INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT. Conférence de presse du 27 septembre 2011
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- Hervé Picard
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1 INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT Conférence de presse du 27 septembre 2011
2 INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT Endocell : première culture cellulaire autologue «prête à l emploi» Pr François Olivennes, Gynécologue-obstétricien, coordinateur du centre de FIV Clinique de la Muette, Paris Implantation des embryons au stade blastocyste (J5) : données biologiques Pr Paul Barrière, Médecin biologiste et directeur du pôle mère-enfant, CHU de Nantes Bénéfices de la coculture embryonnaire sur cellules endométriales autologues Dr Guy Cassuto Biologiste Laboratoire Drouot, Hôpital Des Diaconesses, Paris
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4 INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT Endocell : première culture cellulaire autologue «prête à l emploi» Pr François Olivennes, Gynécologue-obstétricien, coordinateur du centre de FIV Clinique de la Muette, Paris Implantation des embryons au stade blastocyste (J5) : données biologiques Pr Paul Barrière, Médecin biologiste et directeur du pôle mère-enfant, CHU de Nantes Bénéfices de la coculture embryonnaire sur cellules endométriales autologues Dr Guy Cassuto Biologiste Laboratoire Drouot, Hôpital Des Diaconesses, Paris
5 Endocell : première culture cellulaire autologue «prête à l emploi» Pr François Olivennes Gynécologue-obstétricien, coordinateur centre de FIV Clinique la Muette, Paris
6 HISTOIRE DE LA CULTURE EMBRYONNAIRE Années 70 : Développement de milieux de culture plus complexes à partir de données nouvelles sur les secrétions tubaires Années 90 : Limites des milieux de cultures traditionnels «conditions de culture sub-optimales» Métabolisme embryonnaires inapproprié : retard ou arrêt du développement au moment de l activation du génome embryonnaire (J3) Taux très modeste de blastocystes Nombre de cellules du bouton embryonnaire anormalement bas impact au moment de l éclosion Problématique : échecs répétés d implantation Source: Les JTA, M.Plachot, 1996, Bolton et al. 1989, Bowman et Mc Laren1970, Human: Vladet al 1996
7 HISTOIRE DE LA COCULTURE 1962 : 1 ère coculture chez l animal 1989 : 1 ère coculture chez l homme (Wiemer) Début des années 90 : «l effet coculture» Différents types de supports cellulaires : Origine génitale (cumulus, granulosa, utérus, endomètre.) Origine extra-génitale (lignée VERO = cellules épithéliales de reins de singe) Meilleures connaissances de besoins métaboliques de l embryon Coculture de blastocystes : obtenir des embryons à fort potentiel implantatoire + meilleure synchronisation endomètre-embryon
8 HISTOIRE DE LA COCULTURE Arrêté du 12 janvier 1999 fixant les règles de bonnes pratiques en A.M.P : interdiction de la coculture non autologue : «Seule la coculture sur cellules autologues n induit pas de risques infectieux exogènes» Conséquences : Arrêt de la coculture embryon-vero Amélioration des milieux de culture : Milieux séquentiel (Gardner ) Milieu unique de type Global
9 ENDOCELL : LE CONCEPT Culture de cellules épithéliales d endomètre autologue : Sécrétion de facteurs d attachement embryonnaire : - Intégrines, métalloprotéinase, CSF1 Sécrétion de facteurs embryotrophiques : - facteurs de croissance : LIF, IL6, PAF, VEGF, G-CSF, autres. Double but : Améliorer le développement embryonnaire in vitro Favorise l implantation in vivo
10 ENDOCELL : LE CONCEPT Permettre le transfert d un seul embryon au stade ultime de son développement Diminuer le taux de grossesses multiples Diminuer le nombre d HSO Permettre la congélation d un nombre moindre d embryons mais dont les taux de survie après décongélation sont plus élevés Obtenir un taux cumulatif de grossesses supérieur par cycle de stimulation ovarienne
11 LE PRÉLÈVEMENT ENDOMÉTRIAL Concept : importance de la fenêtre d implantation Human menstrual cycle Period 1 5 Proliferative phase 6 14 ovulation Quand? Phase lutéale de J20 à J23 (LH+7 à LH+11) Comment? Par aspiration à la Pipelle de Cornier Phase secrétoire Fenêtre d implantation
12 COMMANDE ENDOCELL Dès l injection d Hcg pour le déclenchant l ovulation la production d Endocell est lancée par les Laboratoires Genévrier Injection hcg Décongélation et Culture Endocell
13 Production Endocell Isolement cellulaire et comptage Culture cellulaire Ratio fixe de cellules stromales et épithéliales Endocell produit final 48h culture Epithelial cells Stromal cells Robot
14 ENDOCELL : CONCLUSION Progrès majeur en culture embryonnaire prolongée Dès la première tentative de FIV Pour donner toutes les chances à l embryon : de se développer harmonieusement de s implanter
15 INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT Endocell : première culture cellulaire autologue «prête à l emploi» Pr François Olivennes, Gynécologue-obstétricien, coordinateur du centre de FIV Clinique de la Muette, Paris Implantation des embryons au stade blastocyste (J5) : données biologiques Pr Paul Barrière, Médecin biologiste et directeur du pôle mère-enfant, CHU de Nantes Bénéfices de la coculture embryonnaire sur cellules endométriales autologues Dr Guy Cassuto Biologiste Laboratoire Drouot, Hôpital Des Diaconesses, Paris
16 Implantation des embryons au stade blastocyste (J5) : données biologiques Pr Paul Barrière Médecin biologiste et directeur du pôle mère-enfant, CHU de Nantes
17 PHYSIOLOGIE L implantation embryonnaire se produit au stade blastocyste éclos. Elle nécessite : Un embryon capable d exprimer des signaux pour son implantation et ayant le moins «souffert» possible en culture Un endomètre «réceptif»: non infecté ayant développé sa microvascularisation sans obstacle intra cavitaire utérin: polype, myome sous muqueux capable de recevoir les «signaux embryonnaires» et d échanger avec l embryon
18 PHYSIOLOGIE DU DÉVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE Le développement embryonnaire montre plusieurs périodes : Période de pré-activation génomique : l embryon se développe sur ses réserves et ses transcrits d origine ovocytaire Progressivement relayée par une période de post-activation génomique : il démarre sa propre activité transcriptionnelle
19 DÉVELOPPEMENT EMBRYONNAIRE PRE-IMPLANTATOIRE Activation du génome embryonnaire entre J2 et J3 pendant 24h Longest step of pre-implantation embryonic development D1 D2 Genomic activation D3 D4 D5 cycle Fertilization 2PN 2 cells 4 cells 8 cells Morula Blastocyste Transcrits ovocytaires Transcription embryonnaire Activation génomique de l embryon Hardy, K, Spano, S. J Endocrinol 2002; 172:
20 PHYSIOLOGIE La phase d activation génomique est une période critique du développement préimplantatoire de l embryon Tout retard de cette activation provoquera un arrêt du développement : la cinétique de l activation est primordiale Impact des milieux sur l activité transcriptionnelle et traductionnelle de l embryon après l activation de son génome
21 QUALITÉ DU BLASTOCYSTE Harmonie du développement pendant 5 jours Critères morphologiques : État d expansion du blastocele Inner Cell Mass : nombre de cellules Régularité du trophectoderme Plusieurs classifications : Dkras ; Gardner ( tiennent compte des mêmes critères) Relation de cause à effet entre aspect morphologique du blastocyste et implantation (Gardner) Gardner DK, et al. Fertil Steril. 2000;73(6):
22 QUALITÉ DU BLASTOCYSTE Critères biologiques : Consommation d IL6 par l embryon (Dominguez et al.) Consommation de glucose par l embryon (Gardner et al.) G.CSF dans le liquide folliculaire de l ovocyte ayant généré la blastocyste (groupe Embic) Etude génomique de la granulosa (Hammamah) Etude protéomique (prometteuse) Etude métabolomique (à ce jour décevante)
23 Consommation d IL6 par l embryon implanté (Dominguez et al.)
24 LES MILIEUX DE CULTURE SYNTHÉTIQUES Ils tentent de répondre aux besoins métaboliques de l embryon et aux changements dynamiques de son environnement L embryon utilise : Les lactates/pyruvates jusqu à l activation de son génome Du glucose après activation du génome L utilisation d un seul milieu pour la culture prolongée est apparue insuffisante dans un premier temps puis débattue pour adopter soit des milieux dits «séquentiels», soit un milieu unique supplémenté.
25 LA COCULTURE Culture simultanée : D embryons Et de cellules somatiques Les cellules somatiques constituent un tapis cellulaire Le dialogue entre ce tapis cellulaire et l embryon va favoriser son développement Sécrétion par le support cellulaire de facteurs embryotrophiques (facteurs de croissance, cytokines ) (Simon et al.)
26 ENDOCELL Permet de débloquer des voies métaboliques Détoxification du milieu liquide : l embryon rejette des déchets dans le milieu (ammoniac², créatinine.qui par accumulation deviennent embryotoxiques) Diffère totalement de la culture embryonnaire classique Choix du milieu capital : doit satisfaire aux besoins de l embryon et du tapis cellulaire
27 LA COCULTURE Présentation des cellules (suspension, tapis à confluence ou non) interfère avec les résultats Morphologie embryonnaire améliorée Meilleure survie des blastocystes congelés Augmentation des taux de grossesse
28 BILAN ABM 2009 TECHNIQUE TENTATIVES* CULTURE PROLONGEE FIV Hors ICSI ,4% ICSI ,9% TEC ,0%
29 RÉSULTATS CULTURE PROLONGÉE Répartition de l âge des femmes à la ponction 2009 Age à la ponction FIV ICSI N % N % <30 ans ,5% ,3% ans ,4% ,3% ans ,0% ,3% ans ,1% 443 9,5% ans 210 7,7% 306 6,6% Taux de grossesses échographiques par transfert 2009 FIV ICSI N % N % Grossesses ,3% ,3%
30 EVOLUTION DES TECHNIQUES D AMP Apport d Endocell Vitrification embryonnaire Taux de survie Taux de grossesse Taux cumulatifs Nouvelle politique de stimulation et de transfert embryonnaire en fonction des progrès de la vitrification ovocytaire et embryonnaire
31 CONCLUSION Progrès attendus des prises en charge en FIV Optimisation des protocoles, des monitorages et des conditions de déclenchement des stimulations ovariennes Optimisation des conditions de culture au laboratoire de FIV «Primum non nocere» Permettre au potentiel biologique des gamètes confiés par le couple de s exprimer au mieux
32 Merci de votre attention
33 INNOVATION EN ASSISTANCE MÉDICALE À LA PROCRÉATION POUR LES COUPLES INFERTILES EN DÉSIR D ENFANT Endocell : première culture cellulaire autologue «prête à l emploi» Pr François Olivennes, Gynécologue-obstétricien, coordinateur du centre de FIV Clinique de la Muette, Paris Implantation des embryons au stade blastocyste (J5) : données biologiques Pr Paul Barrière, Médecin biologiste et directeur du pôle mère-enfant, CHU de Nantes Bénéfices de la coculture embryonnaire sur cellules endométriales autologues Dr Guy Cassuto Biologiste Laboratoire Drouot, Hôpital Des Diaconesses, Paris
34 Bénéfices de la coculture embryonnaire sur cellules endométriales autologues Dr Guy Cassuto Biologiste Laboratoire Drouot, Hôpital Des Diaconesses, Paris
35 Résultats Étude clinique Endocell : Analyse intermédiaire Etude multicentrique, contrôlée et randomisée Comparaison entre le transfert d un embryon à J3 et d un blastocyste en coculture; en terme de grossesse. 230 patientes 17 centres d AMP Français
36 Critères d inclusion Femmes 36 ans Statut ovarien: FSH basale 12 UI/L E2 Rang: 1 ère ou 2 éme tentative Technique AMP: FIV ou ICSI Sérologies: HIV½, AgP24, VHB, VHC, HTLV ½, TPHA, toxoplasmose
37 Méthodologie de l essai Stimulation Ponction Fécondation M. S. J3 SET Transfert Grossesse Inclusion Prélèvement d endomètre J22 Stimulation Ponction Fécondation Coculture J5 SET Transfert Grossesse
38 Caractéristiques de la population étudiée J3 (n=115) Endocell (n=115) Age 30.9 ± ± FSH (UI/L) 6.5 ± ± BMI (kg/m²) 22.9 ± ± Estradiol (pg/ml) 50.9 ± ± Sperm/mL (x10 6 spz/ml) 39.9 ± ± Mobilité progressive (%) 37.1 ± ± Morphologie normale (%) 22.9 ± ± Pas de différence significative entre les 2 groupes p
39 Caractéristiques des cycles (per protocole) Consommation de gonadotrophines (UI) J3 Endocell p 1847 ± ± Durée de stimulation (jours) 10.5 ± ± Nb d ovocytes recueillis 11.4 ± ± Ovocytes matures (MII) 10.1 ± ± Nb m.d embryons à J2 6.6 ± ± Pas de différence significative entre les 2 groupes
40 Population globale étudiée Patientes J3 Endocell Cycles débutés Embryons à J Transfert (SET) 91 69
41 Critère principal Taux de grossesses clinique par transfert
42 Résultats de l étude Endocell Patientes J3 Endocell P Grossesses Taux de grossesses/ transfert 33, 0% 50,7% 0,02 Les patientes ENDOCELL ont 1 chance sur 2 d être enceinte contre 1 chance sur 3 pour celles du J3 Différence de 17,7% entre les 2 groupes: Hypothèse de départ 12% de différence In Vitro Fertilization with Single Blastocyst Stage versus Single Cleavage Stage Embryos. E. G. Papanikolaou New England Journal of Medicine (J3 vs J5 milieu synthétique)
43 Endocell pour qui?
44 Pour les femmes
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52 Conclusion Endocell pourquoi?
53 Endocell : une prise en charge personnalisée Endocell -Permet un meilleur développement embryonnaire par la sécrétion de nombreux facteurs embryotrophiques, absents dans les milieux synthétiques -Permet de gérer le stress oxydatif et d éliminer les déchets métaboliques -Permet de créer un environnement proche des conditions physiologiques
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