Hépatites virales. Inflammation du foie à cause d une infection des hépatocytes par un virus. qui provoque
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- Grégoire Carrière
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1 Hépatites virales Inflammation du foie à cause d une infection des hépatocytes par un virus qui provoque des signes de dysfonctionnement du foie qui dépendent de la quantité d hépatocytes détruits (aucun symptôme encéphalopathie et mort).
2 Hépatites virales Transmission fécale-orale: problème grave dans les pays sous-développés infections aiguës Virus de hépatite A (VHA) Virus de hépatite B (VHB) Virus de hépatite C (VHC) Virus de hépatite D (VHD) Virus de hépatite E (VHE) Infection chroniques, problèmes graves aussi dans les pays développés Voir cours spécifiques sur ces virus Virus d Ebstein-Barr (EBV mononucléose infectieuse) Cytomégalovirus (CMV) Herpes Simplex Virus (HSV; infections connatales) Virus de la varicelle-zona Virus ourlien ( Oreillons) Parvovirus B19 Adénovirus (immune supprimés) Virus de la fièvre jaune Virus de l encéphalite à tiques)
3 L hépatite B - aiguë (30 % symptomatique, <180 jours d incubation) symptômes non-spécifiques: Perte d appétit, fièvre, fatigue, nausées, vomissements, prurit symptômes spécifiques: Ictère, urine foncée, selles décolorées - fulminante (0.1 % (90% morts en 4 semaines si non traités immédiatement) Signes neurologiques d'insuffisance hépatique (encéphalopathie hépatique), coma - chronique (5 10 % (adulte), % (nouveau-nés)) Début : souvent sans symptôme Après des années d infection: fibrose, cirrhose, cancer du foie (20 30 ans)
4 % de la population Virus de l hépatite B (prévalence du virus) (Zuckerman, Medical Virology, 1996, OMS 2010)
5 % de la population Virus de l hépatite B (prévalence des anticorps) (Zuckerman, Medical Virology, 1996, OMS 2010)
6 % de la population Virus de l hépatite B (prévalence des anticorps) (Zuckerman, Medical Virology, 1996, OMS 2010)
7 Virus de l hépatite B (prévalence des anticorps) (Zuckerman, Medical Virology, 1996, OMS 2010) % de la population OMS : 2 ème cause de développement de cancer au monde (après tabagisme)
8 Virus de l hépatite B ADN Lipides : sensible aux détergents
9 Transmission parentérale sexuelle Pendant l accouchement Si la charge virale est élevée infection par contamination des yeux
10 vers la bile Histologie du foie canalicule biliaire de la veine porte de l artère hépatique sinusoïde fenestrations Ø <100 nm vers la veine centrale Espace de Disse cellule de Kupffer cellule épithéliale hépatocytes
11 Schéma du cycle de vie du VHB noyeau ADN ADN db plusieurs ARN (+) pdb Multiplication de l information génétique du virus ARN prégénomique protéines assemblage de la capside assemblage ADN pdb ADN sb du virus cytoplasme
12 Maturation du Membrane plasmique génome dépend de la capside Cycle viral du VHB prégolgi sécrétion dépend sécrétion de la maturation du génome Capside avec ARN Synthèse de pol, protéines de la capside cytoplasme karyoplasme ARN prégenomic pa ADN sb 1. Tous les VHB contiennent une capside avec une molécule d ADN pa pdb chaque particule est infectieuse ADNccc transcription ADN pdb Liberation du génome enveloppement 2. Le VHB sort de la cellule par exocytose qui n est pas mortelle la destruction des hépatocytes ne dépend pas de l infection de la cellule Complexe formation pol ADN Pore nucléaire 3. L ADNccc est très stable même si le cycle viral est interrompu (inhibiteurs) infection Endocytose sans acidification nuclear membrane? VHB
13 Organisation des cadres de lecture du VHB
14 Organisation des cadres de lecture du VHB Les génomes linéaires ont toujours un cadre de lecture qui est coupé l intégration dans la chromatine de l hôte ne permet pas la synthèse de nouvaux virus!!! ( mais peut causer le cancer ) de Kann, 2007
15 ARNm du VHB from Kann, 2007
16 ARNm de la protéine X P X X essentiel pour l infection activateur de plusieurs kinases de la cellule qui sont essentielles pour la réplication du virus
17 N terminus Protéines d enveloppe C terminus S shbs pres2 pres1 pres2 S S mhbs lhbs
18 ARN plus longs que le génome Pol ARN prégénomique Core 240 par capside P c/e ARN de la protéine «e» précore core Clivages pendant la sécrétion de la protéine Protéine «e» (AgHBe) «bluffe» le système immunitaire mais «e» n est pas essentielle est exprimée sous contrôle du même promoteur que la capside et pol une charge virale forte est corrélée avec une concentration forte de protéine «e» (sauf s il y a une mutation «stop» dans précore
19 log concentration Le diagnostic de l hépatite B - infection aiguë - Délai dépendant de la quantité du virus infectant ADN viral Maladie Transaminases (GGT ) anti HBc IgM IgG anti HBc restent à vie anti HBc totales (IgM + IgG) temps (mois)
20 Le diagnostic de l hépatite B log concentration - infection aiguë - ADN viral Maladie Transaminases (GGT ) anti HBc IgM anti HBc totales AgHBe anti HBe temps (mois) La concentration AgHBe est corrélée à la charge virale (exception mt) mais 1. la détection est moins sensible et 2. anti HBe peut être présent malgré de la persistance de l ADN viral
21 Le diagnostic de l hépatite B log concentration - infection aiguë - ADN viral Maladie Transaminases (GGT ) AgHBs anti HBc IgM anti HBc totales anti HBs AgHBe anti HBe temps (mois) La concentration en AgHBs est corrélée faiblement avec la charge virale Anti HBs baisse quelquefois rapidement: 7 ans après 50% des patient n ont pas un anti HBs détectable!
22 Le diagnostic de l hépatite B log concentration - infection aiguë - ADN viral Maladie Transaminases (GGT ) AgHBs anti HBc IgM anti HBc totales anti HBs AgHBe anti HBe temps (mois) Pourquoi peut-on détecter l AgHBs?
23 log concentration Antigènes et anticorps dans les infections aiguës sans symptôme Aucune/très peu de maladie Transaminases ( ) (GGT ) ADN viral AgHBs anti HBc totales anti HBs anti HBc IgM temps (mois)
24 Antigènes et anticorps dans les infections log concentration chroniques Aucune/très peu de maladie Transaminases ( ) aucune maladie quelques symptômes possibles en «poussée» Transaminases normales, ( ) ou HBV DNA HBsAg anti HBc totales HBeAg anti HBc IgM temps (mois - ans) phase aiguë phase chronique Définition: la détection du virus pour plus de 6 mois prouve une infection chronique Si la charge virale n est pas réduite de moitié pendant 6 semaines une infection chronique est très probable
25 log concentration Antigènes et anticorps dans les infections chroniques - séroconversion anti HBc totales anti HBe anti HBc IgM AgHBs Mois ou années après infection ADN viral temps
26 Exemples Anti HBc +, anti HBs -, AgHBs (ou PCR) - : hépatite guérie (soit avant l apparition d anti HBs soit depuis longtemps) Anti HBc +, anti HBs -, AgHBs (ou PCR) + : Anti HBc -, anti HBs + : Anti HBc +, anti HBs -, AgHBs (ou PCR) - ; Anti HBe + : Anti HBc -, AgHBs (+), PCR (+) : hépatite B vaccination (protection si > 10 UI/ml) hépatite guérie (apparition d anti HBs) hépatite B occulte (extrêmement rare) La première diagnose d une hépatite B a besoin une confirmation du premier teste
27 Quel mécanisme cause la maladie? noyau ADN ADN db plusieurs ARN (+) pdb ARN prégénomique Le virus n interfère pas avec la vie de la cellule; il n y a pas de lyse pour faire sortir les nouveaux virus protéines assemblage de la capside assemblage ADN pdb ADN sb du virus cytoplasme
28 Facteurs qui sont liés avec un développement chronique 5 10 % chez des adultes % chez des nouveaux-nés % chez des adultes avec une forte suppression immunitaire (par ex. transplantation de moelle) Des patients avec une charge virale très élevés n ont pas des symptômes! Michael Kann, lecture Santiago de Chile, 2010
29 Quel mécanisme cause la maladie? noyau ADN ADN db plusieurs ARN (+) pdb ARN prégénomique Le virus n interfère pas avec la vie de la cellule; il n y a pas de lyse pour faire sortir les nouveaux virus protéines assemblage de la capside Des épitopes de la protéine core sont exposés à la surface des hépatocytes, qui sont détectés par le système immunitaire (cellules T cytotoxiques) assemblage ADN pdb ADN sb du virus cytoplasme
30 Paramètres importants pour le diagnostic et le traitement de l hépatite B Paramètres viraux paramètres du foie antigènes anticorps inflammation fonctionnement changements morphologiques AgHBs AgHBe anti HBs anti HBe transaminases : ALT, AST, ggt phosphatase alcaline taux de prothrombine Fibroscan (test d élasticité) biopsie génome (IU) anti HBc Autres facteurs de prendre en compte: coinfections avec VHD, VHC et VIH; autres maladies du foie ou auto immunes
31 Fibrose au cours d une hépatite chronique Histologie du foie Fibroblastes en remplacement des hépatocytes Hépatocytes
32 Cirrhose au cours d une hépatite chronique fibroblastes inflammation le tissue fibrotique est moins élastique canal biliaire nodules de régénération
33 Paramètres importants pour le diagnostic et le traitement de l hépatite B Paramètres viraux paramètres du foie antigènes anticorps inflammation fonctionnement changements morphologiques AgHBs AgHBe anti HBs anti HBe transaminases : ALT, AST, ggt phosphatase alcaline taux de prothrombine Fibroscan (test d élasticité) biopsie génome (IU) anti HBc La présence d anti Pol et d anti X est irrégulière Autres facteurs à prendre en compte: coinfections avec VHD, VHC et VIH; autres maladies du foie ou auto immunes
34 Obstacle à la perfusion du foie liver foie portal veine porte vain umbilical veine ombilicale vain pancreas pancréas inferior veine mesenteric vein superior mesenteric vein spleen rein mésentérique inférieure veine mésentérique supérieure
35 Ascite massive au cours d une hépatite chonique
36 Voies du développement des hépatites B réplication limitée ou peu de virus incorporés peu de symptômes, transaminases ( ) Charge virale <10 6 IU/ml immunité réplication limitée chronique transaminases ( ) ou normales réactivation infection hépatite aiguë, transaminases bilirubine virémie persistante, non-symptomatique (transaminases ( ) ou normales) ou hépatite chronique (transaminases ), fibrose, cirrhose, cancer du foie infection chronique, réplication forte transaminases ( ) ou normales fréquence frequency: : low basse moderate moyenne high haute réplication forte Charge virale > IU/ml Une transmission par contact muqueuse est peu probable si la charge virale < 10 6
37 Prévention Vaccination (3 x; 0, 1, 6 mois) Effets secondaires: locaux, symptômes d une grippe légère (le peur d une maladie démyélinisante est un phénomène exclusivement français!!!) anciennement : particules purifiés après inactivation du virus aujourd hui : expression dans la levure Échec de vaccination : - âge - femme - obésité - patients en défaillance rénale chronique - suppression immunitaire (VIH!) - tabagisme, HLA DR3 ou 7+ il faut contrôler le succès!!! parentéral sexuel pendant accouchement Césarienne, séro-vaccination du nouveau-né passive (anti HBs) et active (HBsAg) Préservatifs Prévention des accidents Éviter le contact avec le sang Eventuellement: lunettes de protection
38 Cycle de vie du VHB noyau ADN pdb ADN pdb ADN ccc ARNms sécretion ADN pdb assemblage des virion Les hépatocytes infectés sont détectés par le système immunitaire PEG Ifn a traductions des protéines - de la surface cible thérapeutique (inhibiteurs nucléosidiques) ADN pdb synthèse brin (+) ADN sb rétrotranscription ARN pg assemblage (ARN + capside + pol) cytoplasme ARNm prégénomique (pg) traduction des protéines - de la capside - polymérase
39 Cycle de vie du VHB noyau ADN pdb ADN pdb ADN ccc ARNms sécretion ADN pdb assemblage des virions ADN pdb synthèse brin (+) traduction des protéines - de la Lamivudine surface Tenofovir Adefovir Telbivudine ADN sb rétrotranscription Entecavir ARN pg assemblage (ARN + capside + pol) ARNm prégénomique (pg) traduction des protéines - de la capside - polymérase cytoplasme
40 Traitement des formes différents de l hépatite B - aiguë pas de traitement spécifique - fulminante inhibiteurs de la polymérase (pas fondé sur les faits!) transplantation - chronique OUI (pour réduire les complications)
41 Buts du traitements de l hépatite B chronique réduction durable de la charge virale rémission biochimique séroconversion (si AgHBe +) amélioration histologique réduction des complications (fibrose, cirrhose, cancer) définition de la réponse - PEG Ifn : primaire 1log IU/ml pendant 3 mois charge virale < 2000 IU/ml après 24 semaines séroconversion (si AgHBe +) - inhibiteurs nucléosidiques : primaire 1log IU/ml pendant 3 mois charge virale < 15 IU/ml après 24 semaines facteurs prédictifs tous les paramètres qui indiquent une activité du système immunitaire définition : - charge virale faible - transaminases élevée (3 x du norme) - fibrose
42 Choix du traitement PEG Ifn a : - AgHBe + avec des chances de séroconversion... ALT > 3 x du norme et < 2 x 10 6 IU/ml avantages : durée limitée, pas de résistance, plus de séroconversions désavantages : tolérance limitée, injection, effet antiviral limité, effets secondaires contre-indication : cirrhose décompensée Inhibiteurs nucléosidiques : - tous les patients sans résistance contre l inhibiteur mais meilleures chances chez des patients avec une réponse immunitaire... ALT > 3 x la norme et < 2 x 10 6 IU/ml avantages : bon effet sur la charge virale, bonne tolérance, application orale désavantages : résistances, durée non prédictible, moins de séroconversion
43 Choix du traitement...et les patients avec cirrhose décompensée avec un échec du traitement par inhibiteurs nucléosidiques??? Transplantation du foie!!!
44 Génotypes de VHB (A H) Un génotype diffère d un autre par 9 % de son génome
45 Impact du génotype La charge virale est associée au génotype : B/C < D/E < A/G La réponse au traitement par l interféron est associée : D > C > B/A Le traitement est indépendant du génotype La détermination du génotype n est pas réalisée en diagnostic de routine!
46 Distribution géographique du VHD Taiwan Pacific Islands prévalence élevée intermédiaire basse très basse Pas de donnée 3 génotypes (I, II, III) problèmes de détection par PCR ; ~ infectés ;
47 Les protéines d enveloppe sont des protéines du VHB! Charge virale peut être extrêmement élevée : génomes/ml Virus de l hépatite D (VHD) génome ARN sb circulaire (1,7 kb) nm 2 protéines qui diffèrent juste par 13 aa (60 copies)
48 L hépatite D Il y a deux possibilités d infection: Coinfection ou Surinfection
49 Le développement de la maladie dépend de l infection Hépatites aiguës VHB/VHD coinfection Hépatites HDV/HBV chroniques VHD surinfection des patients VHB infectés Hépatites fulminantes Pathogenèse : réponse immunitaire mort
50 Semaines après infection Sérologie des coinfections VHD VHB ADN anti HBc IgG AgHBs AgHD anti HBc IgM anti HD anti HBs
51 Sérologie des surinfections VHD VHB ADN AgHBs anti HD AgHD années semaines après la surinfection
52 L hépatite C
53 L hépatite C - aiguë : presque jamais vue en pratique (20 % symptomatique, jours d incubation) symptômes non-spécifiques: Perte d appétit, fièvre, fatigue, nausées, vomissements, prurit symptômes spécifiques: Ictère, urine foncé, selle décolorée - chronique % Majoritairement sans symptôme (60 80%) 60 70% transaminases Après des années d infection: fibrose, cirrhose (5 20% des infectés!), cancer du foie (20 30 ans) notamment sur la base d une cirrhose facteur majeur pour la transplantation du foie en Europe Alcool contribue fortement au développement d une cirrhose - fulminante : très rare, chez des patients avec une hépatite B ou après surinfection par le virus de l hépatite A
54 Histoire naturelle de l hépatite C infection (80% asymptomatique) Hépatite chronique (50-85%) Guérison (15-50%) Cirrhose (15-20%) Insuffisance hépatocellulaire Carcinome hépatocellulaire (1-5%)
55 Histoire naturelle de l hépatite C carcinome hépatocellulaire cirrhose décompensée cirrhose compensée hépatite chronique active ans entre exposition et diagnose Zein, CMR, 2000
56 Prévalence du VHC Total : millions Source : OMS
57 Virus de l hépatite C 50 nm
58 Transmission parentérale sexuelle Pendant l accouchement Raison majeure??? (publications : 0 15%) risque : 7 8%
59 Modes de transmission inconnu Toxicomanie (intraveineuse ) autres (hémodialyse, périnatal ) Transfusion (avec l introduction des tests anti VHC) sexuel??? Sources_of_Infection_for_Persons_with_Hepatitis_C_(CDC)_US.png
60 Schéma du cycle de vie du VHC noyau ARN (+) ARN (+) Traduction d une seule polyprotéine Polymérase (NS5B) Clivage en protéines différentes ARN (-) Assemblage cytoplasme
61 Organisation génomique du virus de l hépatite C ARN (+) 9600 b polyprotéine (3011 aa) NTR* protéines protéines non structurales 3 NTR* structurales core glycoprotéines auto- protéase/ altération phosphoprotéine ARN polymérase d enveloppe protéase hélicase des (résistance à ARN dépendante membranes l interféron) canal ionique cofacteur protéase * régions non traduites
62 Clivage de la polyprotéine du VHC signal peptide peptidase signal peptidase Protéines cellulaires = mauvaise cible thérapeutique core glycoprotéines auto- protéase/ altération phosphoprotéine ARN polymérase d enveloppe protéase hélicase des (résistance à ARN dépendante membranes l interféron) canal ionique cofacteur protéase * régions non traduites
63 Clivage de la polyprotéine du VHC signal peptide peptidase signal peptidase Protéines virales = cible thérapeutique NS2/NS3 NS3/NS4A NS5B core glycoprotéines auto- protéase/ altération phosphoprotéine ARN polymérase d enveloppe protéase hélicase des (résistance à ARN dépendante membranes l interféron) canal ionique cofacteur protéase * régions non traduites
64 Le diagnostic de l hépatite C Détection des anticorps : «screening» des personnes qui sont infectées ou ont une hépatite C guérie Techniques : ELISA (ou techniques similaires) Détection du génome : confirmation et suivi d infection Techniques : RT-PCR RT-PCR en temps réel TMA [transcription-mediated amplification branched DNA hybridization assay)
65 Le diagnostic de l hépatite C Détection des anticorps : «screening» ELISA (ou techniques similaires) génération proteine(s) sensitivité positif après l infection 1 ère NS % 16 semaines 2 ème core, NS3, NS4 95% 10 semaines 3 ème core, NS3, NS4, NS5 99% 10 semaines Désavantages: tests souvent négatifs chez des patients en dialyse ou immunodéprimés spécificité limitée La première diagnose d une hépatite C a besoin une confirmation du premier teste
66 Le diagnostic de l hépatite C Détection du génome : confirmation et suivi d infection Avantages: Quantitative: Sensibilité : (10 600) IU/ml Détection du virus tôt (15 20 j après l infection) Désavantages: coût risque de contamination d échantillon 10 6 IU/ml est une charge virale forte Il n y a pas une relation significative entre la charge virale et les transaminases Il n y a pas une corrélation forte entre la charge virale et le caractère infectieux
67 Génotypes du VHC Génotypes (1-6) varient par 30-35% des nucléotides Sous-types (a, b) varient par 20-25% des nucléotides 1a génotype sous-type
68 Répartition des génotypes du VHC Génotype 3 est fréquent chez des toxicomanes
69 Chronicité des infections avec des génotypes différents 1a 50% 1b 92% 2 50% 3 50%
70 Historique du traitement du VHC 1991 Interféron a 1998 Interféron a + ribavirine 2001 Interféron a pégylé + ribavirine 2002 Interféron a 2a pégylé + ribavirine depuis 2011 Inhibiteurs de la protéase NS3/4A (Telapravir, Boceprevir + Ifn + riba) à partir de 2014 Sofosbuvir (NS5B) + ribavirine (2,3) ou + ribavirine + Ifn pégylé (1A) Simeprevir (NS3) + ribavirine + Ifn pégylé Futur: ~ 90 médicaments en phase clinique en ciblant différentes étapes du cycle viral (entrée, réplication )
71 «Guérison» Comparison: Sustained Virological Response Rates in Treatement-Naive Patients Sustained Virological Response Traitement (pas de génome détectable 6 mois après la fin du traitement) Durée (semaine) Total Génotype 1 Génotypes 2 or 3 IFN % 2-5% 15-20% IFN % 9% 30% IFN + RBV 2, % 20% 66% PEG-IFN a-2b+rbv % 42% 82% PEG-IFN a-2b+rbv % 48% 88% PEG-IFN a-2a+rbv % 46% 76% PEG-IFN a-2a+rbv 7 inhibiteurs de NS3/4a % ~95% 51% ~95% 78% IFN=interferon alfa-2b monotherapy twice weekly; IFN+RBV=interferon alfa-2b twice weekly plus ribavirin mg daily; PEG- IFN+RBV=peginterferon alfa-2b (Peg-Intron) or alfa-2a (Pegasys) once weekly plus ribavirin 800 mg daily to mg daily. 1 Poynard, T. et al. Hepatology 1996, 24:778 2 McHutchinson, J. et al. New England Journal of Medicine 1998, 339: Poynard, T. et al. Lancet 1998, 352: Manns, M. et al. Lancet 2001, 120:958 5 Manns, M. et al. Lancet 2001, 120:958; with weight-based ribavirin dosing at >10.6 mg/kg ribavirin by secondary analysis of the study 6 Fried, M. et al. New England Journal of Medicine 2002, 347:975 7 Hadziyannis, S. et al. Journal of Hepatology 2002, suppl. 1:3
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