GUIDE DE PRELEVEMENT

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1 LABORATOIRE DE BIOLOGIE MEDICALE MULTISITE LE CREUSOT-MONTCEAU Site de MONTCEAU Site DU CREUSOT GUIDE DE PRELEVEMENT BIOCHIMIE- HEMATOLOGIE BACTERIOLOGIE PARASITOLOGIE - MYCOLOGIE Edition 2014 Page 1

2 Titre : GUIDE DU PRELEVEMENT DU LABORATOIRE Référence M PAT FO 002 Version 3 Date application 19/07/2014 Page 1/96 Vérifiée par : Responsable assurance qualité M DJEMAI Approuvée par : JL JACOB OBJET Destinataires : Salle à prélèvements Montceau et HD + Secrétariats Montceau (RDC et 1 er étage) et HD + Services soins Montceau et HD n de version Date Nature des modifications Réalisée par : Version 1 Version 2 Version 3 13/05/ /05/ /07/2014 Version 2013 Version 2014 Rajout illustrations ordre des tubes O MENOUNI M DJEMAI/ A MUZYCZKA M DJEMAI/ A MUZYCZKA Le manuel de prélèvement a pour objet de définir les modalités générales de prélèvement, d identification, de conservation et de transport des échantillons biologiques DOMAINE D APPLICATION Le manuel de prélèvement s applique à l ensemble des sites du laboratoire multisite et à tous les partenaires du service de Biologie RESPONSABILITES Le manuel de prélèvement est sous la responsabilité du service de Biologie REFERENCES GBEA (Guide de Bonne Exécution des Analyses) Norme NF EN ISO SH REF 02.Recueil des exigences spécifiques pour l'accréditation des laboratoires de biologie médicale selon la norme NF EN ISO : 2007 Conformément à la norme NF EN ISO : si les conditions de prélèvements présentées dans ce livret ne sont pas respectées le laboratoire pourra être amené à refuser ces prélèvements. Les prélèvements doivent être accompagnés de renseignements cliniques, la date et l heure doivent être renseignées, de même que le l identification et la signature du préleveur. Page 2

3 PLAN PRESENTATION DU LABORATOIRE 4 HORAIRES/ DEPOT DE PRELEVEMENTS 5 MODALITES DE PRELEVEMENTS 6-9 MATERIELS DE RECUEIL FACTEURS DE VARIATION DES RESULTATS D ANALYSES 13 GESTION DES NON CONFORMITES HORAIRE DES NAVETTES LISTE DES ANALYSES REALISEES AU LABORATOIRE BIOCHIME HEMATOLOGIE IMMUNOLOGIE BACTERIOLOGIE MYCOLOGIE PARASITOLOGIE PROTOCOLES DES TEST DYNAMIQUES ANNEXES Page 3

4 PRESENTATION DU LABORATOIRE TELEPHONE Site de Montceau les Mines Site Hôtel Dieu du Creusot STANDARD LABORATOIRE FAX LABO SECRETARIAT TECHNIQUE BACTERIOLOGIE 4758 DEPOT DE SANG 6257 ou 4750 INTERLOCUTEURS Biologistes FONCTIONS POSTE MONTCEAU COURRIEL Dr JL JACOB Dr.MENOUNI Responsable du Service Temps plein Référent en Informatique, Biochimie, Immunologie Réactovigilance- Hémovigilance Identito-vigilance Référente en Bactériologie - Parasitologie Mycologie Bactériovigilance Temps plein 4730 jljacob@gh-cm.fr 4740 odmenouni@montceau71..fr Dr M.DJEMAI Dr L.FORT Cadre médico-technique Référent assurance qualité RAQ Temps plein Référent en Hématologie Responsable du dépôt de sang Co-Responsable du site du Creusot Temps partiel Co-responsable du Creusot 4745 modjemai@gh-cm.fr Labo Creusot lafort@gh-cm.fr Mme C.VAIZAN Cadre des deux sites 4752 chvaizan@gh-cm.fr Page 4

5 HORAIRES DU LABORATOIRE/ DEPOT DES PRELEVEMENTS Site de MONTCEAU LES MINES HORAIRES Jours ouvrables : Du lundi au vendredi : de 8 h à 12 h 45 de 13 h 45 à 16h Le samedi de 8 h à 12 h30. Garde : Du lundi au vendredi : de 12 h 45 à 13 h 45 et de 16h à 8 h Samedi après 12 h Dimanche et fériés toute la journée DEPOT DES PRELEVEMENTS A l étage : prélèvements des hospitalisés Prélèvements déposés dans panière dédiée ( urgent / non urgent) En main propre aux secrétaires : gaz du sang, ammoniémie, dosage de facteurs de coagulation, prélèvements à congeler pour envois externes Au rez-de-chaussée Réception des consultations externes, prélèvement sur place. A l étage Pour les examens urgents sonner - Attendre la réponse du technicien - Poser dans la panière «urgent» Pour les examens non urgents : Poser dans panière non urgent le prélèvement et le bon de demande Site de l HOTEL DIEU DU CREUSOT HORAIRES Jours ouvrables : Du lundi au vendredi : de 7 h30 à 12 h de 13 h 30 à 18 h 30 Le samedi de 8 h30 à 12 h. Garde : Du lundi au vendredi : de 12 h à 13 h 30 et de 18h30 à 7 h30 Samedi après 12 h Dimanche et fériés toute la journée DEPOT DES PRELEVEMENTS Prélèvements des hospitalisés au secrétariat prévu à cet effet : - Prélèvements déposés dans panière dédiée (urgent / non urgent) - En main propre aux secrétaires : gaz du sang, Ammoniémie, dosage de facteurs de coagulation prélèvements à congeler pour envois externes Prélèvements externes à l accueil. Pour les examens urgents sonner - Attendre la réponse du technicien - Poser dans la panière «urgent» Pour les examens non urgents : Poser dans panière non urgent Page 5

6 MODALITES DE PRELEVEMENTS: RECOMMANDATIONS Prélever de préférence le matin Le Jeûne : C est un des éléments permettant la bonne exécution technique des examens et une interprétation pertinente des résultats. Le laboratoire doit s assurer que le patient a respecté : Une période de jeûne strict d au moins 12 heures est indispensable pour le dosage de la glycémie, des triglycérides, du cholestérol. Il est possible de boire un verre d eau et recommandé de prendre un repas léger la veille au soir. Une période de jeûne relative (de 3 heures) est recommandée mais non obligatoire pour les autres dosages. A défaut un repas léger, pauvre en matières grasses est à prévoir ; le prélèvement si possible doit être effectué au moins 2 heures après la collation 1 - PREPARATION DU PATIENT Le site de prélèvement SITES A EVITER : veines proches du site d une infection perfusion (prélever au bras opposé) fistule artério-veineuse du dialysé à préserver cathéter (hémolyse accrue ou utiliser un tube vide partiel). En cas de prélèvements répétitifs, commencer le plus haut possible et descendre progressivement. PRECAUTIONS : utiliser les tubes de purges dans les cas suivants : - Aiguilles vacutainer BD Eclipse : si tests de coagulation, prélever un tube de purge en premier. - Cathéter veineux périphérique : pour minimiser les traces d hémolyse, prélever un tube de purge en premier. - Chambre implantable : prélever 3 tubes de purges en premier. Suivre les recommandations du laboratoire en cas de prélèvement capillaire ou gazométrie (documents joints). 2 ETAPES DU PRELEVEMENT Etape 1 Préparation du matériel nécessaire Choix des tubes en fonction des analyses prescrites (cf bon d analyse) Installation du patient Etape 2 Vérifier l IDENTITE du patient : PAR LA PERSONNE REALISANT LE PRELEVEMENT en lui faisant décliner son identité Recueil ou vérification des informations administratives, physiologiques et thérapeutiques Page 6

7 Etape 3 Prise de sang : Choisir le site de ponction Se désinfecter les mains avec gel hydroalcoolique Poser le garrot Désinfecter le site de ponction Réaliser la ponction RESPECTER L ORDRE PRECONISE DES TUBES (cf illustration ci-dessous) Page 7

8 Faire attention à bien remplir les tubes d hémostase, au niveau du témoin de remplissage. En effet, il faut respecter le rapport de 8 volumes de sang et de 2 volumes du liquide anticoagulant prérempli. Etape 4 Etape 5 Etape 6 Eliminer le matériel de ponction HOMOGENEISATION DES TUBES (8 à 10 fois) IDENTIFICATION DE L ECHANTILLON L ETIQUETAGE DES TUBES A L AVANCE EST PROSCRIT Le collage de l étiquette se fait par la personne ayant réalisé le prélèvement, après celui-ci. L étiquetage doit comporter : o NOM DE NAISSANCE o PRENOM o NOM MARITAL le cas échéant o SEXE o DATE ET HEURE DE PRELEVEMENT (notée au moment du prélèvement) Etape 7 Page 8 Remplissage du bon de demande o convenablement étiquetés (identité idem sur le tube) o analyses cochées o NOM ET SIGNATURE DU PRELEVEUR o DATE ET HEURE DE PRELEVEMENT o RENSEIGNEMENTS CLINIQUES dans les cases prévues : notion de traitements antibiotiques pour acte de bactériologie o notion d urgence clairement établie. o signé du prescripteur

9 Pour les GROUPES SANGUINS il est recommandé en dehors de l urgence vitale * pour les 2 déterminations 2 préleveurs ou à défaut 2 prélèvements différents * un bon de demande par préleveur. * Les 2 déterminations doivent être mises dans 2 sachets différents++ En cas d erreur d identité, utiliser le circuit de correction validé dans chaque institution (Veiller à bien détruire les étiquettes anciennes ou erronées. Pour les analyses portant sur le génome, joindre le consentement éclairé du patient ou une attestation de consultation Tout prélèvement difficile ou tout incident lors du prélèvement doit être notifié, de même que le lieu de prélèvement lorsque celui-ci peut influer sur le résultat obtenu (chambre implantable, cathéter, site inhabituel). IL EST FORMELLEMENT PROSCRIT DE COMPLETER UN TUBE MAL REMPLI AVEC UN AUTRE TUBE Vérifier la péremption des tubes++ Etape 7 : Acheminement au laboratoire Conditions d acheminement (Délai et Température) Se référer à la liste des analyses disponible dans guide (à partir de la page 22) pour les conditions de transport pour chaque analyse. Par exemple lors d un prélèvement pour un TCA pour la surveillance d un patient sous héparine : Transport à T ambiante Acheminent en moins d une heure si utilisation d un tube Citraté ou moins de 4h si tube CTAD Pour les examens transmis dans des laboratoires extérieurs, tous les échantillons sont envoyés au laboratoire qui se chargera de transmettre aux laboratoires sous-traitants. Les services de soins doivent se conformer aux recommandations portées sur le catalogue de prélèvement Biomnis disponible dans les services. Modalités de transport des établissements concernés nel) les bilans toute la journée. Cas des urgences vitales : Un agent du service de soins descend les échantillons. Ils doivent être remis en main propre au personnel du laboratoire afin qu ils soient traitées aussitôt. L agent du service de soins doit préciser oralement qu il s agit d une urgence vitale. Repérage des Examens urgents SITE DU CREUSOT : Prélèvements issus du service des urgences : sacs bleus Prélèvements urgents des autres services : sacs rouges Prélèvements non urgents : sacs transparent SITE DE MONTCEAU : Prélèvement urgents : Sacs rouges Prélèvements non urgents : sacs blancs Page 9

10 Alcoolémie Acide Urique Bilan hépatique Calcium CPK Créatinine Réactive Cycle glycémique Digoxine Glycémie Glycémie post prandiale HGPO75g EXAMENS Centre Hospitalier Montceau les Mines Ionogramme Lipase NT pro BNP Phosphore Potassium Protéine C Protides Sodium Troponine Urée Beta-HCG Matériel de recueil TUBE PRINCIPAL Tube Héparinate lithium : vert clair gel TUBE A RAJOUTER si besoin Si HCG : +1 tube sérothéque Glycémie si délai acheminement prévisible au labo > 2H TP INR Complexes solubles TCA Fibrinogène Héparine HBPM anti-pf4 D dimères Dosage de facteurs (+ 2 tubes supplémentaires) Numération formule Plaquette + Vitesse de sédimentation Réticulocytes Paludisme Groupe phénotype (+ 1 tube par détermination) RAI Agglutinines résiduelles + 1 tube supplémentaire Coombs direct Oxyde de carbone Ammoniémie Calcium ionisé Tube Gris Tube Bleu Citraté ou tube CTAD tube Mauve : EDTA Tube vert foncé, sans gel héparinate lithium Gaz du Sang, Calcium ionisé, Oxyde de Carbone Lactates Page 10

11 LDH Tube Sec avec Gel de couleur Rouge Fer Acide valproïque Coefficient de saturation Carbamazépine Ferritine Paracétamol T3l Phénobarbital T4l Lithium TSH Albumine Oromucoïde Cholestérol Haptoglobine Triglycerides Immunoglobulines Cortisol Procalcitonine Hépatite FSH Estradiol Magnésium + 1 tube jaune Sérothèque Sérologie Toxoplasmose ACE Ca15.3 Ca125 Toxiques/ Stupéfiants Protéinurie Calcium Glycosurie Urée Iono urinaire Microalbuminurie Phosphore Créatinine Acide urique VIH AFP Ca19.9 PSA urines Page 11

12 Coproculture Test de weber Recherche de toxine A et B Clostridium difficile Recherche de rotavirus et adénovirus Dispositif intra vasculaire Liquide de drain Recherche d antigènes solubles urinaires Sécrétion broncho-pulmonaire Spermoculture Liquide de ponction Liquide articulaire ECBU Centre Hospitalier Montceau les Mines ANALYSES TUBE PRINCIPAL TUBES A AJOUTER Pot à coproculture Poudrier stérile Monovette Ou poudrier stérile vol <9ml +Tube bleu Prélèvement bactériologique réalisé sur le site de Montceau Liquide céphalo rachidien Ecouvillons bleu Tube bouchon transparent (purge) Hémoculture Hémoculture pédiatrique Hémoculture chez un patient porteur d un DIV Flacon d hémoculture BACTEC Prélèvement bactériologique hors site de Montceau Tube eswab Test de la grippe A et B Mycoplasmes Ecouvillon rouge Prélèvement prothèse ECBU avec recherche de mycobactérie Recherche de bactérie sur les urines de 24h Outres Seringue stérile Page 12

13 FACTEURS DE VARIATION DES RESULTATS D ANALYSE Facteurs Biologiques inter-individuels Facteurs Biologiques intra-individuels Chronobiologiques : heure de prélèvement Physiologiques pré/post-prandial, stress Thérapeutiques prise de médicament : l héparine fausse certains immunodosages ou peut mimer la présence d une protéine monoclonale sur une électrophorèse Pré-analytiques Lié à la position du patient : repos strict au cours d une HGPO ou avant un dosage de prolactine Lié au temps de pose du garrot : doit être < 3 min La pose du garrot entraine une stase veineuse qui augmente la protidémie d environ 20% après 5 min, les TGO et la bilirubine dès la 3 ème minute et le potassium après 1 min Lié au remplissage du tube Le non respect des proportions sang/anticoagulants recommandées peut perturber gravement certains examens : Tube à NF, VS ou coagulation Un tube citraté mal rempli allonge les tests de coagulation et diminue le TP et augmente l INR. Pour les NF, un excès d EDTA accentue les modifications morphologiques des leucocytes. Monovette pour ECBU, insuffisamment remplie : l acide borique alors en excès, empêchera la pousse des germes. Liés à l additif : un prélèvement prélevé sur le mauvais anticoagulant peut empêcher la réalisation de l analyse La calcémie sera faussement abaissée sur un tube avec agent complexant (citrate, fluorure, EDTA). Liés à l ordre de prélèvement des tubes : un tube EDTA prélevé avant un tube hépariné peut fausser le dosage de la calcémie car EDTA chélateur du Ca / un tube sec prélevé avant tube citraté peut activer la coagulation car les tubes secs sont tapissés de particules de silice destinées à favoriser la coagulation dans ces tubes Liés à l homogénéisation de l échantillon Une agitation trop brutale entraine une hémolyse de l échantillon de sang hémolysé qui entrainera une fausse augmentation du K, LDH, Fer.. Une agitation insuffisante entraine une répartition partielle de l anticoagulant et la production de microcaillots liés à un traitement antibiotique récent pour acte de bactériologie : faux négatifs Page 13

14 GESTION DES NON CONFORMITES Selon la norme 15189, le biologiste doit refuser tout échantillon prélevé ou transmis dans des conditions non conformes aux procédures techniques et réglementaires. Le motif du refus doit être porté à la connaissance du médecin. Il existe 2 types de non conformités suivant l impact sur la qualité de la prise en charge du prélèvement et sur le respect de la règlementation - Non Conformité majeure qui entraine un refus du prélèvement et conduit à l annulation de la demande ou de l examen. - Non-conformité mineure qui a peu d impact sur la qualité du prélèvement, qui conduit souvent à l acceptation des faire des analyses, parfois au refus (cas d un examen redondant) et qui sera toujours tracée dans notre système informatique En cas de refus, dans certains cas une dérogation est possible : le biologiste décide des conditions de dérogation (échantillon précieux, prélèvement difficile à obtenir..) Toute non-conformité, majeure ou mineure, conduit à une action curative (action immédiate), le biologiste définit des actions curatives (au minimum appel du service concerné) Sur le compte rendu édité par le système d information de laboratoire (SIL) et sur le serveur de résultat du système d information de l hôpital (SIH) La non-conformité sera également confirmée par téléphone dès son enregistrement par l opérateur du laboratoire selon les cas au médecin, IDE, patient, ou laboratoire partenaire DESIPTION DE LA NON CONFORMITE 1- Problème d identité patient : (code IP) Identification absente : absence de nom de naissance, prénom, de date de naissance ou du sexe Identification illisible, erronée sur au moins un des 4 paramètres précédents Discordance entre l identité de l Echantillon et le bon de demande PS : si absence de nom marital : on accepte 2- Bon de demande d examen (code BDE) Bon absent ou inadéquat, Date absente, date discordante entre le Bon et l échantillon, Heure absente, discordante, incohérente Horaire du prélèvement inapproprié : Préleveur absent, prescripteur absent, nom de service absent, Examen redondant, examen non fait au laboratoire ou examen coché par erreur Renseignements cliniques absents : traitement non précisé (anticoagulant, antibiotique..), date des dernières règles, notion de voyage si demande de parasitologie MESURE CORRECTIVE Impact majeur = examen non fait Dérogation possible si engagement du préleveur sur la validité de l échantillon en cas de Prélèvement précieux : LCR, ponction, per opératoire, biopsie, calcul) Prélèvement irremplaçable : prélèvement chez un nouveau né, nourrisson, en cas d urgence vitale (où un refus risque de retarder la prise en charge) patient impiquable Le motif de la dérogation doit être absolument tracé Impact majeur et refus de faire l examen si - impossibilité d obtenir le nom du préléveur + sa signature en cas de demande Groupe sanguin ou RAI : Ne pas faire l analyse et saisir IDP Impossibilité d obtenir l heure et la date du prélèvement - Horaire inapproprié : pour les tests dynamiques, le cortisol (sauf demande expresse du médecin), dosage médicaments, TCA/administration héparine Dans les autres cas : impact mineur = acceptation de faire l examen : récupérer, dans la mesure du possible, l information manquante auprès du service Page 14

15 DESIPTION DE LA NON CONFORMITE MESURE CORRECTIVE 3-Conditions d acheminement (code ACHE) Délai d acheminement non respecté Echantillon non protégé de la lumière Milieu de transport absent ou inadéquat Température lors de l acheminement non respectée 4- Echantillon (code TNCO) Contenant inadapté à l examen prescrit (exemple : pas le bon anticoagulant utilisé) Contenant périmé Quantité insuffisante volume de remplissage insuffisant (Tubes d hémostase++) Nature de l échantillon non indiquée ou erronée Localisation du prélèvement non renseigné (prélèvement bactériologique, cathéter, chambre implantable ). 5- Hygiène et sécurité (code HYG) 6/Non-conformité analytique (code ANA) : Prélèvement fortement hémolysé, coagulé, lactescent, dilué dans la perfusion. Impact majeur = examen non réalisé car Conservation et stabilité limitées de l échantillon après prélèvement : TCA sous héparine, Ammoniémie, Gaz du Sang. Pas de dérogation possible Impact majeur et examen dans tous les cas sauf si la non concerne la localisation (site) du prélèvement (impact mineur) : Si impact majeur = examen non réalisé Pas de dérogation possible sauf sur la nature de l échantillon à condition d obtenir l information manquante Si impact mineur : examen réalisé, l information manquante doit être récupérée Impact majeur si contenant détérioré ou non étanche Refus de l analyse Dérogation possible laissé à l appréciation du biologiste Impact mineur si Bon, pochette, et ou étiquette souillés Acceptation de l échantillon avec le code adapté Impact majeur = Refus de faire ou de rendre les examens concernés car la qualité des résultats n est pas garantie Dérogation exceptionnelle nécessitant l accord du biologiste qui doit l argumenter 7/- Autres cas (code AUTRE) L impact est apprécié par biologiste qui doit argumenter et tracer sa décision. Page 15

16 Titre : HORAIRES NAVETTES TRANSPORT CREUSOT / MONTCEAU Référence : M ECH LG 002 Version 4 Date application : 02/11/2012 Page 16/2 Ramassage prélèvements dans services soins SITE FOCH SITE HARFLEUR SEMAINE WEEK END ET JOURS FERIES SEMAINE WEEK END ET JOURS FERIES NAVETTE NAVETTE NAVETTE NAVETTE départ départ arrivée labo arrivée labo HD* labo HD* HD labo HD NAVETTE arrivée labo Montceau Ramassage prélèvements dans services soins NAVETTE arrivée labo Montceau Ramassage prélèvements dans services soins* Ramassage prélèvements SSR Seulement* 7h30 9h00 9h30 7h30 7h30 7h45 7h30 8h Par coursier labo Par brancardier HD Par brancardier HD 8h30 8h45 9h00 Par navette HD 10h 10h30 11h 10h30 11h 11h30 10h00 10h15 10h45 11h Par coursier labo TRPS Par navette HD TRPS 12h30 13h30 14h20 11h30 11h45 Biomnis Par coursier labo 14h30 15h00 15h30 14h30 16h00 16h30 14h30 14h45 Par coursier labo TRPS Par navette HD 15h45 16h00 TRPS 16h 16h30 17h00 16h30 16h45 Par coursier labo Par navette HD 17h00 19h00 19h30 17h30 19h00 19h30 18h45 19h00 18h45 19h00 TRPS TRPS TRPS TRPS Page 16

17 TITRE NAVETTES CREUSOT/MONTCEAU Référence M ECH LG 002 Version 4 Date application : 02/11/2012 Page 17/2 MONTCEAU Standard Centre Hospitalier : Laboratoire : Téléphone : Fax secrétariat: / Fax dépôt sang LE CREUSOT Standard Centre Hospitalier : Laboratoire : Téléphone : Fax : TRANSFERT DES PRELEVEMENTS : Navettes Harfleur/Foch : assurées par : Brancardier HD avec véhicule des urgences à joindre par le standard. ou par la navette archive : tel : ou par TPMR (transport Personne à Mobilité Réduite) si présent : 8h30-12h et 13h30-17h tel : ou par coursier Labo Navettes Labo HD / Labo Montceau : assurées par : Coursier Labo: tel : ou par TRPS : Tel prioritaire pour gestion des livraisons : Me CHERRIER Michelle : ou Si non réponse : Me JOANNU Brigitte : ou Ou Mr PETROCELLI Armand : ou ou par Biomnis Si urgence : contacter TRPS (cf. n ci-dessus) Si urgence et coursier habituel + TRPS indisponibles : par le standard (99) contacter l ambulancier qui fait habituellement les trajets entre Montceau et Le Creusot (cf. liste M ECH LG 001) ou tel à l administrateur de garde 2. TRANSFERT DU MATERIEL : Transfert matériel labo site Montceau au labo site Foch : assuré par les différentes navettes Transfert matériel en intra Foch : assuré par pool ASL ou agents des services Transfert matériel pour Harfleur : assuré par les différentes navettes Page 17

18 LISTE DES EXAMENS DE BIOCHIMIE, HEMATOLOGIE ET BACTERIOLOGIE REALISEES PAR LE LABORATOIRE EXAMENS DE BIOCHIMIE / IMMUNOLOGIE/ HEMATOLOGIE ANALYSES DE BIOCHIMIE URINAIRE RÉFÉRENCE ANALYSES DE BACTERIOLOGIE 21 à COPROCULTURE 31 2 COMPTE D ADDIS 31 3 DISPOSITIF INTRA VASCULAIRE 31 4 ECBU EXAMEN BATERIOLOGIQUE DES PUS 33 6 EXAMEN BACTERIOLOGIQUE DU PIED DIABETIQUE INFECTE 33 7 HEMOCULTURE 34 8 LIQUIDE ARTICULAIRE 35 9 LIQUIDE DE DRAIN LIQUIDE DE PONCTION LIQUIDE CEPHALORACHIDIEN PLAIES, ECOULEMENT, TISSUS PRELEVEMENT UROGENITAUX 37/40 14 PRELEVEMENT OPHTALMOLOGIQUE PRELEVEMENT O.R.L PRELEVEMENT PERINATAUX PRELEVEMENT DE PROTHESE RECHERCHE D ANTIGENE SOLUBLES URINAIRES 40 Légionnelles et pneumocoques 19 RECHERCHE DE BACTERIE MULTIRESISTANTE RECHERCHE DE TOXINES A ET B DE CLOSTRIDIUM DIFFICILE SECRETION BRONCHO-PULMONAIRE SPERMOCULTURE TEST DE DEPISTAGE DE LA GRIPPE A ET B ULCERE ET ESCARRES 43 Page 18

19 ANALYSES DE MYCOLOGIE Centre Hospitalier Montceau les Mines BIOPSIE DE TISSUS OU D ORGANES CHEVEUX ET POILS 44 3 EXSUDATION DES MUQUEUSES 45 4 EXPECTORATION ONGLES PEAU GLABRE PLIS 46 8 PRELEVEMENT BRONCHIQUE PUS ET LIQUIDE PATHOLOGIQUES SANG SELLES 47 ANALYSES DE PARASITOLOGIE 48 1 COPROLOGIE PARASITAIRE RECHERCHE DE PARASITES DANS LES URINES RECHERCHE DE PARASITES SANGUINS SCOTCH TEST ANAL (recherche d œufs d oxyure) 50 PROTOCOLES DES TEST DYNAMIQUES 51 - Tests dynamiques et protocoles hôpital 51 - AXE CORTICOTROPE 52 * Test au dectancyl Test de freinage nocturne 53 * Test au synactène rapide ou immédiat 54 * Test au synactène retard AXE GONADOTROPE 57 * Test à la LH RH court 58 - DIABETOLOGIE 59 * Hyperglycémie provoquée par voie orale sur 2 heures * Hyperglycémie provoquée par voie orale sur 5 heures * Protocole de prise en charge de diabète gestationnel 63 - NEPHROLOGIE 64 * Clairance des phosphates Pour les autres tests se référer au guide Biomnis Page 19

20 ANNEXES ANNEXE 1 Modalités d utilisation des bandelettes urinaires ANNEXE 2 Protocole d utilisation de la Monovette ANNEXE Recherche de chlamydia Trachomatis ANNEXE Recommandations pour les prélèvements de gazométrie ANNEXE 5 Bon de prélèvement Fiche mycologie 79 Fiche de parasitologie 80 Demande de myélogramme 81 Demande de typage lymphocytaire 82 ANNEXE 6 Complément sur les analyses d hémostase ANNEXE Marqueurs cardiaques ANNEXE Diagnostic de la maladie d Alzheimer Page 20

21 EXAMENS BIOLOGIQUES Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE Délai résultat si routine TA = T ambiante = T entre 18 et 25 C, Délai ajout examen et rendu résultat à compter à partir de l heure d enregistrement au labo HEMOSTASE TP INR M+C Bleu Bien homogénéiser les tubes Préciser si traitement TCA de Surveillance (chez un patient sous héparine) TCA de Screening (pas de ttt Héparine) TCK M+C M+C M+C Bleu Bleu anticoagulant : AVK : Noter le nom du médicament, posologie et heure d administration. NACO : Xarelto, Pradaxa, Eliquis Héparine IV, calciparine HBPM : Lovenox, innohep.. Arixtra, Orgaran Délai et T conservation (Pour vérification identité) 6H à TA 8H 1H J0 48H à TA Citrate = 1H CTAD = 4H à TA 4H à TA Citrate = 2H CTAD = 4H Bleu 4H à TA 4 H 1H J0 4H 1H J0 48H à TA 1H J0 48H à TA 48H à TA Fibrinogène M+C Bleu 4H à TA 8H 1H D Dimères M+C Bleu 4H à TA 8H 1H J0 J0 48H à TA 48H à TA Facteur V M Bleu SiTP bas, absence d AVK et suspicion d insuffisance hépatocellulaire 4h à T ambiante 6H 2 H J0 48H à TA J0 48H à TA Facteur VIII, IIX XI Et Willebrand M Bleu Si TCA allongé, TP anormal 4h à T ambiante 4H Page 21

22 EXAMENS BIOLOGIQUES Activité anti-xa -Héparine -HBPM Complexes Solubles Site de réalisation M :Montceau C :Creusot M Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Bleu Cryofibrinogène M Bleu Test de détection anti-pf4 Numération Formule- Plaq Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Préciser nom de l héparine, posologie, mode d administration, relais HEPA- AVK horaire d injection et de prélèvements : *Si héparine standard : -Administration continue : au moins 4h après début du traitement -S/C : à mi chemin entre 2 injections *HBPM : -3h-4h après injection sous cutanée de lovenox, fraxiparine, fragmine -4 à 6h après injection sous cutanée d innohep 1H à TA Délai Ajout après centrifugation 2H à TA 15 Jours à - 20 C Délai Résultat si URGENCE M Bleu Suspicion CIVD 1H à TA 2h 2H M M+C Bleu Mauve Paludisme M Mauve En ambulatoire: Exclusivement prélevé au laboratoire sur matériel de prélèvement préalablement incubé à 37 C Suspicion thrombopénie induite à l héparine Bien homogénéiser le tube par retournement (au moins 5x) HEMATOLOGIE Prévenir le labo et noter les renseignements cliniques et les pays fréquentés IMMEDIAT à 37 C 2H Délai résultat si routine 1H Délai et TA conservation (Pour vérification identité) 48H à TA 15 J à -20 C 48H à TA J8 J8 à 4 C 6H à TA 24H J0 48H à TA 8H à TA 24H 30 mn J0 8H à TA 24H 2H J0 48H à 4 C 48H à 4 C Réticulocytes M Mauve 8H à TA 24H 2H J0 48H à 4 C Vitesse de 48H à 4 C sédimentation M Mauve 7h à TA 8H J0 Page 22

23 EXAMENS BIOLOGIQUES Groupe sanguin Phénotype Site de réalisation M :Montceau C :Creusot M+C Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Mauve Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) IMMUNO-HEMATOLOGIE *Les 2 déterminations doivent être effectuées à partir de 2 ponctions veineuses différentes 24H à TA 24H 30 Min de préférence par 2 préleveurs différents J0 48H à 4 C RAI M+C Mauve *Bien noter l heure de prélèvement l identification et la signature du préleveur 24h à TA 24H 45 Min sur le bon de demande J0 48H à 4 C Coombs direct M+C Mauve Bilan hémolyse/nouveau né (au lieu RAI) 7 H à TA 48H 2H J0 48H à 4 C BIOCHIMIE Jeûne relatif conseillé Acide Urique M+C Vert clair Préciser si grossesse ou si traitement par 7 H à TA 48H 1H J0 uricozyme 48H à 4 C Alcoolémie M+C Vert clair Ne pas utiliser d'alcool pour désinfecter le point de ponction 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Ammoniémie M + C Vert foncé Acheminement immédiat dans sac rouge, le <15min à TA 1H JO 48H à 4 C signaler au secrétariat BHCG M+C Vert clair +Jaune Noter la date des dernières règles 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Bicarbonates ou CO² M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Bilan hépatique (Bili, TGO, TGP, GGT, M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C PAL) Bilirubine (totale libre Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 M+C conjuguée) 48H à 4 C Calcium Ionisé M+C Vert foncé 7H à TA 48H 30 mn JO 48H à 4 C Clairance a la créatinine M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Page 23

24 EXAMENS BIOLOGIQUES Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE CK M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 Créatinine M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 CRP (Protéine CRéactive) Cycle glycémique M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 M+C Vert clair Noter l heure sur chaque tube 7 H à TA 48H 1H J0 Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) 48H à 4 C 48H à 4 C 48H à 4 C 48H à 4 C Digoxine M+C Vert clair Prélever avant la prise médicamenteuse 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Gazométrie M+C Seringue < 15 mn à TA 45 mn JO 48H à 4 C héparinée Glycémie M+C Vert clair Gris Préciser température du patient, nature du prélèvement (veineux, artériel ), présence oxygénothérapie A jeun strict sauf urgence ou mention contraire <2H= tube vert 7H = tube Gris TA 48H 1H J0 48H à 4 C HGPO 75 g M+C Vert clair 2H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C LDH M Vert clair Jeûne relatif conseillé 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Lipase M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Voir procédure marqueurs cardiaques 7 H à TA NT pro BNP M+C 48H 1H J0 Vert clair 48H à 4 C Oxyde de M+C Vert foncé/ 7H à TA 1H JO 48H à 4 C Carbonne gazométrie Phosphatases M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 Alcalines 48H à 4 C Phosphore M+C Vert clair Jeûne fortement conseillé 7 H à TA Potassium M+C Vert clair Acheminement rapide recommandé 4H à TA 12H 48H 1H J0 1H J0 48H à 4 C 48H à 4 C Page 24

25 EXAMENS BIOLOGIQUES Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) Protides M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Sodium M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Transaminases M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 (TGO, TGP) 48H à 4 C Troponine T M+C Vert clair Voir procédure marqueurs cardiaques 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C Urée M+C Vert clair 7 H à TA 48H 1H J0 48H à 4 C ACE : antigène M Rouge + 7 H à TA 48H J0 1 an carcynoembryon Jaune A -20 C naire Acide Prélèvement à effectuer en général juste 7 H à TA 48H J0 4 48H à valproïque M Rouge avant la prise du médicament (taux résiduel) 4 C (Dépakine*) Posologie et heure de dernière prise médicamenteuse Albumine M Rouge Jeûne relatif conseillé 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C /préalbumine AFP (Alpha 1 M Rouge + 7 H à TA 48H J0 1 an foeto protéine) Jaune A -20 C Anticorps anti M Rouge + Joindre renseignement clinique 7 H à TA 48H J0 1 an Hbc Hépa B Jaune A -20 C Anticorps anti M Rouge + Joindre renseignement clinique 7 H à TA 48H 4H J0 1 an Hbs Hépatite B Jaune A -20 C Antigène Hbs M Rouge + Joindre renseignement clinique 7 H à TA 48H 4H J0 1 an Hépatite B Jaune A -20 C CA 15.3 M Rouge + 7 H à TA 48H J0 1 an Jaune A -20 C CA 19.9 M Rouge + 7 H à TA 48H J0 1 an Jaune A -20 C CA125 M Rouge + 7 H à TA 48H J0 1 an Jaune A -20 C Page 25

26 EXAMENS BIOLOGIQUES Carbama-zépine (Tegretol*) Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement M Rouge Avant la nouvelle, prise et toujours à la même heure. Indiquer posologie, date et heure de dernière prise 7 H à TA Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) 48H 4H J0 48H à 4 C Cholestérol M Rouge A jeun strict 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Cortisol C Rouge Prélèvement entre 8 h et 10 h sauf mention contraire sur ordonnance Cryoglobuline C Rouge En ambulatoire: Exclusivement prélevé au laboratoire sur matériel de prélèvement préalablement incubé à 37 C Cycle cortisol 8H- 20 H 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C IMMEDIAT à 37 C 48H J8 8J à 4 C C Rouge Noter l heure sur chaque tube 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Œstradiol C Rouge Noter date des dernières règles et induction 7 H à TA 48H 4H si PMA J0 48H à 4 C ovulation Fer + Coefficient de saturation M Rouge Jeûne relatif conseillé 7 H à TA 48H 48H à 4 C Fer M Rouge Jeûne relatif conseillé 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Ferritine M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C FSH C Rouge Préciser DDR ou contexte 7 H à TA 48H 4H si J0 48H à 4 C PMA J0 Gamma GT M+C Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Haptoglobine M Rouge Préciser si antécédents de transfusion 7 H à TA 48H 48H à 4 C HDL/ LDL Cholestérol M Rouge A jeun strict 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Page 26

27 EXAMENS BIOLOGIQUES Immunoglobulin es (IgA, IgG, IgM) Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C C Rouge Préciser DDR ou contexte 7 H à TA 48H 4H si J0 48H à 4 C LH PMA Lithium M Rouge Prélever avant la prise médicamenteuse 7 H à TA 48H 2H J0 48H à 4 C Magnésium C Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C MNI Test M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Orosomucoïde M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Paracétamol M Rouge Prélèvement 4h minimum après la prise 7 H à TA 48H 2H J0 48H à 4 C Phénobarbital (Gardenal*) Procalcitonine PSA dosage interprétable entre 4 et 11h. 7 H à TA M Rouge Noter : date de début du traitement et heure 7 H à TA 48H 2H J0 48H à 4 C de la dernière prise 7 H à TA C Rouge 7 H à TA 48H 8H J0 48H à 4 C M Rouge A distance de toute cause d élévation transitoire : effort physique intense, rapport sexuel, toucher rectal. 7 H à TA 48H J0 1 an à - 20 C T3L M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C T4L M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Toxoplasmose M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Transferrine M Rouge 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Triglycérides M Rouge A jeun strict 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C TSH M Rouge 7 H à TA 48H 2H J0 48H à 4 C 7 H à TA VIH M Rouge 7 H à TA 48H 2H J0 1 an à - 20 C Page 27

28 EXAMENS BIOLOGIQUES Site de réalisation M :Montceau C :Creusot Tubes de prélèvement (couleur du bouchon) Centre Hospitalier Montceau les Mines Préconisations Délais et T Acheminement Délai Ajout après centrifugation Délai Résultat si URGENCE EXAMENS DE BIOCHIMIE URINAIRE ET RECHERCHE DESANG DANS LES SELLES Délai résultat si routine Délai et TA conservation (Pour vérification identité) Acide urique M Poudrier stérile Calcium M Poudrier stérile Créatinine M Poudrier stérile Glycosurie M+C Poudrier stérile Iono M+C Poudrier stérile Micro M+C Poudrier albuminurie stérile Protéinurie M+C Poudrier stérile Phosphore M Poudrier stérile Urée M Poudrier stérile Toxiques / stupéfiants (Méthadone, M+C Opiacées, THC (cannabis), Cocaïne) Ne pas mettre les urines au réfrigérateur 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C durant le recueil Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Noter la diurèse / 24h 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Poudrier stérile 7 H à TA 48H J0 8 Jours à 4 C Weber (test de) (sang dans les selles) M Poudrier stérile 7 H à TA 48H J0 48H à 4 C Page 28

29 Référence : Centre Hospitalier Montceau les Mines a) B.Foucher, G Pina, G Desjeux, J-M Prevosto, J-F Chaulet, V Cheminel ; Influence de la température et du délai avant centrifugation sur la stabilité de 28 paramètres de détermination courante en biochimie ; Annales de Biologie Clinique. Volume 63, Numéro 1, , Janvier-Février 2005, Annales de biologie clinique ; b) Echantillons biologiques: phase pré-analytique et prélèvement en biologie médicale GHNASSIA JC ; ELSEVIER France ; décembre 1998 c) C.Oddoze, E.Lombard, H.Portugal ;stability study of 81 analytes in human whole blood, in serum and in plasma ;Clinical Biochemistry 45(2012) d) Kemkes-Matthes B, R Fischer, Peetz D; Influence de 8 et 24 h de stockage de sang entier à la température ambiante sur le temps de prothrombine, activée temps partiel de thromboplastine, le fibrinogène, le temps de thrombine, l'antithrombine et le D-dimère; Sang Coagul fibrinolyse Apr; 22 (3) : ; e) World Health Organization. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigation, Revision 2. Geneva: WHO, 2002; f) C.Coussieu ; prolactine : pièges et difficultés pour le laboratoire ; RFL 2009 n 414, p41 g) Fiches techniques Stago h) GEHT; Recommandations - Variables préanalytiques ; 2007; Preanalytiques/Recommandations-Variables-preanalytiques_69_722.html i) Anal de biologie clinique : stabilité préanalytique des paramètres de coagulation : revue des données disponible ; Laetitia Mauge, Martine Alhenc-Gelas Page 29

30 CODE DE BON PRELEVEMENT EN BACTERIOLOGIE Les nuits, jours fériés, samedis et dimanches les seuls examens considérés comme urgents (sauf justification médicale) sont les LCR et les hémocultures. Règles élémentaires à respecter : Prélever aseptiquement un échantillon suffisant du produit pathologique en récipient stérile et étanche avant tout traitement antibiotique; en respectant les conditions élémentaires d hygiène. Tout prélèvement souillé sera refusé. Eviter autant que faire se peut l écouvillon (solution de facilité généralement peu satisfaisant). Pour la recherche de bactéries «exigeantes» et/ou d anaérobies utiliser un milieu de transport approprié.( tube eswab ) Adresser le prélèvement dûment identifié le plus rapidement possible au laboratoire. Tout retard de mise en culture favorise la multiplication de «contaminants» et diminue la chance d isoler un pathogène «fragile».noter la date et l heure de prélèvement Noter les renseignements cliniques et la prise éventuelle d antibiotiques au moment et dans les 3 mois précédent le prélèvement Page 30

31 EXAMENS BIOLOGIQUES COMPTE D ADDIS ou HLM : Ce test consiste en une numération des hématies et des leucocytes sur des urines recueillies pendant un temps délimité et bien défini : on calcule ainsi le débit urinaire par minute des hématies et des leucocytes. Ce test permet : -D apprécier la gravité d une maladie rénale glomérulaire -De suspecter une tuberculose urinaire, une néphropathie interstitielle ou une maladie des voies excrétrices urinaires. COPROCULTURE: Examen à prescrire en cas de diarrhées aigue (émission d au moins 3 selles liquides et/ou molles par jour depuis moins de 14 jours) après avoir éliminer une cause non infectieuse. Il n est pas indiqué en cas de diarrhée chronique. DISPOSITIF INTRAVASCULAIRE Avant l ablation du matériel en place réaliser des hémocultures qualitatives appariées avec différentiel délais de positivité (voir hémoculture) L examen systématique de tout cathéter retiré n est pas justifié en dehors de la présence de signes locaux et/ou généraux. Centre Hospitalier Montceau les Mines Matériel Méthode de prélèvement de recueil Flacon stérile de 500ml ( bouchon rouge) Flacon stérile à coproculture à bouchon rouge Poudrier stérile à bouchon rouge Tube eswab -Le malade vide sa vessie -Noter l heure -Boire 2 verres d eau -Rester allongé durant 3 heures -Recueillir toutes les urines après toilette du méat, dans un flacon propre de 500ml -Noter l heure -Mettre les selles dans un flacon stérile. Ecouvillonage rectal possible chez le nourrisson et le petit enfant. Cet examen comprend la recherche systématique : Salmonelle, shigelle, campylobacter, levures si visible à l examen, yersinia si selles liquides et sanglantes. Cathéter : Après ablation,couper avec des ciseaux stériles et placer -Pour les cathéters courts la totalité de la partie insérée -Pour les cathéters long 5 cm de l extrémité distale. Chambre implantable : -Ecouvillonnage de la chambre externe de la chambre -Prélèvement de la loge par écouvillonnage ou recueil des sérosités -Rinçage de la partie fermée de la chambre -Prélèvement des cathéters Dans les 2 cas il est indispensable de réaliser des hémocultures en périphérie pour rechercher une bactériémie. Conditions Renseignements Apporter la totalité du flacon Noter l heure de début et de fin -Date de début de la diarrhée -Symptômes digestifs : douleurs abdominales, vomissements, distension abdominale -Suspicion de toxi-infection alimentaire isolée ou collective -Immunodépression -Age -Fièvre -Retour d un pays étranger Antibiothérapie Circonstances qui ont motivé l examen : hyperthermie, frissons, notions de choc septique, signe locaux d infection. Conservation Délais de résultats Maximum 2h à +4 C DR : Le jour même *20-25 C Maximum une nuit à +4 C pour la bactériologie *72h à +4 C pour la virologie *si >72h congeler les selles DR : 2 à 5 jours Transport rapide DR : 48 à 72h Page 31

32 ECBU standard : Faire le tri des urines à la bandelette (leucocyturie-nitrites-sang) et de transmettre au laboratoire que les urines positives sauf si le patient est symptomatique ou immunodéprimé. Résultats à inscrire sur le bon de demande. ECBU chez le nourrisson : ECBU chez le patient sondé : ECBU circonstances particulières : Centre Hospitalier Montceau les Mines Le matin (premières urines), sur justification médicale, -après lavage hygiénique des mains et toilette soigneuse,au Monovette savon ou antiseptique, de la région vulvaire chez la femme et du (annexe 2 méat chez l homme, p.69) ou pot -rinçage à l eau, stérile si -élimination du premier jet, volume <9ml -recueil des urines du milieu du jet dans un flacon stérile, -remplissage de la Monovette, -transport au laboratoire Ou au cours de la journée, sur justification médicale, 4 heures au moins après la miction précédente Pot stérile à bouchon rouge Monovette Tube spécial pour Chlamydia et Mycoplasme Poudrier stérile à bouchon rouge Monovette Utilisation d un collecteur spécifique posé après désinfection soigneuse Ne doit pas rester en place plus de 30 min (remettre un collecteur neuf) Urines transvasées dans flacon stérile. Si difficultés : cathétérisme ou ponction suspubienne Après le clampage en aval, ponctionner avec la monovette directement le site de prélèvement préalablement désinfecté puis aspirer au moins 9ml d urines, agiter la monovette. Si changement de sonde : réaliser le prélèvement sur la nouvelle sonde. -Urines du premier jet (après éventuel massage prostatique) en cas de suspicion d infection urétrale ou prostatique, pour la recherche de Mycoplasma ou Chlamydia Trachomatis par biologie moléculaire. -Prélèvement par ponction suspubienne Après désinfection soigneuse des téguments ponctionner directement l urine dans la vessie à l aide d une seringue montée. -Par cathétérisme urétéral Obtention d urine provenant séparément du rein droit ou gauche -Uréostomie Idem nourrisson après nettoyage -Patient incontinent ou handicapé Eviter sondage urinaire aller/retour (risque de prostatite chez l homme) faire un prélèvement par un recueil classique après toilette soigneuse. -Heure prélèvement -Antécédents urologiques (malformations, lithiase) ou neurologiques -Maladie contaminantes : diabète, immunodépression. -Signes cliniques associés : fièvre, brûlures, pollakiurie, trouble digestifs, (nourrisson et jeune enfant), dysurie, globe vésical, douleurs lombaires, -Notion d antibiothérapie récente ou en cours -Sonde à demeure : * Date de pose de la sonde * Signes cliniques Tout patient porteur d une sonde a demeure voit ses urines colonisées au bout de 3 jours si les règles du système clos ne sont pas respectées l ECBU ne sera réalisée que si le patient est symptomatique Monovette : 24 H à température ambiante Urines dans flacon stérile : * Inférieure à 2 heures à température ambiante * Jusqu à 12 heures à + 4 C. DR : 48à72h * Inférieure à 2 heure à température ambiante * Jusqu à 12 heures à + 4 C. DR : 48à72h DR : 48à72h DR : 48à72h Page 32

33 ECBU avec recherche de mycobactéries : EXAMEN BACTERIOLOGIQUE DU PIED DIABETIQUE INFECTE: Infection SI présence de deux des signes cliniques suivant : - Augmentation du volume, induration, érythème périlésionnel, sensibilité locale ou douleur, chaleur locale, présence de pus. Les plaies sans signes cliniques locaux ou généraux d infection ne doivent pas être prélevées. EXAMEN BACTERIOLOGIQUE DES PUS Centre Hospitalier Montceau les Mines Flacon stérile 3 jours de suite recueillir la totalité de la première miction du matin après restriction hydrique depuis la veille. Infection des parties molles : Tube eswabs -Débridement de la plaie avec un scalpel ou une curette stérile. -Nettoyage avec gaze imbibée de sérum physiologique stérile Ecouvillonnage superficiel de la plaie :( pas recommandé sauf dans les cas où les techniques ci-dessous ne sont pas applicables) : écouvillon stérile passé sur une surface de 1cm² de plaies dans un mouvement de zigzag combiné à un mouvement de rotation puis placé dans un milieu de transport. Curetage-écouvillonnage profond de l ulcère : prélever du tissu par grattage de la base de l ulcère avec une curette stérile. Les produits de grattage sont à récupérés par écouvillonnage et placés dans un milieu de transport Biopsie tissulaire : 2à3 fragments de tissus sont à prélever à partir de zones différentes et placés dans un tube stérile additionné de quelques gouttes de sérum physiologique stérile. Flacon stérile Aspiration à l aiguille fine : passer par une zone saine à bouchon préalablement désinfectée, si aucun liquide n est aspiré injecter rouge 1à2 ml de sérum physiologique et réaspirer à l aide d une seconde aiguille. La seringue type gaz du sang est adressée rapidement au laboratoire sans l aiguille, purgée d air, bouchée hermétiquement. En cas d ostéite : biopsie osseuse dans un centre spécialisé. Hémocultures : à réaliser en cas de sepsie Seringue stérile Tube eswab Peau : Désinfecter avec alcool à 70 puis avec solution de povidone iodée (Bétadine), laisser sécher 1 min, rincer au sérum physiologique stérile Muqueuse buccale : isoler le site avec des rouleaux de coton, sécher, appliquer une solution de povidone iodée pendant une minute Le recueil : par ponction à l aide d une aiguille montée sur seringue, en fonction du volume le prélèvement est transporté dans une seringue bouchée sans aiguille après avoir purgé l air ou injecté dans un tube stérile ou mieux dans un milieu de transport. *modalités de prélèvement * contexte clinique *diabète *Contexte clinique *Localisation anatomique *Infection du site opératoire Voir livret Biomnis Transport rapide à température ambiante DR : 2 à 7 jours Transport rapide au laboratoire DR : 2 à 7 jours Page 33

34 HEMOCULTURE Mise en évidence de micro-organisme dans le sang d un patient suspect de SRIS syndrome de réponse inflammatoire systémique (frissons, température supérieure à 38,5 C, plus rarement hypothermie ) ou d'endocardite. -Prélever aseptiquement environ 10ml de sang dans 2 flacons d hémoculture, l un aérobie, l autre anaérobie -Le nombre optimum d hémocultures conseillées (validées par l expérience) est de trois séries espacées dans le temps ou 6 flacons prélevés à la même heure en un seul prélèvement ( bien numéroter les flacons : aérobie 1, anaérobie 1, aérobie 2, anaérobie 2.) Voir annexe 3 -Flacon d hémocultur e aérobie et anaérobie BACTEC PLUS+ AEROBIC BACTEC LYTIC/10 Anaerobic -Flacon pédiatriques (nourrissons et jeunes) BACTEC PEDS PLUS Centre Hospitalier Montceau les Mines Se reporter au protocole validé par le CLIN. Prélever d abord le flacon aérobie puis l anaérobie HémocultureS différentielles chez patients porteurs d un DIV : Pour vérifier l absence d infection du DIV prélever 2 flacons (aérobie+anaérobie) sur le DIV et 2 flacons (aérobie+anaérobie) en périphérie. Ces 4 flacons doivent : -Etre identifiés -Etre prélevés à la même heure -Contenir la même quantité de sang -Etre amenés immédiatement au laboratoire Patient suspect d endocardite ou de brucellose : Lors de l'endocardite la bactériémie est constante : réalisation des hémocultures quelle que soit la température du patient Prélever un nombre plus élevé d'hémocultures (6 séries espacées dans le temps ou plus ) Sérologie pour Coxiella burnetii, bartonella spp, Chlamydia spp, Aspergillus spp,candida spp, A signaler sur le bon de demande, l incubation des hémocultures sera prolongé de 4 semaines. En cas d endocardite des CMI complèteront l antibiogramme. Patient sous antibiothérapie avec suspicion d endocardite : Faire des hémocultures, arrêt des antibiotiques, refaire des hémocultures 2-4 jours après *tableau clinique *traitement antibiotique *suspicion d endocardite *patient porteur de DIV interprétation : suspicion d infection du DIV si temps de pousse des hémocultures prélevées sur DIV <2h au temps de pousse des hémocultures prélevées en périphérie DIV infecté. Transport rapide au laboratoire Les résultats positifs sont systématiqueme nt téléphonés dans le service. DR : 7 jours Page 34