parasites suivants : Theileria parva, T. annulata, T. mutans, T. taurotratgi, Anaplasma marginale, Cowdria ruminantium, Babesia bigemina, B. bovis, Trypanosoma brucei, T. conglense et T. vivax. Sérums témoins fortement positifs (C ++ ) : Ils ont été prélevés à partir de bovins de race exotique ou de race Boran sains, ne possédant pas d anticorps dirigés contre les parasites précités. Ces animaux ont été infectés expérimentalement par des tiques Boophilus decoloratus infectées par B. bigemina. Les sérums ont été prélevés régulièrement et analysés et ceux ayant révélé d importants titres d anticorps anti B. bigemina ont été utilisés comme témoins positifs. Les sérums témoins positifs (C ++ ) et négatifs (C - ) ont été isolés par centrifugation à g pendant 30 min puis lyophilisés et stockés à +4 C. Un sérum avec des titres moyens d anticorps anti-b. bigemina (C + ) a été également utilisé comme témoin dans ce test. Il a été préparé par dilution du sérum témoin fortement positif: ((C + ) : 10 µl (C ++ ) + 30 µl (C - )). - Sérums à tester : Ce sont des sérums collectés de tous les bovins inclus dans cette étude puis isolés et conservés comme décrit dans le paragraphe Test : Les anticorps anti-b. bigemina ont été recherchés dans les sérums de bovins au moyen d un test ELISA, selon la technique rapportée par TEBELE et al., [20]. Dans ce test,

4 192 EL HAJ (N.) ET COLLABORATEURS une protéine recombinante spécifique à B. bigemina (EP1b) a été utilisée comme antigène. Le kit de diagnostic comprenant l antigène recombinant de B. bigemina, les sérums témoins ainsi que le protocole ELISA nous ont été fournis par l équipe de recherche sur les maladies transmises par les tiques de l ILRI (MORZARIA et al., Nairobi, Kenya). L antigène de B. bigemina, (150 µl),dilué au préalable à 1 : 30 dans du tampon DPBS (Dulbecco s Phosphate buffered saline, ph 7.2 +/- 0.2) a été incubé dans chacun des puits de la microplaque (Nunc-Immunoplate I) à +4 C pendant une nuit. Le blocage des sites non spécifiques a été réalisé avec 300 µl d une solution de blocage (DPBS-0.1 %Tween % caséine) incubée pendant 20 min à 37 C. Les sérums à tester et les sérums témoins ont été dilués à 1 : 100, dans du tampon de dilution (DPBS/0.1 % Tween-20-2 % lait) puis incubés avec l antigène à 37 C pendant 30 min. Le sérum conjugué (anticorps monoclonal anti-bovin IgG1, HRP), dilué à 1 : 4000 dans du tampon de dilution, a été additionné puis incubé à 37 C durant 30 min. Les lavages entre les différentes incubations ont été faits avec du tampon de lavage (DPBS-0.1 %Tween-20). La réaction immunitaire a été révélée par addition et incubation pendant 30 min d une solution contenant le substrat hydrogène peroxyde (1 %) et le chromogène 40 mm 2,2-azinobis 3-éthyl-benzylthiazoline 6-sulfonic acid, ammonium salt (ABTS), dilués dans du tampon sodium citrate à un ph de 4.0. La densité optique a été déterminée au moyen d un lecteur ELISA (Multiscan Plus ELISA, Flow laboratories) à la longueur d onde 414 nm. Les densités optiques obtenues ont été converties en pourcentages de positivité (PP), calculés par rapport à une valeur de référence dans chacune des plaques d un sérum témoin ayant des titres d anticorps très élevés (C ++ ) selon la méthode rapportée par TEBELE et al., [20]. 4) GESTION ET ANALYSE DES DONNÉES Les données de l enquête et les résultats sérologiques correspondants ont été saisis sur un logiciel de gestion de données épidémiologiques (PANACEA). Ce logiciel a servi pour effectuer les différentes analyses descriptives et les comparaisons des différentes proportions à l aide du test χ 2. Résultats Dans les régions d étude (Fig. 1), la prévalence de l infection par T. annulata chez les animaux a été respectivement de : 27 % au Gharb, 28 % au Loukkos, 41 % à Doukkala, 47 % à Tadla et 66 % au Haouz (Fig. 2). Elle a varié en suivant un gradient croissant de l étage bioclimatique sub-humide vers l étage aride. La comparaison des prévalences observées a révélé l existence de trois niveaux statistiquement différents selon les régions : le plus élevé dans la région du Haouz (66 %), le niveau moyen dans les deux régions de Doukkala et de Tadla (41 % et 47 %) et le niveau faible dans les deux régions du Gharb et du Loukkos (27 % et 28 %). Globalement, T. annulata est plus prévalente que B. bigemina. En effet, la proportion d animaux séropositifs pour B. bigemina a été respectivement de 10 % à Tadla, 13 % à Doukkala, 14 % au Gharb et au Loukkos et 16 % au Haouz (Fig. 2). La comparaison des prévalences estimées de la babésiose à B. bigemina a montré que seules les deux régions du Haouz et de Tadla ont été statistiquement différentes. Parmi la totalité des bovins étudiés, 6 % se sont révélés inféctés par les deux protozoaires alors que 51 % n ont jamais été infectés par T. annulata ni par B. bigemina (Fig. 3). La proportion d animaux séropositifs pour T. annulata a été de 36 % et pour B. bigemina de 7 % Séropositifs (%) Doukkala Ghard Haouz Loukkos Tadla Région d étude FIGURE 2. Prévalence de T. annulata et de B. bigemina chez les animaux dans les cinq régions d étude.

5 SÉRO-ÉPIDÉMIOLOGIE DES INFECTIONS PAR THEILERIA ANNULATA ET BABESIA BIGEMINA AU MAROC % 6 % 7 % 36 % T+ B+ B+ T T+ B T B FIGURE 3. Proportions des animaux infectés par T. annulata et/ou B. bigemina. Séropositifs (%) Doukkala Ghard Haouz Loukkos Tadla Région d étude Theileria Babesia FIGURE 4. Proportions de troupeaux séropositifs dans les cinq régions d étude. Afin d évaluer la distribution des deux parasites dans chacune des régions étudiées, le pourcentage de troupeaux infectés a été également déterminé. Les deux parasites étaient largement distribués dans toutes les régions visitées. Au total, 91 % des troupeaux étaient infectés par T. annulata et 68 % par B. bigemina (Fig.4). Les conditions et les pratiques d élevage dans les régions visitées sont globalement favorables à la transmission des deux infections. Parmi les élevages étudiés : 48 % avaient des étables construites en matériaux traditionnels. L enquête a révélé que 40 % des éleveurs traitent systématiquement contre les tiques, 30 % le font uniquement quand ils voient des tiques sur les animaux et 30 % ne pratiquent pas de traitement acaricide (Tableau I). De plus, la période de traitement, l intervalle entre les traitements et la nature des produits acaricides utilisés varient considérablement entre les exploitations. D un autre coté, plus de la moitié des troupeaux (56 %) faisait l objet de pâturage (Tableau I). Enfin, parmi les éleveurs faisant l objet de l enquête seulement 48 % utilisent le traitement spécifique en cas d observation de symptômes des piroplasmoses. Près de la moitié 48 % adoptent des traitements de type traditionnel, suivi ou non par un traitement spécifique (Tableau I). Le traitement tradition-

6 194 EL HAJ (N.) ET COLLABORATEURS Thei : Theileria, Bab. : Babesia (ns) : Non significatif (p > 0.05) Bour : Zones totalement dépendantes des apports pluviométriques TABLEAU I. Influence des conditions d élevage sur la proportion des troupeaux séropositifs pour les deux infections dans les régions étudiées. nel effectué est basé sur l utilisation de douche froide, saignée, cautérisation des ganglions, préparations orales à base d épices et d herbes etc. Le recours à un traitement chimique et spécifique à ces maladies n est souvent appliqué qu à un stade tardif. En effet, l enquête a révélé que différentes modalités de traitement étaient utilisées contre la maladie : un traitement exclusivement spécifique (48 %), un traitement à la fois spécifique et traditionnel (33 %), un traitement exclusivement traditionnel (14.9 %) et pas de traitement (0.8 %). En conclusion, une proportion non négligeable des éleveurs associait la chimiothérapie à la médecine traditionnelle et seulement la moitié traitait correctement en cas de maladie. L analyse des facteurs de risque a révélé que les conditions et les pratiques d élevage ne semblent pas influencer la prévalence des deux infections (Tableaux I et II). En effet, globalement il n y a pas eu de différences significatives entre les proportions totales de troupeaux et d animaux séropositifs selon que les conditions soient favorables ou non à l infestation par les tiques (selon que les étables soient traditionnelles ou en béton, la présence ou non de traitements acaricides, la présence ou l absence de pratique de pâturage). Discussion Les deux protozoaires T. annulata et B. bigemina sont largement distribués dans les cinq régions d étude. La majorité des élevages (91 %) se sont révélés séropositifs pour T. annulata et 68 % pour B. bigemina. Toutefois, la moitié des bovins n ont jamais été infectés par T. annularta ni par B. bigemina. Le pourcentage d animaux infectés en même temps par T. annulata et B. bigermina n était que de 6 %. La prévalence de B. bigemina a été faible par rapport à celle de T. annulata dans toutes les régions étudiées. Toutefois, une enquête précédente ayant intéressé les deux espèces B. bovis et B. bigemina, a révélé l existence de B. bovis dans les régions du Gharb et du Haouz, avec des prévalences respectives de 22 % et de 10 %, [19]. La séroprévalence de B. bigemina observée dans le Gharb a été de 10.8 % mais nulle dans le Haouz, alors que notre étude a révélé qu elle était maximale dans cette région (16 %). Cette différence serait due à la nature des tests de dépistage utilisés. En effet, nos analyses ont été réalisées au moyen d un test ELISA suffisamment spécifique et sensible [20], utilisant un antigène recombinant spécifique de B. bigemina [21]. Les conditions et les pratiques d élevage dans les exploitations visitées ont été étudiées. Elles étaient globalement favorables à la transmission des deux parasites. De nombreuses étables sont conçues en matériaux traditionnels (48 %). Ce qui constitue un environnement adéquat pour l hibernation des tiques Hyalomma detritum detritum, principal vecteur de T. annulata au Maroc [14]. La pratique de pâturage, qui favorise le déplacement des tiques en particulier celles du genre Boophilus, vecteurs essentiels de B. bigemina, était fréquente dans les élevages étudiés (56 %). En effet, au Maroc la tique Boophilus annulatus a été identifiée dans différentes régions à climat humide, sub-humide et semi aride dont notamment les régions étudiées dans notre enquête [1, 2, 19]. D un coté, une proportion non négligeable d éleveurs n a jamais traité contre les tiques. Par ailleurs, l enquête a révélé que les éle-

7 SÉRO-ÉPIDÉMIOLOGIE DES INFECTIONS PAR THEILERIA ANNULATA ET BABESIA BIGEMINA AU MAROC 195 Thei : Theileria, Bab. : Babesia ns : Non significatif (P > 0.05), s : significatif (P < 0.05) Bour : Zones totalement dépendantes des apports pluviométriques TABLEAU II. Influence des conditions d élevage sur la prévalende des deux infections chez les animaux dans les régions étudiées. veurs adoptent souvent des traitements de type traditionnel, en cas d observation des symptômes de l une des deux maladies. Le recours à un traitement chimique et spécifique à chacune des deux maladies n est souvent appliqué qu à un stade tardif après l échec du traitement traditionnel. Les facteurs et les pratiques d élevage semblent être globalement favorables à la transmission des infections par les tiques. Cependant, ces facteurs ne paraissent pas influencer leurs prévalences. Il semblerait donc que les mesures de prévention, entreprises contre les piroplasmoses par les acaricides, soient inappropriées. Un programme de sensibilisation des éleveurs aux différents facteurs de risque et aux mesures de prévention serait bénéfique, en particulier sur le rôle vecteur des tiques, sur leur écobiologie, ainsi que sur la rémanence et la nature des produits acaricides. Le contrôle de la theilériose et de la babésiose bovines au Maroc nécessite la mise en place d une stratégie de lutte appropriée et commune contre ces deux protozoaires et leurs vecteurs. Un programme raisonné de lutte contre les tiques permettrait de réduire les pertes dues aux piroplasmoses. La vaccination contre ces infections permettrait de protéger les animaux exposés dans les régions d endémie. Au Maroc, depuis 1985, un vaccin vivant à base de lymphocytes infectés par des schizontes de T. annulata a fait l objet de nombreuses investigations et d essais sur le terrain [13, 15]. Des expérimentations ont été entreprises pour déterminer son innocuité et son efficacité, la durée de l immunité chez l hôte bovin, l influence des lignées cellulaires vaccinales, la différence de réceptivité entre les race de bovins vaccinés et son effet sur la gestation [15]. Ce vaccin a été utilisé lors d une série de campagnes de vaccination sur le terrain dans une région d endémie, pendant 4 ans [10]. Il a permis la protection contre l infection naturelle et une épreuve de virulence expérimentale. Aucun cas de morbidité ni de mortalité n ont été signalés chez les animaux vaccinés et les tiques ne s infectent pas lorsqu elles se nourrissent sur ces animaux [10]. L étude de faisabilité économique a révélé que la vaccination offre des avantages malgré l existence de certaines contraintes liées à l utilisation d un vaccin vivant [3]. En effet, parmi les éleveurs interrogés, 66 % sont prêts à supporter le coût de la vaccination à un prix de 30 Dhs (1 $ = 10 Dhs) par animal, incluant un coût de production estimé entre 12 et 16 Dhs par dose. Cet investissement serait bénéfique puisque les pertes dues à la theilériose ont été estimées entre 300 et 650 Dhs par animal, sans tenir compte du coût résultant de l utilisation des acaricides [3]. Dans les régions visitées en particulier dans le Gharb et le Loukkos, la babésiose maladie est rencontrée avec des fréquences variables souvent dans un même troupeau [18]. Le contrôle de la babésiose maladie se fait dans différentes régions du monde, en utilisant des vaccins vivants à base de sang infecté par B. bigemina et B. bovis [18]. L administration de ces vaccins après atténuation à des bovins hautement sensibles a montré une faible ou absence de pathogénécité [16, 17, 18]. L utilisation de tels vaccins dans les régions à risque du Maroc permettrait de réduire les pertes qui seraient engendrées par ces protozooses. Par ailleurs, le contrôle par la vaccination doit être impérativement associé à des mesures d accompagnement, notamment l organisation de campagnes de sensibilisation et d information auprès des éleveurs dans les régions à risque.

8 196 EL HAJ (N.) ET COLLABORATEURS Références 1. BAILLY CHOUMARA H., MOREL P.C. et RAGEAU J. : Première contribution au catalogue des tiques du Maroc. Bull. Soc. Ph. Nat., Maroc, 1974, 54, BAILLY CHOUMARA H., MOREL P.C. et RAGEAU J. : Sommaire des données actuelles sur les tiques au Maroc. Bull., Inst. Sc., 1976, 1, BOUSLIKHANE M. : Tropical theileriosis (Theileria annulata) in Morocco : Epidemiological and economic investigations. PhD, University of Reading, U.K., 197 pages, BURRIDGE M.J. et KIMBER C.D. :The indirect fluorescent antibody test for experimental East Coast fever (Theileria parva infection of cattle). Evaluation of a cell culture schizonte antigen. Res, Vet. Sci., 1972, 13, CAMPBELL J.D., El HASNAOUI M., AHMED J.S. et SPOONER, R.L. : An improved serum antibody test for Theileria annulata. In : Proceedings of European Union Third Co-ordination Meeting on Tropical Theileriosis, Antalya, Turkey, 1994, R.L. Spooner et J.D. Campbell ed., 1994, DYER M. et TAIT A. : Control of lymphoproliferation by Theileria annulata. Parasitol. Today, 1987, 3, EL HAJ N. : Theilériose bovine à Theileria annulata : Contribution à l étude de l immunité passive d origine colostrale. Thèse de 3 ème cycle, Université Cadi Ayyad, Marrakech, Maroc, x pages, FERNANDEZ RUVALCABA M., CANTO ALARON G. J. et ABOYTES TORRES R. : Seroprevalence of Babesia spp. and Anaplasma in the municipality of Santiago Ixcuintla, Mexico. Veterinaria Mexico, 1995, 26, FLACH EJ., OUHELLI H., WADDINGTON D., OUDDICH M. et SPOONER R.L. : Factors influencing the transmission and incidence of tropical theileriosis (Theileria annulata infection of cattle) in Morocco. Vet. Parasitol., 1995, 59, FLACH E.J. et OUHELLI H. : The epidemiology of tropical theileriosis (Theileria annulata infection in cattle) in an endemic area of Morocco. Veterinary Parasitolgy, 1992, 44, KACHANI M., OUHELLI H., BOUSLIKHANE M., El HASNAOUI M., EL GUENNOUNI R. et SPOONER R. : Sero-epidemiological survey of tropical theileriosis in Morocco. Investigations on vaccination against theileriosis in Morocco. In : Tropical Animal health And Production. Proceeding of the European Union International Symposium on Ticks and Tick borne diseases, Xi an, China 3-6 September Hunter ed., 1997, 29, MORZARIA S.P. : Ticks and Ticks-borne disease control. In : Proceeding of a joint OAU, FAO and ILRAD. Workshop held in Kampala, Uganda September Dolan T.T ed., 1991, OUHELLI H. : Theilériose bovine à Theileria annulata (Dschunkowsky & Luhs, 1904). Recherche sur la biologie des vecteurs (Hyalomma spp.) et sur les intéractions hôte-parasite, I.N.P., Toulouse, OUHELLI H. et FLACH E. : Epidemiology and control of theileriosis in Morocco. In : Recent developpments in the research and control of Theileria annulata. Proceedings of a workshop held at ILRAD, Nairobi, Kenya, September Editor, Dolan, T.T., 1990, OUHELLI H., KACHANI M., FLACH E., WILLIAMSON S., EL HASNAOUI M. et SPONNER R. : Investigations on vaccination against theileriosis in Morocco. In : Tropical Animal Health and Production. Proceeding of European Union International Symposium on Ticks and Tick borne diseases, Xi an, China 3-6 September Hunter et al., (ed.), 1997, 29, PIPANO E., FISH L., SHKAP V., LEIBOITZ B. et KNEGEL Y. : Reduced virulence of cultured Babesia bovis. First International Conference on Tick-borne Pathogen at the Host vector Interface. An Agenda for Research, 1992a, Sept.,15-18, St Paul, Minnesota, PIPANO E., FISH L., SHKAP V. et FRANCK M. : Low virulence Babesia bovis obtained by in vitro cloning. Journal of parasitology, Suppl., 1992b, 39, PIPANO E. : Vaccines against hemoparasitic diseases in Israel with special reference to quality assurance. In tropical Animal Health And Production. Proceeding of the European Union International Symposium on Ticks and Tick-borne Diseases, Wi an, China, 3-6 Sept. 1996, A.G. Hunter et al., ed., 1997, 29, SAHIBI H., RHALEM A., BERRAG B., GOFF W.L. et CAMUS E. : Bovine babesiosis, seroprevalence and ticks associated with cattle from two different regions of Morocco. Tropical veterinary medecine : molecular epidemiology, hemoparasites and their vectors, and general topiccs. F. JONGEJAN et W. GOFF (ed.), Annals of the New York Academy of Sciences, 1998, 849 : TEBELE N., KATENDE J., SKILTON R., MUSOKE A. et MORZA- RIA S. : A recombinant antigen for the detection of antibodies to Babesia bigemina using an enzyme linked immunosorbent assay. Tick host pathogen interactions : A global perspective. Kruger National Park, South Africa. 28-September, 1, TEBELE N., SKILTON R., KATENDE J., WELLS C.W., NENE V., MORZARIA S. et MUSOKE A. J. : Clonning, characterisation and expression of a 200 kilodaltons diagnostic antigen of Babesia bigemina. J. Clinical Microbiol, 2000, 38, UILENBERG G. : International collaborative research : Significance of tick-borne hematoparasitic diseases to world animal health. Veterinary Parasitology, 1995, 57, WOODFORD J.D., JONES T.W., RAE P.F., BOID R. et BELL SAKYI L. : Seroepidemiological studies of bovine babesiosis on Pamba Island, Tanzania. Veterinary Parasitology, 1990, 37,