LISA-TRACKER Premium Infliximab

Dimension: px
Commencer à balayer dès la page:

Download "LISA-TRACKER Premium Infliximab"

Transcription

1 Fr. Juin 0 LISA-TRACKER Premium LTI00 6 déterminations Français DEFINITION Le coffret LISA-TRACKER Premium ( ) permet le dosage par méthode ELISA du TNFα humain, de l (anti-tnfα) ainsi que des anticorps anti-, dans le sérum. Ces tests sont quantitatifs et peuvent s effectuer de manière individuelle ou de manière simultanée grâce à un protocole de dosage uniformisé. VALEUR DIAGNOSTIQUE Les anti-tnfα sont des agents thérapeutiques largement utilisés pour traiter des patients atteints par diverses maladies inflammatoires. L est l un des anti-tnfα préconisé pour le traitement de la polyarthrite rhumatoïde, la maladie de Crohn, la spondylarthrite ankylosante, etc. C est un anticorps monoclonal chimérique capable de se fixer au TNFα. Il permet ainsi de bloquer l action du TNFα responsable de l état inflammatoire. Cependant, au cours du traitement, certains patients peuvent développer des anticorps dirigés contre l. Il en résulte une diminution du taux plasmatique de l anti-tnfα ainsi qu une réapparition ou une augmentation des symptômes de la maladie. Le coffret LISA-TRACKER Premium ( ) permet le dosage de paramètres : TNFα, et anticorps anti-. Ce coffret permet aux praticiens de suivre au cours du temps l évolution du taux plasmatique de ces paramètres chez un patient. ECHANTILLONS Les dosages peuvent être effectués sur plasma ou sérum. Eviter d'utiliser des sérums lipémiques, ainsi que des prélèvements congelés et décongelés plus de fois. Le TNFα étant labile en solution, il est impératif d utiliser les échantillons immédiatement après prélèvement, ou de les congeler pour une utilisation ultérieure. Afin de limiter toutes fixations non spécifiques, il est conseillé de centrifuger et de filtrer les échantillons congelés depuis plus de 6 mois et troubles. PRINCIPE DES TESTS A) Dosage du TNFα Un anticorps monoclonal de capture anti-tnfα est adsorbé sur un support solide constitué de barrettes de 8 micropuits (microplaque). Dans un premier temps, l'échantillon dilué est distribué dans un puits de la microplaque. S'il contient du TNFα, celuici va se fixer à l anticorps de capture. Après incubation, un premier lavage permet d éliminer les éléments non-fixés. On ajoute ensuite un anticorps anti-tnfα biotinylé. Après incubation, un deuxième lavage permet d éliminer l excès d anticorps. Ensuite, la streptavidine conjuguée à la peroxydase de Raifort est ajoutée. Elle se fixe au complexe «anticorps de capture / TNFα / anticorps anti-tnfα biotinylé» précédemment formé. Après incubation, un troisième lavage permet d éliminer l'excès de conjugué. L'étape de chromogénèse est réalisée en déposant le substrat de l'enzyme : TMB (,,, tétraméthylbenzidine). Au cours de celle-ci, se développe une coloration proportionnelle à la quantité de TNFα présente dans l'échantillon. L'addition de H SO (0. M) permet de bloquer la réaction enzymatique. La lecture des densités optiques à 0 nm sur un spectrophotomètre constitue la dernière étape de réalisation du test. Une gamme étalon permet de définir la quantité de TNFα (pg/ml) présente dans l échantillon. B) Dosage de l L antigène TNFα humain est adsorbé sur un support solide constitué de barrettes de 8 micropuits (microplaque). Dans un premier temps, l'échantillon dilué est distribué dans un puits de la microplaque. S'il contient de l, celui-ci va se fixer au TNFα adsorbé. Après incubation, un premier lavage permet d éliminer les éléments non-fixés. On ajoute ensuite un anticorps anti-igg humaines biotinylé. Après incubation, un deuxième lavage permet d éliminer l excès d anticorps. Ensuite, la streptavidine conjuguée à la peroxydase de Raifort est ajoutée. Elle se fixe au complexe «TNFα / / anti-iggh biotinylé» précédemment formé. Après incubation, un troisième lavage permet d éliminer l'excès de conjugué. L'étape de chromogénèse est réalisée en déposant le substrat de l'enzyme: TMB (,,, tétraméthylbenzidine). Au cours de celle-ci, se développe une coloration proportionnelle à la quantité d présente dans l'échantillon. L'addition de H SO (0. M) permet de bloquer la réaction enzymatique. La lecture des densités optiques à 0 nm sur un spectrophotomètre constitue la dernière étape de réalisation du test. Une gamme étalon permet de définir la quantité d (µg/ml) présente dans l échantillon. Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

2 C) Dosage des anticorps anti- L est adsorbé sur un support solide constitué de barrettes de 8 micropuits (microplaque). Dans un premier temps, l'échantillon dilué est distribué dans un puits de la microplaque. S'il contient des anticorps anti-, ceux-ci vont se fixer à l adsorbé. Après incubation, un premier lavage permet d éliminer les éléments non-fixés. On ajoute ensuite de l biotinylé. Après incubation, un deuxième lavage permet d éliminer l excès d anticorps. Ensuite, la streptavidine conjuguée à la peroxydase de Raifort est ajoutée. Elle se fixe au complexe «adsorbé / anticorps anti- / biotinylé» précédemment formé. Après incubation, un troisième lavage permet d éliminer l'excès de conjugué. L'étape de chromogénèse est réalisée en déposant le substrat de l'enzyme : TMB (,,, tétraméthylbenzidine). Au cours de celle-ci, se développe une coloration proportionnelle à la quantité d anticorps anti- présente dans l'échantillon. L'addition de H SO (0. M) permet de bloquer la réaction enzymatique. La lecture des densités optiques à 0 nm sur un spectrophotomètre constitue la dernière étape de réalisation du test. Une gamme étalon permet de définir la quantité d anticorps anti- (ng/ml) présente dans l échantillon. COMPOSITION DU COFFRET Le coffret est composé de familles de réactifs : Couleur bouchons des flacons de réactifs Réactifs «dosage TNFα» Réactifs «dosage» Réactifs «dosage anticorps anti-» Rouge Bleu Jaune Réactifs «communs» Vert, Blanc, Noir ou Violet micropuits Rouge Bleu Jaune - A) Réactifs spécifiques au dosage du TNFα Flacons de «contrôle positif - TNF» (pg/ml), lyophilisés, à reconstituer à l aide du tampon de reprise. A diluer. Un seul flacon est à utiliser par série de tests. Ne pas réutiliser. Les valeurs attendues (pg/ml) sont indiquées sur le flacon. Bouchons rouges. Flacon d anticorps biotinylé. Prêt à l'emploi. Bouchon rouge. Flacon «Tampon de dilution des s - TNFα». Prêt à l'emploi. Bouchon rouge. Flacon «Tampon de reprise». Prêt à l'emploi. x 00µl x 6ml x 8ml Bouchon rouge. Note : Les titres des étalons et du contrôle positif pour le TNFα ont été standardisés par rapport à l étalon international WHO: 88/786. B) Réactifs spécifiques au dosage de l x 6ml Une microplaque de barrettes bleues amovibles, sensibilisée par du TNFα humain. barrettes Cinq flacons «-», (µg/ml). Prêts à l'emploi. Ils peuvent être utilisés plusieurs fois. La quantité d est indiquée sur le flacon. Bouchons bleus. Flacon «contrôle positif -», (µg/ml). A diluer. Il peut être utilisé plusieurs fois. x,ml x 0µl Une microplaque de barrettes rouges amovibles, sensibilisée par un anticorps monoclonal anti-tnfα. barrettes Les valeurs attendues (µg/ml) sont indiquées sur le flacon. Bouchon bleu. Flacons «- TNF» lyophilisés, (pg/ml), à reconstituer en tampon de reprise. A diluer. Un seul flacon est à utiliser par série de tests. Ne pas réutiliser. x 00µl Flacon d anticorps biotinylé. Prêt à l'emploi. Bouchon bleu. x 6ml La quantité de TNFα est indiquée sur le flacon. Bouchons rouges. Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

3 C) Réactifs spécifiques au dosage des anticorps anti- Une microplaque de barrettes jaunes amovibles, sensibilisée par de l. barrettes Cinq flacons «- anti-», (ng/ml). Prêts à l'emploi. Ils peuvent être utilisés plusieurs fois. La quantité en anticorps anti- est indiquée sur le flacon. Bouchons jaunes. x,ml du sachet déshydratant et les remettre immédiatement entre + C et +8 C. Les étalons et le contrôle positif pour le dosage du TNFα doivent être utilisés de manière extemporanée. Ils doivent être utilisés dans l heure qui suit leur reconstitution en «tampon de reprise». Ils sont à usage unique et doivent donc être jetés après utilisation. PREPARATION DES REACTIFS A l exception du TDL, qui peut être préparé à l avance, les réactifs doivent être préparés de manière extemporanée. Flacon «contrôle positif anti-», (ng/ml). A diluer. Il peut être utilisé plusieurs fois. Les valeurs attendues (ng/ml) sont indiquées sur le flacon. Bouchon jaune. Flacon d anticorps biotinylé Prêt à l'emploi. Bouchon jaune. x ml x 6ml. Tampon de dilution et de lavage (TDL) - Diluer le Tampon Phosphate-Tween concentré au /0 en eau distillée. - Durée de conservation : mois entre + C et +8 C (ne plus utiliser si des signes de contaminations ou de modifications apparaissent) Remarque : en présence de cristaux dans la solution concentrée, placer le flacon min. à +7 C avant utilisation.. Préparation des échantillons et des contrôles positifs D) Réactifs communs aux trois dosages Flacon de streptavidine conjuguée à la peroxydase. Prêt à l'emploi. Bouchon vert. Flacon de Tampon Phosphate-Tween ph 7, (concentré 0x) - A reconstituer en eau distillée. Bouchon blanc. Flacon de Substrat (TMB). Prêt à l emploi. Bouchon noir. Flacon de solution d arrêt H SO (0. M). Prêt à l emploi. Bouchon violet. x ml x 00ml x ml x ml a) Echantillons - Dosage du TNFα et dosage des anticorps anti- : les diluer au / en tampon TDL (exemple : 0µl + 0µl de TDL). Agiter vigoureusement au vortex. - Dosage de l : les diluer au /0 en tampon TDL (exemple : 0µl + ml de TDL). Agiter vigoureusement au vortex. b) Contrôles positifs - Dosage du TNFα : dans un premier temps, le contrôle positif lyophilisé doit être reconstitué en ajoutant 00µl de «tampon de reprise» [BUF-A]. Attendre minutes, puis agiter vigoureusement. A nouveau, attendre minutes et agiter vigoureusement. - Dans un second temps, le contrôle positif «reconstitué» doit être dilué au / en tampon TDL (0µl + 0µl de TDL). Agiter vigoureusement au vortex. MATERIEL NECESSAIRE NON FOURNI Eau distillée Pipettes de précision Lecteur muni d'un filtre 0 nm Peigne de lavage 8 canaux. STABILITE ET CONDITIONS DE CONSERVATION Tous les réactifs et les barrettes de puits sensibilisées doivent être conservés entre + C et +8 C dans leur conditionnement d origine. Ne pas utiliser un coffret dont les dates de péremption sont dépassées. Après la première ouverture, conserver les barrettes non utilisées à l'intérieur de la pochette plastique en présence - Dosage de l : le diluer au /0 en tampon TDL (exemple : 0µl + ml de TDL). Agiter vigoureusement au vortex. - Dosage des anticorps anti- : le diluer au / en tampon TDL (exemple : 0µl + 0µl de TDL). Agiter vigoureusement au vortex.. Préparation de la gamme étalon pour le dosage du TNF. Etant donné la labilité du TNFα en phase liquide il est nécessaire de préparer la gamme étalon de manière extemporanée à partir de l étalon lyophilisé [CAL]. - Reconstituer l étalon TNFα lyophilisé, [CAL], avec 00µl de tampon de reprise [BUF-A]. Attendre minutes, puis agiter vigoureusement. A nouveau, attendre minutes et agiter vigoureusement. Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

4 - Diluer l étalon initial reconstitué de ¼ en ¼ (en cascade) en tampon de dilution de l étalon TNFα,, afin d obtenir les étalons de la gamme. Le tampon de dilution de l étalon TNFα,, est utilisé comme «6». Le schéma de dilution est présenté dans le tableau ci-dessous : «reconstitué» 000 pg/ml 000 pg/ml 6 0 pg/ml 6, pg/ml,6 pg/ml 0 pg/ml = = = = = = lyophilisé [TNF-CAL] 00µl «reconstitué» 00µl 00µl 00µl µl de Tampon de reprise [BUF-A] 00µl de 00µl de [DIL- CAL] 00µl de [DIL- CAL] 00µl de [DIL- CAL] [DIL- CAL] - Les étalons à 6 doivent être déposés dans la microplaque. L étalon «reconstitué» ne doit pas être déposé sur la microplaque.. Utilisation des anticorps biotinylés - prêts à l'emploi - Estimer le volume nécessaire à la manipulation et les transférer dans un tube à partir duquel se fera le dépôt.. Utilisation du conjugué (streptavidine-hrp) - prêt à l'emploi - Estimer le volume nécessaire à la manipulation et le transférer dans un tube à partir duquel se fera le dépôt. 6. Utilisation du substrat - prêt à l'emploi - Estimer le volume nécessaire à la manipulation et le transférer dans un tube opaque à partir duquel se fera le dépôt. PRECAUTIONS D'EMPLOI - Retirer tous les réactifs hors de leur logement de conditionnement et les ramener impérativement à température ambiante (+8 C / + C) au minimum une demi-heure avant de commencer le dosage. - La température des réactifs peut influencer le résultat final. - S'assurer que les plaques soient bien égouttées après chaque lavage. - Ne pas utiliser les réactifs si des signes de contaminations ou de modifications apparaissent. Les étalons, les contrôles et le tampon de dilution des s-tnf, sont d'origine humaine. Pour chacun, les recherches d'anticorps anti-hiv et, anti-hcv et d'antigènes de l'hépatite B se sont révélées négatives. S'agissant de produits potentiellement infectieux, il est toutefois nécessaire de les manipuler avec les précautions d'usage. - Les étalons et le contrôle positif pour le dosage du TNFα doivent être utilisés de manière extemporanée. Ils doivent être utilisés dans l heure qui suit leur reconstitution en «tampon de reprise». Ils sont à usage unique et doivent donc être jetés après utilisation. - Les réactifs en solution (excepté la solution d arrêt) contiennent comme agent de conservation, de l azide de sodium à une concentration <0.% (w/v) ou du ProClin 00 à 0.0% (w/v). Ne pas avaler et éviter tout contact avec la peau et les muqueuses. L azide de sodium peut former des mélanges explosifs lors de son élimination dans les canalisations de cuivre ou de plomb. Rincer abondamment lors de telles éliminations. - Le coffret LISA-TRACKER Premium ( ) a été élaboré dans le respect des directives européennes 67/8/CEE et 999//CE en ce qui concerne la classification, l emballage et l étiquetage des préparations dangereuses. - LISA-TRACKER Premium ( ) a été optimisé pour les conditions opératoires précisées dans cette notice. Le non-respect des dilutions, de la préparation des réactifs, du protocole ou la substitution d un réactif par un autre produit peuvent affecter les performances finales du test. MODE OPERATOIRE. Préparation du test Utiliser la feuille de travail contenue dans le coffret pour noter la localisation des échantillons. Pour chaque essai, et pour chaque spécificité de dosage, prévoir : - puits «étalon» (gamme de calibration) - puits «contrôle positif» - puits par échantillon Dans le cas d un dosage «simultané» placer les barrettes correspondantes à chaque spécificité sur un support de plaque. Remarque : Dans le cadre de l utilisation d un automate de dilution/répartition, placer les barrettes dans l ordre suivant : dosage de l, dosage des anti- puis dosage du TNFα.. Incubation des étalons, des contrôles positifs et des échantillons Déposer 00µl par puits pour chaque étalon. Déposer 00µl par puits de chaque contrôle dilué. Déposer 00µl d échantillons dilués dans les puits correspondant aux spécificités recherchées. Laisser incuber 60 minutes à température ambiante. Vider les puits par retournement de la plaque. Procéder à une série de lavages en tampon de dilution et de lavage (TDL) (00µl/puits). Eliminer le liquide résiduel en tamponnant la plaque sur un papier absorbant.. Incubation de l anticorps biotinylé Déposer 00µl d anticorps biotinylé spécifique, prêt à l emploi, dans tous les puits respectifs. Incuber 60 minutes à température ambiante. Vider les puits par retournement de la plaque. Procéder à une série de lavages en tampon de dilution et de lavage (TDL) (00µl/puits). Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

5 Eliminer le liquide résiduel en tamponnant la plaque sur un papier absorbant.. Incubation du Conjugué Déposer 00µl de conjugué prêt à l emploi dans tous les puits. Incuber 0 minutes à température ambiante. Vider les puits par retournement de la plaque. Procéder à une série de lavages en tampon de dilution et de lavage (TDL) (00µl/puits). Eliminer le liquide résiduel en tamponnant la plaque sur un papier absorbant.. Incubation du Substrat Déposer 00µl de substrat dans tous les puits. Incuber minutes à température ambiante et à l abri de la lumière. 6. Arrêt de la réaction Ajouter 00µl de H SO (0. M) dans tous les puits. 7. Lecture Lire la densité optique de chaque puits avec un lecteur de microplaques muni d'un filtre 0nm au cours des 0 minutes suivant l arrêt de la réaction. RESULTATS ET INTERPRETATION C) Dosage des anticorps anti- - La densité optique (DO) de l étalon doit être au moins égale à La valeur (ng/ml) du contrôle positif doit être comprise dans la fourchette d acceptation inscrite sur le flacon. - Tracer la courbe d étalonnage (polynomiale) en portant en abscisse (axe des X) la quantité d anticorps anti- (ng/ml) de chaque étalon et, en ordonnée (axe des Y), la DO correspondante. - La quantité d anticorps anti- de l échantillon dosée peut être lue directement sur la courbe. - Tout échantillon possédant une DO supérieure à celle de l étalon est considéré «hors-gamme». Il peut être redilué afin d estimer précisément la quantité d anticorps anti-. Dans ce cas, il faut tenir compte du facteur de dilution. CARACTERISTIQUES ET PERFORMANCES DES DOSAGES Limite de détection Estimé à partir des 6 échantillons issus d une population «individus sains». Limite de détection TNFα Limite de détection Limite de détection Anti- 0 pg/ml 0, µg/ml 0 ng/ml Au 99 ème percentile Au 9 ème percentile Au 9 ème percentile A) Dosage du TNFα - La densité optique (DO) de l étalon doit être au moins égale à La valeur (pg/ml) du contrôle positif doit être comprise dans la fourchette d acceptation inscrite sur le flacon. - Tracer la courbe d étalonnage (polynomiale) en portant en abscisse (axe des X) la quantité de TNFα (pg/ml) de chaque étalon et, en ordonnée (axe des Y), la DO correspondante. - La quantité de TNFα de l échantillon dosée peut être lue directement sur la courbe. - Tout échantillon possédant une DO supérieure à celle de l étalon est considéré «hors-gamme». Il peut être redilué afin d estimer précisément la quantité de TNFα. Dans ce cas, il faut tenir compte du facteur de dilution. B) Dosage de l - La densité optique (DO) de l étalon doit être au moins égale à La valeur (µg/ml) du contrôle positif doit être comprise dans la fourchette d acceptation inscrite sur le flacon. - Tracer la courbe d étalonnage (polynomiale) en portant en abscisse (axe des X) la quantité d (µg/ml) de chaque étalon et, en ordonnée (axe des Y), la DO correspondante. - La quantité d de l échantillon dosée peut être lue directement sur la courbe. - Tout échantillon possédant une DO supérieure à celle de l étalon est considéré «hors-gamme». Il peut être redilué afin d estimer précisément la quantité d. Dans ce cas, il faut tenir compte du facteur de dilution. Plage de mesure TNFα Anti- 0 pg/ml pg/ml 0, µg/ml - µg/ml 0 ng/ml - 00 ng/ml Etude des substances interférentes LISA-TRACKER Premium ( ) a été évalué sur une population de sérums contenant des substances potentiellement interférentes (cryoglobulines, facteurs rhumatoïdes, anticorps hétérophiles, taux élevés de triglycérides, de bilirubine, d IgG et/ou d IgM, de protéine Cq) et sur une population de sérums de patients présentant des maladies autoimmunes. Aucune interférence n a été détectée. Précision Paramètres TNFα (pg/ml) (µg/ml) Anti- (ng/ml) Intra-essai ( tests dans le même essai) Valeur moyenne CV (%) Inter-essais ( tests dans essais différents) Valeur moyenne CV (%) Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

6 Justesse Le standard international WHO 88/786 pour le TNFα a été dilué à 000pg/ml et testé en parallèle des essais de précision. TNFα (pg/ml) International WHO 88/786 dilué à 000pg/ml LIMITES Intra-essai ( tests dans le même essai) Valeur moyenne CV (%) Inter-essais ( tests dans essais différents) Valeur moyenne CV (%) Le dosage de l montre une réaction croisée vis-àvis des sérums de patients traités par de l Adalimumab et de l Etanercept, qui sont autres anti-tnfα couramment utilisés. BIBLIOGRAPHIE Ainsworth MA et al. Tumor necrosis factor-alpha binding capacity and anti-infliximab antibodies measured by fluidphase radioimmunoassays as predictors of clinical efficacy of infliximab in Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 008 Apr;0():9-8. Afif W et al.clinical Utility of Measuring and Human Anti- Chimeric Antibody Concentrations in Patients With Inflammatory Bowel Disease. Am J Gastroenterol 00; 0: 9. Arends S et al. The formation of autoantibodies and antibodies to TNF-α blocking agents in relation to clinical response in patients with ankylosing spondylitis. Clin Exp Rheumatol. 00 Sep-Oct;8():66-8. Baert F et al. Influence of Immunogenicity on the Long-Term Efficacy of in Crohn s Disease. N Engl J Med 00;8:60-8. Bartelds GM et al. Development of antidrug antibodies against adalimumab and association with disease activity and treatment failure during long-term follow-up. JAMA. 0 Apr ;0():60-8. Bendtzen K. Is There a Need for Immunopharmacologic Guidance of Anti Tumor Necrosis Factor Therapies. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol. 6, No., April 0, pp Candon S et al. Clinical and biological consequences of immunization to infliximab in pediatric Crohn's disease. Clin Immunol. 006 Jan;8():-9. Choy et al. Efficacy of a novel PEGylated humanized anti-tnf (CDP870) in patients with rheumatoid arthritis : a phase II doubleblinded, randomized, dose escalating trial. Rheumatology 00;:-7. Jaminitski et al. The presence or absence of antibodies to infliximab or adalimumab determines the outcome of switching to etanercept. Rheum Dis. 0 Feb;70():8-8. Koren et al. Recommendation on risk-based strategies for detection and characterization of antibodies against biotechnology products. Journal of Immunological Methods, (008) -9. Korswagen LA et al. Venous and Arterial Thromboembolic Events in Adalimumab-Treated Patients With Anti-adalimumab Antibodies. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol. 6, No., April 0, pp Krzysiek R et al. Circulating Concentration of and Response to Treatment in Ankylosing Spondylitis: Results From a Randomized Control Study. Arthritis & Rheumatism (Arthritis Care & Research) Vol. 6, No., May, 009, pp Marotte et al. Circulating tumour necrosis factor-alpha bioactivity in rheumatoid arthritis patients treated with infliximab: link to clinical response. Arthritis Res Ther. 00;7():R9-. Mire-Sluis et al. Recommandation for the design and optimization of immunoassays used in the dectection of host antibodies against biotechnology products. Journal of Immunological Methods, 89 (00) -6. Radstake TRDJ et al. Formation of antibodies against infliximab and adalimumab strongly correlates with functional drug levels and clinical responses in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 009;68:79 7. Ram Raj Singh, et al. TNFα blockade in human diseases : mechanisms and future. Clin.Immunol., 008 February ; 6():- 6. Seow CH et al. Trough serum infliximab: a predictive factor of clinical outcome for infliximab treatment in acute ulcerative colitis. Gut. 00 Jan;9():9-. Sparado A et al. Switching from infliximab or etanercept to adalimumab in resistant or intolerant patients with spondyloarthritis: a -year study. Rheumatology (Oxford). 00 Jun;9(6):07-. Steenholdt C, et al. Cut-off levels and diagnostic accuracy of infliximab trough levels and anti-infliximab antibodies in Crohn's disease. Scandinavian Journal of Gastroenterology, March 0, Vol. 6, N, Pages 0-8. Takeuchi et al. Baseline tumour necrosis factor alpha levels predict the necessity for dose escalation of infliximab therapy in patients with rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 0 Jul;70(7):08-. Ternant D et al. An enzyme-linked immunosorbent assay for therapeutic drug monitoring of. Ther Drug Monit., 006 April ; 8():69-7. Van den Bemt BJF et al. Anti-infliximab antibodies are already detectable in most patients with rheumatoid arthritis halfway through an infusion cycle: an open-label pharmacokinetic cohort study. BMC Musculoskeletal Disorders 0. Vetterlein et al. No antibodies to PEG detected in patients treated with certolizumab pegol. Ann Rheum Dis 008;67(Suppl II):6. Wolbink GJ et al. Development of Anti-infliximab Antibodies and Relationship to Clinical Response in Patients With Rheumatoid Arthritis. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol., No., March 006, pp7 7. Desroches M et al. Treatment failure with antagonists of TNF-α: mechanisms and implications for the care of patients. Eur. Cytokine Netw., Vol. n, December 00, 6-. DeVries et al. Inefficacy of infliximab in ankylosing spondylitis is correlated with antibody formation. Ann Rheum Dis. 007 Jan;66():-. Edrees et al. Anti-tumor necrosis factor (TNF) therapy in rheumatoid arthritis: correlation of TNF-alpha serumlevel with clinical response and benefit from changing dose or frequency of infliximab infusions. Clin Exp Rheumatol. 00 Jul-Aug;():69-7. Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 6/8

7 SCHEMA RECAPITULATIF DU MODE OPERATOIRE A) Dilution des échantillons : Dosage du TNFα Dosage de l Dosage des anticorps anti- au / au /0 au / B) Dilution des contrôles positifs : Dosage du TNFα Dosage de l Dosage des anticorps anti- au / * au /0 au / * le contrôle positif lyophilisé est à reconstituer avec 00µl de «tampon de reprise», puis à diluer au ½ en TDL. C) Préparation de la gamme étalon TNFα : Remarque : la gamme étalon TNFα doit être fabriquée à partir de l étalon TNFα et utilisée dans l heure. «reconstitué» pg/ml 000 pg/ml 0 pg/ml 6, pg/ml,6 pg/ml 0 pg/ml = = = = = = lyophilisé [TNF-CAL] 00µl «reconstitué» 00µl 00µl 00µl µl de Tampon de reprise [BUF-A] 00µl de 00µl de 00µl de 00µl de D) Mode opératoire : Réactifs s* Contrôles positifs dilués Echantillons dilués Incubation Lavage** Anticorps secondaires biotinylés Incubation Lavage** Streptavidine-HRP Incubation Lavage** Substrat (TMB) Incubation Solution «stop» Mode opératoire 00µl / puits h à température ambiante Laver fois en tampon de dilution/lavage (TDL) : x 00µl / puits 00µl / puits (réactifs spécifiques) h à température ambiante Laver fois en tampon de dilution/lavage (TDL) : x 00µl / puits 00µl / puits 0 minutes à température ambiante Laver fois en tampon de dilution/lavage (TDL) : x 00µl / puits 00µl / puits minutes à température ambiante et à l abri de la lumière 00µl / puits * Les étalons pour le dosage du TNFα doivent être fabriqués de manière extemporannée. En revanche, les étalons pour le dosage de l et des anticorps anti- sont prêts à l emploi. ** Eliminer le liquide résiduel en tamponnant la plaque sur un papier absorbant. Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 7/8

8 E) Exemples de configuration de dosage : a) 6 sérums à doser en, anti- et TNFα A B C D E F C+ 8 6 C+ 8 6 C+ 8 6 G H Dosage Dosage anti- Dosage TNFα b) patients à doser en, anti- et TNFα A 6 B C D E F C+ C+ C+ G H Dosage Dosage anti- Dosage TNFα Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 8/8

9 c) 6 sérums à doser en anti A 9 B 0 C D 6 E 7 F C+ 8 6 G 9 7 H Dosage anti- INDEX DES SYMBOLES Déclaration de conformité CE Test ELISA Référence produit Numéro de Lot Date d expiration Dispositif de Diagnostic In Vitro Nombre de tests Consulter les instructions d utilisation Limites de température Risque biologique Contient de l azide de sodium A reconstituer Siège social -6 bld de Beaubourg, Actipôle Bat, Croissy Beaubourg 77 Marne la Vallée Cx France Tél : Fax : Internet : Notice technique, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 9/8

10

11 Ag. June 0 LISA-TRACKER Premium LTI00 6 determinations English DEFINITION LISA-TRACKER Premium ( ) is an enzyme linked immunoassay (ELISA) for the quantitative determination of human TNFα, (anti-tnfα) and anti- antibodies in human serum samples. These tests can be separatly or simultaneously done by following the standardized assay protocole. DIAGNOSTIC VALUE Anti-TNFα are therapeutic agents widely used to treat patients with various inflammatory diseases. is one of the anti-tnfα recommended for the treatment of the rheumatoid arthritis, Crohn s disease, ankylosing spondylitis, etc. This chimeric monoclonal antibody is able to bind TNFα. It blocks the action of TNFα responsible for the inflammatory state. However, during the treatment, some patients can develop antibodies against. Consequently, the plasmatic level of anti-tnfα decreases and simultaneous the disease symptoms reappear or increase. LISA-TRACKER Premium ( ) allows the detection of parameters: TNFα, and anti- antibodies. This kit allows the physician to monitor the level of these parameters in patient sera. SAMPLES COLLECTION AND HANDLING The test should be performed on serum or on plasma. Lipemic sera should be avoided, as well as samples which have been frozen and defrosted more than once. The TNFα being unstable in solution, it is imperative to use samples immediately after blood taking. If determination is not performed immediately, samples should be frozen. To avoid any non-specific binding, samples which have been frozen for more than 6 months or which are cloudy, should be centrifuged and filtered. ASSAY PRINCIPLE A. Dosage of TNFα A monoclonal anti-tnfα antibody is coated onto a polystyrene microtiter plate ( strips of 8 wells). First, the diluted sample is added to the antibody coated well, which allows to bind. After incubation, unbound proteins are removed by washing. Anti-TNFα biotinylated antibodies is added. After incubation, unbound antibodies are removed by washing. Then horseradish peroxydase labelled streptavidin is added. The streptavidin binds to the complex formed with biotinylated anti-tnfα antibodies. After incubation, the wells are washed again to eliminate any excess of conjugate. The bound enzyme is revealed by addition of substrate TMB (,,, tetramethylbenzidin). The colour intensity is proportional to the amount of TNFα. Adding H SO (0.M) allows to stop the enzymatic reaction. After stopping the reaction by H SO (0.M), the optical density is read by a spectrophotometer at 0nm. A range of calibration allows to define the quantity of TNFα of each patient samples expressed in pg/ml. B. Dosage of The TNFα is coated onto a polystyrene microtiter plate ( strips of 8 wells). First, the diluted sample is added to the antibody coated well, which allows to bind. After incubation, unbound proteins are removed by washing. Anti-human IgG biotinylated antibodies is added. After incubation, unbound antibodies are removed by washing Then horseradish peroxydase labelled streptavidin is added. The streptavidin binds to the complex formed with biotinylated anti-igg antibodies. After incubation, the wells are washed again to eliminate any excess of conjugate. The bound enzyme is revealed by addition of substrate TMB (,,, tetramethylbenzidin). The colour intensity is proportional to the amount of. Adding H SO (0.M) allows to stop the enzymatic reaction. After stopping the reaction by H SO (0.M), the optical density is read by a spectrophotometer at 0nm. A range of calibration allows to define the quantity of of each patient samples expressed in µg/ml. C. Dosage of anti- The is coated onto a polystyrene microtiter plate ( strips of 8 wells). First, the diluted sample is added to the antibody coated well, which allows to bind. After incubation, unbound proteins are removed by washing. Biotinylated infliximab is added. After incubation, unbound antibodies are removed by washing Then horseradish peroxydase labelled streptavidin is added. The streptavidin binds to the complex formed with biotinylated. After incubation, the wells are washed again to eliminate any excess of conjugate. The bound enzyme is revealed by addition of substrate TMB (,,, tetramethylbenzidin). The colour intensity is proportional to the amount of anti- antibodies. Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 0/8

12 Adding H SO (0.M) allows to stop the enzymatic reaction. After stopping the reaction by H SO (0.M), the optical density is read by a spectrophotometer at 0nm. A range of calibration allows to define the quantity of anti- antibodies of each patient samples expressed in ng/ml. REAGENTS reagent families : Color TNFα reagents reagents anti- antibodies reagents cap of vials Red Blue Yellow Common reagents Green, White, Black or Purple microwells Red Blue Yellow - A) Specific reagents for the TNFα determination strips of individual breakaway red wells coated with a monoclonal anti-tnfα antibodies. «- TNFα» lyophilized vial (pg/ml), To reconstitute with Buffer A. To dilute. A single vial is to be used for each serie of tests. Do not reuse. The quantity of TNF α is indicated on the vial label. Red cap «Positive control - TNFα» (pg/ml), lyophilized vial. To reconstitute with Buffer A. To dilute. A single vial is to be used for each serie of tests. Do not reuse. The quantity of TNF α is indicated on the vial label. Red cap Biotinylated antibody vial. Red cap «dilution buffer - TNFα» vial. Red cap Buffer A vial. strips x 00µL x 00µL x 6mL x 8mL x 6mL Red cap Note : s and positive control for TNFα titer are standardized against the WHO reference: 88/786. B) Specific reagents for the determination strips of individual breakaway blue wells coated with human TNFα. strips vials of s, (µg/ml). The vials can be reused several times. The quantity of is indicated on the vial label. Blue cap «Positive control -», (µg/ml). To dilute. The vials can be reused several times. The quantity of is indicated on the vial label. Blue cap Biotinylated antibody vial. Blue cap C) Specific reagents for the anti- antibodies determination x,ml x 0µL x 6mL strips of individual breakaway yellow wells coated with. strips vials of «anti-» s, (ng/ml). The vials can be reused several times. The quantity of anti- is indicated on the vial label. Yellow cap «Positive control anti-infliximab», (ng/ml). To dilute. The vial can be reused several times. The quantity of anti- is indicated on the vial label. Yellow cap Biotinylated antibody vial. Yellow cap x,ml x ml x 6mL Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

13 D) Common reagents HRP labelled Streptavidin. Green cap Phosphate-Tween Buffer ph 7, (0x) To reconstitute with distilled water. White cap Substrate (TMB). Black cap Stop solution - H SO (0. M). Purple cap MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED x ml x 00mL x ml x ml b. Positive controls - TNFα determination - The lyophilized control should be reconstituted with 00µL of buffer A, [BUF-A]. Wait minutes, then mix vigorously. Repeat this agitation step. - Then, dilute the reconstituted positive control to ½ in TDL. Ex : 0µL positive control + 0µL TDL Vortex vigorously. - determination - Dilute to /0 in TDL Ex : 0µL positive control + ml TDL - Vortex vigorously. - anti- determination - Dilute to / in TDL Ex : 0µL positive control + 0µL TDL - Vortex vigorously. distilled water precision pipettes microplate spectrophotometer with 0 nm filter 8 channel pipettes STABILITY AND STORAGE Store reagents and micro-wells at + C/+8 C in their own package. Do not use kits beyond the expiration date. Store unused strips into their plastic bag with the desiccant. Store all components immediately after use again at + C/+8 C. The standard and the positive control for the dosage of the TNFα must be used in an extemporaneous way. They must be used within the hour after their reconstitution in buffer A. They are single-used and must be discarded after use. SETUP Except the TDL, which can be prepare in advance, all reagents must be prepared extemporaneously.. Dilution and Wash buffer (TDL) - Dilute concentrated Phosphate-Tween Buffer /0 in distilled water. - Shelf life : month at + C/+8 C (avoid to use if signs of contamination or other visible changes occur). NB. If there are crystals in the concentrated solution, warm the bottle up to +7 C for minutes before use.. Preparation of samples and positive controls a. Samples - TNFα and anti- determination - Dilute to / in TDL Ex : 0µL sample + 0µL TDL - Vortex vigorously. - determination - Dilute to /0 in TDL Ex : 0µL sample + ml TDL - Vortex vigorously.. Preparation of the calibration range for the TNF Considering the TNFα lability in solution, the calibration range should be prepared just before performed the test. - The lyophilized TNFα standard, [TNF-CAL], must be reconstituted with 00µL of buffer A, [BUF-A]. Wait minutes, then mix vigorously. Repeat this agitation step. - Then proceed to the serial dilution to ¼ of the standard into the standard buffer,. The standard buffer, [DIL- CAL], will be use as standard 6. The dilution protocole is presented in the table below. «reconstituted» 000 pg/ml 000 pg/ml 0 pg/ml 6, pg/ml,6 pg/ml 6 0 pg/ml = = = = = = lyophilized [TNF-CAL] 00µL «reconsti tuted» 00µL 00µL 00µL µL Buffer A [BUF-A] 00µL 00µL 00µL 00µL Note : only standards to 6 should be used for the calibration curves.. Use of ready-to-use biotinylated antibody. - Estimate the amount required for handling and transfer to a tube.. Use of ready-to-use HRP Streptavidin conjugate. - Estimate the amount required for handling and transfer to a tube. 6. Use of ready-to-use substrate. - Estimate the amount required for handling and transfer to a dark tube. Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

14 PRECAUTIONS Unpack all reagents in order to let them warm at room temperature (+8 C/+ C) at least half an hour before starting the test. The temperature of the reagents can impact the final result. Check that all plates are well drained after each wash. Avoid to use reagents if signs of contamination or other visible changes occur. Human sources for the preparation of standards, controls and the standard dilution buffer-tnf, have been tested and found negative for antibody to HIV and, antibody to hepatitis C virus and hepatitis B virus antigen. Nevertheless, no test can offer complete assurance that HIV, hepatitis B virus or other infectious agents are absent. Therefore, the reagents should be handled as potentially infective materials. The standard and the positive control for the dosage of the TNFα must be used extemporaneously. They must be used within the hour after their reconstitution in buffer A. They are single-use and must be discarded after use. Reagents in solution (except for substrate buffer and stop solution) contain less of 0.% (w/v) sodium azide and 0.0% (w/v) of Proclin 00. Do not eat and avoid contact with skin and eyes. Azide can form explosive mixtures in copper or lead piping. Rinse thoroughly after flushing. LISA-TRACKER Premium ( ) has been developed according CE directives 67/8/EEC and 999//EC relating to the classification, packaging and labeling of dangerous preparations. LISA-TRACKER Premium ( ) has been optimized for the use as describe in this procedure. Do not substitute other manufacter s reagents. Dilution or adulteration of these reagents may also affect the performance of the test. Close adherence to the test procedure will assure optimal performance. METHOD. Preparing the test Use the work sheet to note the sample locations. Set out: - standard wells - well for positive control - well for each sample For a simultaneous testing of the parameters, detach the exact number of wells needed. Return unused wells to plastic pouch provided in the kit, with the desiccant bag. Remark : If a dispensing/diluting device is used, place the specific wells in the following order : dosage of, dosage of anti- then dosage of TNFα.. Samples, positive controls and standards incubation Add 00 µl of standards, diluted controls or samples. Incubate for 60 minutes at room temperature (+8 C/+ C). Wash step: Remove the content of the wells by rapid inversion. Wash times with 00µL of TDL buffer. Dry the microplate by tapping it gently on an absorbent paper to eliminate the excess of liquid.. Incubation of biotinylated antibodies Add 00µL of specific biotinylated antibodies in identified wells. Incubate for 60 minutes at room temperature (+8 C/+ C). Wash step: Remove the content of the wells by rapid inversion. Wash times with 00µL of dilution and washing buffer. Dry the microplate by tapping it gently on an absorbent paper to eliminate the excess of liquid.. Incubation of Conjugate Add 00µL of conjugate. Incubate for 0 minutes at room temperature (+8 C/+ C). Wash step: Remove the content of the wells by rapid inversion. Wash times with 00µL of dilution and washing buffer. Dry the microplate by tapping it gently on an absorbent paper to eliminate the excess of liquid.. Incubation of Substrate Add 00µL substrate into each well. Incubate for minutes at room temperature (+8 C/+ C), in the dark. 6. Stop of the reaction Add 00µL of H SO (0,M) to each well. 7. Reading Read the optical density of each well at 0nm within 0 minutes after stopping reaction. RESULTS AND INTERPRETATION A. Dosage of TNFα - The OD of the standard should be at least The positive control value should be comprised into the range indicated on the vial label. - Trace the standard curve (polynomial curve), plotting the units of the standard points (pg/ml) along the abscissa (X axis) and the corresponding OD values along the ordinate (Y axis). - The TNFα value can be directly read on the curve. - Samples with values greater than that of standard may be diluted to obtain a more precise result. The number of units should be multiplied by the selected dilution. B. Dosage of - The OD of the standard should be at least The positive control value should be comprised into the range indicated on the vial label. - Trace the standard curve (polynomial curve), plotting the units of the standard points (µg/ml) along the abscissa (X axis) and the corresponding OD values along the ordinate (Y axis). - The value can be directly read on the curve. - Samples with values greater than that of standard may be diluted to obtain a more precise result. The number of units should be multiplied by the selected dilution. Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

15 C. Dosage of anti- - The OD of the standard should be at least The positive control value should be comprised into the range indicated on the vial label. - Trace the standard curve (polynomial curve), plotting the units of the standard points (ng/ml) along the abscissa (X axis) and the corresponding OD values along the ordinate (Y axis). - The anti- value can be directly read on the curve. - Samples with values greater than that of standard may be diluted to obtain a more precise result. The number of units should be multiplied by the selected dilution. CHARACTERISTICS AND PERFORMANCE OF THE TEST Limits of detection / threshold values Estimated on 6 healthy patient samples. Reference material precision The WHO 88/786 International standard for TNFα was diluted at 000pg/mL and tested during the precision tests. Intra-run ( tests in a same assay) Inter-runs ( tests different assays) TNFα (pg/ml) Mean CV (%) Mean CV (%) International WHO 88/786 at 000pg/mL LIMITS Sera of patient treated with Adalimumab or Etanercept, others anti-tnfα, may cross-reacted with test. Limit of detection TNFα Limit of detection Limit of detection Anti- 0 pg/ml 0. µg/ml 0 ng/ml 99 th percentile 9 th percentile 9 th percentile Assay range TNFα Anti- 0 pg/ml pg/ml 0, µg/ml - µg/ml 0 ng/ml - 00 ng/ml Interfering Substances Study LISA-TRACKER Premium ( ) was evaluated to assess potential cross reactivity to other antibodies and interference from serum components (cryoglobulins, rheumatoid factors, heterophilic antibodies, high levels of triglycerides, bilirubin, IgG and/or IgM, and Cq proteins, autoantibodies). No interference was detected. Precision Intra-run ( tests in a same assay) Inter-runs ( tests different assays) Parameters Mean CV (%) Mean CV (%) TNFα (pg/ml) (µg/ml) Anti- (ng/ml) Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

16 REFERENCES Ainsworth MA et al. Tumor necrosis factor-alpha binding capacity and anti-infliximab antibodies measured by fluidphase radioimmunoassays as predictors of clinical efficacy of infliximab in Crohn's disease. Am J Gastroenterol. 008 Apr;0():9-8. Afif W et al.clinical Utility of Measuring and Human Anti- Chimeric Antibody Concentrations in Patients With Inflammatory Bowel Disease. Am J Gastroenterol 00; 0: 9. Arends S et al. The formation of autoantibodies and antibodies to TNF-α blocking agents in relation to clinical response in patients with ankylosing spondylitis. Clin Exp Rheumatol. 00 Sep- Oct;8():66-8. Baert F et al. Influence of Immunogenicity on the Long-Term Efficacy of in Crohn s Disease. N Engl J Med 00;8:60-8. Bartelds GM et al. Development of antidrug antibodies against adalimumab and association with disease activity and treatment failure during long-term follow-up. JAMA. 0 Apr ;0():60-8. Bendtzen K. Is There a Need for Immunopharmacologic Guidance of Anti Tumor Necrosis Factor Therapies. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol. 6, No., April 0, pp Candon S et al. Clinical and biological consequences of immunization to infliximab in pediatric Crohn's disease. Clin Immunol. 006 Jan;8():-9. Choy et al. Efficacy of a novel PEGylated humanized anti-tnf (CDP870) in patients with rheumatoid arthritis : a phase II doubleblinded, randomized, dose escalating trial. Rheumatology 00;:-7. Desroches M et al. Treatment failure with antagonists of TNF-α: mechanisms and implications for the care of patients. Eur. Cytokine Netw., Vol. n, December 00, 6-. Radstake TRDJ et al. Formation of antibodies against infliximab and adalimumab strongly correlates with functional drug levels and clinical responses in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis 009;68:79 7. Ram Raj Singh, et al. TNFα blockade in human diseases : mechanisms and future. Clin.Immunol., 008 February ; 6():- 6. Seow CH et al. Trough serum infliximab: a predictive factor of clinical outcome for infliximab treatment in acute ulcerative colitis. Gut. 00 Jan;9():9-. Sparado A et al. Switching from infliximab or etanercept to adalimumab in resistant or intolerant patients with spondyloarthritis: a -year study. Rheumatology (Oxford). 00 Jun;9(6):07-. Steenholdt C, et al. Cut-off levels and diagnostic accuracy of infliximab trough levels and anti-infliximab antibodies in Crohn's disease. Scandinavian Journal of Gastroenterology, March 0, Vol. 6, N, Pages 0-8. Takeuchi et al. Baseline tumour necrosis factor alpha levels predict the necessity for dose escalation of infliximab therapy in patients with rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 0 Jul;70(7):08-. Ternant D et al. An enzyme-linked immunosorbent assay for therapeutic drug monitoring of. Ther Drug Monit., 006 April ; 8():69-7. Van den Bemt BJF et al. Anti-infliximab antibodies are already detectable in most patients with rheumatoid arthritis halfway through an infusion cycle: an open-label pharmacokinetic cohort study. BMC Musculoskeletal Disorders 0. Vetterlein et al. No antibodies to PEG detected in patients treated with certolizumab pegol. Ann Rheum Dis 008;67(Suppl II):6. Wolbink GJ et al. Development of Anti-infliximab Antibodies and Relationship to Clinical Response in Patients With Rheumatoid Arthritis. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol., No., March 006, pp7 7. DeVries et al. Inefficacy of infliximab in ankylosing spondylitis is correlated with antibody formation. Ann Rheum Dis. 007 Jan;66():-. Edrees et al. Anti-tumor necrosis factor (TNF) therapy in rheumatoid arthritis: correlation of TNF-alpha serumlevel with clinical response and benefit from changing dose or frequency of infliximab infusions. Clin Exp Rheumatol. 00 Jul-Aug;():69-7. Jaminitski et al. The presence or absence of antibodies to infliximab or adalimumab determines the outcome of switching to etanercept. Rheum Dis. 0 Feb;70():8-8. Koren et al. Recommendation on risk-based strategies for detection and characterization of antibodies against biotechnology products. Journal of Immunological Methods, (008) -9. Korswagen LA et al. Venous and Arterial Thromboembolic Events in Adalimumab-Treated Patients With Anti-adalimumab Antibodies. ARTHRITIS & RHEUMATISM Vol. 6, No., April 0, pp Krzysiek R et al. Circulating Concentration of and Response to Treatment in Ankylosing Spondylitis: Results From a Randomized Control Study. Arthritis & Rheumatism (Arthritis Care & Research) Vol. 6, No., May, 009, pp Marotte et al. Circulating tumour necrosis factor-alpha bioactivity in rheumatoid arthritis patients treated with infliximab: link to clinical response. Arthritis Res Ther. 00;7():R9-. Mire-Sluis et al. Recommandation for the design and optimization of immunoassays used in the dectection of host antibodies against biotechnology products. Journal of Immunological Methods, 89 (00) -6. Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page /8

17 SUMMARY OF METHOD A. Sample Dilution TNFα Anti- / /0 / B. Positive Control Dilution TNFα Anti- / * /0 / The lyophilized positive control should be reconstituted with 00µL of Buffer A then the solution should be diluted with TDL (/). C. TNFα calibration range Rk : the TNFα calibration range should be elaborate with the standard and must be used within the hour after reconstitution. «reconstituted» pg/ml 000 pg/ml 0 pg/ml 6, pg/ml,6 pg/ml 0 pg/ml = = = = = = lyophilized [TNF-CAL] 00µL «reconsti tuted» 00µL 00µL 00µL µL Buffer A [BUF-A] 00µL 00µL 00µL 00µL D. Procedure Reagents Procedure s* Diluted positive controls 00µL / wells Diluted samples Incubation h at room temperature Washing** Wash times with TDL buffer : x 00µL / wells Biotinylated antibodies 00µL / wells (specific reagents) Incubation h at room temperature Washing** Wash times with TDL buffer : x 00µL / wells HRP-Streptavidin 00µL / wells Incubation 0 minutes at room temperature Washing** Wash times with TDL buffer : x 00µL / wells Substrate (TMB) 00µL / wells Incubation minutes at room temperature. Protect from light. Stop solution 00µL / wells * s for the TNFα determination should be prepared extemporaneously. s for and anti- determination are ready to use. ** Dry the microplate by tapping it gently on a towel to eliminate the excess of liquid. Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 6/8

18 E. Configuration of the assays a. 6 sera for, anti- and TNF assay A Sera Sera Sera 9 Sera Sera Sera 9 6 Sera Sera Sera 9 B Sera Sera Sera 0 Sera Sera Sera 0 Sera Sera Sera 0 C Sera Sera Sera Sera Sera Sera Sera Sera Sera D Sera 6 Sera Sera Sera 6 Sera Sera Sera 6 Sera Sera E Sera 7 Sera Sera Sera 7 Sera Sera Sera 7 Sera Sera F C+ Sera 8 Sera 6 Sera C+ Sera 8 Sera 6 Sera C+ Sera 8 Sera 6 Sera G Sera Sera 9 Sera 7 Sera Sera Sera 9 Sera 7 Sera Sera Sera 9 Sera 7 Sera H Sera Sera 0 Sera 8 Sera 6 Sera Sera 0 Sera 8 Sera 6 Sera Sera 0 Sera 8 Sera 6 assay anti- assay TNFα assay b. sera for, anti- and TNF assay A 6 B C D E F C+ C+ C+ G Sera Sera Sera H Sera Sera Sera assay anti- assay TNFα assay Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 7/8

19 c. 6 sera for anti- determination A Sera Sera Sera 9 B Sera Sera Sera 0 C Sera Sera Sera D Sera 6 Sera Sera E Sera 7 Sera Sera F C+ Sera 8 Sera 6 Sera G Sera Sera 9 Sera 7 Sera H Sera Sera 0 Sera 8 Sera 6 anti- assay SYMBOLS USED EC Declaration of conformity ELISA Test Number of test Consult Instructions Catalogue number Lot Number Expiry Date In Vitro Diagnostic Device Temperature limitation Biological hazard Contains sodium azide Reconsitute with Office -6 bld de Beaubourg, Actipôle Bat, Croissy Beaubourg 77 Marne la Vallée Cx France Tél : Fax : Internet : Product Insert, LISA-TRACKER Premium, LTI00, Page 8/8

ELISA PeliClass human IgG subclass kit REF M1551

ELISA PeliClass human IgG subclass kit REF M1551 Sanquin Reagents Plesmanlaan 5 0 CX Amsterdam The Netherlands Phone: +.0.5.599 Fax: +.0.5.570 Email: reagents@sanquin.nl Website: www.sanquinreagents.com M55/ November 007 ELISA PeliClass human IgG subclass

Plus en détail

ELISIS Prothrombin IgG / IgM LIS 1229

ELISIS Prothrombin IgG / IgM LIS 1229 Fr. Mars 2009 ELISIS Prothrombin IgG / IgM LIS 1229 Français DÉFINITION Le coffret ELISIS Prothrombin IgG/IgM ( ) permet une recherche qualitative et quantitative, par méthode ELISA, des anticorps anti-prothrombine

Plus en détail

Offered in the US by ALPCO www.alpco.com Phone: (800) 592-5726 Fax: (603) 898-6854 ELIZEN RAT FSH

Offered in the US by ALPCO www.alpco.com Phone: (800) 592-5726 Fax: (603) 898-6854 ELIZEN RAT FSH ELIZEN RAT FSH ENGLISH FRANÇAIS (en) (fr) ZenTech s.a. Liège Science Park, Avenue du Pré-Aily 10, 4031 ANGLEUR, Belgium Tel. : + 32-(0)4-361.42.32 Fax : + 32-(0)4-367.00.63 info@zentech.be www.zentech.be

Plus en détail

APPLICATION QMS TACROLIMUS Beckman Coulter AU480 /AU680 /AU5800

APPLICATION QMS TACROLIMUS Beckman Coulter AU480 /AU680 /AU5800 APPLICATION QMS TACROLIMUS Beckman Coulter AU480 /AU680 /AU5800 Réactif Beckman Coulter REF A53727 Le dosage immunologique QMS Tacrolimus est destiné à déterminer la quantité de tacrolimus dans le sang

Plus en détail

ZYMUTEST upa Antigen # ARK013A

ZYMUTEST upa Antigen # ARK013A ZYMUTEST upa Antigen # ARK013A (One step ELISA method for the assay of Human Urokinase-type Plasminogen Activator Antigen) FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Last revision: 25/06/2014

Plus en détail

PROTEINE URINE (URP) DIMENSIONS KIT REF 39064 F360 Analyseur F560 Analyseur R1 3x100 ml Σ R1 3x100 ml Σ CAL 1x5 ml.

PROTEINE URINE (URP) DIMENSIONS KIT REF 39064 F360 Analyseur F560 Analyseur R1 3x100 ml Σ R1 3x100 ml Σ CAL 1x5 ml. PROTEINE URINE (URP) USAGE PREVU Pour la détermination quantitative in vitro des Protéines Totales dans l urine et le liquide cérébrospinal (CSF). Ce produit est destiné à l utilisation sur les instruments.

Plus en détail

2 players Ages 8+ Note: Please keep these instructions for future reference. WARNING. CHOKING HAZARD. Small parts. Not for children under 3 years.

2 players Ages 8+ Note: Please keep these instructions for future reference. WARNING. CHOKING HAZARD. Small parts. Not for children under 3 years. Linja Game Rules 2 players Ages 8+ Published under license from FoxMind Games NV, by: FoxMind Games BV Stadhouderskade 125hs Amsterdam, The Netherlands Distribution in North America: FoxMind USA 2710 Thomes

Plus en détail

Publication IEC 61000-4-3 (Edition 3.0 2008) I-SH 01

Publication IEC 61000-4-3 (Edition 3.0 2008) I-SH 01 Publication IEC 61000-4-3 (Edition 3.0 2008) I-SH 01 Electromagnetic compatibility (EMC) Part 4-3: Testing and measurement techniques Radiated, radio-frequency, electromagnetic field immunity test INTERPRETATION

Plus en détail

Instructions Mozilla Thunderbird Page 1

Instructions Mozilla Thunderbird Page 1 Instructions Mozilla Thunderbird Page 1 Instructions Mozilla Thunderbird Ce manuel est écrit pour les utilisateurs qui font déjà configurer un compte de courrier électronique dans Mozilla Thunderbird et

Plus en détail

Cocaïne RAPU08T082. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

Cocaïne RAPU08T082. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium Cocaïne RAPU08T082 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium : 100211/1 en One step test device for the qualitative detection of Cocaine metabolites in human urine

Plus en détail

APPLICATION QMS AMIKACINE Système intégré Ortho Clinical Diagnostics VITROS 5600, systèmes de chimie VITROS 5,1 FS et 4600

APPLICATION QMS AMIKACINE Système intégré Ortho Clinical Diagnostics VITROS 5600, systèmes de chimie VITROS 5,1 FS et 4600 Microgenics Corporation Entreprise de Thermo Fisher Scientific APPLICATION QMS AMIKACINE Système intégré Ortho Clinical Diagnostics VITROS 5600, systèmes de chimie VITROS 5,1 FS et 4600 Réf. 0373910 Destiné

Plus en détail

KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2

KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous en pages 1 et 2 KIT ELISA dosage immunologique anti-bsa REF : ELISA : 0033 (0)169922672 : 0033 (0)169922674 : www.sordalab.com @ : sordalab@wanadoo.fr A RECEPTION DU COLIS : Vérifier la composition du colis indiquée ci-dessous

Plus en détail

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage

www.gbo.com/bioscience 1 Culture Cellulaire Microplaques 2 HTS- 3 Immunologie/ HLA 4 Microbiologie/ Bactériologie Containers 5 Tubes/ 6 Pipetage 2 HTS 3 Immunologie / Immunologie Informations Techniques 3 I 2 ELISA 96 Puits 3 I 4 ELISA 96 Puits en Barrettes 3 I 6 en Barrettes de 8 Puits 3 I 7 en Barrettes de 12 Puits 3 I 8 en Barrettes de 16 Puits

Plus en détail

Operating instructions / Instructions d'utilisation

Operating instructions / Instructions d'utilisation Operating instructions / Instructions d'utilisation IntensiveClear Bypass Cartridge / Cartouche de dérivation To prevent misuse read these instructions before installation or use. en, fr - US, CA Afin

Plus en détail

Thyroid Scan. To Prepare

Thyroid Scan. To Prepare Thyroid Scan A thyroid scan checks your thyroid gland for problems. The thyroid gland is located in your neck. It speeds up or slows down most body functions. You will be asked to swallow a pill that contains

Plus en détail

Instructions pour mettre à jour un HFFv2 v1.x.yy v2.0.00

Instructions pour mettre à jour un HFFv2 v1.x.yy v2.0.00 Instructions pour mettre à jour un HFFv2 v1.x.yy v2.0.00 HFFv2 1. OBJET L accroissement de la taille de code sur la version 2.0.00 a nécessité une évolution du mapping de la flash. La conséquence de ce

Plus en détail

Protocole de laboratoire pour la purification manuelle de l ADN d un échantillon de 0,5 ml

Protocole de laboratoire pour la purification manuelle de l ADN d un échantillon de 0,5 ml Protocole de laboratoire pour la purification manuelle de l ADN d un échantillon de 0,5 ml Pour la purification de l ADN génomique des kits de prélèvements Oragene et ORAcollect. Pour tout protocole et

Plus en détail

AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr)

AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr) AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr) Doc.No. : EUM/OPS/TEN/13/706466 Issue : v2 Date : 23 July 2013 WBS : EUMETSAT Eumetsat-Allee 1, D-64295 Darmstadt, Germany Tel: +49 6151 807-7 Fax:

Plus en détail

AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr)

AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr) AMESD-Puma2010-EFTS- Configuration-update-TEN (en-fr) Doc.No. : EUM/OPS/TEN/13/706466 Issue : v3 Date : 7 May 2014 WBS : EUMETSAT Eumetsat-Allee 1, D-64295 Darmstadt, Germany Tel: +49 6151 807-7 Fax: +49

Plus en détail

POLICY: FREE MILK PROGRAM CODE: CS-4

POLICY: FREE MILK PROGRAM CODE: CS-4 POLICY: FREE MILK PROGRAM CODE: CS-4 Origin: Authority: Reference(s): Community Services Department Cafeteria Services and Nutrition Education Division Resolution #86-02-26-15B.1 POLICY STATEMENT All elementary

Plus en détail

SHBG-ELISA KAPD2996. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

SHBG-ELISA KAPD2996. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium SHBG-ELISA KAPD2996 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 110711/1 SHBG ELISA KAPD2996 IN VITRO DIAGNOSTIC USE en DIAsource ImmunoAssays SA - Rue du Bosquet

Plus en détail

Prostate Cancer. Signs of Prostate Cancer

Prostate Cancer. Signs of Prostate Cancer Prostate Cancer The prostate is a gland in men that makes a liquid that forms part of semen. Its size is about 2 centimeters by 2 centimeters and is located in the pelvic area. The prostate uses a male

Plus en détail

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY)

TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) TEST ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSEY) Lise Vézina, technicienne de laboratoire Michel Lacroix, agronome-phytopathologiste Direction de l innovation scientifique et technologique Au Laboratoire

Plus en détail

BÜHLMANN fcal TM turbo

BÜHLMANN fcal TM turbo BÜHLMANN fcal TM turbo Dosage de la calprotectine par turbidimétrie Pour utilisation professionnelle Coffret de réactifs B-KCAL-RSET Revision date: 2015-11-05 BÜHLMANN LABORATORIES AG Baselstrasse 55 CH

Plus en détail

TSSIBS - Immunoanalyse. Immunoanalyse

TSSIBS - Immunoanalyse. Immunoanalyse Jeudi 14 Novembre RANDHAWA Sunny L2 TSSIBS Docteur DESPLAT-JEGO Sophie 6 pages Immunoanalyse Plan: A. Définition de l'immunoanalyse I. Critères de choix II. Caractéristiques communes B. Exemples de techniques

Plus en détail

FEDERATION INTERNATIONALE DE L AUTOMOBILE. Norme 8861-2000

FEDERATION INTERNATIONALE DE L AUTOMOBILE. Norme 8861-2000 FEDERATION INTERNATIONALE DE L AUTOMOBILE Norme 8861-2000 NORME FIA CONCERNANT LA PERFORMANCE DES DISPOSITIFS D'ABSORPTION D'ÉNERGIE À L'INTÉRIEUR DES BARRIÈRES DE PNEUS DE FORMULE UN Ce cahier des charges

Plus en détail

AINoE. Rapport sur l audition d AINoE Paris, 18 juin 2003

AINoE. Rapport sur l audition d AINoE Paris, 18 juin 2003 AINoE Abstract Interpretation Network of Excellence Patrick COUSOT (ENS, Coordinator) Rapport sur l audition d AINoE Paris, 18 juin 2003 Thématique Rapport sur l audition d AINoE Paris, 18 juin 2003 1

Plus en détail

6. Les désastres environnementaux sont plus fréquents. 7. On ne recycle pas ses déchets ménagers. 8. Il faut prendre une douche au lieu d un bain.

6. Les désastres environnementaux sont plus fréquents. 7. On ne recycle pas ses déchets ménagers. 8. Il faut prendre une douche au lieu d un bain. 1. Notre planète est menacée! 2. Il faut faire quelque chose! 3. On devrait faire quelque chose. 4. Il y a trop de circulation en ville. 5. L air est pollué. 6. Les désastres environnementaux sont plus

Plus en détail

MAT 2377 Solutions to the Mi-term

MAT 2377 Solutions to the Mi-term MAT 2377 Solutions to the Mi-term Tuesday June 16 15 Time: 70 minutes Student Number: Name: Professor M. Alvo This is an open book exam. Standard calculators are permitted. Answer all questions. Place

Plus en détail

CONNECTEURS HE13-HE14 CONNECTORS HE13-HE14

CONNECTEURS HE13-HE14 CONNECTORS HE13-HE14 CONNECTORS HE13-HE14 Spécification de conditionnement 107-15453 03 Septembre 08 Rév. G 1. BUT Cette spécification définit les matériels et les méthodes de conditionnement des connecteurs HE13-HE14 mâles

Plus en détail

Mesure Measurement Réf 322 033 Etiquettes Terre, Jupiter, Mars, Français p 1 Lune pour dynamomètre 10 N English p 4 Earth, Jupiter, Mars, Moon,

Mesure Measurement Réf 322 033 Etiquettes Terre, Jupiter, Mars, Français p 1 Lune pour dynamomètre 10 N English p 4 Earth, Jupiter, Mars, Moon, Mesure Measurement Français p 1 English p 4 Version : 8006 Etiquettes Terre, Jupiter, Mars, Lune pour dynamomètre 10 N Earth, Jupiter, Mars, Moon, labels for 10 N dynamometer Mesure Etiquettes Terre, Jupiter,

Plus en détail

Pour utilisation en vue de la préparation et de l isolement de lymphocytes purifiés directement à partir de sang total NOTICE

Pour utilisation en vue de la préparation et de l isolement de lymphocytes purifiés directement à partir de sang total NOTICE Pour utilisation en vue de la préparation et de l isolement de lymphocytes purifiés directement à partir de sang total NOTICE Pour test diagnostique in vitro PI-TT.610-FR-V5 Instructions Utilisation visée

Plus en détail

4. Calibrant B ELISA Phosphatidylsérine IgG, prédilué, 1 flacon de 1,2 ml de sérum humain avec des

4. Calibrant B ELISA Phosphatidylsérine IgG, prédilué, 1 flacon de 1,2 ml de sérum humain avec des QUANTA Lite Phosphatidylserine IgG ELISA 704625 (Précédemment Coffret BINDAZYME De Dosage des Anticorps IgG Anti-phosphatidylserine) Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut Application

Plus en détail

Exemple PLS avec SAS

Exemple PLS avec SAS Exemple PLS avec SAS This example, from Umetrics (1995), demonstrates different ways to examine a PLS model. The data come from the field of drug discovery. New drugs are developed from chemicals that

Plus en détail

Instructions for Completing Allergan s NATRELLE TM Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form

Instructions for Completing Allergan s NATRELLE TM Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form Instructions for Completing Allergan s NATRELLE TM Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form Please read the instructions below and complete ONE of the attached forms in either English or

Plus en détail

TEST ELISA NEOSPORA CANINUM

TEST ELISA NEOSPORA CANINUM TEST ELISA NEOSPORA CANINUM BIO K 218/2 - BIO K 218/5 Pour sérums sanguins - Test de Blocage - Monopuits www.biox.com Neospora caninum est un protozoaire décrit dans un premier temps comme un parasite

Plus en détail

L immunoenzymologie. Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic cificité des anticorps pour leurs nes

L immunoenzymologie. Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic cificité des anticorps pour leurs nes L immunoenzymologie Technique puissante couramment utilisée e en recherche et en diagnostic Basée e sur la très s grande spécificit cificité des anticorps pour leurs antigènes nes Test qualitatif Détection

Plus en détail

Date: 09/11/15 www.crmconsult.com Version: 2.0

Date: 09/11/15 www.crmconsult.com Version: 2.0 Date: 9/11/2015 contact@crmconsult.fr Page 1 / 10 Table des matières 1 SUGARPSHOP : SCHEMA... 3 2 PRESENTATION... 4 3 SHOPFORCE WITH SCREENSHOTS... 5 3.1 CLIENTS... 5 3.2 ORDERS... 6 4 INSTALLATION...

Plus en détail

Pr Bernard Combe. Immuno-Rhumatologie, Hôpital Lapeyronie CHU de Montpellier

Pr Bernard Combe. Immuno-Rhumatologie, Hôpital Lapeyronie CHU de Montpellier Journal de L ANDAR (Association Nationale de Défense contre l Arthrite Rhumatoîde) octobre2008 Le Mabthéra dans la polyarthrite rhumatoïde Pr Bernard Combe Immuno-Rhumatologie, Hôpital Lapeyronie CHU de

Plus en détail

Quick Start Guide Guide de démarrage rapide

Quick Start Guide Guide de démarrage rapide Platinum App Bridge Kit Trousse de pont pour App Platinum MC Quick Start Guide Guide de démarrage rapide 1 Check kit contents. Vérifier le contenu de la trousse. A B E CA DB E C D A B E C D A B E C D C

Plus en détail

QUANTA Lite Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut. HA dsdna ELISA 704615

QUANTA Lite Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut. HA dsdna ELISA 704615 QUANTA Lite Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut HA dsdna ELISA 704615 Application Ce coffret permet de quantifier in vitro les autoanticorps IgG spécifiques de haute affinité

Plus en détail

ENGLISH WEDNESDAY SCHOOL ENTRY TEST ENROLMENT FORM 2015-2016

ENGLISH WEDNESDAY SCHOOL ENTRY TEST ENROLMENT FORM 2015-2016 CHECKLIST FOR APPLICATIONS Please read the following instructions carefully as we will not be able to deal with incomplete applications. Please check that you have included all items. You need to send

Plus en détail

DOCUMENTATION - FRANCAIS... 2

DOCUMENTATION - FRANCAIS... 2 DOCUMENTATION MODULE CATEGORIESTOPMENU MODULE CREE PAR PRESTACREA INDEX : DOCUMENTATION - FRANCAIS... 2 INSTALLATION... 2 CONFIGURATION... 2 LICENCE ET COPYRIGHT... 3 SUPPORT TECHNIQUE ET MISES A JOUR...

Plus en détail

OCD 1991 Printed in U.S.A.

OCD 1991 Printed in U.S.A. U.S. LICENSE 1236 Recombinant Antigens Provided by Raritan, New Jersey 08869 Chiron Corporation Emeryville CA 94608 OCD 1991 Printed in U.S.A. 32 Hepatitis B Virus Core Antigen (Recombinant) ORTHO HBc

Plus en détail

Solution d hébergement de "SWIFTAlliance ENTRY R7" Politique de Sauvegarde et de Restauration

Solution d hébergement de SWIFTAlliance ENTRY R7 Politique de Sauvegarde et de Restauration Solution d hébergement de "SWIFTAlliance ENTRY R7" Politique de Sauvegarde et de Restauration Avril 2012 I- Introduction Le présent document présente la politique de sauvegarde et de restauration à adopter

Plus en détail

5.5.5 Exemple d un essai immunologique

5.5.5 Exemple d un essai immunologique 5.5.5 Exemple d un essai immunologique Test de grossesse Test en forme de bâtonnet destiné à mettre en évidence l'hormone spécifique de la grossesse, la gonadotrophine chorionique humaine (hcg), une glycoprotéine.

Plus en détail

Instructions for Completing Allergan s Natrelle Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form

Instructions for Completing Allergan s Natrelle Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form Instructions for Completing s Natrelle Silicone-Filled Breast Implant Device Registration Form Please read the instructions below and complete ONE of the attached forms in either English or French. IMPORTANT:

Plus en détail

ExAO-NG Capteur. ExAO-NG Sensor. Capteur fréquence cardiaque Heart rate sensor. Réf : 482 105. Français p 1. English p 3.

ExAO-NG Capteur. ExAO-NG Sensor. Capteur fréquence cardiaque Heart rate sensor. Réf : 482 105. Français p 1. English p 3. ExAO-NG Capteur ExAO-NG Sensor Français p 1 English p 3 Version : 3106 1 Généralités Le capteur fréquence cardiaque permet la détection et l enregistrement des phénomènes électriques cardiaques. Il permet

Plus en détail

CMBEC 32 May 22, 2009

CMBEC 32 May 22, 2009 MEDICAL DEVICE REGULATIONS OVERVIEW CMBEC 32 May 22, 2009 Sarah Chandler A/Head, Regulatory and Scientific Section Medical Devices Bureau (MDB) Therapeutic Products Directorate (TPD) 613-954-0285 sarah_chandler@hc-sc.gc.ca

Plus en détail

Glaucoma. optic nerve. back of eye

Glaucoma. optic nerve. back of eye Glaucoma Glaucoma is an eye disease that can cause vision loss or blindness. With glaucoma, fluid builds up in the eye, which puts pressure on the back of the eye. This pressure injures the optic nerve

Plus en détail

QUANTA Lite Jo-1 ELISA 708585 Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut

QUANTA Lite Jo-1 ELISA 708585 Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut QUANTA Lite Jo-1 ELISA 708585 Uniquement pour Diagnostics In-Vitro Complexité de CLIA: Haut Application QUANTA Lite Jo-1 est un test ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) pour la détection semi-quantitative

Plus en détail

SeroMP Recombinant IgM

SeroMP Recombinant IgM SeroMP Recombinant Trousse pour la détection semi-quantitative par dosage immuno-enzymatique (ELISA) des anticorps anti-mycoplasma pneumoniae dans le sérum humain Notice d emploi Trousse pour 96 déterminations

Plus en détail

French 2208A. French for Healthcare Le français de la santé

French 2208A. French for Healthcare Le français de la santé French 2208A French for Healthcare Le français de la santé Professeur : Heures de bureau : Iryna Punko disponible tous les jours par courriel, sauf le week-end. Préalable - Fr 1900 E ou Fr 1910, ou permission

Plus en détail

The new consumables catalogue from Medisoft is now updated. Please discover this full overview of all our consumables available to you.

The new consumables catalogue from Medisoft is now updated. Please discover this full overview of all our consumables available to you. General information 120426_CCD_EN_FR Dear Partner, The new consumables catalogue from Medisoft is now updated. Please discover this full overview of all our consumables available to you. To assist navigation

Plus en détail

7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit

7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit 7900003 24 Tests Circulating Tumor Cell Control Kit 1 APPLICATION Pour usage in vitro Le kit CELLSEARCH Circulating Tumor Cell Control Kit est conçu pour être utilisé comme contrôle de dosage pour vérifier

Plus en détail

QUICK START GUIDE. for the LiftMaster Internet Gateway

QUICK START GUIDE. for the LiftMaster Internet Gateway QUICK START GUIDE for the LiftMaster Internet Gateway Before Starting Before starting STOP you MUST have: a router active internet connection internet gateway serial number Look at the label on the bottom

Plus en détail

QUICK START GUIDE. for the LiftMaster Internet Gateway

QUICK START GUIDE. for the LiftMaster Internet Gateway QUICK START GUIDE for the LiftMaster Internet Gateway Before Starting Before starting STOP you MUST have: a router active internet connection internet gateway serial number Look at the label on the bottom

Plus en détail

NOTICE D UTILISATION Option USB 2-Ports USB FRANCAIS

NOTICE D UTILISATION Option USB 2-Ports USB FRANCAIS NOTICE D UTILISATION Option USB 2-Ports USB FRANCAIS Introduction Ce supplément vous informe de l utilisation de la fonction USB qui a été installée sur votre table de mixage. Disponible avec 2 ports USB

Plus en détail

DOCUMENTATION MODULE FOOTERCUSTOM Module crée par Prestacrea

DOCUMENTATION MODULE FOOTERCUSTOM Module crée par Prestacrea DOCUMENTATION MODULE FOOTERCUSTOM Module crée par Prestacrea INDEX : DOCUMENTATION - FRANCAIS... 2 1. INSTALLATION... 2 2. CONFIGURATION... 2 3. LICENCE ET COPYRIGHT... 4 4. MISES A JOUR ET SUPPORT...

Plus en détail

Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet

Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet Appli Ozyme Western Blot Protocole Complet SOMMAIRE Matériel et réactifs nécessaires... P.2 Déroulement de l expérience... P.3 Préparation, électrophorèse et protocole de transfert... P.3 Protocole de

Plus en détail

GRAPHIC STANDARDS MANUAL

GRAPHIC STANDARDS MANUAL GRAPHIC STANDARDS MANUAL CHARTE GRAPHIQUE This Graphic Standards Manual is aimed at the relays of the Europe Direct information network. They are members of a single family dedicated to the same aim: the

Plus en détail

Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage dans le vin (OIV-Oeno 427-2010)

Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage dans le vin (OIV-Oeno 427-2010) Méthode OIV- -MA-AS315-23 Type de méthode : critères Critères pour les méthodes de quantification des résidus potentiellement allergéniques de protéines de collage (OIV-Oeno 427-2010) 1 Définitions des

Plus en détail

INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. Analyzer and Influenza A+B FIA. Choisir le mode de l analyseur.

INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. Analyzer and Influenza A+B FIA. Choisir le mode de l analyseur. Eject Analyzer and Influenza FIA INSTRUCTIONS PRINCIPALES Destiné exclusivement à l analyseur Sofia. PROCÉDURE DU TEST Tous les échantillons cliniques doivent être à température ambiante avant de commencer

Plus en détail

VINEO Unstable Proteins 100 tests Ref: 354-8121

VINEO Unstable Proteins 100 tests Ref: 354-8121 VINEO Unstable Proteins 100 tests Ref: 354-8121 Notice d utilisation (Français) page 3 Instructions (English) page 15 Détection spécifique des protéines instables Specific detection of unstable proteins

Plus en détail

Dengue NS1 Antigen DxSelect Page 2

Dengue NS1 Antigen DxSelect Page 2 Dengue NS1 Antigen DxSelect (Français) REF EL1510 Rév. A Test d'immunoadsorption enzymatique (ELISA) pour la détection de l'antigène NS1 dans le sérum humain Pour diagnostic in vitro UTILISATION PRÉVUE

Plus en détail

Assembly Instructions Stratton Premier Combo Plus Instructions Pour Assembler Collection Stratton Premier Combo Plus

Assembly Instructions Stratton Premier Combo Plus Instructions Pour Assembler Collection Stratton Premier Combo Plus W westwood design Assembly Instructions Stratton Premier Combo Plus Instructions Pour Assembler Collection Stratton Premier Combo Plus ! WARNING: FALL HAZARD TO PREVENT DEATH OR SERIOUS INJURY, ALWAYS

Plus en détail

2002 Maritime Mathematics Competition Concours de Mathématiques des Maritimes 2002

2002 Maritime Mathematics Competition Concours de Mathématiques des Maritimes 2002 2002 Maritime Mathematics Competition Concours de Mathématiques des Maritimes 2002 Instructions: Directives : 1 Provide the information requested below Veuillez fournir les renseignements demandés ci-dessous

Plus en détail

HDL-32E & VLP-16 Interface Box

HDL-32E & VLP-16 Interface Box HDL-32E & VLP-16 Interface Box HDL-32E & VLP-16 Interface Box Using the HDL-32E & VLP-16 sensors with the Interface Box Caution! There is no internal polarity nor over voltage protection in the sensors;

Plus en détail

Official Documents for 2015 Marathon des Sables

Official Documents for 2015 Marathon des Sables Official Documents for 2015 Marathon des Sables Please take care when completing these documents they may be rejected if incorrect. They must be printed in colour and completed by hand. They must be posted

Plus en détail

that the child(ren) was/were in need of protection under Part III of the Child and Family Services Act, and the court made an order on

that the child(ren) was/were in need of protection under Part III of the Child and Family Services Act, and the court made an order on ONTARIO Court File Number at (Name of court) Court office address Applicant(s) (In most cases, the applicant will be a children s aid society.) Full legal name & address for service street & number, municipality,

Plus en détail

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr

Biologie Appliquée. Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015. Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr Biologie Appliquée Dosages Immunologiques TD9 Mai 2015 Stéphanie Sigaut INSERM U1141 stephanie.sigaut@inserm.fr 1 ELISA 2 3 4 [Ac] 5 6 7 8 9 Correction : Faire la moyenne D0-1 et D0-2 pour toute les valeurs

Plus en détail

FICHE D INSCRIPTION / ENROLMENT FORM CREA Ecole de création en communication SA ( ci-après CREA ) / ( hereby CREA )

FICHE D INSCRIPTION / ENROLMENT FORM CREA Ecole de création en communication SA ( ci-après CREA ) / ( hereby CREA ) School of Communication Arts & Digital Marketing Genève FICHE D INSCRIPTION / ENROLMENT FORM CREA Ecole de création en communication SA ( ci-après CREA ) / ( hereby CREA ) MASTER EN MARKETING DU LUXE M1

Plus en détail

European Aviation Safety Agency

European Aviation Safety Agency Page 1 of 6 European Aviation Safety Agency EASA SPECIFIC AIRWORTHINESS SPECIFICATION for as specified in Section I This Specific Airworthiness Specification is issued in accordance with Regulation (EC)

Plus en détail

Guideline for the Index of the Quality of the Air

Guideline for the Index of the Quality of the Air Guideline for the Index of the Quality of the Air Report EPS 1/AP/3 April 1996 iii Readers Comments Comments regarding the content of this report should be addressed to: Tom Furmanczyk Pollution Data

Plus en détail

Plasmid DNA purification

Plasmid DNA purification Plasmid DNA purification Excerpt from user manual - Français - NucleoBond Xtra NucleoBond Xtra NucleoBond Xtra Plus NucleoBond Xtra Plus January 2013 / Rev. 11 Plasmid DNA purification Français Introduction

Plus en détail

Stool Test for Ova and Parasite (O&P)

Stool Test for Ova and Parasite (O&P) Stool Test for Ova and Parasite (O&P) This test looks for parasites and their ova or eggs in the digestive tract by checking a sample of stool in a lab. A parasite lives on or inside another organism.

Plus en détail

DynDNS. Qu est-ce que le DynDNS?

DynDNS. Qu est-ce que le DynDNS? DynDNS. Qu est-ce que le DynDNS? Le DynDNS (Dynamic Domain Name Server) sert à attribuer un nom de domaine à une adresse ip dynamique. Chaque ordinateur utilise une adresse ip pour communiquer sur le réseau.

Plus en détail

Hybridation et marquage Affymetrix puce HU133 Plate-Forme. plus 2

Hybridation et marquage Affymetrix puce HU133 Plate-Forme. plus 2 PRECAUTIONS GENERALES : HYBRIDATION AFFYMETRIX - Toutes les manipulations se font avec des gants de façon à limiter le risque de dépôt de RNAses présentes en grande quantité sur notre peau. - Tout le matériel

Plus en détail

CanAg NSE EIA. Prod. No. 420-10. 2013-07 Pour 96 déterminations

CanAg NSE EIA. Prod. No. 420-10. 2013-07 Pour 96 déterminations CanAg NSE EIA Prod. No. 420-10 Instructions d utilisation Kit de test immunoenzymatique 2013-07 Pour 96 déterminations UTILISATION Le Kit CanAg NSE EIA est destiné à la détermination quantitative du NSE

Plus en détail

Sujet de TPE PROPOSITION

Sujet de TPE PROPOSITION Single photon source made of single nanodiamonds This project will consist in studying nanodiamonds as single photon sources. The student will study the emission properties of such systems and will show

Plus en détail

L ouverture des données de la recherche en 2015 : définitions, enjeux, dynamiques

L ouverture des données de la recherche en 2015 : définitions, enjeux, dynamiques L ouverture des données de la recherche en 2015 : définitions, enjeux, dynamiques «Re-analysis is a powerful tool in the review of important studies, and should be supported with data made available by

Plus en détail

(Programme de formation pour les parents ~ Training program for parents)

(Programme de formation pour les parents ~ Training program for parents) PODUM-INFO-ACTION (PIA) La «carte routière» pour les parents, sur l éducation en langue française en Ontario A «road map» for parents, on French-language education in Ontario (Programme de formation pour

Plus en détail

Call for tender No. ITER/C4T109/75/JBT TAXIS SERVICES FOR THE ITER ORGANIZATION

Call for tender No. ITER/C4T109/75/JBT TAXIS SERVICES FOR THE ITER ORGANIZATION china eu india japan korea russia usa 13067 St. Paul-Ies-Durance ww.iter.org 27 April 2009 Call for tender No. ITER/C4T109/75/JBT TAXIS SERVICES FOR THE ITER ORGANIZATION Contact: Jérémy BEGOT Tel: +33

Plus en détail

Notice QuantiFERON Monitor (QFM ) ELISA 2 96

Notice QuantiFERON Monitor (QFM ) ELISA 2 96 Novembre 2014 Notice QuantiFERON Monitor (QFM ) ELISA 2 96 Test de sang total IFN-γ mesurant les réponses aux stimulants immunitaires innés et adaptatifs Version 1 Utilisation prévue pour le diagnostic

Plus en détail

Animation de la démarche Santé et Sécurité au Travail pour Les Crudettes SAS

Animation de la démarche Santé et Sécurité au Travail pour Les Crudettes SAS MINISTERE DE L AGRICULTURE LES CRUDETTES SAS www.lescrudettes.com MÉMOIRE DE FIN D ÉTUDES présenté pour l obtention du diplôme d ingénieur agronome spécialisation : Agro-alimentaire option : QUALI-RISQUES

Plus en détail

FLOPAM TM Cleaning Solution nettoyage des polymères

FLOPAM TM Cleaning Solution nettoyage des polymères 2 3 FLOPAM TM Cleaning Solution nettoyage des polymères Nettoyage des masses de polymères collées sur le sol ou sur les appareils. Lors de la mise en oeuvre de polyacrylamides poudre, certaines quantités

Plus en détail

Use of LCA tools in the early stages of a research project - A case study about an innovative process for cellulose nanocrystals extraction

Use of LCA tools in the early stages of a research project - A case study about an innovative process for cellulose nanocrystals extraction MATERIA NOVA Use of LCA tools in the early stages of a research project - A case study about an innovative process for cellulose nanocrystals extraction Olivier Talon, Séverine Coppée, Jevgenij Lazko,

Plus en détail

Florida International University. Department of Modern Languages. FRENCH I Summer A Term 2014 FRE 1130 - U01A

Florida International University. Department of Modern Languages. FRENCH I Summer A Term 2014 FRE 1130 - U01A Florida International University Department of Modern Languages FRENCH I Summer A Term 2014 FRE 1130 - U01A Class time: Monday, Tuesday, Wednesday, Thursday; 6:20 P.M. - 9:00 P.M. Instructors: Prof. Jean-Robert

Plus en détail

Quick start. Pulsar ellipse 300/500/650/800/1200. Pulsar ellipse premium 500/650/800/1200

Quick start. Pulsar ellipse 300/500/650/800/1200. Pulsar ellipse premium 500/650/800/1200 Quick start Pulsar ellipse 300/500/650/800/1200 Pulsar ellipse premium 500/650/800/1200 Using the additional functions available on your Pulsar ellipse Utilisation des fonctions additionnelles de votre

Plus en détail

Décrets, arrêtés, circulaires

Décrets, arrêtés, circulaires Décrets, arrêtés, circulaires TEXTES GÉNÉRAUX MINISTÈRE DES AFFAIRES SOCIALES, DE LA SANTÉ ET DES DROITS DES FEMMES Arrêté du 17 septembre 2014 modifiant la liste des spécialités pharmaceutiques remboursables

Plus en détail

Dosages à réactifs marqués

Dosages à réactifs marqués Dosages à réactifs marqués Principe = réaction Ag-Ac un des deux réactifs (Ag ou Ac) est marqué par un traceur Différentes méthodes selon que le traceur est radioactif (RIA), enzymatique (EIA) ou luminescent

Plus en détail

CORGANISATION EUROPÉENNE POUR LA RECHERCHE NUCLÉAIRE

CORGANISATION EUROPÉENNE POUR LA RECHERCHE NUCLÉAIRE CORGANISATION EUROPÉENNE POUR LA RECHERCHE NUCLÉAIRE EUROPEAN ORGANIZATION FOR NUCLEAR RESEARCH L a b o r a t o i r e E u r o p é e n p o u r l a P h y s i q u e d e s P a r t i c u l e s E u r o p e a

Plus en détail

AUX AGENTS IMMOBILIERS QUALIFICATIONS OF AGENTS AND SALESPERSONS REGULATIONS

AUX AGENTS IMMOBILIERS QUALIFICATIONS OF AGENTS AND SALESPERSONS REGULATIONS REAL ESTATE AGENTS LICENSING ACT QUALIFICATIONS OF AGENTS AND SALESPERSONS REGULATIONS R.R.N.W.T. 1990,c.15(Supp.) In force September 15, 1992; SI-013-92 LOI SUR LA DÉLIVRANCE DE LICENCES AUX AGENTS IMMOBILIERS

Plus en détail

BILL 9 PROJET DE LOI 9

BILL 9 PROJET DE LOI 9 Bill 9 Government Bill Projet de loi 9 Projet de loi du gouvernement 1 st Session, 40 th Legislature, Manitoba, 61 Elizabeth II, 2012 1 re session, 40 e législature, Manitoba, 61 Elizabeth II, 2012 BILL

Plus en détail

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde

Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde 1 ETSL Sérodiagnostic de la polyarthrite rhumatoïde TP 1 GABIN-GAUTHIER 13/11/2009 I. LA MALADIE... 2 II. TECHNIQUES QUALITATIVES... 2 1. PRINCIPE... 2 2. MODE OPERATOIRE... 3 2.1. WRST ou Waaler Rose

Plus en détail

MODE D'EMPLOI USER MANUAL. MIDI MESSENGER version 1-2-3. MIDI MESSENGER version 1-2-3

MODE D'EMPLOI USER MANUAL. MIDI MESSENGER version 1-2-3. MIDI MESSENGER version 1-2-3 MIDI MESSENGER version 1-2-3 USER MANUAL MidiMessenger has been designed to help virtual organs users by sending Midi messages to the instrument. But MidiMessenger is also a general purpose tool for one

Plus en détail

Promotion of bio-methane and its market development through local and regional partnerships. A project under the Intelligent Energy Europe programme

Promotion of bio-methane and its market development through local and regional partnerships. A project under the Intelligent Energy Europe programme Promotion of bio-methane and its market development through local and regional partnerships A project under the Intelligent Energy Europe programme Contract Number: IEE/10/130 Deliverable Reference: W.P.2.1.3

Plus en détail

CH14 STEREOISOMERIE DES MOLECULES ORGANIQUES IMPORTANCE DE LA STEREOCHIMIE DES MOLECULES THERAPEUTIQUES

CH14 STEREOISOMERIE DES MOLECULES ORGANIQUES IMPORTANCE DE LA STEREOCHIMIE DES MOLECULES THERAPEUTIQUES PARTIE COMPRENDRE CH14 STEREOISOMERIE DES MOLECULES ORGANIQUES IMPORTANCE DE LA STEREOCHIMIE DES MOLECULES THERAPEUTIQUES A - ISOMERIE POUR QUELQUES MEDICAMENTS Mélange racémique : mélange équimolaire

Plus en détail

ASSEMBLY INSTRUCTIONS DIRECTIVES POUR L'ASSEMBLAGE luster chandelier lamp chandelier à trois branches en verre lustré

ASSEMBLY INSTRUCTIONS DIRECTIVES POUR L'ASSEMBLAGE luster chandelier lamp chandelier à trois branches en verre lustré ASSEMBLY INSTRUCTIONS DIRECTIVES POUR L'ASSEMBLAGE luster chandelier lamp chandelier à trois branches en verre lustré SKU 2711592 INSTRUCTIONAL MANUAL MANUEL D'INSTRUCTIONS 270/2707 COMPONENT LIST LISTE

Plus en détail