DÉPISTAGE PRÉNATAL NON INVASIF (DPNI) DE LA TRISOMIE 21 SUR PLASMA MATERNEL
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- Sévérine Bruneau
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1 Diagnostic Anténatal Non Invasif des Maladies Génétiques DÉPISTAGE PRÉNATAL NON INVASIF (DPNI) DE LA TRISOMIE 21 SUR PLASMA MATERNEL LABORATOIRE DE GENETIQUE ARCHET 2
2 Trisomie 21 Fréquence 1/800 La plus fréquente des maladies chromosomiques La cause la plus fréquente de retard mental La fréquence des trisomies 21 augmente avec l âge maternel Diagnostic de certitude = caryotype
3 Trisomie 21 libre et régulière
4 Dépistage Combiné Trisomie , mise en place d un dépistage combiné: probabilité unique prenant en compte : Risques liés à l âge maternel Mesure de la clarté de nuque (>3 mm) Dosage des marqueurs sériques du 1 er trimestre Division par 2 du nombre de prélèvements invasifs tout en conservant le même niveau de diagnostic de la trisomie 21
5 Dépistage Combiné Trisomie 21 3,72 %! 96 % de gestes invasifs pour des fœtus non porteurs de Trisomie 21 Nécessité de mettre en place un dépistage plus fiable et non invasif
6 ADN fœtal circulant dans le sang maternel Découverte de l ADN fœtal circulant (Lo et al, 1997) + Apparition de nouvelles techniques de séquençage Nouveau test de dépistage prénatal non invasif, basé sur l ADN fœtal circulant Spécificité et sensibilité très élevées DPNI: Dépistage Prénatal Non Invasif NIPT: Non Invasive Prenatal Testing NIPD: Non Invasive Prenatal Diagnosis
7 Sources d ADN fœtal circulant dans le sang maternel Source principale d ADN fœtal circulant: syncytiotrophoblaste, relargage continuel via un mécanisme d apoptose. ADN fœtal libre circulant dans le sang maternel = 5 à 10 % de l ADN total libre dans le sang
8 Sources d ADN fœtal circulant dans le sang maternel Apparition précoce dans la circulation maternelle. Détection ~ 5-6 SA avec les techniques actuelles, mais vraisemblablement relargué dès l implantation de l embryon Augmentation de la concentration tout au long de la grossesse (+21% par semaine au premier trimestre de la grossesse, ralentissement au second trimestre et pic dans les 8 dernières semaines) Disparition rapide (< 48 h) après accouchement (demi- vie médiane 16 min) Pas de persistance après la grossesse Stable dans la circulation maternelle malgré une forte concentration en nucléases du plasma. Association à des microparticules dérivées du placenta: rôle protecteur vis-à-vis dégradation
9 ADN fœtal circulant dans le sang maternel Le génome fœtal entier est représenté dans la circulation maternelle MAIS pas de différence entre ADN fœtal libre et ADN maternel libre.
10 Détection d une augmentation du nombre de copies d ADN foetal Par Séquençage Haut Débit ou NGS (Next Generation Sequencing) Dosage chromosomique relatif: Fœtus euploïde: 2 chromosomes 21 Fœtus T21: 3 copies par rapport à 2 copies augmentation de 1,5 fois Le puissance de discrimination augmente avec le nombre de molécules d ADN séquencées
11 Le DPNI en France Le CONSORTIUM H+ Regroupement de 7 CHU PARIS BREST BORDEAUX NICE LYON NANCY MARSEILLE Inclusion de 600 patientes, 50 T21, DPNI en parallèle de l amniocentèse 100% des trisomies retrouvées Aucun faux négatif
12 DPNI : les limites Faux positifs 0,1 à 0,2 % Mosaïques confinées au placenta Jumeaux évanescents Cause maternelle (cancer) Faux négatifs < 1/10000 Trisomie 21 en mosaïque IMC maternel élevé
13 INDICATIONS POUR LE TEST DE DPNI T21 au CHU de Nice D après les recommandations de l Association des Cytogénéticiens de Langue Française Version et de l HAS (septembre 2015) Marqueurs sériques maternels (MSM) (risque à 1/1000), SANS hyperclarté nucale (CN<3,5mm) ou autre anomalie échographique Dépistage combiné au 1 er trimestre Dépistage séquentiel intégré au 2 ème trimestre Dépistage au 2ème trimestre par les MSM seuls Age maternel 38 ans pour les patientes n ayant pas pu bénéficier du dépistage par les MSM, SANS hyperclarté nucale (CN<3,5mm) ou autre anomalie échographique Antécédent de grossesse avec fœtus atteint de trisomie 21. Couples dont l un des membres est porteur d une translocation robertsonnienne impliquant un chromosome 21 Le test est réalisé à partir de 12 SA jusqu à 32 SA 45,XX,rob(14;21)(q10;q10)
14 EXCLUSIONS POUR LE DPNI T21 au CHU de Nice Clarté nucale supérieure ou égale à 3,5 mm Signe d appel échographique Grossesses gémellaires/multiples.
15 Le DPNI en pratique au CHU de Nice Indication pour le test de DPNI T21 Test prescrit au cours d une consultation par un praticien du CHU de Nice attestation de consultation + consentement éclairé de la patiente + note d information à remettre à la patiente. Remplir le bon de demande spécifique + joindre les documents demandés Prélèvement de sang maternel recueilli sur tube Streck: Centre de prélèvement Archet 2 Résultat (2-3 semaines) LIMITE/ECHEC NEGATIF POSITIF Informer la patiente qu il existe un risque résiduel faible Poursuivre surveillance écho. Amniocentèse caryotype = Diagnostic de certitude
16 DPNI ADN fœtal circulant BioAnalyzer Library Builder (10 patients) Ion Chef = 3 jours Ion Proton Chips PI
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