SANG et TRANSFUSION. Objectifs : savoir se repérer à partir de notions simples Introduire la notion d hémovigilance

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1 SANG et TRANSFUSION Objectifs : savoir se repérer à partir de notions simples Introduire la notion d hémovigilance

2 Plan du cours Les groupes sanguins érythrocytaires Les examens immunohématologiques

3 TRANSFUSION 1900 Landsteiner découvre le 1er système des groupes sanguins : le système ABO 1940 valide le système Rhésus 1952 Dausset met en évidence le système HLA des GB

4 Les groupes sanguins érythrocytaires La membrane du GR porte une mosaïque de substances antigéniques, génétiquement déterminées, qui définissent les systèmes de groupes sanguins Antigènes allotypiques cad caractères propres à un groupe d individus dans une espèce donnée Génétiquement contrôlés et indépendants

5 Les groupes sanguins érythrocytaires 25 systèmes Le plus connu et le plus ancien : le système ABO, le plus important du fait de son implication en transfusion sanguine et pour la transplantation d organe

6

7 Les antigènes érythrocytaires Les antigènes de groupe sanguin sont situés dans la membrane lipidique du GR (Rhésus) ou dans les glycolipides sur la face externe de la membrane (ABH)

8 Le système ABO Le système ABO présente deux caractéristiques qui sont à l origine des méthodes de groupage et expliquent son rôle important en transfusion et lors des transplantations : La présence ou l absence des antigènes A et/ ou B à la surface des GR La présence ou l absence des anticorps naturels anti-a et/ou anti-b dans le plasma, correspondants aux antigènes absents sur

9 Biosynthèse des antigènes du système ABO H A h B Substanc e de base ENZYME ENZYME Substance A et/ou B Substance H

10 Les antigènes Groupe sanguin A Antigènes membranair es A Anticorps sériques anti-b Fréquen ce en France 45% B B anti-a 9% O H anti-a et anti-b 43% AB A et B aucun 3%

11 Les antigènes

12 Répartition des Ag ABH dans l organisme À la surface des GR Des GB Des plaquettes De la plupart des tissus (cellules épithéliales, endothélium vasculaire, secrétions salivaires) à l exception de l os, des neurones et de la cornée

13 Les anticorps naturels,réguliers Les anticorps anti-a et anti-b sont régulièrement présents chez tous les individus dépourvus de l antigène correspondant Présents dans le plasma d un sujet en dehors de toute stimulation antigénique reconnue (transfusion ou grossesse) Sont dirigés contre les antigènes que le sujet ne possèdent pas sur leur GR Apparaissent chez l enfant entre 0 et 6 mois Intérêt primordial en transfusion sanguine en raison du risque d incident dès la 1ère transfusion incompatible

14 Les anticorps immuns, irréguliers N existent pas à l état naturel Apparaissent à la suite d une immunisation préalable : grossesse ABO incompatible, transfusion ABO incompatible Présents le plus souvent chez les donneurs O (notion de donneur O dangereux, recherche obligatoire sur chaque don)

15 Détermination du groupe ABO Le groupage ABO repose sur deux épreuves qui doivent être concordantes : Epreuve globulaire dite de Beth-Vincent consiste à rechercher par une technique d agglutination les antigènes présents sur les hématies GR à tester (antigènes à déterminer) + sérums tests connus (anticorps monoclonaux anti-a et anti-b)

16 Réaction d agglutination Agglutination Formation d un réseau

17 Détermination du groupe ABO Epreuve sérique dite de Simonin Consiste à identifier les anticorps naturels réguliers dirigés contre les antigènes absents Plasma à tester (anticorps naturels) + GR tests connus Le groupe ne sera définitif qu à la suite de 2 déterminations réalisées à partir de 2 prélèvements sanguins différents

18 Groupage ABO BETH VINCENT SIMONIN anti-a anti-b GR A GR B O A B _ _ AB

19 Règles de compatibilité ABO SYSTEME ABO Ac anti-a Ac anti-b POUR LES GLOBULES ROUGES A A compatibilité Ac anti-b O O compatibilité AB AB donneur universel Ac anti-a B B identité identité pas d'ac receveur universel

20 Règles de compatibilité ABO A POUR LE PLASMA AB O B

21 Le système Rh (Rhésus) Système complexe de groupe sanguin On compte 52 antigènes appartenant à ce système En pratique courante seuls 5 sont à connaître : D, C, c, E, e La présence de l antigène D défini le groupe Rhésus positif (85%) son absence le groupe Rhésus négatif

22 Le système Rhésus comprend 52 antigènes situés sur la membrane du GR

23 Les antigènes ANTIGENES D (RH1) C (RH2) E (RH3) c (RH4) e (RH5) Fréquence en France 85% 70% 30% 80% 98%

24 Le groupe Rhésus est déterminé par la présence ou l absence de l antigène D Le phénotype Rhésus est déterminé par la présence ou l absence des 5 antigènes : D, C/c, E/e La protéine D

25 Les Anticorps du système Rhésus Toujours acquis, secondaires à une immunisation, lors d une transfusion ou d une grossesse Probabilité d apparition fonction de l immunogénicité de classe IgG, hémolysants, capables de traverser le placenta, responsables de la symptomatologie présentée par un nouveau-né Rhésus + né de mère Rhésus - : maladie hémolytique du nouveau-né

26 Incompatibilité foetomaternelle

27 Règles de compatibilité Rhésus POUR LES GLOBULES ROUGES SYSTEME RHESUS Rh - Rh + = Ag D+

28 Les autres systèmes érythrocytaires Importance transfusionnelle car certains de leurs antigènes sont fortement immunisants Système Kell: l Antigène KEL1 est un puissant immunogène pour les sujets Kell- (90% de la population) Système Duffy : antigène FY1 et FY2 Système MNS : antigène MNS3 et MNS4

29 Les autres systèmes érythrocytaires L absence d un Antigène dans l un de ces systèmes ne s accompagne pas d anticorps naturels, comme dans le système ABO, mais une transfusion ou une grossesse peuvent provoquer la formation d anticorps immuns responsables ultérieurement d accidents transfusionnels ou de MHNN (alloimmunisation)

30 Les examens immunohématologiques Groupage ABO RH1 (RhD) Phénotypage RH et Kell Phénotypage étendu Recherche d anticorps irréguliers (RAI) Epreuve de compatibilité au laboratoire Tests de Coombs

31 Les examens immunohématologiques Groupage ABO RH1 correspond à la détermination du groupe ABO et du Rhésus standard D la détermination est basée sur la réaction d agglutination spécifique le groupage est considéré comme définitif si les résultats sont concordants sur deux déterminations sur 2 prélèvements différents Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel et contexte prénuptial et

32 Phénotype Rhésus Kell Recherche grâce à l utilisation de sérums tests anti-c, anti-e, anti-c, anti-e et anti-k la présence ou l absence à la surface des hématies des 5 antigènes suivants : C (RH2), E (RH3), c (RH4), e (RH5) et K (KEL1) Contexte prétransfusionnel avéré ou potentiel Contexte prénuptial, pré et périnatal Validation de l identification d anticorps anti-érythrocytaires

33 Phénotype étendu Recherche de la présence ou l absence des antigènes : JK1, JK2, FY1, FY2, MNS3 et MNS4 Champ d application : - allo-immunisation anti-érythrocytaire complexe - à titre préventif chez certains patients transfusés de façon itérative - validation de la RAI

34 Recherche d Anticorps Irréguliers (RAI) Examen consistant à dépister et identifier les anticorps dirigés contre les antigènes érythrocytaires autres que A et B dans le sérum à étudier grâce à une gamme d hématies tests Délai de réalisation de 45 mn à plusieurs heures Validité 72H

35 Recherche d Anticorps Irréguliers (RAI) Champ d application : Obligatoire chez tout patient susceptible d être transfusé Contexte de greffe ou de transplantation Contexte pré ou périnatal Chez le patient transfusé itératif en bonne place au cours des séries de transfusion Chez le patient transfusé dans le cadre du suivi post-transfusionnel

36 Produits transfusés en cas d urgence hémorragique Urgence vitale immédiate pas de groupe ni de RAI si non disponibles CGR O sans hémolysines distribution sans délai Urgence vitale pas de RAI si non disponible nécessité de groupe ABO conforme délai de distribution inférieur à 30 minutes Urgence «relative» nécessité de groupe et RAI conformes délai de distribution de 2-3 heures

37 Epreuve directe de compatibilité au laboratoire EDC Qualification biologique du don Consiste à tester le sérum du receveur vis-à-vis du CGR à transfuser (l objectif étant de détecter certains Ac masqués par la présence d autres Ac, ou des Ac rares) Validité 72H Champ d application : Receveur présentant ou ayant présenté un ou plusieurs allo-anticorps anti-érythrocytaires Nouveau-né présentant un test de Coombs positif ou né de mère allo-immunisée

38 Test de Coombs Permet la mise en évidence de la sensibilisation in vivo des hématies humaines par des anticorps grâce à l utilisation d un réactif appelé antiglobuline humaine Champ d application : Maladie hémolytique du nouveau-né Incident transfusionnel Anémie hémolytique autoimmune

39 Recherche d'anticorps fixés sur les hématies Ac non spontanément agglutinables + anti-gammaglobulines humaines Hématies fœtales ayant fixé l'ac complexe agglutinant

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