ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand

Dimension: px
Commencer à balayer dès la page:

Download "ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand"

Transcription

1 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A. Veyradier, M. Wolf, A. Stepanian, P. Coppo A disintegrin and metalloprotease with thrombospondin type 1 repeats (ADAMTS13) est la protéase spécifique du facteur von Willebrand. En cas de brèche vasculaire, ce dernier permet, grâce à sa structure multimérique, l adhésion des plaquettes au sous-endothélium et l agrégation des plaquettes entre elles dans la microcirculation, où les forces de cisaillement sont élevées. ADAMTS13 régule l activité du facteur von Willebrand en réduisant la taille de ses multimères. Un déficit fonctionnel sévère en ADAMTS13 (activité inférieure à 10 %) est observé dans la majorité des cas de purpura thrombotique thrombocytopénique, une microangiopathie thrombotique définie par la formation spontanée dans la microcirculation sanguine de thrombi plaquettaires responsables d une anémie hémolytique mécanique, d une thrombopénie de consommation et de signes d ischémie multiviscérale. Il s agit d une maladie rare (quatre cas pour un million d habitants et par an) mais gravissime en l absence de traitement immédiat et spécifique (plasmathérapie). Dans 90 % des cas, le purpura thrombotique thrombocytopénique est acquis et dû à la présence d autoanticorps anti-adamts13. Dans les autres cas, il s agit d un déficit constitutionnel de transmission autosomique récessive appelé syndrome d Upshaw-Schulman. Les tests permettant l exploration biologique d ADAMTS13 comprennent la mesure de son activité, de son taux antigénique, du titre des immunoglobulines G anti-adamts13, ainsi que la recherche d une activité inhibitrice circulante anti-adamts13 et de mutations du gène d ADAMTS13. L ensemble de ces analyses fait appel à des techniques hyperspécialisées coûteuses et réservées à des centres experts. Outre les éléments de réponse qu elle peut apporter aux questions concernant la corrélation phénotype/génotype, une meilleure caractérisation structurale et fonctionnelle d ADAMTS13 est cruciale pour évaluer la pertinence d une forme purifiée plasmatique ou recombinante à visée thérapeutique Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés. Mots clés : ADAMTS13 ; Facteur von Willebrand ; Autoanticorps anti-adamts13 ; Purpura thrombotique thrombocytopénique ; Syndrome d Upshaw-Schulman Plan Introduction 1 ADAMTS13 2 Propriétés biochimiques 2 Biosynthèse 2 Structure 2 Clivage protéolytique du VWF 2 Liaison au VWF 3 Régulation 3 Exploration biologique d ADAMTS13 4 Étapes préanalytiques 4 Méthodes biologiques 4 Variations physiologiques et déficits partiels en ADAMTS13 6 Variations physiologiques 6 Déficits partiels en ADAMTS13 6 Déficits sévères en ADAMTS13 6 Définition, épidémiologie, clinique et traitement du purpura thrombotique thrombocytopénique 6 Physiopathologie du purpura thrombotique thrombocytopénique 6 Indications et interprétation de l exploration biologique d ADAMTS13 dans le PTT 7 Conclusion et perspectives 8 Biologie médicale Introduction L hémostase primaire correspond à la formation du clou plaquettaire comme première étape à la réparation d une brèche vasculaire. Le facteur von Willebrand (VWF) est une glycoprotéine plasmatique qui joue un rôle clé dans l hémostase primaire puisqu il est indispensable à l adhésion des plaquettes au sous-endothélium mis à nu par la brèche vasculaire et à l agrégation des plaquettes entre elles à des taux de cisaillement élevés du flux sanguin (microcirculation sanguine) [1].LeVWF est synthétisé dans les cellules endothéliales et dans les mégacaryocytes (où il est stocké respectivement dans les corps de Weibel-Palade et les granules alpha), compartiments cellulaires à partir desquels il est sécrété dans le plasma. La particularité du VWF est d avoir une structure multimérique organisée en association de dimères (eux-mêmes constitués de l association de deux monomères dont le poids moléculaire est de l ordre de 250 kda) : le plus petit multimère est un dimère de 500 kda et les plus grands multimères peuvent atteindre un poids moléculaire de kda. Cette organisation multimérique a une conséquence directe sur sa fonction puisque le pouvoir adhésif du VWF vis-à-vis du sous-endothélium et des plaquettes est proportionnel à la taille du multimère. Dans le plasma circule un éventail de multimères du VWF de différentes tailles classiquement classés en trois groupes : les bas poids moléculaire, les poids moléculaire intermédiaires et les hauts poids moléculaire. 1

2 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand Dans les compartiments cellulaires, il existe en plus des multimères de très haut poids moléculaire du VWF qui ne sont pas retrouvés dans le plasma dans les conditions physiologiques. La régulation de la taille des multimères de VWF dans le plasma repose essentiellement sur l action d une protéase spécifique de clivage du VWF appelée A disintegrin and metalloprotease with thrombospondin type 1 repeats, treizième membre (ADAMTS13) [1]. Cette régulation est cruciale pour prévenir la formation de thrombi plaquettaires au sein de la microcirculation sanguine. ADAMTS13 Propriétés biochimiques En 1996, deux groupes indépendants [2, 3] purifient partiellement la protéase spécifique de clivage du VWF à partir de plasma humain. Cette enzyme est identifiée comme une métalloprotéase d environ 200 kda différente des métalloprotéases matricielles ou des sérine-protéases plasmatiques puisque leurs inhibiteurs habituels n ont aucun effet sur sa propre activité enzymatique in vitro. Son spectre d action apparaît étroit puisqu elle ne dégrade ni le fibrinogène, ni l albumine, ni le collagène ; en revanche, elle hydrolyse spécifiquement le VWF par scission du pont peptidique Tyr1605-Met1606 situé dans son domaine A2. In vitro, son activité enzymatique est potentialisée par les cations divalents (en particulier le Ca 2+ )et par un ph optimal compris entre 8 et 9 ; elle est bloquée en présence d éthylène diamine tétracétique (EDTA). Sa concentration plasmatique est de l ordre de 1 µg/ml. Sa demi-vie dans le plasma, comprise entre 2 et 3 jours, est inhabituellement longue pour une protéase [4], ce qui suggère l existence, en plus de sa forme soluble plasmatique, d une forme liée à un récepteur cellulaire et/ou à un transporteur plasmatique qui n est pas encore identifié. Biosynthèse Le gène de la protéase spécifique du VWF a été identifié simultanément grâce au séquençage de l extrémité N-terminale de la protéine [5-7] et à une stratégie de clonage positionnel [8] conduisant ainsi à la découverte du treizième membre de la famille ADAMTS, dont une vingtaine de membres sont identifiés. Le gène codant ADAMTS13 (ADAMTS13) est localisé sur le chromosome 9q34 et s étend sur 37 kb incluant 29 exons. L acide ribonucléique messager complet comprend 4,6 kb mais il existe un épissage alternatif du gène conduisant à plusieurs variants dont la signification demeure inconnue. ADAMTS13 est synthétisée dans les cellules stellaires périsinusoïdales (ou cellules de Ito siégeant entre les hépatocytes et les cellules endothéliales) du foie [8-10], les cellules endothéliales [11, 12] et les cellules de la lignée mégacaryocytaire [13, 14]. Elle est sécrétée dans le plasma sous forme d une enzyme active. Structure La pré-pro-adamts13 est une monochaîne de acides aminés [6]. Elle comprend un peptide signal (33 acides aminés) et un propeptide (41 acides aminés) dont la séquence C-terminale est compatible avec une protéolyse par la furine. La protéase mature est glycosylée, et cela explique probablement la différence entre sa masse moléculaire calculée (145 kda) et la masse moléculaire apparente de son produit de purification plasmatique (190 kda). Après clivage du propeptide, la forme mature d ADAMTS13 (Fig. 1) comprend un domaine métalloprotéase, un domaine de type désintégrine, un domaine thrombospondine de type 1 (TSP-1), un domaine riche en cystéines contenant une séquence RGDS potentiellement impliquée dans des interactions avec des intégrines, un domaine de type ADAMTS spacer. L arrangement séquentiel spécifique de ces précédents domaines définit les protéines de la famille ADAMTS. En outre, les membres de la famille ADAMTS comprennent une combinaison propre de domaines TSP-1 additionnels et d autres motifs C-terminaux. Après son domaine spacer, ADAMTS13 contient sept autres domaines TSP-1 et deux domaines CUB (Fig. 1). En particulier, ADAMTS13 se distingue des autres membres de la famille ADAMTS par son propeptide particulièrement court et la présence de domaines CUB. La signification fonctionnelle de ces caractéristiques distinctives est inconnue jusqu à présent. Clivage protéolytique du VWF À ce jour, la seule fonction connue d ADAMTS13 est de cliver spécifiquement le VWF (au niveau du pont peptidique Tyr1605- Met1606) afin de limiter la taille (et ainsi le pouvoir adhésif visà-vis des plaquettes) des multimères de VWF circulant dans le plasma, et par conséquent de réguler la formation du clou plaquettaire en réponse à une brèche vasculaire. Le clivage de son propeptide n apparaît pas indispensable à l activité enzymatique d ADAMTS13 [15]. Le domaine catalytique d ADAMTS13 (métalloprotéase) inclut le site actif enzymatique H 224 EXXHXXGXXHD 235 de type adamalysine qui contient des sites de liaison aux ions Ca 2+ et Zn 2+[16,17]. Figure 1. Domaines structuraux et fonctionnels d ADAMTS13. ADAMTS13 est une glycoprotéine monocaténaire composée de la succession des domaines structuraux suivants : un peptide signal (PS), un propeptide (P), un domaine métalloprotéase qui contient des sites de fixation au calcium et au zinc, un domaine désintégrine, un premier domaine thrombospondine de type 1 (TSP-1), un domaine riche en cystéines, un domaine spacer, une succession de sept domaines TSP-1 et deux domaines CUB. La partie N-terminale d ADAMTS13 (allant du domaine métalloprotéase jusqu au domaine spacer inclus) est indispensable au clivage du facteur von Willebrand (VWF) in vitro et in vivo. La partie C-terminale d ADAMTS13 n est pas indispensable à ce clivage in vitro, mais elle l est probablement in vivo puisqu elle est indispensable à la liaison d ADAMTS13 au VWF d une part et à son récepteur endothélial, le CD36, d autre part. 2 Biologie médicale

3 ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A Figure 2. Clivage protéolytique du facteur von Willebrand (VWF) par ADAMTS13. ADAMTS13 intervient dans la régulation de la taille des multimères du VWF afin de limiter son pouvoir adhésif, dans deux situations distinctes. A. À la phase initiale de la sécrétion du VWF par les cellules endothéliales, ADAMTS13 clive les multimères de très haut poids moléculaire du VWF (limitation immédiate de la taille des multimères du VWF avant sa mise en circulation dans le plasma). B. Deuxièmement, au sein du clou plaquettaire formé pour réparer une brèche vasculaire, ADAMTS13 clive les multimères de haut poids moléculaire du VWF liés aux plaquettes (résorption du clou plaquettaire une fois la brèche vasculaire réparée). En outre, des études réalisées en conditions statiques in vitro à partir de protéines recombinantes tronquées ont montré que l activité enzymatique d ADAMTS13 vis-à-vis du VWF ne peut être assurée par le seul domaine métalloprotéase mais requiert au contraire la présence additionnelle d un domaine riche en cystéines et d un domaine spacer [16, 17]. Ces domaines sont donc des sites potentiels de fixation d ADAMTS13 au VWF et sont probablement impliqués dans le mécanisme de reconnaissance du substrat [18, 19]. En revanche, les domaines TSP et les domaines CUB ne sont pas indispensables au clivage du VWF in vitro [16, 17]. Liaison au VWF En conditions statiques in vitro, ADAMTS13 est incapable de se lier au VWF en solution en l absence de traitement préalable du substrat, soit par des contraintes de cisaillement élevées, soit par des agents dénaturants comme l urée ou l hydrochlorure de guanidine, ou encore par son immobilisation sur une surface plastique [20]. Ces conditions induisent donc une modification de conformation du site de liaison du VWF à ADAMTS13 indispensable à la liaison du substrat à son enzyme in vitro (le K d de la liaison d ADAMTS13 au VWF immobilisé est de l ordre de 14 nm) [20]. En conditions hémodynamiques in vitro (système BIAcore), l affinité de la liaison entre le VWF et ADAMTS13 est forte, avec un K d de l ordre de 50 nm. Des expériences réalisées avec des ADAMTS13 recombinantes tronquées confirment le rôle essentiel et coopératif des domaines TSP et CUB dans le phénomène de reconnaissance du substrat [21-23]. Ainsi, les domaines TSP-1 et CUB pourraient permettre à ADAMTS13 de se fixer in vivo aux cellules endothéliales (le CD36 endothélial est un récepteur candidat [24] ) ou aux plaquettes par son extrémité C-terminale, cet ancrage cellulaire pouvant alors être un prérequis à son interaction avec le VWF. Les sites précis de liaison entre le VWF et ADAMTS13 restent à identifier, tant sur le substrat que sur l enzyme. Des indications sont néanmoins disponibles grâce à une approche reposant sur des expériences de liaison de protéines tronquées in vitro. En conditions de flux, les domaines A1, A2 et A3 du VWF se lient à ADAMTS13, mais seul le domaine A2 semble contenir Biologie médicale des petites séquences plus spécifiquement impliquées dans cette liaison [25]. Tous les domaines d ADAMTS13 sont capables de se lier indépendamment au VWF, mais il existe un phénomène de synergie entre certains domaines d ADAMTS13 permettant une liaison de haute affinité [18]. Régulation La régulation de l activité d ADAMTS13 sur le VWF fait intervenir des propriétés intrinsèques au VWF et aussi des facteurs plasmatiques extérieurs. La modélisation du domaine A2 du VWF suggère que le pont peptidique Tyr1605-Met1606, qui constitue le site spécifique de clivage par ADAMTS13, est cryptique au sein de la molécule de VWF native [26]. In vivo, seul le dépliement du VWF induit par les forces de cisaillement élevées du flux sanguin dans les microvaisseaux permet l exposition de ce pont peptidique et le rend donc accessible à ADAMTS13. De plus, cet accès est modulé par la liaison du VWF à certains ligands comme la P-sélectine (intervenant dans la fixation du VWF à la surface des cellules endothéliales à la phase initiale de sa sécrétion dans le plasma [27] ) ou la glycoprotéine Ib plaquettaire (qui permet la liaison du VWF aux plaquettes au sein du clou plaquettaire formé pour réparer une brèche vasculaire [28] ). La liaison du VWF à ces deux ligands faciliterait l accès du VWF à ADAMTS13, expliquant ainsi pourquoi, physiologiquement, le rôle d ADAMTS13 dans la régulation de la taille des multimères du VWF est prédominant dès l étape de sécrétion du VWF par les cellules endothéliales (limitation immédiate de la taille des multimères avant la mise en circulation du VWF dans le plasma) et aussi au sein du clou plaquettaire (résorption du clou plaquettaire une fois la brèche vasculaire réparée) (Fig. 2) [27, 28]. Parmi les facteurs plasmatiques capables de modifier l activité d ADAMTS13 vis-à-vis du VWF, il faut retenir l hémolyse et certaines cytokines inflammatoires, notamment l interleukine 6 (IL6) qui inhibent l activité protéolytique d ADAMTS13 par des mécanismes non élucidés [29, 30]. La thrombine, le facteur Xa, l élastase leucocytaire et la plasmine sont capables de cliver ADAMTS13 et donc de l inactiver par dégradation [31, 32]. 3

4 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand Exploration biologique d ADAMTS13 Étapes préanalytiques Tests biochimiques Les tests biochimiques relatifs à ADAMTS13 (activité, antigène, titrage d immunoglobulines G [IgG] et recherche d activité inhibitrice circulante [AIC]) sont réalisés uniquement à partir de plasma citraté (tubes d hémostase classiques) ou de sérum. Les tubes doivent être centrifugés à g pendant 20 minutes dans un délai maximal de 4 heures après le prélèvement sanguin veineux périphérique (le patient n a pas besoin d être à jeûn). Le plasma citraté ou le sérum doit être décanté. Si les dosages ne peuvent pas être réalisés extemporanément, le plasma citraté ou le sérum doit être aliquoté et congelé à -20 C ou -80 C jusqu au dosage. En cas d exploitation des prélèvements sur un site extérieur, les tubes doivent être envoyés dans la carboglace. Un certain nombre de limites préanalytiques, s appliquant principalement à la mesure de l activité d ADAMTS13, doivent être soulignées. Limites communes à toutes les techniques L EDTA inactive totalement l activité d ADAMTS13 in vitro [2, 3] ; en cas d erreur de prélèvement sur tube EDTA, l activité d ADAMTS13 est retrouvée faussement effondrée. L hémoglobine libre inactive également l activité d ADAMTS13 [29], d où le caractère inexploitable de tout prélèvement hémolysé. Limites propres à certaines techniques Pour les techniques utilisant du VWF natif (VWF full-length purifié ou recombinant) comme substrat, il existe un risque d interférence avec le VWF endogène du patient si son taux de VWF:Ag plasmatique/sérique est supérieur à 300 UI/dl. Dans ce cas, il est recommandé de recourir à une technique utilisant un petit substrat (peptides synthétiques de VWF). Les techniques fluorimétriques sont parfois irréalisables en cas de plasmas autofluorescents dès le début de la mesure, avant addition de substrat. Dans certains cas également, une hyperbilirubinémie très importante peut interférer avec la lecture en fluorimétrie [33, 34]. Étude génétique Pour l étude génétique, l acide désoxyribonucléique est classiquement extrait à partir des culots cellulaires provenant de tubes de sang total prélevé sur EDTA ou citrate. Les tubes sont conservés à +4 C s ils peuvent être traités dans un délai de 72 heures ou sinon à -20 C. Un consentement éclairé du patient est nécessaire. Méthodes biologiques Activité d ADAMTS13 (activité protéolytique vis-à-vis du VWF) Depuis 1998, plusieurs méthodes de mesure de l activité d ADAMTS13 ont été développées. Elles sont relativement bien standardisées et leur objectif principal est d avoir une sensibilité suffisante pour la détection des déficits enzymatiques sévères (taux inférieurs à 10 %). Toutes ces méthodes sont basées sur la dégradation d un substrat exogène, soit du VWF natif (molécule entière ou VWF full-length) purifié à partir de plasma humain ou recombinant, soit de courts peptides synthétiques de VWF (substrat minimal pour ADAMTS13 composé d une séquence de quelques acides aminés incluant le site de clivage par ADAMTS13), par l ADAMTS13 du plasma testé [35-53] (Tableau 1). Les produits de dégradation du VWF sont mesurés soit par électrophorèse, soit par des techniques immunologiques, soit par des techniques d agrégation plaquettaire [35-53] (Tableau 1). Ces techniques, outre les limites préanalytiques déjà citées (cf. supra), présentent les limites suivantes : les tests précités sont réalisés en conditions statiques (ce qui ne reflète pas les conditions de flux nécessaires in vivo pour l exposition du VWF dans une conformation optimale à son clivage par ADAMTS13) et nécessitent donc l utilisation d agents dénaturants (urée-guanidine) pour promouvoir la susceptibilité du VWF au clivage par ADAMTS13 ; selon le type de substrat utilisé, le temps d hydrolyse peut varier de quelques heures à plusieurs jours ; les techniques utilisant des peptides synthétiques courts (ne contenant donc pas les domaines de liaison du VWF à ADAMTS13) ne sont sensibles ni à l effet des mutations d ADAMTS13 situées dans ces domaines de liaison ni à l effet d autoanticorps anti-adamts13 dont l épitope (les épitopes) serai(en)t situé(s) au sein de ces mêmes domaines. En 2010, toutes les méthodes de mesure de l activité d ADAMTS13 relèvent du statut d examens hyperspécialisés Tableau 1. Mesure de l activité d ADAMTS13 : substrats utilisés, méthodes de détection, kits commerciaux de recherche clinique disponibles. Substrats Méthodes de détection Kits commerciaux VWF full-length EP (fragment dégradé de 350 kda) [35] - EP (profil multimérique du VWF) [36] - VWF:CBA résiduel du VWF clivé [37-39] - VWF:RCo résiduel du VWF clivé [40, 41] - IRMA (VWF:Ag résiduel non clivé) [42] - Western blot (profil multimérique du VWF) [43] - VWF A2 Elisa (VWF-A2 marqué non clivé) [44] - Western blot (VWF-A2 clivé) [45] - VWF-86aa VWF86-ALEXA FRET substrate ACTIFLUOR ADAMTS13 activity assay VWF-78aa HRP-assay (VWF-78aa clivé) [46] - VWF-73aa SDS-PAGE (VWF-73aa clivé) [47] - Elisa (VWF-73aa non clivé marqué) [48] - [49, 50] FRET (VWF-73aa clivé) ATS-13 activity assay TECHNOZYM ADAMTS-13 Western blot (VWF-73aa clivé) [47, 51] - Elisa (VWF-73aa clivé) [52] TECHNOZYM ADAMTS-13 activity ELISA SELDI-TOF (VWF-73aa clivé) [53] - VWF full-length : facteur von Willebrand entier ; VWF-A2 : domaine A2 du VWF ; EP : électrophorèse ; VWF:CBA : capacité de liaison du VWF au collagène ; VWF:RCo : activité cofacteur de la ristocétine du VWF ; VWF:Ag : taux antigénique du VWF ; WVF-78aa : fragment peptidique du facteur von Willebrand compris entre les acides aminés L1591 et R1668 ; VWF-73aa : fragment peptidique du facteur von Willebrand compris entre les acides aminés D1596 et R Biologie médicale

5 ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A Tableau 2. Mesure de l antigène d ADAMTS13 : méthodes, réactifs, kits commerciaux de recherche clinique disponibles. Méthodes Anticorps anti-adamts13 et standard Kits commerciaux Elisa non commercial [54] Elisa non commercial [55] Western blot [56] Elisa commercial (chromogénique) Elisa commercial (chromogénique) Elisa commercial (chromogénique) Elisa commercial (chromogénique) 3 anticorps monoclonaux Pool de plasmas normaux 2 anticorps polyclonaux ADAMTS13 recombinante 1 anticorps monoclonal Pool de plasmas normaux Anticorps non spécifiés Pool de plasmas normaux 1 anticorps monoclonal et 1 anticorps non spécifié Pool de plasmas normaux 1 anticorps monoclonal et 1 anticorps polyclonal de lapin biotinylé ADAMTS13 recombinante 2 anticorps polyclonaux 1 calibrant non spécifié TECHNOZYM ADAMTS-13 (Technoclone GmbH, Vienne, Autriche) TECHNOZYM ADAMTS-13 Antigen (Technoclone GmbH, Vienne, Autriche) IMUBIND ADAMTS13 ELISA HUMAN ADAMTS13 ELISA KIT Elisa : enzyme-linked immunosorbent assay. Tableau 3. Détection et titrage des immunoglobulines G (IgG) anti-adamts13 : méthodes, réactifs, kits commerciaux de recherche clinique disponibles. Méthodes Antigène, anticorps anti-adamts13 et standard Kits commerciaux Elisa commercial Elisa commercial ADAMTS13 recombinante IgG antihumaine couplée à la peroxydase Plasma humain avec fort titre d IgG anti-adamts13 ADAMTS13 recombinante IgG antihumaine de chèvre couplée à la peroxydase Standard non spécifié TECHNOZYM ADAMTS-13 INH IMUBIND ADAMTS13 Autoantibody ELISA Elisa : enzyme-linked immunosorbent assay. récemment transférés de la recherche et non du statut d examens spécialisés pouvant être effectués en routine. En corollaire, ces techniques, qui restent extrêmement coûteuses, sont centralisées dans des laboratoires experts (un ou deux laboratoires par pays en Europe, environ cinq laboratoires aux États- Unis) et il n existe pas encore de contrôle de qualité international ni national officiel. Quelle que soit la méthode utilisée, les normes de l activité d ADAMTS13 se situent entre 50 % et 150 % (exprimées par rapport à un mélange de plasmas normaux). Les sensibilité, spécificité, linéarité et précision de ces différentes méthodes ont été comparées dans différentes études multicentriques [50, 54-57]. De manière synthétique, il apparaît que toutes les méthodes de mesure de l activité d ADAMTS13 ont un seuil de détection situé entre 5%et 10%, et que leur sensibilité et leur spécificité sont excellentes dans la zone de pertinence clinique pour le diagnostic positif de purpura thrombotique thrombocytopénique (PTT) (cf. infra). Dans la zone des déficits partiels en ADAMTS13 (entre 15 % et 50 %) dont la pertinence clinique n est pas établie, il existe une assez grande variabilité interméthodes, alors que, pour des valeurs normales supérieures à 50 %, les méthodes sont assez bien corrélées. Plus précisément, les méthodes utilisant du VWF full-length comme substrat sont le plus souvent très bien corrélées à celles utilisant des peptides synthétiques [50, 58]. Cependant, dans une étude réalisée sur 188 échantillons comparant une méthode utilisant l hydrolyse de VWF full-length révélée par un test de liaison au collagène à une méthode utilisant le peptide synthétique FRETS-VWF73, une discordance mettant en défaut la sensibilité du FRETS-VWF73 a été observée chez 10 % des patients [57]. En 2010, la méthode FRETS-VWF73 reste celle le plus facilement utilisable et la plus rapide (résultats disponibles en une journée). Cependant, en cas de discordance avec la présentation clinique, la confrontation systématique à une méthode de Biologie médicale référence utilisant du VWF full-length s impose afin de s affranchir d un éventuel défaut de sensibilité du FRETS-VWF73 lié à certaines mutations ou à certains autoanticorps. Antigène d ADAMTS13 Plusieurs tests (enzyme-linked immunosorbent assay [Elisa] avec détection chromogénique ou western blot) dédiés à la mesure de l antigène d ADAMTS13 sont disponibles et ont été adaptés en kits commerciaux de recherche clinique [58-60] (Tableau 2). Ils utilisent des anticorps (Ac) anti-adamts13 polyclononaux ou monoclonaux. Les normes de l antigène d ADAMTS13 plasmatique sont comprises entre 700 et 1400 ng/ml. À ce jour, la capacité de ces tests à quantifier les différentes isoformes plasmatiques d ADAMTS13 n est pas établie. En outre, on ne sait pas non plus si la présence d auto-ac anti- ADAMTS13 libres ou au sein de complexes immuns interfère dans la mesure de l antigène d ADAMTS13. Autoanticorps anti-adamts13 Chez les patients atteints de PTT, la réponse auto-immune dirigée contre ADAMTS13 est polyclonale. Deux types d auto-ac anti-adamts13 ont été décrits [61-63] : des Ac «neutralisants» (ou inhibiteurs) qui agissent par inhibition directe du site catalytique d ADAMTS13, et des Ac «non neutralisants» qui agissent en se complexant à ADAMTS13 et accélèrent ainsi sa clairance. Ces deux mécanismes coexistent très souvent chez les patients atteints de PTT. Les auto-ac anti-adamts13 peuvent donc être mesurés soit par des méthodes immunologiques soit par des tests fonctionnels. Détection et titrage des IgG anti-adamts13 Plusieurs méthodes (western blot ou Elisa) dédiées à la détection et/ou au titrage des auto-ac anti-adamts13 (IgG, IgM et IgA) ont été développées [62-64]. Seules les méthodes permettant de titrer les IgG anti-adamts13 ont été adaptées en kits commerciaux de recherche clinique (Tableau 3). Ces méthodes Elisa mettent en jeu de l ADAMTS13 recombinante de type 5

6 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand sauvage et une révélation par des Ac anti-igg humaine. Ces méthodes détectent les IgG anti-adamts13 plasmatiques indépendamment de leur caractère fonctionnel : ainsi, les IgG neutralisantes (inhibant l activité catalytique d ADAMTS13) et les IgG non neutralisantes (complexant ADAMTS13 et accélérant sa clairance) sont toutes deux mesurées par ces tests Elisa. Cependant, la capacité de ces kits à détecter une éventuelle fraction d IgG anti-adamts13 complexée à ADAMTS13 au sein de complexes immuns reste inconnue. Selon les kits, la limite de positivité du titre d IgG anti-adamts13 définie par le fabricant est comprise entre 10 U/ml et 15 U/ml. Ce seuil est probablement sous-estimé et il est recommandé que chaque laboratoire redéfinisse son propre seuil à l aide d une population conséquente de volontaires sains. Recherche d une activité inhibitrice circulante anti-adamts13 Les Ac anti-adamts13 neutralisants (ou inhibiteurs) sont recherchés par des tests fonctionnels mesurant l activité résiduelle d ADAMTS13 d un mélange de plasma témoin et de plasma testé préchauffé à 56 C afin de dissocier d éventuels complexes immuns [61, 62, 65, 66]. Cette recherche d AIC anti- ADAMTS13 a donc les mêmes limites que celles inhérentes aux différentes méthodes de mesure de l activité d ADAMTS13. En outre, ces méthodes sont semi-quantitatives et peu sensibles, et il n existe pas de consensus quant à l expression des résultats. Séquençage du gène d ADAMTS13 L étude génétique d ADAMTS13 repose sur un séquençage exhaustif des 29 exons et des jonctions exon-intron du gène d ADAMTS13 puisqu il n existe pas de sites préférentiels de mutations dans le PTT héréditaire (syndrome d Upshaw- Schulman), seule pathologie liée à un défaut génétique d ADAMTS13 (cf. infra). Variations physiologiques et déficits partiels en ADAMTS13 Ce paragraphe ne concerne que les variations physiologiques et les déficits partiels de l activité d ADAMTS13. Les autres paramètres biologiques (antigène, autoanticorps) n ont pas été suffisamment étudiés dans la littérature pour faire ici l objet d une synthèse. Variations physiologiques Les conditions physiologiques qui semblent influencer ADAMTS13 sont les âges extrêmes de la vie, l ethnie et la grossesse [1, 67]. Ces conditions ont en commun une augmentation physiologique des taux de VWF et il apparaît donc que l activité circulante d ADAMTS13 varie en sens inverse du taux de VWF plasmatique. Un argument qui vient appuyer cette observation est que l administration de desmopressine (un analogue de la vasopressine ayant pour propriété de stimuler la sécrétion plasmatique de VWF par les cellules endothéliales) entraîne une diminution significative de l activité plasmatique d ADAMTS13 [68, 69]. Chez les nouveau-nés et les sujets âgés, l activité d ADAMTS13 apparaît discrètement diminuée [67, 70, 71] d environ 10 %à20%parrapport à la population générale. De même, les sujets noirs ont également des taux d ADAMTS13 plus bas [1]. Au cours de la grossesse, l activité d ADAMTS13 diminue progressivement à partir de la 12 e semaine d aménorrhée pour atteindre à terme des taux 15 % à 20 % inférieurs au taux de base [72]. Déficits partiels en ADAMTS13 Les déficits fonctionnels partiels en ADAMTS13 sont définis par des activités comprises entre 20 % et 50 %. Contrairement au déficit sévère qui est pathognomonique du PTT (cf. infra), ils ne sont pas spécifiques puisque retrouvés dans de nombreuses pathologies : pathologies cardiovasculaires (infarctus du myocarde [73, 74], hypertension artérielle maligne [75] ), sepsis sévère et choc septique [32, 76], accès palustre [77], hépatopathies [67-78], syndrome des antiphospholipides [79], certaines microangiopathies thrombotiques (MAT) comme le hemolysis elevated liver enzymes low platelet count (HELLP) syndrome [80, 81] ou le syndrome hémolytique et urémique [36, 65]. Dans environ 10 % des cas, des tableaux cliniques de PTT peuvent également s accompagner d une activité d ADAMTS13 subnormale ; le plus souvent, ces PTT surviennent dans un contexte de cancer, de pathologie liée au virus de l immunodéficience humaine ou de greffe [82]. Quelle que soit la pathologie concernée, la pertinence clinique de ces déficits partiels en ADAMTS13 n est pas clarifiée. Si leur implication directe dans la physiopathologie de ces différentes maladies est peu probable, il est plus vraisemblable qu ils ne soient en réalité qu une conséquence de la pathologie associée ou sous-jacente. Les mécanismes de ces déficits fonctionnels partiels en ADAMTS13 sont multiples : consommation de l enzyme par un excès de substrat, diminution de la synthèse et/ou de la sécrétion d ADAMTS13 liée à une dysfonction de l endothélium, inhibition d ADAMTS13 par certaines cytokines pro-inflammatoires comme l IL6, dégradation d ADAMTS13 par des enzymes protéolytiques (thrombine, élastases leucocytaires) [82]. Par ailleurs, un polymorphisme d ADAMTS13 (P475S) fréquent dans la population japonaise mais non retrouvé chez les Caucasiens est associé, à l état hétérozygote, à une diminution partielle de l activité d ADAMTS13 [83]. Déficits sévères en ADAMTS13 Le déficit fonctionnel sévère en ADAMTS13 est pathognomonique d une forme particulière de MAT appelée PTT [1, 82, 84, 85]. Définition, épidémiologie, clinique et traitement du purpura thrombotique thrombocytopénique Le PTT est défini par la formation spontanée dans la microcirculation sanguine de thrombi plaquettaires responsables d une anémie hémolytique mécanique, d une thrombopénie de consommation, et de signes d ischémie multiviscérale touchant principalement le cerveau et le rein. Il s agit d une maladie rare dont l incidence est estimée à 4 cas pour un million d habitants et par an. À l exception des rarissimes formes à révélation pédiatrique, le PTT touche principalement l adulte jeune de 30 à 40 ans avec une prédominance féminine (deux femmes pour un homme). Le PTT évolue classiquement par poussées entrecoupées de périodes de rémission clinique. Dans plus de 50 % des cas, le PTT est idiopathique ; dans les autres cas, il survient avec un contexte clinique associé (maladie auto-immune, infection, grossesse, médicaments, cancer, greffe d organe, etc.). Les facteurs déclenchants des poussées sont multiples (infection, grossesse, certains médicaments comme les thiénopyridines) mais restent souvent non identifiés. Le diagnostic du PTT est parfois difficile à établir en raison de l absence de spécificité de ses signes clinicobiologiques et ses diagnostics différentiels sont donc nombreux. En l absence de traitement urgent et adapté dont le prérequis est bien entendu un diagnostic précis, les poussées de PTT ont un pronostic très sévère conduisant au décès dans 90 % des cas. Depuis 1990, l utilisation empirique de la plasmathérapie (idéalement échanges plasmatiques) a révolutionné le pronostic des poussées de PTT en permettant un taux de survie de 90 % [85]. Physiopathologie du purpura thrombotique thrombocytopénique De sa première description clinique en 1926 [86], la physiopathologie du PTT est restée totalement obscure jusqu en 1982, date à laquelle il a été rapporté que les thrombi plaquettaires présents de manière diffuse dans les microvaisseaux des patients atteints de PTT avaient la particularité d être très riches en multimères de très haut poids moléculaire du VWF [87]. Ce n est que 15 ans plus tard en 1997, lorsqu ADAMTS13, la métalloprotéase responsable de la régulation de la taille des multimères du 6 Biologie médicale

7 ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A Figure 3. Séquence physiopathologique du purpura thrombotique thrombocytopénique (PTT). Dans 90 % des cas de PTT, un déficit fonctionnel sévère en ADAMTS13 (activité plasmatique inférieure à 5 %) qu il soit acquis par le biais d autoanticorps anti-adamts13 ou héréditaire par le biais de mutations bialléliques du gène d ADAMTS13, provoque un défaut de clivage des plus grands multimères de facteur von Willebrand (VWF). L accumulation dans la plasma de ces grands multimères hyperadhésifs de VWF conduit à la formation spontanée de thrombi plaquettaires dans la microcirculation sanguine (région de l arbre vasculaire où les taux de cisaillement élevés du flux sanguin confèrent au VWF une conformation spatiale dépliée particulièrement affine pour les plaquettes). Ces thrombi plaquettaires sont responsables de l anémie hémolytique mécanique, de la thrombopénie de consommation et des signes d ischémie viscérale qui caractérisent le PTT. VWF, a été découverte, que la physiopathologie du PTT a pu être élucidée [36, 61] : en effet, chez les patients atteints de PTT, il existe dans 90 % des cas un déficit fonctionnel sévère (activité inférieure à 10 %) d ADAMTS13 qui entraîne l accumulation anormale dans le plasma de multimères de très haut poids moléculaire du VWF. Ce VWF hyperadhésif est responsable de la formation spontanée de thrombi plaquettaires qui vont obstruer la microcirculation sanguine et provoquer la poussée de PTT (Fig. 3). Le déficit sévère en ADAMTS13 est le plus souvent acquis par le biais d auto-ac anti-adamts13 (PTT acquis auto-immun représentant neuf cas de PTT déficitaires en ADAMTS13 sur dix), mais il peut être aussi héréditaire de transmission autosomique récessive (un cas de PTT déficitaire en ADAMTS13 sur dix) par le biais de mutations bialléliques du gène d ADAMTS13 (maladie orpheline appelée syndrome d Upshaw-Schulman) (Fig. 4) [1, 8, 66, 82, 84]. Dans 10 % des PTT, ADAMTS13 n est pas déficitaire et la maladie relève alors d une autre physiopathologie [82, 84]. Indications et interprétation de l exploration biologique d ADAMTS13 dans le PTT Devant une poussée de MAT, les indications et l interprétation de l exploration biologique d ADAMTS13 sont identiques chez l adulte et chez l enfant (le PTT de l adulte est un PTT acquis auto-immun dans plus de 90 % des cas, la forme héréditaire de révélation tardive étant très rare ; le PTT de l enfant et de l adolescent peut être soit une forme héréditaire soit une forme acquise avec une fréquence moyenne équivalente mais néanmoins extrêmement variable en fonction de la tranche d âge). Ces indications sont les suivantes. Au diagnostic, devant toute MAT en poussée Une hiérarchie dans l ordre des tests ADAMTS13 à réaliser devant une suspicion clinique de MAT au diagnostic doit être impérativement respectée (Fig. 5) [82, 84, 88] : en première intention, mesure de l activité d ADAMTS13 ; en seconde intention, et uniquement si l activité d ADAMTS13 est inférieure à 10 %, recherche d autoanticorps anti-adamts13 par titrage Biologie médicale des IgG et recherche d AIC. En cas de positivité des IgG et/ou de l AIC, l hypothèse d un PTT acquis auto-immun est hautement probable. En cas de négativité des IgG et de l AIC, l hypothèse d un PTT acquis auto-immun ne peut être totalement écartée (autoanticorps de nature non IgG, inhibiteur de nature non Ig, opsonisation de tous les autoanticorps sur ADAMTS13 et clairance des complexes immuns formés, etc.) mais l hypothèse d un PTT héréditaire par mutations du gène d ADAMTS13 (syndrome d Upshaw-Schulman) doit être envisagée. En raison de la complexité du séquençage du gène d ADAMTS13 (absence de hotspot de mutations [Fig. 4] imposant un séquençage systématique de la totalité des 29 exons du gène et de toutes les jonctions exons-introns), l exploration génétique d ADAMTS13 n est réalisée que si l activité d ADAMTS13 (en l absence d autoanticorps détectable) persiste inférieure à 10 % en rémission clinique en l absence d autoanticorps détectable (cf. infra). Après obtention de la rémission clinique et hématologique L ascension de l activité d ADAMTS13 à un taux supérieur à 10 % témoigne d un déficit acquis et la normalisation du taux (valeur supérieure à 50 %) serait un facteur de bon pronostic puisqu elle est associée à un risque de rechute inférieur à 5% la première année [64, 82, 85]. Au contraire, la persistance d une activité d ADAMTS13 inférieure à 10 % en rémission clinique et hématologique : si elle est associée à des autoanticorps anti-adamts13 détectables, signe un PTT acquis et constituerait un facteur prédictif de rechute [64] ; si elle n est pas associée à des autoanticorps anti-adamts13 détectables, doit faire évoquer un PTT héréditaire et motiver une étude génétique d ADAMTS13. Dans ce dernier cas, le diagnostic de PTT acquis (sans autoanticorps détectable) est également possible. Cas particuliers En cas de déficit acquis persistant en rémission, les patients peuvent recevoir des perfusions prophylactiques d immuno- 7

8 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand Figure 4. Mutations du gène d ADAMTS13 dans le syndrome d Upshaw-Schulman (forme héréditaire du purpura thrombotique thrombocytopénique). Une centaine de mutations du gène d ADAMTS13 ont été décrites dans le syndrome d Upshaw-Schulman. Ces mutations sont localisées sur toute la longueur du gène (absence de hotspot) et conduisent principalement à des substitutions d acides aminés ou à des codons stop (indiqués sur la partie supérieure de la figure). Elles consistent plus rarement en des délétions, insertions ou des mutations de sites d épissage (indiquées sur la partie inférieure de la figure). En bleu, mutations de novo. * mutations exprimées dans des recombinants. TSP : thrombospondine. Points essentiels ADAMTS13 est la métalloprotéase spécifique de clivage du VWF. Elle a été purifiée à partir du plasma humain en 1996 et son gène a été cloné en L exploration biologique d ADAMTS13 comprend : la mesure de son activité et de son taux antigénique, la recherche d autoanticorps anti-adamts13 (titrage d IgG anti-adamts13 et recherche d AIC) dans le plasma et le séquençage de son gène. Ces tests relèvent d une biologie hyperspécialisée réservée à des laboratoires experts. Le déficit fonctionnel sévère (activité plasmatique inférieure à 10 %) en ADAMTS13 est responsable d une forme particulière de MAT appelée PTT. Le PTT est défini par une anémie hémolytique mécanique et une thrombopénie de consommation parfois associées à des signes d ischémie multiviscérale. Le PTT est une maladie rare due dans plus de 90 % des cas à des autoanticorps anti-adamts13 (PTT acquis auto-immun) et dans moins de 10 % des cas à des mutations bialléliques du gène d ADAMTS13 (maladie orpheline appelée syndrome d Upshaw- Schulman). Il existe en France un Centre national de référence des MAT de l adulte et de l enfant (CNR-MAT) (année de labellisation 2006 du Plan national maladies rares). suppresseurs. Dans ce cas, la surveillance de l activité d ADAMTS13 et du titre des IgG anti-adamts13 peut être réalisée tous les 3 mois pendant une durée indéterminée. Chez tout patient ayant un antécédent de PTT, une étude supplémentaire d ADAMTS13 est prescrite dans les cas suivants : suspicion clinicobiologique de rechute, projet de grossesse ou découverte d une grossesse en cours, chirurgie. Conclusion et perspectives Depuis les années 2000, le développement des méthodes de mesure de l activité d ADAMTS13 a permis de comprendre la physiopathologie du PTT, de saisir pourquoi la plasmathérapie est efficace dans le traitement des poussées de PTT (les concentrés plasmatiques contiennent de l ADAMTS13 active), et 8 Biologie médicale

9 ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A Figure 5. Arbre décisionnel. Exploration biologique d ADAMTS13 devant une suspicion de purpura thrombotique thrombocytopénique (PTT). Devant une suspicion clinique de PTT en poussée, la mesure de l activité d ADAMTS13 est réalisée en première intention. En seconde intention, et uniquement si l activité d ADAMTS13 est inférieure à 10 %, une recherche d autoanticorps (auto-ac) anti-adamts13 est justifiée : titrage des immunoglobulines G (IgG) anti-adamts13 et recherche d une activité inhibitrice circulante (AIC). En cas de positivité des IgG et/ou de l AIC, le diagnostic de PTT acquis est retenu. En cas de négativité des IgG et de l AIC, l activité d ADAMTS13 doit être mesurée en rémission. En rémission, si l activité d ADAMTS13 est devenue détectable, le diagnostic de PTT acquis est retenu. Si, au contraire, elle est toujours effondrée, une recherche d auto-ac anti-adamts13 doit être à nouveau réalisée avant de prescrire une étude génétique d ADAMTS13 : en effet, dans certains cas, les auto-ac anti-adamts13 deviennent détectables (alors qu ils ne l étaient pas lors de la poussée initiale) et le diagnostic de PTT acquis est alors hautement probable ; dans le cas contraire, le séquençage du gène d ADAMTS13 est alors justifié. Si des mutations bialléliques sont retrouvées, le diagnostic de PTT héréditaire (syndrome d Upshaw-Schulman) est retenu. Dans l hypothèse où aucune mutation du gène d ADAMTS13 ne serait retrouvée, il est très difficile de faire le diagnostic différentiel entre un PTT acquis relevant d un mécanisme autre qu un auto-ac non IgG/non neutralisant et un PTT héréditaire lié par exemple à des mutations du promoteur du gène d ADAMTS13, ou encore à des mutations d un gène modulateur de l activité d ADAMTS13 non identifié à ce jour. d apporter le premier test biologique sensible et spécifique permettant de confirmer le diagnostic de poussée de PTT, diagnostic jusqu à présent porté uniquement sur des arguments clinicobiologiques non spécifiques. En 2010, l exploration biologique d ADAMTS13 relève du domaine de la biologie hyperspécialisée et elle permet une confirmation rétrospective du diagnostic de PTT : en effet, aucune méthode n est à ce jour adaptée à l urgence et cette exploration reste réservée à des équipes de biologie expertes compte tenu, d une part de sa spécificité technique et, d autre part, d une fréquente complexité d interprétation des résultats. En France, le Plan national maladies rares a permis de labelliser Biologie médicale en 2006 Centre national de référence des microangiopathies thrombotiques de l adulte et de l enfant (CNR-MAT) un réseau de cliniciens et de biologistes qui s intéressent aux MAT depuis 1998 (coordonnateurs Pr Coppo, Pr Veyradier). Une des missions du CNR-MAT est d optimiser la prestation nationale centralisée d exploration biologique d ADAMTS13 développée depuis 1999 en encadrant d autres laboratoires qui seraient reconnus experts à une échelle régionale au sein des centres de compétences du CNR-MAT. Parallèlement, des partenariats solides avec la recherche fondamentale et l industrie devraient permettre de développer une technologie dédiée à une mesure de l activité d ADAMTS13 mieux adaptée à l urgence. 9

10 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand Cet article a fait l objet d une prépublication en ligne : l année du copyright peut donc être antérieure à celle de la mise à jour à laquelle il est intégré. Références [1] Sadler JE. Von Willebrand factor, ADAMTS13 and thrombotic thrombocytopenic purpura. Blood 2008;112:11-8. [2] Furlan M, Robles R, Lämmle B. Partial purification and characterization of a protease from human plasma cleaving von Willebrand factor to fragments produced by in vivo proteolysis. Blood 1996;87: [3] Tsaï HM. Physiologic cleavage of von Willebrand factor by a plasma protease is dependent on its conformation and requires calcium ion. Blood 1996;87: [4] Furlan M, Robles R, Morselli B, Sandoz P, Lämmle B. Recovery and half-life of von Willebrand factor-cleaving protease after plasma therapy in patients with thrombotic thrombocytopenic purpura. Thromb Haemost 1999;81:8-13. [5] Fujikawa K, Suzuki H, McMullen B, Chung D. Purification of human von Willebrand factor-cleaving protease and its identification as a new member of the metalloprotease family. Blood 2001;98: [6] Zheng X, Chung D, Takayama TK, Majerus EM, Sadler JE, Fujikawa K. Structure of von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS13), a metalloprotease involved in thrombotic thrombocytopenic purpura. J Biol Chem 2001;276: [7] Soejima K, Mimura N, Hirashima M, Maeda H, Hamamoto T, Nagagaki T, et al. A novel metalloprotease synthesized in the liver and secreted into the blood: possibly, the von Willebrand factor-cleaving protease? J Biochem (Tokyo) 2001;130: [8] Levy GG, Nichols WC, Lian EC, Foroud T, McClintick JN, McGee BM, et al. Mutations in a member of theadamts gene family cause thrombotic thrombocytopenic purpura. Nature 2001;413: [9] Zhou W, Inada M, Lee TP, Benten D, Lyubsky S, Bouhassira EE, et al. ADAMTS13 is expressed in hepatic stellate cells. Lab Invest 2005;85: [10] Plaimauer B, Zimmerman K, Volkel D, Antoine G, Kerschbaumer R, Jenab P, et al. Cloning, expression and functional characterization of the von Willebrand factor cleaving-protease (ADAMTS13). Blood 2002;100: [11] Shang D, Zheng XW, Niiya M, Zheng XL. Atypical sorting of ADAMTS13 in vascular endothelial cells and Madin-Darby canine kidney cells depends on the CUB domains and their association with lipid drafts. Blood 2006;108: [12] Turner N, Nolasco L, Tao Z, Dong JF, Moake J. Human endothelial cells synthesize and release ADAMTS13. J Thromb Haemost 2006;4: [13] Liu L, Choi H, Bernardo A, Bergeron AL, Nolasco L, Ruan C, et al. Platelet-derived VWF-cleaving metalloprotease ADAMTS-13. J Thromb Haemost 2005;3: [14] Suzuki M, Murata M, Matsubara Y, Uchida T, Ishihara H, Shibano T, et al. Detection of von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS- 13) in human platelets. Biochem Biophys Res Commun 2004;313: [15] Majerus EM, Zheng XL, Tuley EA, Sadler JE. Cleavage of the ADAMTS13 propeptide is not required for protease activity. J Biol Chem 2003;278: [16] Soejima K, Matsumoto M, Kokame K, Ishizashi H, Maeda H, Nozaki C, et al. ADAMTS-13 cysteine-rich/spacer domains are functionally essential for von Willebrand factor cleavage. Blood 2003; 102: [17] Zheng X, Nishio K, Majerus EM, Sadler JE. Cleavage of von Willebrand factor requires the spacer domain of the metalloprotease ADAMTS13. J Biol Chem 2003;278: [18] Ai J, Smith P, Wang S, Zhang P, Zheng XL. The proximal carboxyterminal domains of ADAMTS13 determine substrate specificity and are all required for cleavage of von Willebrand factor. J Biol Chem 2005;280: [19] Gao W, Anderson PJ, Majerus EM, Tuley EA, Sadler JE. Exosite interactions contribute to tension-induced cleavage of von Willebrand factor by the antithrombic ADAMTS13 metalloprotease. Proc Natl Acad Sci USA 2006;103: [20] Majerus EM, Anderson PJ, Sadler JE. Binding of ADAMTS13 to von Willebrand factor. J Biol Chem 2005;280: [21] Bernardo A, Nolasco L, Wang Y, Ball C, Moake J. Peptides from the C-terminal regions of ADAMTS-13 specifically block cleavage of ultralarge von Willebrand factor multimers on the endothelial surface under flow. J Thromb Haemost 2003;1:405a. [22] Tao Z, WangY, Choi H, BernardoA, Nishio K, Sadler JE, et al. Cleavage of the ultralarge multimers of von Willebrand factor by C-truncated mutants of ADAMTS13 under flow. Blood 2005;106: [23] Zhang P, Pan W, Rux AH, Sachais BS, Zheng XL. The cooperative activity between the carboxy-terminal TSP1 repeats and the CUB domains of ADAMTS13 is crucial for recognition of von Willebrand factor under flow. Blood 2007;110: [24] Davis AK, Makar RS, Stowell CP, Kuter DJ, Dzik WH. ADAMTS13 binds to CD36: a potential mechanism for platelet and endothelial localization of ADAMTS13. Transfusion 2009;49: [25] Dong JF, Moake JL, Bernardo A, Fujikawa K, Ball C, Nolasco L, et al. ADAMTS-13 metalloprotease interacts with the endothelial cellderived ultralarge von Willebrand factor. J Biol Chem 2003;278: [26] Jenkins PV, Pasi KJ, Perkins SJ. Molecular modeling of ligand and mutation sites of the type A domains of human von Willebrand factor and their relevance to von Willebrand s disease. Blood 1998;91: [27] Padilla A, Moake JL, Bernardo A, Ball C, Wang Y, Arya M, et al. P-selectin anchors newly released ultralarge von Willebrand factor multimers to the endothelia cell surface. Blood 2004;103: [28] Nishio K, Anderson PJ, Zheng XL, Sadler JE. Binding of platelet glycoprotein Iba to von Willebrand factor domain A1 stimulates the cleavage of the adjacent domain A2 by ADAMTS13. Proc Natl Acad Sci USA 2004;101: [29] Studt JD, Hovinga JA, Antoine G, Hermann M, Rieger M, Scheiflinger F, et al. Fatal congenital thrombotic thrombocytopenic purpura with apparent ADAMTS13 inhibitor: in vitro inhibition of ADAMTS13 activity by hemoglobin. Blood 2005;105: [30] Bernardo A, Ball C, Nolasco L, Moake JF, Dong JF. Effects of inflammatory cytokines on the release and cleavage of the endothelial cell-derived ultralarge von Willebrand factor multimers under flow. Blood 2004;104: [31] Crawley JT, Lam JK, Rance JB, Mollica LR, O Donnell JS, Lane DA. Proteolytic inactivation of ADAMTS13 by thrombin and plasmin. Blood 2005;105: [32] Ono T, Mimuro J, Madoiwa S, Soejima K, Kashiwakura Y, Ishiwata A, et al. Severe secondary deficiency of von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS13) in patients with sepsis-induced disseminated intravascular coagulation: its correlation with development of renal failure. Blood 2006;107: [33] Meyer SC, Sulzer I, Lämmle B, Kremer Hovinga JA. Hyperbilirubinemia interferes withadamts13 activity measurement by FRETS-VWF73 assay: diagnostic relevance in patients suffering from thrombotic microangiopathies. J Thromb Haemost 2007;5: [34] Eckmann CM, De Laaf RT, Van Keulen JM, Van Mourick JA, De Laat B. Bilirubin oxidase as a solution for the interference of hyperbilirubinemia with ADAMTS13 activity measurement by FRETS-VWF73 assay. J Thromb Haemost 2007;5: [35] Tsai HM, Lian EC. Antibodies to von Willebrand factor cleaving protease in acute thrombotic thrombocytopenic purpura. N Engl J Med 1998;339: [36] Furlan M, Robles R, Galbusera M, Remuzzi G, Kyrle PA, Brenner B, et al. von Willebrand factor-cleaving protease in thrombotic thrombocytopenic purpura and the hemolytic-uremic syndrome. N Engl J Med 1998;339: [37] Gerritsen HE, Turecek PL, Schwartz HP, Lämmle B, Furlan M. Assay of von Willebrand factor (VWF)-cleaving protease based on decreased collagen binding affinity of degraded VWF: a tool for the diagnosis of thrombotic thrombocytopenic purpura (TTP). Thromb Haemost 1999; 82: [38] Rick ME, Moll S, Taylor MA, Krizek DM, White GC, Aronson DL. Clinical use of a rapid collagen binding assay for von Willebrand factor cleaving protease in patients with thrombotic thrombocytopenic purpura. Thromb Haemost 2002;88: [39] Knovich MA, Lawson HL, Burke MH, Mc Coy TP, Owen J. Rapid quantitative assay ofadamts13 activity on an automated coagulation analyser: clinical applications and comparison with immunoblot method. Am J Hematol 2008;83: [40] Bohm M, Vigh T, Scharrer I. Evaluation and clinical application of a new method for measuring activity of von Willebrand factor-cleaving metalloprotease (ADAMTS13). Ann Hematol 2002;81: Biologie médicale

11 ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand A [41] Kostousov V, Fehr J, Bombeli T. Novel, semi-automated, 60-min-assay to determine von Willebrand factor cleaving activity of ADAMTS13. Thromb Res 2006;118: [42] Obert B, Tout H, Veyradier A, Fressinaud E, Meyer D, Girma JP. Estimation of the von Willebrand factor-cleaving protease in plasma using monoclonal antibodies to VWF. Thromb Haemost 1999;82: [43] Knovich MA, Craver K, Matulis MD, Lawson H, Owen J. Simplified assay for VWF cleaving protease (ADAMTS13) activity and inhibitor in plasma. Am J Hematol 2004;76: [44] Whitelock JL, Nolasco L, Bernardo A, Moake J, Dong JF, Cruz MA. ADAMTS13 activity in plasma is rapidly measured by a new ELISA method that uses recombinant VWF-A2 domain as substrate. J Thromb Haemost 2004;2: [45] Cruz MA, Whitelock J, Dong JF. Evaluation ofadamts13 activity in plasma using recombinant von Willebrand factor A2 domain polypeptide as substrate. Thromb Haemost 2003;90: [46] Wu JJ, Fujikawa K, Lian EC, McMullen BA, Kulman JD, Chung DW. A rapid enzyme-linked assay for ADAMTS13. J Thromb Haemost 2006;4: [47] Kokame K, Matsumoto M, Fujimura Y, Miyata T. VWF73, a region from D1596 to R1668 of von Willebrand factor, provides a minimal substrate for ADAMTS13. Blood 2003;103: [48] Zhou W, Tsai HM. An enzyme immunoassay of ADAMTS13 distinguishes patients with thrombotic thrombocytopenic purpura from normal individuals and carriers of ADAMTS13 mutations. Thromb Haemost 2004;91: [49] Kokame K, Nobe Y, Kokubo Y, Okayama A, Miyata T. FRETS- VWF73, a first fluorogenic substrate for ADAMTS13 assay. Br J Haematol 2005;129: [50] Kremer-Hovinga J, Mottini M, Lämmle B. Measurement of ADAMTS13 activity in plasma by the FRETS-VWF73 assay: comparison with other assay methods. J Thromb Haemost 2006;4: [51] Ai J, Smith P, Wang S, Zhang P, Zheng XL. The proximal carboxyl terminal domains of ADAMTS13 determine substrate specificity and are all required for cleavage of von Willebrand factor. J Biol Chem 2005;280: [52] Kato S, Matsumoto M, Matsuyama T, Isonishi A, Hiura H, Fujimura Y. Novel monoclonal antibody-based enzyme immunoassay for determining plasma levels of ADAMTS13 activity. Transfusion 2006; 46: [53] Jin M, Cataland S, Bissell M, Wu HM. A rapid test for the diagnosis of thrombotic thrombocytopenic purpura using surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight (SELDI-TOF)-mass spectrometry. J Thromb Haemost 2006;4: [54] Studt JD, Böhm M, Budde U, Girma JP, Varadi K, Lämmle B. Measurement of von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS- 13) activity in plasma: a multicenter comparison of different assay methods. J Thromb Haemost 2003;1: [55] Tripodi A, Chantarangkul V, Böhm M, Budde U, Dong JF, Friedman KD, et al. Measurement of von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS-13): results of an international collaborative study involving 11 methods testing the same set of coded plasmas. J Thromb Haemost 2004;2: [56] Mahdian R, Rayes J, Girma JP, Houllier A, Obert B, Meyer D, et al. Comparison of FRETS-VWF73 to full-length VWF as a substrate for ADAMTS13 activity measurement in human plasma samples. Thromb Haemost 2006;95: [57] Palla R, Valsecchi C, Spreafico M, Bajetta MT, Peyvandi F. Influence of the von Willebrand factor substrate on ADAMTS13 activity measurement. J Thromb Haemost 2009;7(suppl2):253. [58] Rieger M, Ferrari S, Kremer Hovinga J, Konetschny C, Herzog A, Koller L, et al. Relation between ADAMTS13 activity and ADAMTS13 antigen levels in healthy donors and patients with thrombotic microangiopathies (TMA). Thromb Haemost 2006;95: [59] Feys HB, Liu F, Dong N, Pareyn I, Vauterin S, Vandeputte N, et al. ADAMTS13 plasma level determination uncovers antigen absence in acquired thrombotic thrombocytopenic purpura and ethnic differences. J Thromb Haemost 2006;4: [60] Ishizashi H, Yagi H, Matsumoto M, Soejima K, Nakagaki T, Fujimura Y. Quantitative Western blot analysis of plasma ADAMTS13 antigen in patients with Upshaw-Schulman syndrome. Thromb Res 2007;120: Biologie médicale [61] Tsai HM, Chun Y, Lian E. Antibodies to von Willebrand factor cleaving protease in acute thrombotic thrombocytopenic purpura. N Engl J Med 1998;339: [62] Rieger M, Mannucci PM, Kremer Hovinga JA, Herzog A, Gerstenbauer G, Konetschny C, et al. ADAMTS13 antibodies in patients with thrombotic microangiopathies and other immunomediated diseases. Blood 2005;106: [63] Peyvandi F, Lavoretano S, Palla R, Feys HB, Vanhoorelbeke K, Battaglioli T, et al. ADAMTS13 and anti-adamts13 antibodies as markers for recurrence of acquired thrombotic thrombocytopenic purpura during remission. Haematologica 2008;93: [64] Ferrari S, Scheiflinger F, Rieger M, Midde G, Wolf M, Coppo P, et al. Prognostic value of anti-adamts13 antibodies feature (Ig isotype titer and inhibitory effect) in a cohort of 35 adult French patients undergoing a first episode of thrombotic microangiopathy with an undetectable ADAMTS13 activity. Blood 2007;109: [65] Veyradier A, Obert B, Houllier A, Meyer D, Girma JP. Specific von Willebrand factor-cleaving protease in thrombotic microangiopathies: a study of 111 cases. Blood 2001;98: [66] Scully M. Inhibitory anti-adamts13 antibodies: measurement and clinical application. Blood Rev 2010;24:11-6. [67] Mannucci PM, Canciani MT, Forza I, Lassuna F, Lattuada A, Rossi E. Changes in health and disease of the metalloprotease that cleaves von Willebrand factor. Blood 2001;98: [68] Reiter RA, Knöbl P, Varadi K, Turecek PL. Changes in von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS13) activity after infusion of desmopressin. Blood 2003;101: [69] Mannucci PM, Capoferri C, Canciani MT. Plasma levels of von Willebrand factor regulate ADAMTS13, its major cleaving protease. Br J Haematol 2004;126: [70] Kavakli K, Canciani MT, Mannucci PM. Plasma levels of the von Willebrand factor-cleaving protease in physiological and pathological conditions in children. Pediatr Hematol Oncol 2002;19: [71] Schmugge M, Dunn MS, Amankwah KS, Blanchette VS, Freedman J, Rand ML. The activity of the von Willebrand factor-cleaving protease ADAMTS-13 in newborn infants. J Thromb Haemost 2003;2: [72] Sanchez-Luceros A, Farias CE, Amaral MM, Kempfer AC, Votta R, Marchese C, et al. Von Willebrand factor-cleaving protease (ADAMTS13) activity in normal non-pregnant women, pregnant and post-delivery women. Thromb Haemost 2004;92: [73] Chion CK, Doggen CJ, Crawley JT, Lane DA, Rosendaal FR. ADAMTS13 and von Willebrand factor and the risk of myocardial infarction in men. Blood 2007;109: [74] Miura M, Kiakita K, Matsukawa M, Soejima K, Fichigami S, Miyazaki Y, et al. Prognostic value of plasma von Willebrand factorcleaving protease (ADAMTS13) antigen levels in patients with coronary artery disease. Thromb Haemost 2010;103: [75] Van den Born BJ, Van der Hoeven NV, Groot E, Lenting PJ, Meijers JC, Levi M, et al. Association between thrombotic microangiopathy and reduced ADAMTS13 activity in malignant hypertension. Hypertension 2008;51: [76] Kremer-Hovinga JA, Zeerleder S, Kessler P, Romani de Wit T, Van Mourik JA, Hack CE, et al. ADAMTS-13, von Willebrand factor and related parameters in severe sepsis and septic shock. J Thromb Haemost 2007;5: [77] Larkin D, de Laat B, Jenkins PV, Bunn J, Craig AG, Terraube V, et al. Severe Plasmodium falciparum malaria is associated with circulating ultralarge von Willebrand factor multimers and ADAMTS13 inhibition. PLoS Pathog 2009;5:e [78] Uemura M, Fujimura Y, Matsuyama T, Matsumoto M, Ishikawa M, Ishizashi H, et al. Potential role of ADAMTS13 in the progression of alcoholic hepatitis. Curr Drug Abuse Rev 2008;1: [79] Austin SK, Starke RD, Lawrie AS, Cohen H, Machin SJ, Mackie IJ. The VWF/ADAMTS13 axis in the antiphospholipid syndrome: ADAMTS13 antibodies and ADAMTS13 dysfunction. Br J Haematol 2008;141: [80] Lattuada A, Rossi E, Calzarossa C, Candolfi R, Mannucci PM. Mild to moderate reduction of a von Willebrand factor protease (ADAMTS- 13) in pregnant women with HELLP microangiopathic syndrome. Haematologica 2003;88: [81] Hulstein JJ, Van Runnard Heimel PJ, FranxA, Lenting PJ, Bruinse HW, Silence K, et al.acute activation of the endothelium results in increased levels of active von Willebrand factor in hemolysis, elevated liver enzymes and low platelets (HELLP) syndrome. J Thromb Haemost 2006;4:

12 A ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand [82] Zheng XL, Sadler JE. Pathogenesis of thrombotic microangiopathies. Annu Rev Pathol 2008;3: [83] Kokame K, Matsumoto M, Soejima K, Yagi H, Ishizashi H, Funato M, et al. Mutations and common polymorphisms in ADAMTS13 gene responsible for von Willebrand factor-cleaving protease activity. Proc Natl Acad Sci USA 2002;99: [84] Tsai HM. Pathophysiology of thrombotic thrombocytopenic purpura. Int J Hematol 2010;91:1-9. [85] Kiss JE. Thrombotic thrombocytopenic purpura: recognition and management. Int J Hematol 2010;91: [86] Moschcovitz E. Hyaline thrombosis of the terminal arterioles and capillaries: a hitherto undescribed disease. Proc NY Pathol Soc 1924; 24:21-4. [87] Moake JL, Rudy CK, Troll JH, Weinstein MJ, Colannino NM, Azocar NM, et al. Unusually large plasma factor VIII: von Willebrand factor multimers in chronic relapsing thrombotic thrombocytopenic purpura. N Engl J Med 1982;307: [88] Veyradier A, Meyer D. Thrombotic thrombocytopenic purpura and its diagnosis. J Thromb Haemost 2005;3: A. Veyradier Service d hématologie biologique, Hôpital Antoine Béclère, AP-HP, 157, rue de la Porte-de-Trivaux, Clamart, France. Inserm U770, 80, rue du Général-Leclerc, Le Kremlin Bicêtre, France. Faculté de médecine Paris Sud, Université Paris 11, 63, rue Gabriel-Péri, Le Kremlin Bicêtre, France. Centre national de référence des microangiopathies thrombotiques de l adulte et de l enfant, Service des maladies du sang, Hôpital Saint-Antoine, 184, rue du Faubourg-Saint-Antoine, Paris, France. M. Wolf. Service d hématologie biologique, Hôpital Antoine Béclère, AP-HP, 157, rue de la Porte-de-Trivaux, Clamart, France. Inserm U770, 80, rue du Général-Leclerc, Le Kremlin Bicêtre, France. Centre national de référence des microangiopathies thrombotiques de l adulte et de l enfant, Service des maladies du sang, Hôpital Saint-Antoine, 184, rue du Faubourg-Saint-Antoine, Paris, France. A. Stepanian. Inserm U770, 80, rue du Général-Leclerc, Le Kremlin Bicêtre, France. Service d hématologie biologique et transfusion, Hôpital Louis Mourier, AP-HP, 178, rue des renouillers, Colombes, France. P. Coppo. Centre national de référence des microangiopathies thrombotiques de l adulte et de l enfant, Service des maladies du sang, Hôpital Saint-Antoine, 184, rue du Faubourg-Saint-Antoine, Paris, France. Service des maladies du sang, Hôpital Saint-Antoine, 184, rue du Faubourg-Saint-Antoine, Paris, France. Toute référence à cet article doit porter la mention : Veyradier A., Wolf M., Stepanian A., Coppo P. ADAMTS13, la protéase spécifique de clivage du facteur von Willebrand. EMC (Elsevier Masson SAS, Paris), Biologie médicale, A, Disponibles sur Arbres décisionnels Iconographies supplémentaires Vidéos / Animations Documents légaux Information au patient Informations supplémentaires Autoévaluations Cas clinique 12 Biologie médicale

Hémostase et Endocardite Surveillance des anticoagulants. Docteur Christine BOITEUX

Hémostase et Endocardite Surveillance des anticoagulants. Docteur Christine BOITEUX Hémostase et Endocardite Surveillance des anticoagulants Docteur Christine BOITEUX Théorie Endocardites et anticoagulation POUR Thromboses Emboles septiques CONTRE Favorise emboles septiques et diffusion

Plus en détail

IMMUNOLOGIE. La spécificité des immunoglobulines et des récepteurs T. Informations scientifiques

IMMUNOLOGIE. La spécificité des immunoglobulines et des récepteurs T. Informations scientifiques IMMUNOLOGIE La spécificité des immunoglobulines et des récepteurs T Informations scientifiques L infection par le VIH entraîne des réactions immunitaires de l organisme qui se traduisent par la production

Plus en détail

Test direct à l Antiglobuline (TDA ou Coombs direct)

Test direct à l Antiglobuline (TDA ou Coombs direct) Test direct à l Antiglobuline (TDA ou Coombs direct) Mise en évidence par le réactif de Coombs polyspécifique d une fixation des anticorps (Igs) ou des fractions du complément (C3d) sur les hématies du

Plus en détail

Anticorps anti-hla en transplantation rénale

Anticorps anti-hla en transplantation rénale Anticorps anti-hla en transplantation rénale Caroline Suberbielle Laboratoire d'immuno-histocompatibilité Hôpital St Louis Paris Définitions Patient «naïf» Patient sans événement immunisant Homme ou enfant

Plus en détail

5.5.5 Exemple d un essai immunologique

5.5.5 Exemple d un essai immunologique 5.5.5 Exemple d un essai immunologique Test de grossesse Test en forme de bâtonnet destiné à mettre en évidence l'hormone spécifique de la grossesse, la gonadotrophine chorionique humaine (hcg), une glycoprotéine.

Plus en détail

Hémostase. Laboratoire d Hématologie Angers. Octobre 2012 Cours IFSI

Hémostase. Laboratoire d Hématologie Angers. Octobre 2012 Cours IFSI Hémostase Laboratoire d Hématologie Angers Octobre 2012 Cours IFSI Introduction (2) Activation simultanée de différentes fonctions biologiques spécifiques ayant des cinétiques différentes, et se succédant

Plus en détail

TYPAGE HLA CROSSMATCH ANTICORPS ANTI-HLA

TYPAGE HLA CROSSMATCH ANTICORPS ANTI-HLA 16/11/12 TYPAGE HLA CROSSMATCH ANTICORPS ANTI-HLA Chantal GAUTREAU LABORATOIRE HLA S E R V I C E D I M M U N O L O G I E E T D H I S T O C O M PAT I B I L I T É, A P - H P, HÔPITAL SAINT LOUIS, PARIS,

Plus en détail

Gestion des anticoagulants oraux directs dans le cadre de l urgence

Gestion des anticoagulants oraux directs dans le cadre de l urgence Gestion des anticoagulants oraux directs dans le cadre de l urgence Vendredi 23 mai 2014 Valérie Poirier Clément d Audigier Service d Hématologie biologique Hôpital Saint-Antoine Les anticoagulants oraux

Plus en détail

Quelle place pour le test de génération de thrombine au sein du laboratoire de biologie clinique?

Quelle place pour le test de génération de thrombine au sein du laboratoire de biologie clinique? Quelle place pour le test de génération de thrombine au sein du laboratoire de biologie clinique? À la recherche du test «idéal» pour diagnostiquer les troubles de l hémostase C. Lecut, P. Peters, A. Gothot

Plus en détail

PICT DOSAGE DES ANTICOAGULANTS 1. PEFAKIT PICT. Dosage chronométrique. PEFAKIT PiCT. PEFAKIT PiCT Calibrateur HNF. PEFAKIT PiCT Contrôles HNF

PICT DOSAGE DES ANTICOAGULANTS 1. PEFAKIT PICT. Dosage chronométrique. PEFAKIT PiCT. PEFAKIT PiCT Calibrateur HNF. PEFAKIT PiCT Contrôles HNF Dosage chronométrique PICT 1. PEFAKIT PICT Nombre de tests 8-505-01 coffret 80 3 flacons d activateur (2 ml) 3 flacons de réactif Start (2 ml) Mesure des anticoagulants par méthode chronométrique. 1 2

Plus en détail

VI) MARQUEURS BIOLOGIQUES DU CANCER THYROIDIEN

VI) MARQUEURS BIOLOGIQUES DU CANCER THYROIDIEN VI) MARQUEURS BIOLOGIQUES DU CANCER THYROIDIEN 1) Thyroglobuline a) Indications et fréquence Exclusivement sécrétée par la thyroïde Marqueur de choix pour le suivi du cancer différencié de la thyroïde

Plus en détail

Sysmex Educational Enhancement & Development

Sysmex Educational Enhancement & Development Sysmex Educational Enhancement & Development Bulletin d information SEED-Afrique No 6 Le rôle du test D-dimères dans le diagnostic clinique. Introduction à la coagulation L objectif de ce bulletin est

Plus en détail

MAB Solut. vos projets. MABLife Génopole Campus 1 5 rue Henri Desbruères 91030 Evry Cedex. www.mabsolut.com. intervient à chaque étape de

MAB Solut. vos projets. MABLife Génopole Campus 1 5 rue Henri Desbruères 91030 Evry Cedex. www.mabsolut.com. intervient à chaque étape de Mabsolut-DEF-HI:Mise en page 1 17/11/11 17:45 Page1 le département prestataire de services de MABLife de la conception à la validation MAB Solut intervient à chaque étape de vos projets Création d anticorps

Plus en détail

ANTICORPS POLYCLONAUX ANTI IMMUNOGLOBULINES

ANTICORPS POLYCLONAUX ANTI IMMUNOGLOBULINES L OUTIL IDEAL POUR TOUTES LES DETECTIONS IMMUNOCHIMIQUES pour toutes les techniques immunodosages (EIA/ELISA) dot/ westernblot immunohistochimie immunocytochimie cytométrie en flux quel que soit le système

Plus en détail

Sources bibliographiques :

Sources bibliographiques : AP-HM LBM 00PREP01D004 Date d application: 2014-06-16 Version : 3 Rédaction : ALBANESE Brigitte, AILLAUD Marie Françoise, ARNOUX Dominique Validation : MORANGE Pierre, DIGNAT-GEORGE Françoise Approbation

Plus en détail

L immunoenzymologie. Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic cificité des anticorps pour leurs nes

L immunoenzymologie. Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic cificité des anticorps pour leurs nes L immunoenzymologie Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic Basée e sur la très s grande spécificit cificité des anticorps pour leurs antigènes nes Test qualitatif Détection

Plus en détail

Polyarthrite rhumatoïde et biologie

Polyarthrite rhumatoïde et biologie Polyarthrite rhumatoïde et biologie Le point de vue de l'immunologiste Sylvain Laboratoire d'immunologie, sdubucquoi@univ univ-lille2. -lille2.fr FR et PR Définition Auto-anticorps anti-fragment Fc des

Plus en détail

THYROGLOBULINE Marqueur sensible et spécifique

THYROGLOBULINE Marqueur sensible et spécifique THYROGLOBULINE Marqueur sensible et spécifique Club Thyroïde Ile-de-France 2013 Monique LEBAN GH Pitié-Salpêtrière Charles Foix Service de Biochimie Endocrinienne et Oncologique Cancers Différenciés de

Plus en détail

Dosages à réactifs marqués

Dosages à réactifs marqués Dosages à réactifs marqués Principe = réaction Ag-Ac un des deux réactifs (Ag ou Ac) est marqué par un traceur Différentes méthodes selon que le traceur est radioactif (RIA), enzymatique (EIA) ou luminescent

Plus en détail

Suivi Biologique des Nouveaux Anticoagulants

Suivi Biologique des Nouveaux Anticoagulants Suivi Biologique des Nouveaux Anticoagulants M.M. Samama, M-H. Horellou, C. Flaujac, J. Conard Groupe Hémostase-Thrombose Hôtel-Dieu L. Le Flem, C. Guinet, F. Depasse Biomnis - Ivry sur Seine TFPI TFPI

Plus en détail

F.Benabadji Alger 22.11.13

F.Benabadji Alger 22.11.13 F.Benabadji Alger 22.11.13 ALLERGIE DANS LE MONDE 4ÉME RANG MONDIAL (OMS) PROBLÈME DE SANTÉ PUBLIQUE LES CAUSES Notre environnement (industriel, technologique, scientifique et climatique) * Allergènes

Plus en détail

ANEMIE ET THROMBOPENIE CHEZ LES PATIENTS ATTEINTS D UN CANCER

ANEMIE ET THROMBOPENIE CHEZ LES PATIENTS ATTEINTS D UN CANCER ANEMIE ET THROMBOPENIE CHEZ LES PATIENTS ATTEINTS D UN CANCER Dr Michael Hummelsberger, Pr Jean-Gabriel Fuzibet, Service de Médecine Interne, Hôpital l Archet, CHU Nice 1. ANEMIE L étiologie de l anémie

Plus en détail

Les nouveaux anticoagulants oraux sont arrivé! Faut il une surveillance biologique?

Les nouveaux anticoagulants oraux sont arrivé! Faut il une surveillance biologique? Les nouveaux anticoagulants oraux sont arrivé! Faut il une surveillance biologique? Références : Pr Samama Journée de Biologie Praticienne Décembre 2011 I. Gouin-Thibault Journée de Biologie Clinique 2012

Plus en détail

Université Bordeaux Segalen - PACES 2012-2013 ED UE9s Avril 2013

Université Bordeaux Segalen - PACES 2012-2013 ED UE9s Avril 2013 Sélectionner les propositions exactes Université Bordeaux Segalen - PACES 2012-2013 ED UE9s Avril 2013 QCM 1 La plupart des techniques de biologie moléculaire repose sur le principe de complémentarité

Plus en détail

Anticoagulants. Hémostase primaire Coagulation Fibrinolyse Vasoconstriction localisée + agrégation plaquettaire = formation d un thrombus plaquettaire

Anticoagulants. Hémostase primaire Coagulation Fibrinolyse Vasoconstriction localisée + agrégation plaquettaire = formation d un thrombus plaquettaire Anticoagulants I. Antiagrégants plaquettaires 1. Rappel Hémostase primaire Coagulation Fibrinolyse Vasoconstriction localisée + agrégation plaquettaire = formation d un thrombus plaquettaire Formation

Plus en détail

Conception assistée par ordinateur de molécules thérapeutiques

Conception assistée par ordinateur de molécules thérapeutiques Conception assistée par ordinateur de molécules thérapeutiques D. Gilis Bioinformatique génomique et structurale Faculté des sciences appliquées Université Libre de Bruxelles Objectif: illustrer en quoi

Plus en détail

Surveillance biologique d'un traitement par Héparine de Bas Poids Moléculaire (HBPM)

Surveillance biologique d'un traitement par Héparine de Bas Poids Moléculaire (HBPM) Hématologie biologique (Pr Marc Zandecki) Faculté de Médecine CHU 49000 Angers France Surveillance biologique d'un traitement par Héparine de Bas Poids Moléculaire (HBPM) 1. Structure et mode d'action

Plus en détail

Nouveaux anticoagulants oraux (NOAC)

Nouveaux anticoagulants oraux (NOAC) Nouveaux anticoagulants oraux (NOAC) Mécanisme d action Suivi biologique: comment et quand? A.Demulder IRIS-Lab 15/05/2013 1 Anticoagulants «traditionnels»: HNF Parentéral Suivi biologique avec ajustement

Plus en détail

Coombs direct positif (et tout ce qui se cache derrière) : Gestion et interprétation. Dr J.C. Osselaer, Luxembourg, 14.12.2006

Coombs direct positif (et tout ce qui se cache derrière) : Gestion et interprétation. Dr J.C. Osselaer, Luxembourg, 14.12.2006 Coombs direct positif (et tout ce qui se cache derrière) : Gestion et interprétation Dr J.C. Osselaer, Luxembourg, 14.12.2006 Etiologie d'un Coombs Direct positif 1. Autoanticorps immunisation contre GR

Plus en détail

DÉRÉGULATION DU COMPLÉMENT,

DÉRÉGULATION DU COMPLÉMENT, DÉRÉGULATION DU COMPLÉMENT, ADAMTS13 ET GROSSESSE Y. DELMAS, Néphrologie - CHU Pellegrin, BORDEAUX Session 1 Introduction : les microangiopathies de la grossesse Les microangiopathies (MAT) observées durant

Plus en détail

L adhérence cellulaire

L adhérence cellulaire UE2 : Biologie cellulaire Migration cellulaire, domiciliation et cancer Chapitre 2 : L adhérence cellulaire Pierre CAVAILLES Année universitaire 2010/2011 Université Joseph Fourier de Grenoble - Tous droits

Plus en détail

leucémie lymphoïde chronique

leucémie lymphoïde chronique la leucémie lymphoïde chronique S.Taoussi, M.T. Abad Service hématologie, EHS ELCC Blida Ce travail a été réalisé au laboratoire hématologie du CAC Blida avec le soutien du CMNG et du laboratoire de recherche

Plus en détail

Développement d un traitement pour l ataxie de Friedreich. Dr. Jacques P. Tremblay Université Laval Québec, Canada

Développement d un traitement pour l ataxie de Friedreich. Dr. Jacques P. Tremblay Université Laval Québec, Canada Développement d un traitement pour l ataxie de Friedreich Dr. Jacques P. Tremblay Université Laval Québec, Canada Ataxie de Friedreich Maladie héréditaire Transmission récessive Liée au chromosome 9 Due

Plus en détail

Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage dans le vin (OIV-Oeno 427-2010)

Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage dans le vin (OIV-Oeno 427-2010) Méthode OIV- -MA-AS315-23 Type de méthode : critères Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage (OIV-Oeno 427-2010) 1 Définitions des

Plus en détail

AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE

AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE AGREGATION DE BIOCHIMIE GENIE BIOLOGIQUE CONCOURS EXTERNE Session 2005 TRAVAUX PRATIQUES DE BIOCHIMIE PHYSIOLOGIE ALCOOL ET FOIE L éthanol, psychotrope puissant, est absorbé passivement dans l intestin

Plus en détail

LES NOUVEAUX ANTICOAGULANTS

LES NOUVEAUX ANTICOAGULANTS LES NOUVEAUX ANTICOAGULANTS Pr. Alessandra Bura-Rivière, Service de Médecine Vasculaire Hôpital Rangueil, 1 avenue Jean Poulhès, 31059 Toulouse cedex 9 INTRODUCTION Depuis plus de cinquante ans, les héparines

Plus en détail

Prise en charge des AVC chez les patients prenant un nouvel anticoagulant oral. Dr François Rouanet Unité Neuro-Vasculaire, CHU Bordeaux

Prise en charge des AVC chez les patients prenant un nouvel anticoagulant oral. Dr François Rouanet Unité Neuro-Vasculaire, CHU Bordeaux Prise en charge des AVC chez les patients prenant un nouvel anticoagulant oral Dr François Rouanet Unité Neuro-Vasculaire, CHU Bordeaux Déclaration de conflits d intérêts Honoraires reçus pour expertise

Plus en détail

DIAGNOSTIC PRÉNATAL NON INVASIF : LE SANG MATERNEL

DIAGNOSTIC PRÉNATAL NON INVASIF : LE SANG MATERNEL 6 LE TEST DIAGNOSTIC PRÉNATAL NON INVASIF : LE SANG MATERNEL Source : les cellules trophoblastiques Fetal cell Cell isolation Détection 5-6SA Disparition rapide après accouchement Pas de persistance après

Plus en détail

Biologie cellulaire. Perfectionnement à la culture cellulaire. Programme. ParTIe PraTIQUe. ParTIe THÉorIQUe. durée : 4 jours

Biologie cellulaire. Perfectionnement à la culture cellulaire. Programme. ParTIe PraTIQUe. ParTIe THÉorIQUe. durée : 4 jours Biologie cellulaire Perfectionnement à la culture cellulaire durée : 4 jours ingénieurs, chercheurs et chefs de projet connaissances de base en culture cellulaire ou validation du module «initiation à

Plus en détail

Les anticoagulants oraux directs dans la pratique médicale: implications pour le laboratoire d hémostase

Les anticoagulants oraux directs dans la pratique médicale: implications pour le laboratoire d hémostase Pipette 6-2014, Seite 17 18 Les anticoagulants oraux directs dans la pratique médicale: implications pour le laboratoire d hémostase Anne Angelillo-Scherrer Références, Figures 1 5 et Table 1 Références

Plus en détail

Cholestérol. Précautions de prélèvement. Valeurs usuelles. Clinique. Cholestérol total. HDL-cholestérol. LDL-cholestérol. Hypocholestérolémies

Cholestérol. Précautions de prélèvement. Valeurs usuelles. Clinique. Cholestérol total. HDL-cholestérol. LDL-cholestérol. Hypocholestérolémies Cholestérol 89 Cholestérol L hypercholestérolémie est un facteur de risque d athérosclérose comme l ont établi de grandes enquêtes épidémiologiques. Dans le sang, le cholestérol est transporté par des

Plus en détail

CONTROVERSE : IDR OU QUANTIFERON LORS D'UN CONTAGE EN EHPAD?

CONTROVERSE : IDR OU QUANTIFERON LORS D'UN CONTAGE EN EHPAD? CONTROVERSE : IDR OU QUANTIFERON LORS D'UN CONTAGE EN EHPAD? Hélène MANGEARD François MALADRY Tuberculose : infection mycobactérienne Infection mycobactérienne chronique (M. Tuberculosis ++ ou bacille

Plus en détail

RIVAROXABAN ET TESTS DE BIOLOGIE MEDICALE

RIVAROXABAN ET TESTS DE BIOLOGIE MEDICALE RIVAROXABAN ET TESTS DE BIOLOGIE MEDICALE Ce texte est une mise au point d Octobre 2012, dont le contenu sera revu en fonction de l avancement des connaissances Rédacteurs : Isabelle Gouin-Thibault 1,

Plus en détail

DÉFICITS IMMUNITAIRE COMMUN VARIABLE

DÉFICITS IMMUNITAIRE COMMUN VARIABLE DÉFICITS IMMUNITAIRE COMMUN VARIABLE Le présent livret a été rédigé à l attention des patients et de leurs familles. Il ne doit pas remplacer les conseils d un spécialiste en immunologie. 1 Egalement Disponible

Plus en détail

Leucémie. Causes, Facteurs de risques

Leucémie. Causes, Facteurs de risques Leucémie La leucémie ou cancer du sang ou leucose aiguë des organes hématopoïétiques(sang, rate, ganglions, moelle osseuse) est un type de cancer qui entraîne la fabrication par l organisme d un trop grand

Plus en détail

EXERCICES : MECANISMES DE L IMMUNITE : pages 406 407 408 409 410

EXERCICES : MECANISMES DE L IMMUNITE : pages 406 407 408 409 410 EXERCICES : MECANISMES DE L IMMUNITE : pages 406 407 408 409 410 EXERCICE 1 PAGE 406 : EXPERIENCES A INTERPRETER Question : rôles respectifs du thymus et de la moelle osseuse dans la production des lymphocytes.

Plus en détail

Hépatite chronique B Moyens thérapeutiques

Hépatite chronique B Moyens thérapeutiques Hépatite chronique B Moyens thérapeutiques Dr Olfa BAHRI Laboratoire de Virologie Clinique Institut Pasteur de Tunis INTRODUCTION Plus de 300. 10 6 porteurs chroniques de VHB dans le monde Hépatite chronique

Plus en détail

TD de Biochimie 4 : Coloration.

TD de Biochimie 4 : Coloration. TD de Biochimie 4 : Coloration. Synthèse de l expérience 2 Les questions posées durant l expérience 2 Exposé sur les méthodes de coloration des molécules : Générique Spécifique Autres Questions Pourquoi

Plus en détail

Cibles Nouveaux ACO AVK. Fondaparinux HBPM HNF. Xarelto. Eliquis Lixiana. Pradaxa PARENTERAL INDIRECT ORAL DIRECT. FT / VIIa.

Cibles Nouveaux ACO AVK. Fondaparinux HBPM HNF. Xarelto. Eliquis Lixiana. Pradaxa PARENTERAL INDIRECT ORAL DIRECT. FT / VIIa. Accidents hémorragiques aux nouveaux anticoagulants Gérard Audibert Anesthésie Réanimation CHU de Nancy Remerciements au Pr A. Steib GIHP Cibles Nouveaux ACO ORAL DIRECT FT / VIIa PARENTERAL INDIRECT AVK

Plus en détail

CHAPITRE 3 LA SYNTHESE DES PROTEINES

CHAPITRE 3 LA SYNTHESE DES PROTEINES CHAITRE 3 LA SYNTHESE DES ROTEINES On sait qu un gène détient dans sa séquence nucléotidique, l information permettant la synthèse d un polypeptide. Ce dernier caractérisé par sa séquence d acides aminés

Plus en détail

Fiche : CARACTERISATION CYTOGENETIQUE ET MOLECULAIRE DES LEUCEMIES PROLYMPHOCYTAIRES B. Coordonnateurs : F Nguyen Khac, E Chapiro

Fiche : CARACTERISATION CYTOGENETIQUE ET MOLECULAIRE DES LEUCEMIES PROLYMPHOCYTAIRES B. Coordonnateurs : F Nguyen Khac, E Chapiro 1 Fiche : CARACTERISATION CYTOGENETIQUE ET MOLECULAIRE DES LEUCEMIES PROLYMPHOCYTAIRES B Coordonnateurs : F Nguyen Khac, E Chapiro CONTEXTE La leucémie prolymphocytaire B (LPL B) est une pathologie rare,

Plus en détail

3.1 Connaissance et expertise en matière de tests de coagulation

3.1 Connaissance et expertise en matière de tests de coagulation 3 DIAGNOSTIC EN LABORATOIRE 29 1. Il est essentiel de poser un diagnostic correct pour que le patient reçoive le traitement dont il a besoin. Dans différents troubles de coagulation, les symptômes peuvent

Plus en détail

Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies optique et électronique

Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies optique et électronique Université Mohammed V-Agdal Faculté des Sciences de Rabat Laboratoire de Zoologie et de Biologie générale Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies optique et électronique Histologie-Embryologie

Plus en détail

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr Biologie Appliquée Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015 Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr 1 ELISA 2 3 4 [Ac] 5 6 7 8 9 Correction : Faire la moyenne D0-1 et D0-2 pour toute les valeurs

Plus en détail

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY)

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) Lise Vézina, technicienne de laboratoire Michel Lacroix, agronome-phytopathologiste Direction de l innovation scientifique et technologique Au Laboratoire

Plus en détail

ATTESTATION D ACCREDITATION ACCREDITATION CERTIFICATE. N 8-1285 rév. 2

ATTESTATION D ACCREDITATION ACCREDITATION CERTIFICATE. N 8-1285 rév. 2 Convention N 889 Section Santé Humaine ATTESTATION D ACCREDITATION ACCREDITATION CERTIFICATE N 8-1285 rév. 2 Le Comité Français d'accréditation (Cofrac) atteste que : The French Committee for Accreditation

Plus en détail

PRISE EN CHARGE DES PRE ECLAMPSIES. Jérôme KOUTSOULIS. IADE DAR CHU Kremlin-Bicêtre. 94 Gérard CORSIA. PH DAR CHU Pitié-Salpétrière.

PRISE EN CHARGE DES PRE ECLAMPSIES. Jérôme KOUTSOULIS. IADE DAR CHU Kremlin-Bicêtre. 94 Gérard CORSIA. PH DAR CHU Pitié-Salpétrière. PRISE EN CHARGE DES PRE ECLAMPSIES Jérôme KOUTSOULIS. IADE DAR CHU Kremlin-Bicêtre. 94 Gérard CORSIA. PH DAR CHU Pitié-Salpétrière. 75 Pas de conflits d intérêts. Définitions Pré éclampsie Définitions

Plus en détail

Monitoring de l hémoglobine au bloc opératoire Place d une mesure continue non invasive. C Decoene PH CHRU Lille

Monitoring de l hémoglobine au bloc opératoire Place d une mesure continue non invasive. C Decoene PH CHRU Lille Monitoring de l hémoglobine au bloc opératoire Place d une mesure continue non invasive C Decoene PH CHRU Lille objectif Le taux d hémoglobine intervient dans : Le transport d O2 L hémostase L équilibre

Plus en détail

Innovations thérapeutiques en transplantation

Innovations thérapeutiques en transplantation Innovations thérapeutiques en transplantation 3èmes Assises de transplantation pulmonaire de la région Est Le 16 octobre 2010 Dr Armelle Schuller CHU Strasbourg Etat des lieux en transplantation : 2010

Plus en détail

β-galactosidase A.2.1) à 37 C, en tampon phosphate de sodium 0,1 mol/l ph 7 plus 2-mercaptoéthanol 1 mmol/l et MgCl 2 1 mmol/l (tampon P)

β-galactosidase A.2.1) à 37 C, en tampon phosphate de sodium 0,1 mol/l ph 7 plus 2-mercaptoéthanol 1 mmol/l et MgCl 2 1 mmol/l (tampon P) bioch/enzymo/tp-betagal-initiation-michaelis.odt JF Perrin maj sept 2008-sept 2012 page 1/6 Etude de la β-galactosidase de E. Coli : mise en évidence d'un comportement Michaélien lors de l'hydrolyse du

Plus en détail

La reconnaissance moléculaire: la base du design rationnel Modélisation moléculaire: Introduction Hiver 2006

La reconnaissance moléculaire: la base du design rationnel Modélisation moléculaire: Introduction Hiver 2006 La reconnaissance moléculaire: la base du design rationnel En 1890 Emil Fisher a proposé le modèle "serrure et clé" pour expliquer la façon de fonctionner des systèmes biologiques. Un substrat rentre et

Plus en détail

II.5. l inflammation protumorale

II.5. l inflammation protumorale II.5. l inflammation protumorale L une de ses missions est de favoriser la reconstruction des tissus lésés. Les macrophages sécrètent des : enzymes MMP Facteurs de croissance EGF Cet aspect de l inflammation

Plus en détail

2D-Differential Differential Gel Electrophoresis & Applications en neurosciences

2D-Differential Differential Gel Electrophoresis & Applications en neurosciences 2D-Differential Differential Gel Electrophoresis & Applications en neurosciences Jean-Etienne Poirrier Centre de Neurobiologie Cellulaire et Moléculaire Centre de Recherches du Cyclotron Université de

Plus en détail

Les traitements anticoagulants. Emmanuelle de Raucourt Service Hématologie biologique CHVS

Les traitements anticoagulants. Emmanuelle de Raucourt Service Hématologie biologique CHVS Les traitements anticoagulants Emmanuelle de Raucourt Service Hématologie biologique CHVS Plan Rappels sur la physiologie de l hémostase et son exploration. Les héparines Les AVK Les nouveaux anticoagulants

Plus en détail

E03 - Héparines non fractionnées (HNF)

E03 - Héparines non fractionnées (HNF) E03-1 E03 - Héparines non fractionnées (HNF) Les héparines sont des anticoagulants agissant par voie parentérale. 1. Modalités d u tilisation Mode d action : l héparine est un cofacteur de l antithrombine

Plus en détail

Exploration de l hémostase chez les patients traités par NACO

Exploration de l hémostase chez les patients traités par NACO CHU GRENOBLE Exploration de l hémostase chez les patients traités par NACO Pr G Pernod Médecine Vasculaire CH Grenoble Nouveaux anticoagulants: CHU GRENOBLE Administration orale Action immédiate Demi-vie

Plus en détail

Prise en charge de l embolie pulmonaire

Prise en charge de l embolie pulmonaire Prise en charge de l embolie pulmonaire Dr Serge Motte Liège 06.12.14 - Laack TA et Goyal DG, Emerg Med Clin N Am 2004; 961-983 2 PLAN Diagnostic Prise en charge: Phase aiguë: analyse de gravité Choix

Plus en détail

Vers l individualisation des prescriptions en oncologie : rôle du génome constitutionnel

Vers l individualisation des prescriptions en oncologie : rôle du génome constitutionnel Vers l individualisation des prescriptions en oncologie : rôle du génome constitutionnel Jacques Robert I NSERM U916 I nstitut Bergonié Université de Bordeaux Le génome constitutionnel 3 milliards de paires

Plus en détail

INTERET PRATIQUE DU MDRD AU CHU DE RENNES

INTERET PRATIQUE DU MDRD AU CHU DE RENNES INTERET PRATIQUE DU MDRD AU CHU DE RENNES QU EST-CE QUE LE MDRD? Il s agit d une formule permettant d estimer le débit de filtration glomérulaire et donc la fonction rénale La formule est la suivante :

Plus en détail

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde 1 ETSL Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde TP 1 GABIN-GAUTHIER 13/11/2009 I. LA MALADIE... 2 II. TECHNIQUES QUALITATIVES... 2 1. PRINCIPE... 2 2. MODE OPERATOIRE... 3 2.1. WRST ou Waaler Rose

Plus en détail

I - CLASSIFICATION DU DIABETE SUCRE

I - CLASSIFICATION DU DIABETE SUCRE I - CLASSIFICATION DU DIABETE SUCRE 1- Définition : Le diabète sucré se définit par une élévation anormale et chronique de la glycémie. Cette anomalie est commune à tous les types de diabète sucré, mais

Plus en détail

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage 2 HTS 3 Immunologie / Immunologie Informations Techniques 3 I 2 ELISA 96 Puits 3 I 4 ELISA 96 Puits en Barrettes 3 I 6 en Barrettes de 8 Puits 3 I 7 en Barrettes de 12 Puits 3 I 8 en Barrettes de 16 Puits

Plus en détail

Nouveaux anti-thrombotiques. Prof. Emmanuel OGER Pharmacovigilance Pharmaco-épidémiologie Faculté de Médecine Université de Rennes 1

Nouveaux anti-thrombotiques. Prof. Emmanuel OGER Pharmacovigilance Pharmaco-épidémiologie Faculté de Médecine Université de Rennes 1 Nouveaux anti-thrombotiques Prof. Emmanuel OGER Pharmacovigilance Pharmaco-épidémiologie Faculté de Médecine Université de Rennes 1 Classification Antithrombines directes o Lépirudine REFLUDAN o Désirudine

Plus en détail

Dépistage des facteurs de risque modifiables chez les adultes atteints d hypertension (Ensemble d indicateurs : Dispensateurs de soins de santé

Dépistage des facteurs de risque modifiables chez les adultes atteints d hypertension (Ensemble d indicateurs : Dispensateurs de soins de santé (Ensemble d indicateurs : Dispensateurs de soins de santé primaires) Définition Pourcentage des patients âgés de 18 ans et plus qui sont atteints d hypertension et qui ont subi tous les tests suivants

Plus en détail

Biochimie I. Extraction et quantification de l hexokinase dans Saccharomyces cerevisiae 1. Assistants : Tatjana Schwabe Marcy Taylor Gisèle Dewhurst

Biochimie I. Extraction et quantification de l hexokinase dans Saccharomyces cerevisiae 1. Assistants : Tatjana Schwabe Marcy Taylor Gisèle Dewhurst Biochimie I Extraction et quantification de l hexokinase dans Saccharomyces cerevisiae 1 Daniel Abegg Sarah Bayat Alexandra Belfanti Assistants : Tatjana Schwabe Marcy Taylor Gisèle Dewhurst Laboratoire

Plus en détail

AOD : que reste-t-il des tests biologiques?

AOD : que reste-t-il des tests biologiques? Jour AOD : que reste-t-il des tests biologiques? (Et la reversion?) Dr. Olivier Feugeas CRTH, CHU Strasbourg et groupe Bio67/Biosphère Chu de Conflits d Intêrets Bayer Boehringer-Ingelheim BMS-Pfizer Sanofi

Plus en détail

CONCOURS DE L INTERNAT EN PHARMACIE

CONCOURS DE L INTERNAT EN PHARMACIE Ministère de l enseignement supérieur et de la recherche Ministère de la santé et des sports CONCOURS DE L INTERNAT EN PHARMACIE Valeurs biologiques usuelles Edition de Novembre 2009 (6 pages) Conseil

Plus en détail

La cytométrie de flux

La cytométrie de flux TD5 La cytométrie de flux Air sous-pression Signal de formation des gouttes Signal de charge des gouttes Cellules en suspension Liquide de Gaine Vibrateur Ultrason Dˇtecteur de Lumi re Arrt du Faisceau

Plus en détail

Conduite du traitement lors de la gestion péri-opératoire, et des évènements hémorragiques

Conduite du traitement lors de la gestion péri-opératoire, et des évènements hémorragiques Conduite du traitement lors de la gestion péri-opératoire, et des évènements hémorragiques PE Morange Lab.Hématologie Inserm U1062 CHU Timone Marseille Limites du traitement par AVK Fenetre therapeutique

Plus en détail

AVK et insuffisance rénale : une association sans risque?

AVK et insuffisance rénale : une association sans risque? COLLOQUE DE PRATIQUE CLINIQUE AVK et insuffisance rénale : une association sans risque? T.-T. PHAM SMIG HUG 18.01.2012 ANTICOAGULANTS DISPONIBLES (ET LES FUTURS...) AVK (Sintrom, Marcoumar, Warfarin )

Plus en détail

Accidents hémorragiques des anticoagulants, thrombopénie induite par l héparine

Accidents hémorragiques des anticoagulants, thrombopénie induite par l héparine Accidents hémorragiques des anticoagulants, thrombopénie induite par l héparine Item 326. Prescription et surveillance des classes de médicaments les plus courantes chez l'adulte et chez l'enfant. Connaître

Plus en détail

Hémorragies cérébrales et nouveaux anticoagulants

Hémorragies cérébrales et nouveaux anticoagulants Hémorragies cérébrales et nouveaux anticoagulants Gérard Audibert Anesthésie Réanimation CHU de Nancy Remerciements au Pr A. Steib GIHP BHR, Boeringer, LFB, Fresenius-Kabi, Integra-Neurosciences Patient

Plus en détail

FMC DINAN LA MALADIE VEINEUSE THROMBOEMBOLIQUE «NEWS»

FMC DINAN LA MALADIE VEINEUSE THROMBOEMBOLIQUE «NEWS» FMC DINAN LA MALADIE VEINEUSE THROMBOEMBOLIQUE «NEWS» Dinan Port Lanvallay Jeudi 21 mai 2015 Professeur Patrick Jégo Service de Médecine Interne Professeur Patrick Jégo Service de Médecine Interne LA PRISE

Plus en détail

COMMISSION DE LA TRANSPARENCE AVIS. 18 janvier 2006

COMMISSION DE LA TRANSPARENCE AVIS. 18 janvier 2006 COMMISSION DE LA TRANSPARENCE AVIS 18 janvier 2006 ADVATE 1500 UI, poudre et solvant pour solution injectable 1 flacon(s) en verre de 1 500 UI - 1 flacon(s) en verre de 5 ml avec matériel(s) de perfusion(s)

Plus en détail

Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale

Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale ARN du virus de l hépatite C : ARN-VHC ARN-VHC 03VHC1 Novembre 2003 Edité : mars 2006 Annales ARN-VHC 03VHC1 1 / 8 ARN-VHC 03VHC1

Plus en détail

Les nouveaux anticoagulants ont ils une place aux Urgences?

Les nouveaux anticoagulants ont ils une place aux Urgences? Les nouveaux anticoagulants ont ils une place aux Urgences? Emmanuel Andrès Service de Médecine Interne Diabète et Maladies métabolique Clinique Médicale B - CHRU de Strasbourg Remerciements au Professeur

Plus en détail

Hémochromatose génétique non liée à HFE-1 : quand et comment la rechercher? Cécilia Landman 11 décembre 2010

Hémochromatose génétique non liée à HFE-1 : quand et comment la rechercher? Cécilia Landman 11 décembre 2010 Hémochromatose génétique non liée à HFE-1 : quand et comment la rechercher? Cécilia Landman 11 décembre 2010 Métabolisme du fer : hepcidine Fer absorbé par les entérocytes des villosités duodénales : transporteur

Plus en détail

Exploration d une anomalie lipidique (EAL) en 2015: Place du dosage de l Apo A et de l Apo B

Exploration d une anomalie lipidique (EAL) en 2015: Place du dosage de l Apo A et de l Apo B Exploration d une anomalie lipidique (EAL) en 2015: Place du dosage de l Apo A et de l Apo B Nabiha KAMAL Laboratoire de Biochimie Faculté de Médecine et de Pharmacie de Casablanca CHU Ibn Rochd de Casablanca

Plus en détail

TECHNOLOGIE APPLIQUÉE. Schizocytes : recherche et interprétation RÉSUMÉ. Schizocytes, anémie hémolytique, microangiopathie thrombotique.

TECHNOLOGIE APPLIQUÉE. Schizocytes : recherche et interprétation RÉSUMÉ. Schizocytes, anémie hémolytique, microangiopathie thrombotique. Chantal FOSSAT, Marie ROMÉO * Schizocytes : recherche et interprétation RÉSUMÉ La découverte orientée ou fortuite de schizocytes sur un frottis sanguin est fréquente en Biologie Médicale. Témoin d une

Plus en détail

SYNOPSIS INFORMATIONS GÉNÉRALES

SYNOPSIS INFORMATIONS GÉNÉRALES Evaluation de l utilisation d un anticoagulant anti-xa direct oral, Apixaban, dans la prévention de la maladie thromboembolique veineuse chez les patients traités par IMiDs au cours du myélome : étude

Plus en détail

E04a - Héparines de bas poids moléculaire

E04a - Héparines de bas poids moléculaire E04a - 1 E04a - Héparines de bas poids moléculaire Les héparines de bas poids moléculaire (HBPM) sont un mélange inhomogène de chaînes polysaccharidiques obtenues par fractionnement chimique ou enzymatique

Plus en détail

Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale

Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale Annales du Contrôle National de Qualité des Analyses de Biologie Médicale Anticorps anti-tissus non spécifiques d organe (anticorps anti-mitochondries de type M2) Immuno-pathologie 04ATI2 Janvier 2005

Plus en détail

METHODES DE SEPARATION DE PROTEINES : PURIFICATION DE LA GST PAR AFFINITE AU GLUTATHION

METHODES DE SEPARATION DE PROTEINES : PURIFICATION DE LA GST PAR AFFINITE AU GLUTATHION Laboratoire de Physiologie Végétale Université de Neuchâtel (2005) Travaux pratiques METHODES DE SEPARATION DE PROTEINES : PURIFICATION DE LA PAR AFFINITE AU GLUTATHION INTRODUCTION: Les protéines tiennent

Plus en détail

LASER DOPPLER. Cependant elle n est pas encore utilisée en routine mais reste du domaine de la recherche et de l évaluation.

LASER DOPPLER. Cependant elle n est pas encore utilisée en routine mais reste du domaine de la recherche et de l évaluation. LASER DOPPLER INTRODUCTION La technique qui utilise l effet Doppler à partir d un faisceau laser est l une des seules qui permette d enregistrer en continu le reflet de la perfusion superficielle de tissus

Plus en détail

Etude des héparan sulfates protéoglycans anticoagulant dans la reproduction

Etude des héparan sulfates protéoglycans anticoagulant dans la reproduction Etude des héparan sulfates protéoglycans anticoagulant dans la reproduction Pattern d expression chez les rongeurs, dans l ovaire humain, et fonction de reproduction dans des modèles de souris transgéniques

Plus en détail

Ce document a été mis en ligne par le Canopé de l académie de Bordeaux pour la Base Nationale des Sujets d Examens de l enseignement professionnel.

Ce document a été mis en ligne par le Canopé de l académie de Bordeaux pour la Base Nationale des Sujets d Examens de l enseignement professionnel. Ce document a été mis en ligne par le Canopé de l académie de Bordeaux pour la Base Nationale des Sujets d Examens de l enseignement professionnel. Ce fichier numérique ne peut être reproduit, représenté,

Plus en détail

Dépistage Prénatal Non Invasif

Dépistage Prénatal Non Invasif Dépistage Prénatal Non Invasif Dr Mélanie JIMENEZ POCQUET Biologiste - Cytogéneticien L ABOcaryo+ L ABO+ - Chambray les Tours Les patientes connectées Les forums La presse Le presse DPNI : pourquoi

Plus en détail

Gestion pratique des nouveaux anticoagulants oraux Avantages et inconvénients. Dr Serge Motte

Gestion pratique des nouveaux anticoagulants oraux Avantages et inconvénients. Dr Serge Motte Gestion pratique des nouveaux anticoagulants oraux Avantages et inconvénients Dr Serge Motte Bruxelles 24.11.12 - PLAN Points forts et points faibles des nouveaux anticoagulants Questions dans la pratique

Plus en détail

Les renseignements suivants sont destinés uniquement aux personnes qui ont reçu un diagnostic de cancer

Les renseignements suivants sont destinés uniquement aux personnes qui ont reçu un diagnostic de cancer Information importante pour les personnes atteintes d un cancer du poumon non à petites cellules de stade avancé Les renseignements suivants sont destinés uniquement aux personnes qui ont reçu un diagnostic

Plus en détail

Dr Pascale Vergne-Salle Service de Rhumatologie, CHU de Limoges. Membre enseignant chercheur EA 4021

Dr Pascale Vergne-Salle Service de Rhumatologie, CHU de Limoges. Membre enseignant chercheur EA 4021 Dr Pascale Vergne-Salle Service de Rhumatologie, CHU de Limoges Membre enseignant chercheur EA 4021 Rhumatisme inflammatoire chronique Prévalence des SA ies en Europe = 1 à 2% Age moy : 26 ans, ratio homme/femme:

Plus en détail