METHODES D ANALYSES ET INTERPRETATION DES RESULTATS :
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- Hippolyte Leroux
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1 METHODES D ANALYSES ET INTERPRETATION DES RESULTATS : - potentiel de minéralisation du C et N, - fractionnement biochimique et ISMO, - Maturité : test d auto-échauffement - Maturité : test respirométrique Xavier SALDUCCI Sté Celesta-lab MAUGUIO Tél : contact@celesta-lab.fr 1
2 Caractérisation de la matière organique par la minéralisation potentielle du carbone et de l azote (= Cinétique C&N) (NF XP U44-163, Décembre 2009) : Objectif : définir le potentiel de minéralisation (carbone et azote) de produits organiques par une méthode d incubation en conditions contrôlées (T et H ). La minéralisation est un processus microbien qui transforme la matière organique en matière minérale, soit Corganique -> CO 2 Norganique -> NH 4+ -> NO 3 - Domaine d application : les amendements organiques et supports de culture homologués ou normalisés. Principe : Suivi de la production de dioxyde de carbone (C-CO 2 ) et d azote minéral (N-NO 3- et N-NH 4+ ) par un mélange terre + produit organique, lors d une incubation de 91 jours en conditions contrôlées de T (28 C) et H (pf 2,5). Norme validée par l AFNOR en Décembre 2009 et publiée en 01/2010 2
3 Cinétique de Minéralisation de N et C : la terre de référence terre agricole de tendance limoneuse ou sableuse, séchée à température ambiante et tamisée à 4 mm, conservée à 4 C, 100 g/kg < argile < 250 g/kg MS, 6.0 < pheau < 7.3 Calcaire < 2 g/kg MS Nminéral < 35 mg/kg MS 5 g/kg MS < Corganique < 10 g/kg MS 3
4 Cinétique de Minéralisation de N et C : matériel et méthode Le produit organique : séché à 38 C+/-2 C, broyé et tamisé à 1 mm. Un échantillon = 25 g de terre sèche ajusté à H pf2.5 (optimum biologique) + produit organique (apport à 2000 mg de carbone / kg terre sèche). + KNO3 (35 mgn/kg MS) Bocaux hermétiques de 1 l + 1 flacon de soude 0,5 M (piégeage du CO2) => enceinte thermostatée à 28 C (optimum biologique). Un traitement sol seul = contrôle potentiel de minéralisation du carbone et de l'azote du sol. 3 répétitions par traitement et par mesure. Dosage du C-CO2 à 9 reprises après 1, 3, 7, 14, 21, 28, 49, 70, 91 jours d'incubation à 28 C. Après chaque mesure les flacons de NaOH sont changés, les bocaux aérés. L'humidité des échantillons est contrôlée et ajustée tous les 15 jours. Dosage de l azote minéral (N-NO 3- et N-NH 4+ ) à 7 reprises après 0, 7, 14, 28, 49, 70 et 91 jours d'incubation à 28 C. Les écha ntillons sont sacrifiés et extrait dans du KCL 1M, dans un rapport 1/4 p/v. 4
5 Cinétiques de minéralisation : Dispositif : 5
6 Dispositif : Cinétiques de minéralisation : 6
7 Paramètres mesurées : C organique du produit en g/kg ou % N organique du produit en g/kg ou % QCI i : quantité de C-CO2 dégagé par le sol (avec ou sans produit) pendant l intervalle de temps I i, QCt k : quantité cumulé de C-CO2 dégagée par le sol (avec ou sans produit) à la date de prélèvement t k, qct k : quantité de C-CO2 provenant de la décomposition du produit ct k : coefficient de minéralisation exprimée en % du carbone organique du produit à la date t k Qt k : quantité d azote minéral présente dans le sol (avec ou sans produit) pendant l intervalle de temps I i, QNt k : quantité d azote minéral produite par le sol (avec ou sans produit) à la date de prélèvement t k, qnt k : quantité d azote minéralisé (si >0) ou immobilisé (si < 0) dans le sol par le produit à la date de prélèvement t k, nt k : Nminéralisé ou immobilisé en % de l azote organique du produit à la date t k 7
8 Cinétique C&N / résultats C minéralisé ANNEXE 1 / Résultats de la minéralisation du carbone du Sol Témoin et du mélange sol Témoin + Produit Organique Compost de MIATE DOSAGE DU C-CO2 Traitement / temps (jours) Sol Témoin mgc-co2/kg Ecart type mgc-co2/kg Sol Témoin + Produit organique mgc-co2/kg Ecart type mgc-co2/kg BILAN C-CO Produit Organique mgc-co2/kg Ecart type mgc-co2/kg BILAN C-CO2 (%) Produit Organique 0,0 1,5 3,6 6,0 8,5 10,1 10,8 12,8 14,4 15,5 %C ajouté 8
9 Cinétique C&N / graphiques C minéralisé Cinétiques de minéralisation du carbone du sol Témoin et du mélange sol Témoin + Produit Organique C-CO2 (mgc-co2/kg terre) Temps d'incubation (jours) Sol Témoin Sol Témoin + Produit organique 100 C-minéralisé en % du carbone apporté par le Produit Organique %Cminéralisé (C-CO2%) Temps d'incubation (jours) 9
10 Cinétique C&N / résultats N minéralisé ANNEXE 2 / Résultats de la minéralisation de l'azote du Sol Témoin et du mélange Sol Témoin + Produit Organique Compost de MIATE DOSAGE DU NO3 Traîtement / temps (jours) Sol Témoin mgn-no3 / kg Ecart type Sol Témoin + Produit Organique mgn-no3 / kg Ecart type Bilan NO Produit Organique mgn-no3 / kg Ecart type DOSAGE DU NH4 Traitement / temps (jours) Sol Témoin mgn-nh4 /kg Ecart type Sol Témoin + Produit Organique mgn-nh4 /kg Ecart type Bilan NH Produit Organique mgn-nh4 /kg Ecart type Total N BILAN TOTAL N-MINERAL Total Nmin. Sol Témoin mgn-no3+nh4/kg Total Nmin. Sol Témoin + Produit Organique mgn-no3+nh4/kg Produit Organique mgn-no3+nh4/kg Ecart type Azote réellement minéralisé mgn-no3+nh4/kg BILAN TOTAL N-MINERAL (%) N minéralisé net 0,0 1,5 3,6 3,1 8,7 9,2 7,3 %N organique 10
11 Cinétique C&N / graphiques N minéralisé Cinétiques de minéralisation de l'azote du Sol Témoin et du mélange Sol Témoin + Produit Organique 120 N minéral (mgn-no3+nh4/kg sol sec) Temps d'incubation (jours) Sol Témoin Sol Témoin + Produit Organique Minéralisation de l'azote organique du produit organique % Nminéralisé (NO3+NH4) Temps d'incubation (jours) 11
12 Cinétiques de Minéralisation de C et N (Incubations contrôlées selon NF XPU ) Cinétiques de minéralisation du Carbone de différents amendements organiques Cinétiques de Minéralisation de l'azote de différents amendements organiques Compost bovin 80 Compost bovin Carbone minéralisé (%Corg.) Fumier bovin 1 Fumier bovin 2 Fumier bov. Déshydraté Matières végétales Nminéralisé (%Norg.) Fumier Bovin 1 Fumier Bovin 2 Fumier bov. Déshydraté Matières végétales Temps (j) Temps (j) 12
13 13
14 Bulletin de Synthèse De la Cinétique de Minéralisation du C et N (bas de page) 14
15 Interprétation des résultats de cinétiques de minéralisation Hypothèses : MS : 69.8% MO : 45.5% sur brut C : 22.8% sur brut N : 1.91% sur brut (1.48% de N org / 0.41% de N-NH4 / 0.02% de N-NO3) Coeff de minéralisation à 91 jours : 34.1% pour C Coeff max de minéralisation de N organique en 91 jours : 3.7% (pas d immobilisation) Détail du calcul des estimations de fourniture pour 10 tonnes de matière brute / ha : Estimation de la quantité de MO stable : La quantité totale en kg de carbone fournie par 10 tonnes de produit brut est calculée en multipliant la dose de kg par la teneur en carbone du produit brut = x 22,8 / 100 = kg On multiplie ensuite cette quantité par le taux de minéralisation du carbone maximal en 91 jours d incubation, pour calculer la quantité de carbone susceptible d être minéralisée la première année. Pour un apport de 10 T, la quantité de carbone minéralisée du produit est : x 34.1% = 780 kg. La quantité de carbone restant dans le sol est alors : C stable = = kg/ha La fourniture de MO stable est calculée par : MO stable = C stable x 2 = x 2 = kg/ha 15
16 Estimation des fournitures d azote : Pour 10 tonnes de produit brut, les quantités d azote apportées par le produit sont calculées en multipliant la dose de kg par la teneur en azote du produit brut. Les différentes formes d azote sont distinguées. N ammoniacal = x 0,41 / 100 = 41 kg N nitrique = x 0,02 / 100 = 2 kg N organique = x 1,48 / 100 = 148 kg L azote minéral (ammoniacal et nitrique) initialement présent dans le produit est supposé être disponible à court terme. On multiplie ensuite la quantité d azote organique apportée par le taux maximum de minéralisation de l azote organique en 91 jours d incubation, pour calculer la quantité d azote organique susceptible d être minéralisée la première année. Pour un apport de 10 T, la quantité d azote organique minéralisée du produit est : 148 x 3.7% = 5 kg L allure de la cinétique de minéralisation indique si l azote ainsi minéralisé est disponible à court, moyen ou long terme, et sur l existence d un éventuel phénomène transitoire ou prolongé de réorganisation de l azote. Les fournitures totales d azote minéral sont calculées en additionnant l azote minéralisé à partir des différentes formes d azote : N total minéralisable = = 48 kg 16
17 Exemple n 1 : cinétique de minéralisation d un compost mûr et stabilisé 100% 100% N nitrique 80% 60% 40% 20% 0% Matière organique MO instable MO stable 80% 60% 40% 20% 0% Azote total N ammoniacal Effet amendant et nutritif : ajuster la date d apport et la dose. N organique m inéralisable à court terme N organique non disponible à court terme 17
18 Exemple n 2 : cinétique de minéralisation d un compost non arrivé à maturité 100% 80% 60% 40% 20% 0% Matière organique MO instable MO stable 100% 80% 60% 40% 20% 0% Azote total N nitrique N ammoniacal N organique immobilisé à court terme N organique non disponible à court terme Effet amendant mais risque de faim d azote : ajuster la fertilisation et la date d apport. 18
19 Exemple n 3 : cinétique de minéralisation d un compost non stabilisé 100% 100% N nitrique 80% 60% 40% 20% 0% Matière organique MO instable MO stable 80% 60% 40% 20% 0% Azote total N ammoniacal N organique m inéralisable à court terme N organique non disponible à court terme Effet amendant médiocre, risque de faim d azote et de phytotoxicité : date d apport? 19
20 Limites des cinétiques de minéralisation Produits séchés à 40 C : perte d une partie de l az ote ammoniacal. Quid de l effet du séchage sur la dégradation de la MO? Produits broyés à 1 mm : très grande surface de contact avec le sol par rapport au produit de départ Température d incubation : 28 C Humidité favorable à l activité biologique Les cinétiques expriment un POTENTIEL de minéralisation du produit, dans des conditions optimales de minéralisation. Passage labo champ? Conditions optimales de minéralisation 20
21 Application à venir des Cinétiques de minéralisation de C&N Possibilité de calculer, à partir du coefficient de minéralisation du Carbone à 91 jours (ct 91 ) l ISMO (Indice de Stabilité de la MO) = quantité (ou %) de matière organique résistante à la minéralisation après 1 an au champ, > ISMO = 87, x ct 91 Transposition au champ : utilisation de modèle simplifié de la minéralisation de l azote pour piloter à la parcelle la fertilisation azotée. 21
22 Comparaison des Cinétiques de minéralisation de l azote au champ et en laboratoire (Source Arvalis / Bouthier et Trochard, 2009) / 44 couples %Nminéralisé jours normalisés à 15 C 22
23 Caractérisation de la matière organique par fractionnement biochimique et estimation de sa stabilité [XP U ( ) puis XP U , Décembre 2009] Objectif : caractériser la stabilité biologique d un produit organique à partir de son profil biochimique (Stabilité biologique = propriété caractérisant la résistance de matières organiques à la minéralisation après apport au sol mais restant potentiellement minéralisable à long terme, à un rythme très lent de l ordre des coefficients annuels de minéralisation (2%) observés dans les sols cultivés. Domaine d application : amendements organiques et supports de culture normalisés ou homologués, ayant au moins 20% de MO sur MS. 23
24 Caractérisation de la matière organique par fractionnement biochimique et estimation de sa stabilité [XP U ( ) puis XP U , Décembre 2009] Principe : caractérisation de la matière organique par solubilisations successives aux détergents neutre et acide et à l acide sulfurique (Van Soest : eau-ndf-adf-h 2 SO 4 ). Les fractions carbonées : solubles (SOL), hémicellulose (HEM), cellulose (CEL), lignine-cutine (LIC) sont plus ou moins résistantes à la dégradation : soluble < hémicellulose < cellulose < lignine et cutine. Mesure de la quantité de carbone minéralisable après 3 j d incubation à 28 C selon XP U (=ct 3, %C) Les fractions organiques déterminées + coefficient de minéralisation à 3 j (ct 3 ) sont utilisées pour calculer un indicateur (ISMO) qui détermine a priori, dans le produit initial, la proportion de matière organique potentiellement résistante à la minéralisation environ 1 an après apport ISMO = 44,5 + (0,5 x SOL) (0.2 x CEL) + (0,7 x LIC) (2.3 x ct 3 ) Norme expérimentale pour ISB/Tr jusqu en Décembre 2009, transformée en ISMO et validée par l AFNOR en Décembre 2009 et publiée en 01/2010
25 Nouvel indice d estimation de la Stabilité Biologique de la Matière Organique : ISMO (NF XP U , Décembre 2009) Méthodologie très proche de l ISB/Tr : fractionnement biochimique (SOL, HEM, CELcalculée, LIC) sans dosage de la CEW + pourcentage de minéralisation du Carbone après 3 jours d incubation (Ct 3 )(XP U ), Travail financé par l ADEME Etabli sur la base d une étude portant sur 83 produits (pour 10 à 50 pour ISB/Tr) puis appliqué à une base de données en comportant plus de 500, Plus robuste que ISB/Tr pour que de faibles variations sur les fractions aient peu d impact sur l indice, 25
26 Produits et creusets pour ISMO 26
27 Pesée des produits 27
28 Appareillage : extracteur de fibre 28
29 ISMO : Expression des résultats MS MO en %MS Fractions SOL / HEM / CEL / LIC en %MO si -3% < fraction < 0% => fraction = 0%, Si fraction < -3% => «résultats aberrant» => ISMOct 91 selon XP U Ct 3 en %Corganique ISMO en %MO en kg / t produit sec en kg / t produit brut Si ISMO> 100% => «résultat supérieur à 100% ramené à 100% par convention»
30 Exemple de bulletin D analyse de l ISMO 30
31 MO = 25,8 % du brut ISMO = 42,7% A partir de l ISMO : Application pratique de l indice ISMO 1000 kg de matière brute apportent 258 kg de MO brute qui sont susceptibles de fournir 258 * 0,427 = 110 kg de matière organique potentiellement résistante à la dégradation. Concrètement : 1000 kg de compost frais apportent 110 kg de MO résistante à la dégradation 31
32 Premiers résultats de l analyse de l ISMO pour 440 produits organiques regroupés en 11 groupes (Lashermes et al, 2008) Nutrition microbes et plantes ISMO (en % de la MO totale) Nutrition microbes et plantes Etat physique Etat physique (Nutrition) 32
33 LIMITES DE L ISMO Certains produits (de 1% à 5%) peuvent présenter des résultats aberrants du fractionnement biochimique (fraction négative) : Produits contenant des soies de porcs Certains produits d origine viticole (marcs) Grains de maïs frais? Dans ce cas, le calcul de l ISMO doit se faire à partir des résultats de la cinétique ISMO et résultats de cinétiques = potentiels obtenus en laboratoire dans des conditions optimales Au champ, l expression de ces potentiels sera modulée par différents facteurs : Caractéristiques physico-chimiques et biologiques du sol (% d argile, ph,.) Climat Pratiques culturales Sol nu / cultivé Caractéristiques physiques du produit (granulométrie, présentation) La transposition des potentiels au champ ne peut pas être directe Les classements des produits les uns par rapport aux autres restent pertinents
34 Innocuité : Maturité du produit (Test respirométrique) (d après INRA Dijon) Objectif : apprécier la maturité d un produit organique par le suivi de sa respiration durant 7 jours. Méthode : Adaptée à partir des études de l INRA de Dijon et ENSAIA de Nancy (Morel et al, 1986; Nicolardot et al, 1986) À partir d un échantillon de PO séché à 40 C et broyé à 1 mm, incubation contrôlée à 28 C du produit organique ré -humidifié et dosage à jours du C-CO2 produit
35 Innocuité : Maturité du produit (Test respirométrique) Dispositif :
36 Résultats Graphiques : Interprétation : Cinétique de minéralisation début compostage C minéralisé (gc-co2 / kg MS) IMMATURE seuil de maturité MATURE 2 ans/tassé 8 mois fin compostage Temps (j)
37 Résultats :
38 Eléments d Interprétations 3 niveaux de maturité peuvent être définis : < 10 g C-CO2 / kg MS : produit mature, pas d interaction négative avec la culture aux doses agronomiques habituelles (10 à 30 t brut/ha) 10 < C-CO2 < 15 g / kg MS : produit en cours de maturation : la maturation n est pas totalement finie, des risques de phytotoxicité pour la culture en fonction des doses et modalités des apports (quantité, localisation, date ); > 15 g C-CO2 /kg MS : produit immature : peut être utilisé au champ mais interaction avec la culture => contrôler modalités des apports (quantité, localisation, date ).
39 Innocuité : Maturité du produit Test d auto-échauffement pour compost (Test Rottegrad - Température) prnf EN ( ) Objectif : apprécier la maturité d un produit organique par le suivi de l auto-échauffement du produit. Principe : mesurage de l auto-échauffement dans un vase Dewar et mesurage de la température maximale, la température étant un indicateur de l activité biologique aérobie, Méthode : après tamisage à 10 mm du produit frais, incubation à 22 ± 2 C du produit humidifié (test de la «poignée») et mesure 2 fois par jour de la température (T maximum entre 2 à 5 jours)
40 Innocuité : Maturité du produit (Test Rottegrad - Température) : Dispositif :
41 RAPPORT D'ANALYSE DE PRODUIT ORGANIQUE N de laboratoire: Demandeur : Specimen MATROT Référence: Nature : Intermédiaire: Date de réception: 23/10/2008 Specimen MATROT TEST ROTTEGRAD Température ( C) Temps (jours) Température maximale atteinte ( C): 42 Interprétation: Degré de décomposition I II III IV V Désignation Matière brute Compost frais Compost mur T max ( C) Conclusion: Ce produit est considéré comme un compost frais Le Responsable du Laboratoire Xavier SALDUCCI Mauguio le 04/11/08
42 Innocuité : Maturité du produit (Test Rottegrad Auto-échauffement) Interprétation Degré de décomposition I II III IV V Désignation Matière brute Compost frais Compost mur T max ( C)
Contexte : Objectif : Expérimentation :
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