SURVEILLANCE BIOLOGIQUE EN MILIEU INDUSTRIEL : cas du benzène et des HAP. méthode analytique d évaluation

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1 SURVEILLANCE BIOLOGIQUE EN MILIEU INDUSTRIEL : cas du benzène et des HAP. méthode analytique d évaluation MANDA, P. DIAKITE, A.; KOUADIO, J.H Laboratoire de Toxicologie et Hygiène agro-industrielle ; UFR des Sciences Pharmaceutiques et Biologiques- Université de COCODY- ABIDJAN BPV 34 Abidjan Côte d Ivoire mandapierre@yahoo.fr

2 Plan de la présentation Généralités sur la surveillance biologique Définition Indicateurs biologiques d exposition Indicateurs biologiques d effets Critères de sélection des tests biologiques applications pratiques de la surveillance biologiques Valeurs limites de reference Quelques toxiques industriels Le benzène Les HAP

3 1- Définition Généralités( 1) C est la mesure et l évaluation des agents chimiques ou de leurs métabolites; dans les tissus, les secrétions les excrétions ou l air expiré ou toute combinaison de ces méthodes, afin d estimer l exposition des personnes et des risques pour leur santé par rapport à une reference appropriée.

4 Généralités (2) 2. Indicateurs biologiques d exposition La surveillance biologique d'exposition à des produits chimiques fait appel à des indicateurs de dose interne qui mesurent les paramètres suivants : la quantité de produits chimiques présents la quantité d un ou plusieurs de ses produits de transformation ou métabolites. La plupart des biomarqueurs renseignent sur une exposition récente.

5 Généralités (2) 3-Indicateurs biologiques d effets Ils traduisent soit la réponse de l'organisme (mécanisme d'adaptation ou de compensation) des altérations de ses mécanismes de défense au niveau cellulaire ou moléculaire Exemples 1-Les adduits de l hg ( amines aromatiques, HAP, nitrosamines etc.. ) 2-Le dosage de l activité cholinestérasique pour mesurer l exposition aux pesticides organophosphorés.

6 4-critères de sélections des tests biologiques. -la connaissance du métabolisme de la substance dans l organisme humain ( toxicocinetique) - la connaissance des modifications survenues dans l organe cible ( toxicodynamie) - l existence d indicateurs - l existence de méthodes analytiques précises - échantillons biologiques faciles à prélever pour mesurer les indicateurs - existence d une relation dose effet et dose réponse et connaissance de ces relations

7 5- Les applications pratiques de la surveillance biologique - le moment du prélèvement le choix du moment ou l on effectue le prélèvement dépend des caractéristiques cinétiques du produit - Les facteurs d interférence le régime alimentaire, le sexe l age, le mode de vie ( tabagisme ;alcoolisme- l exposition simultanée à plusieurs substances toxiques sur les lieux de travail

8 Les valeurs limites de référence Ce sont des valeurs indicatives qui varie selon les pays En France: BIOTOX elaboré par l'inrs (Institut National de Recherche et de Sécurité), consultable sur Internet ( Aux États-Unis, BEI (Biological Exposure Indice). Les valeurs de ces BEI sont proposées par les hygiénistes de l'acgih (American Conference of Governmental Industrial Hygienists). En Allemagne Le BAT (Biologischer Arbeitsstoff Toleranzwert) est la valeur biologique de référence par les hygiénistes allemands de la DFG Au Canada,l'IRSST (Institut de Recherche en Santé et en Sécurité du Travail) au Québec a élaboré des IBE (Indices Biologiques d'exposition)

9 II - QUELQUES TOXIQUES INDUSTRIELS : LE BENZÈNE Les professions exposées Industrie pétrolière, chimique et pétrochimique : Industrie de la parfumerie : utilisation comme solvant d'extraction Carburants automobiles : Laboratoires de la recherche et de l'industrie : utilisation de benzène pur

10 1- marqueurs biologiques de surveillance benzène H OH Acide phenyl- mercapturique O benzène OH H Benzène glycol HO 2 C CO 2 H Acide tt muconique OH phénol Figure 1: métabolisme du benzène

11 Indicateurs biologiques - Moment du prélèvement Le benzène sanguin : le prélèvement immédiatement après l'exposition l'acide trans, trans- muconique (t,t-ma) urinaires bon indicateur biologique d'exposition, prélèvement en fin de poste de travail, l'acide S-phénylmercapturique (S-PMA) urinaires prélèvement en fin de poste Le dosage du benzène dans les urines en fin de poste a été proposé, il est spécifique. (voire même < 0,01 ppm). Le dosage des phénols urinaires totaux, immédiatement après la fin du poste de travail

12 dosage du benzène atmosphérique Mode de prélèvement : prélèvement atmosphérique échantillonnage passif : GABIE ;PERKIN ELMER ANALYSE ( norme NF X ) Extraction : desorption des vapeurs de prélèvement dans 5 ml de sulfure de carbone. - conditions chromatographiques : appareillage : chromatographie en phase gazeuse colonne : PEG 20 M, 4 m four 80 c injecteur : 220 c détecteur à ionisation de flamme séparation par colonne capillaires : - - Etalon interne : toluène limite de détection : 0,02ppm

13 dosage de l acide trans trans urinaire -Mode de prélèvement : fin de poste - Dans des flacons en polyethylène - Un dispositif de recueil, URIPREL, Constitué d'une seringue et d'une cartouche, analyse Extraction des échantillons par des colonnes échangeuses d anions types SAX L extraction est suivi d un dosage CLPH avec un détecteur UV Conditions chromatographiques : Volume injecté : 20 ul Durée d analyse :30 mn Colonne analytique : ODS C 18 Détection : en UV 259 nm Étalon externe

14 Hydrocarbures aromatiques polycycliques Surveillance biologique de l exposition Indicateurs d exposition externe le pyrène: présence constante dans la majorité des mélanges : non cancérigène le B(a) pyrène: B(a)P indicateur de cancerognicité - indicateur biologiques d exposition - 1-OH-pyrène: - 3-OH-BaP

15 SURVEILLANCE BIOLOGIQUE Spécimen biologique urines correspondant à toutes les mictions du quart de travail(8 heures en général) urines de 24 heures Détermination du bruit de fond premières urines après 2 jours de non exposition (samedi et dimanche) Analyse chromatogrqphique: Extraction sur colonne SEP-PAK Quantification par HPLC muni d un détecteur UV

16 conclusion