Maladie Cœliaque: Tests au laboratoire. ARL 21 mars 2013 Dr. Claude-Olivier Marti, PhD

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1 Maladie Cœliaque: Tests au laboratoire ARL 21 mars 2013 Dr. Claude-Olivier Marti, PhD

2 Histoire: -100 : Grec "koeliakos" = souffrance dans les intestins Décrit par Aretaeus en à Rome 1939: 17 cas de MC chez des enfants - Métabolisme des graisses - Métabolisme des carbohydrates - Ions - Radiographies osseuses 1950: Famine aux Pays-Bas! W.K. Dicke trouve un lien avec le pain 1952: Lancet: étude sur l implication de la farine dans la MC

3 1200 # Publications (MC) / année Adapté de pubmed

4 Blé et gluten Fasano A, Physiol Rev 2011, 91: Endosperme: - 75% d amidon - 25% gluten Gluten: - Prolamines: Blé: alpha-gliadine Seigle: Sécaline Orge: Hordéine Avoine: Avénine - Gluténines

5 Gliadine Activité cytotoxique Activité immuno modulatoire Perméabilité intestinale (CXCR3 zonuline) Induction de IL-8 Fasano A, Physiol Rev 2011, 91: ! Retrouve des homologies conservées dans la sécaline (seigle) et l hordéine (orge)! Certaines variétés d avoine

6 Gluten et maladies associées - Maladie cœliaque - Coeliaquie - Sprue non tropicale - Entéropathie au gluten - Intolérance au gluten - Allergie au gluten - Allergie alimentaire -

7 Gluten et maladies associées Adapté de Sapone et al, BMC Medicine, 2012 Maladies associées au gluten Allergie Autoimmun Sensibilité au gluten (non allergique ni immun) Maladie cœliaque Dermatitis herpetifromis Ataxie au gluten

8 Cœliaquie en 2012 (European guidelines, 2012) - Maladie systémique d origine immunitaire - Initiée par le gluten et les prolamines apparentées - Chez des individus qui présentent une susceptibilité génétique - Présentant une combinaisons variables de manifestions cliniques.

9 Physiopathologie - Infections (rotavirus) - Zonuline (tight junctions) - Récepteur CD71 Green PH et al. N Engl J Med 2007

10 Fasano A Physiol Rev 2011;91:

11 Physiopathologie - Infections (rotavirus) - Zonuline (tight junctions) - Récepteur CD71 Green PH et al. N Engl J Med 2007

12 Génétique - 90% HLA-DQ2.5 (DQA1*05DQB1*02) - La plupart des autres : HLA-DQ8 (DQA1*03DQB1*03:02) Adapté de Meresse et al, Immunity % dans une famille % entre vrais jumeaux - HLA contribue pour env. 35% du risque génétique, mais autres gènes impliqués

13 Meresse et al, Immunity 2012 Combinaison de différents variants qui induit une réponse méditée par les cellules T

14 Epidémiologie 1/8000 1/ : signes cliniques 1960: Test de malabsorption + biopsie 1/ : Début de la sérologie 1/??? : Sérologie, Histologie Finlande: 2-2.8% Allemagne: % Italie: 0.7-1% Suisse: 0.75% (date de 2001) USA: 0.71 % (2012) Plus fréquente ou mieux dépistée?

15 Increasing prevalence of celiac disease over time Aliment Pharmacol Ther 26, , 2007 Changement si rapide ne peut pas s expliquer que par la génétique

16 Des facteurs environnementaux sont certainement responsables: : - Allaitement (rôle protecteur?) Induction lente à une tolérance au gluten - Conseillé de ne pas en donner trop et trop tôt (<4 mois) - Rôle du microbiote chez les nourrissons avec un risque accru de MC???

17 Diagnostic idéal 1. Signes cliniques claires et spécifiques 3. Tests génétiques simples et rapides 2. Sérologie avec des marqueurs sensibles et spécifiques 4. Biopsie qui est le gold standard et qui est 100% contributive

18 1. Signes cliniques Madame M., 46 ans - Bonne santé générale - Anémique depuis sa 1 ère grossesse - 3 fausses couches ensuite - Hématocrite bas - Hyperménorrhée : maux de ventre répétés! endoscopie! colonoscopie (normale) Biopsie : montre une atrophie villositaire + augmentation des lymp. intra épithélial (=LIE) IgA ttg: 14 UI/ml (cut-off 20) mais positif pour IgA/IgG DGP

19 1. Signes cliniques Maladie oligosymptomatique - Forme «classique»: 30-50% - Diarrhée chronique, douleurs abdominales, amaigrissement - Forme frustes: % - MC sans diarrhée, symptômes vagues Adultes: MC du sujet obèse: 187 coeliaques, 3% en sous-poids, 44% en surpoids (J. Gastroinstetin. Liver Dis, 2012)

20 2. Sérologie Quel(s) test(s)? IgA anti-gliadine IgG anti-gliadine Anti-endomysium IgA anti-ttg IgG anti-ttg IgA sérique totale IgA anti-dgp IgG anti-dgp Anti-tTG/DGP IgA anti-réticuline Seulement valable si régime AVEC gluten!

21 2. Sérologie Anti-réticuline (ARA) et Anti-gliadine (AGA) 1971: Anti-réticuline: Test par ImmunoFluorescence Indirecte (IFI) Sensibilité moyenne : 40-60% Spécificité moyenne : 80-90% 75-80: Anti-gliadine: Test IgA ou IgG par Elisa Sensibilité moyenne : 23-90% Spécificité moyenne : 45-90% NE doivent plus être utilisés!

22 2. Sérologie 1984: Anti-Endomysium = EMA Pascale Chrétien-Leprince EMA (IFI) Sensibilité 90 % (85-95%) Spécificité 99% ( %) LR+ 171 LR- 0.11! Spécificité et positive likelihood ratio le plus élevés en sérologie

23 2. Sérologie 1997: Anti-TransGlutaminase tissulaire = TG2 (ttg) Cible des EMA: transglutaminase tissulaire = ttg2 IgA ttg (Elisa) Villalta D. et al. Clin Chem 2010, 56 (3) : 456 IgG ttg (Elisa) Sensibilité 93 % (91-94%) 85% Spécificité 96% (95-97%) 95% LR LR Déficit en IgA (10x plus que dans la population ) Faux pos: Crohn ou maladies hépatiques chroniques Influencé par l hémolyse

24 Celikey (Phadia): Antigène recombinant humain produit dans les cellules eucaryotes (système Baculovirus/Sf9) QUANTA Lite (INOVA): h-ttg (GR) R h-ttg (Recombinant Human Tissue Transglutaminase pour le Bioflash) Orgentec (Diagnostika): Antigène humain recombinant issu de 293-EBNA (embryonic kidney cell line) Eurospital SpA (Italie): Antigène humain produit dans E.coli! Pas les mêmes seuils et pas directement comparables

25

26 2. Sérologie 2005: Anti- Deaminated Gliadin Peptides= DGP IgA DGP IgG DGP Sensibilité 88% (86-90%)! 65% (55-75%)! Spécificité 94% (92-95%) 98% (94-100%) LR LR ! Intéressant (IgG) pour les IgA déficients (sp IgG DGP > sp. IgG ttg)! Intéressant chez les enfants Sensibilité des tests, adapté de Maglio et al, 2010 Enfants cœliaques IgA anti-dgp IgG anti-dgp EMA IgA anti-ttg < 24 mois 89 % 94 % 88 % 87 % > 24 mois 67 % 84 % 98 % 96 %

27 Conclusion: Our study shows that a-dgp increases neither the sensitivity nor the specificity of EMA and ttg. Conclusions: In this study IgA IgG-DGP identified adult coeliac disease patients negative for antibodies against endomysium and tissue transglutaminase.

28 Biopsies pour 268 patients: biopsies positive et suggestives de MC biopsies négatives et pas de symptômes Combinaison: IgA ttg + IgA et IgG DGP - ppv: 99% npv: 98% - lr+: 87 lr-: Si 3 tests positifs ou négatif: situation «claire», sinon biopsie

29 3. Génétique HLA DQ2/DQ8 90% des patients ont l allèle DQ2.5 10% restant sont DQ8 Ces allèles sont nécessaires mais pas suffisants! une mauvaise valeur prédictive positive (30-50%)! bonne valeur prédictive négative (environ 95%)

30 4. Biopsie Classification modifiée de Marsh (1995) Adapté de Stanford, School of Medicine

31 4. Biopsie 1990: European Society of Paediatric Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition: Marsh grade III a-c était requis pour le diagnostic! Problème des coeliaquies patchy, technique du médecin mais aussi du pathologue March 3a March 2 The American Journal of Gastroenterology 105, ! autres pathologies qui ont des biopsies similaires

32 5. Place des tests rapides Avantages: - Petite quantité de matériel, sang capillaire - Patient présent sur place - Rapidité - Désavantages: - Fiabilité - Formation du personnel - Lecture/interprétation - Contexte!!!! - A propos d un test rapide acheté sur le net: Je viens de passer le test mais je ne suis pas certaine que ça ait bien marché... la ligne de test dans le 2e cercle est-elle supposée être pâle ou foncée? car je la voyais à peine. Il n'y a pas eu de 2e ligne donc négatif... mais je ne peux être certaine que ça ait bien marché et que ce n'est pas un faux négatif!

33 Conclusions: Coeliac disease in Libyan children is as common as in Europe, affecting around 1% of the general population. The rapid test for IgA antitransglutaminase determination on a blood drop was not an efficient screening test. CONCLUSIONS: The commercial kits described here produce high values of sensitivity and specificity, offering the general practitioner who suspects a possible case of CD the real possibility to look for anti-h-ttg antibodies in his own medical office during a standard visit at a satisfyingly low cost.

34 C-O Marti, B. Fellay, P. Baehler, A. Bürgin-Wolf (Liestal) Intérêt de la part de plusieurs médecins d avoir un test rapide Simtomax (Augurix, Suisse) - Immunochromatographie multiplex par flux latéral - Teste: - IgA/IgG DGP - IgA totaux - Ctrl interne - Sang complet (plasma ou sérum) - Environ 10min

35

36 Cohorte de 250 enfants: - Risque accrue (n=101) - Suspicion de MC (n=149) Testés avec IgA ttg (Phadia, ou IgG si déficience en IgA, cut-off 3 et 5 U/ml respectivement) et IgA totales - 29 enfants avec IgA ttg (ou IgG) élevé! 25 biopsies, 24 confirment une MC Se: 93.1% ( %) Sp: 95% ( %) VPP: 71% VPN: 99.1%

37 But: Evaluation rétrospective du test rapide Simtomax dans une population pédiatrique testée par sérologie ET par biopsie - Une cohorte d une cinquantaine d enfants - Tous auscultés par un pédiatre gastroentérologue dans un contexte compatible avec une MC - Tests (Liestal) et examens (Fribourg) effectués: - EMA - IgG et IgA ADA (avant 2010), IgA et IgG DGP (après 2010) - IgA ttg - Biopsie duodénale

38 Nos données: VPP = 57% VPN = 100% Mais avec une prévalence de 15% dans cette population pédiatrique spéciale (vs 1-2% dans la population normale). LR+ = 7.14 LR- = 0 Conclusions: - Bonne valeur prédictive négative/lr-! exclure une MC - Outil intéressant pour le dépistage de la MC chez des enfants à risque - En cas de tests douteux/positifs: sérologie complète et l avis d un spécialiste sont nécessaires - Il est important que ce test soit réalisé par des professionnel de la santé et non pas chez soi Questions ouvertes: - Outils de dépistage dans une population normale??? - Performances du test chez des adultes???

39 Etapes du diagnostic 1. Signes cliniques 2. Sérologie 4. Biopsie 3. Génétique

40 Model de l iceberg Kneepkens CMF (2012) Eur. J. Pediatr

41 Schéma de diagnostic Autant de schémas que de publications

42 Groupe 1 Symptomatiques Diarrhées inexpliquées Mal à déglutir, Perte de poids, Courbe de croissance cassée, Puberté retardée,! Test AC spécifiques (IgA TG2 ou IgA DGP)! Si nég (IgA compétent): MC peu probable! Si IgA ttg > 10 MOC: plus besoin de biopsie! Si seroneg mais suspicions forte: Biopsie et HLA Groupe 2 Asymptomatiques Risque augmenté comme T1DB Syndrome de Down, Déficience en IgA Parents cœliaques! 1 er test: HLA (forte VPN)! Taux TG2 fluctuants: faire une biopsie

43 CONCLUSION: This study confirms based on prospective data that a small intestinal biopsy is not necessary for the diagnosis of CD in symptomatic patients with ttga 100 U/mL. CONCLUSIONS: To diagnose celiac disease based on serologic factors, it might be best to define thresholds for levels of IgA anti-ttg based on a predefined likelihood ratio or post-test probability, instead of a multiple of a cut-off value CONCLUSIONS: A strongly positive ttg should not be enough to diagnose celiac disease in the most frequent clinical situations, small bowel biopsy remaining as the gold standard in these cases.

44 Traitement Actuellement: Régime Sans Gluten - Coût - Compliance - Vie sociale (restaurants, ) - Présence de gluten un peu partout Bakshi et al, 2012

45 Mais: Refractory coeliac disease (RCD) 2-5% - de type 1: expansion polyclonale de T cells (normales) - de type 2: Accumulation massive d IEL avec des phénotypes aberrants NK/T cell (low-grade intraepithelial lymphoma) Rubio-Tapia et al, 2010 RCD I CD3+ CD8+ RCD II CD3+! Traitement par immunosuppreseurs CD8-

46 Suivi / Compliance du GFD: 6mois à 1 année: amélioration et normalisation au niveau de l épithélium (villosités, diminution des IEL, ) Enfants (ESPGHAN): Sérologie est assez bien corrélée avec l amélioration au niveau du duodénum (IgA ttg ou DGP). - Amélioration des symptômes (reprise de la courbe de poids, croissance,.) - Normalisation des tests sérologiques Adultes (American Gastroenterological Association): Sérologie est moins bien corrélée - Permet de voir si adhérence à un GFD - Moins bonne corrélation entre la sérologie et l état de la muqueuse

47 Résumé Maladie oligosymptomatique! diagnostic pas toujours évident Tests sérologiques ont une bonne se. et sp. mais pas 100%! La recherche des IgA anti-ttg est recommandée pour le dépistage, avec en parallèle le dosage de l IgA sérique totale Si déficience en IgA, utiliser IgG anti-ttg et/ou anti-dgp Les IgG ou IgG /IgA anti-dgp sont utiles chez les enfants (et chez les adultes?!?) Génétique: Bonne valeur prédictive négative Place pour les tests rapides mais qui doivent être testés et réalisés (interprétés) par des professionnels La biopsie reste nécessaire, mais est-elle standard» dans toutes les situations? encore toujours le «gold

48 Littérature - European Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition guidelines for the diagnosis of coeliac disease. J Pediatr Gastroenterol Nutr Jan;54(1): doi: /MPG.0b013e31821a23d0. - Celiac disease: an immunological jigsaw. Immunity Jun 29;36(6): doi: /j.immuni Clinical practice. Celiac disease. N Engl J Med Dec 20;367(25): doi: /NEJMcp Sprue / maladie cœliaque une maladie aux multiples visages Forum Med Suisse 2011;11(49): Serological diagnosis of celiac disease: comparative analysis of different strategies. Clin Chim Acta Nov 12;413(21-22): Celiac disease: prevalence, diagnosis, pathogenesis and treatment. World J Gastroenterol Nov 14;18(42): doi: / wjg.v18.i

49 Merci pour votre attention!

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