Géloses de Sabouraud à l infusion cœur-cervelle BBL, préparées en tubes et en flacons, servant à la culture sélective des champignons
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- Sabine Fleury
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1 /08 Géloses de Sabouraud à l infusion cœur-cervelle BBL, préparées en tubes et en flacons, servant à la culture sélective des champinons Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Gentamicin Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Gentamicin Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Gentamicin Voir le lossaire de symboles à la fin de la notice. APPLICATION Ces milieux sont utilisés dans des méthodes qualitatives de mise en évidence et de culture sélective de champinons pathoènes à partir d échantillons cliniques et non cliniques. RESUME ET EXPLICATION La Sabouraud Brain Heart Infusion Aar est basée sur la formulation de Gorman 1. L association de la Brain Heart Infusion Aar et de la Sabouraud Dextrose Aar dans ce milieu favorise la mise en évidence des champinons comparativement aux milieux utilisés séparément. L ajout de san de mouton défibriné est recommandé pour favoriser la mise en évidence des champinons dimorphes exieants. 2, 3 Différentes associations d aents antimicrobiens (chloramphénicol, cycloheximide et entamicine) sont incorporées pour favoriser la mise en évidence des champinons pathoènes à partir d échantillons fortement contaminés par des bactéries et des champinons saprophytes. 2 PRINCIPES DE LA METHODE La Sabouraud Brain Heart Infusion Aar se compose d une association de peptones et d infusions de cervelle et de cœur qui fournit les acides aminés et les autres composés azotés complexes. Le dextrose est une source d énerie. Le chlorure de sodium apporte les électrolytes essentiels. Une solution tampon de phosphate disodique maintient le ph du milieu. Le san de mouton défibriné est ajouté pour fournir des nutriments qui induisent la croissance d espèces dimorphes dans la phase levure. 2,3 Le chloramphénicol est un antibiotique à spectre étendu qui inhibe un rand nombre de bactéries à Gram néatif ou Gram positif. Le cycloheximide est un aent antifonique, principalement actif contres les saprophytes, qui n inhibe pas la croissance des espèces pathoènes. La entamicine est un antibiotique à base d aminolucosides, qui inhibe la croissance des bactéries à Gram néatif. REACTIFS Sabouraud Brain Heart Infusion Aar Formule approximative* par litre d eau purifiée Infusion cœur-cervelle (matières solides)... 4,0 Diestion peptique de tissu animal... 5,0 Diestion pancréatique de caséine... 10,5 Dextrose... 21,0 Chlorure de sodium... 2,5
2 Phosphate disodique...1,25 Gélose...15,00 *Ajustée et/ou complémentée en fonction des critères de performances imposés. La Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol contient, par litre, 5 % de san de mouton défibriné et 0,05 de chloramphénicol. La Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide contient, par litre, 0,05 de chloramphénicol et 0,5 de cycloheximide. La Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide contient, par litre, 5 % de san de mouton défibriné, 0,05 de chloramphénicol et 0,5 de cycloheximide. La Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Gentamicin contient, par litre, 0,05 de chloramphénicol et 0,05 de entamicine. La Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Choramphenicol and Gentamicin contient, par litre, 10 % de san de mouton défibriné, 0,05 de chloramphénicol et 0,05 de entamicine. La Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Gentamicin contient, par litre, 0,05 de entamicine. Avertissements et précautions : Réservé au dianostic in vitro. Ouvrir avec précaution les tubes et les flacons étroitement bouchés pour ne pas risquer d être blessé par un bris de verre. Des microoranismes pathoènes, notamment les virus de l hépatite et de l immunodéficience humaine, sont susceptibles d être présents dans les échantillons cliniques. Respecter les «Précautions standard» 4-7 et les consines en viueur dans l établissement pour manipuler tout objet contaminé avec du san ou d autres liquides oraniques. Stériliser à l autoclave les tubes préparés, les récipients contenant les échantillons et tout autre matériel contaminé avant de les éliminer. Instructions pour la conservation : Dès réception, conserver les tubes et les flacons dans l obscurité, à une température comprise entre 2 et 8 C. Ne pas les coneler ni les surchauffer. Ne pas ouvrir prématurément. Maintenir à l abri de la lumière. Conservés comme indiqué sur l étiquette jusqu au moment de l utilisation, les milieux en tube et en flacon peuvent être ensemencés jusqu à la date de péremption et incubés jusqu à 6 semaines. Laisser le milieu s équilibrer à température ambiante avant de l ensemencer. Détérioration du produit : Ne pas utiliser le milieu s il présente des sines de contamination microbienne, décoloration ou dessiccation, ou d autres sines de détérioration. PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS Consulter les publications citées en référence pour plus d informations sur les méthodes de prélèvement et de préparation des échantillons. 2,3,8 METHODE Matériaux fournis : Suivant le produit commandé, l un des milieux préparés répertoriés ci-dessous est fourni. Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Gentamicin Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Gentamicin Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Gentamicin
3 Matériaux requis mais non fournis : Milieux de culture auxiliaires, réactifs, souches de contrôle de qualité et matériel de laboratoire requis pour cette méthode. Mode opératoire du test : Respecter les techniques d asepsie. Ensemencer le milieu dès que possible après réception de l échantillon au laboratoire. A l aide d un ensemenceur à anse ou à fil droit stérile, strier la surface du milieu avec l échantillon. Consulter les publications citées en référence pour plus d informations sur le traitement et l ensemencement des échantillons comme les tissus, les squames, les cheveux, les ronures d onles, etc. 2,3,8-12 Pour isoler des champinons responsables de mycoses cutanées, un milieu polyvalent non sélectif et un milieu sélectif doivent être ensemencés en parallèle. Incuber à 25 à 30 C en atmosphère plus humide. Pour isoler des champinons responsables de mycoses systémiques, deux jeux de milieux doivent être ensemencés en parallèle, l un étant incubé à 25 à 30 C et l autre à 35 ± 2 C. Les cultures doivent être examinées au moins une fois par semaine pour déceler une croissance éventuelle de champinons et maintenues pendant 4 à 6 semaines avant de conclure à un test néatif. Contrôle de qualité par l utilisateur : 1. S assurer que les milieux ne présentent aucun sine de détérioration, comme indiqué à la rubrique «Détérioration du produit». 2. Contrôler les performances en ensemençant un échantillon représentatif de chaque milieu avec des cultures pures de souches de contrôle stables, produisant une réaction connue. Les souches de test suivantes sont recommandées : SOUCHE DE TEST Blastomyces dermatitidis ATCC Candida albicans ATCC Trichophyton mentarophytes ATCC 9533 Escherichia coli ATCC *Asperillus nier ATCC RESULTAT ATTENDU Croissance Croissance Croissance Inhibition (partielle à complète) Inhibition (partielle à complète) * Uniquement avec Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide et Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol and Cycloheximide. Effectuer les contrôles de qualité conformément aux rélementations nationales et/ou internationales, aux exiences des oranismes d homoloation concernés et aux procédures de contrôle de qualité en viueur dans l établissement. Il est recommandé à l utilisateur de consulter les directives NCCLS et la rélementation CLIA concernées pour plus d informations sur les modalités de contrôle de qualité. RESULTATS Examiner le milieu pour déceler une croissance éventuelle. L examen au microscope de la colonie facilite l identification. LIMITES DE LA PROCEDURE Ces milieux préparés sont conçus pour réaliser un isolement primaire. Certains tests dianostiques peuvent être réalisés avec le milieu primaire. Cependant, une culture pure est recommandée pour réaliser des tests biochimiques et d autres tests d identification. Consulter les publications citées en référence pour plus d informations. 3,8-12
4 Un milieu unique est habituellement insuffisant pour détecter l ensemble des microoranismes d importance clinique éventuellement présents dans un échantillon. Les aents présents dans les milieux sélectifs sont susceptibles d inhiber la croissance de certaines souches des espèces dépistées et de favoriser la croissance d espèces censées être inhibées, notamment lorsqu elles sont larement représentées dans l échantillon. Les échantillons cultivés sur des milieux sélectifs doivent, par conséquent, être éalement cultivés sur des milieux non sélectifs pour recueillir des informations complémentaires et faciliter la mise en évidence de pathoènes éventuels. CARACTERISTIQUES DE PERFORMANCES Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Gentamicin Tous les lots de Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Chloramphenicol and Gentamicin sont testés en usine afin de vérifier la conformité des performances avec les spécifications. Des échantillons représentatifs du lot sont ensemencés directement en striant la élose inclinée avec de jeunes colonies de souches Trichophyton mentarophytes ATCC 9533 et Blastomyces dermatitidis ATCC prélevées en surface d une boîte de élose de Sabouraud au dextrose BBL Sabouraud Dextrose Aar. Des échantillons supplémentaires sont ensemencés avec Candida albicans ATCC et Escherichia coli ATCC en striant la élose inclinée avec de jeunes colonies prélevées en surface d une boîte de élose de soja BBL Trypticase Soy Aar avec 5 % de san de mouton. Les tubes sont incubés, bouchons desserrés, à une température comprise entre 20 et 27 C jusqu à 7 jours en atmosphère aérobie. T. mentarophytes, B. dermatitidis and C. albicans présentent une croissance moyenne à importante. La croissance est nulle dans le cas d E. coli. CONDITIONNEMENT N o réf. Description BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar with Chloramphenicol, coffret de 10 flacons Mycoflask BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Aar Slants with Chloramphenicol and Cycloheximide, carton de 100 tubes de taille C BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar Slants with Chloramphenicol and Cycloheximide, carton de 100 tubes de taille A BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Aar Slants with Chloramphenicol and Gentamicin, coffret de 10 tubes de taille C BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Aar Slants with Chloramphenicol and Gentamicin, coffret de 10 fioles de plastique BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Aar with Gentamicin, carton de 100 flacons de 30 cc. REFERENCES 1. Gorman, J.W SABHI, a new culture medium for pathoenic funi. Am. J. Med. Technol. 33: Merz, W.G., and G.D. Roberts Detection and recovery of funi from clinical specimens, p In A. Balows, W.J. Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenber, and H.J. Shadomy (ed.), Manual of clinical microbioloy, 5th ed. American Society for Microbioloy, Washinton, D.C. 3. Haley, L.D., H. Trandel, and M.B. Coyle Cumitech 11, Practical method for culture and identification of funi in the clinical mycoloy laboratory. Coordinatin ed., J.C. Sherris. American Society for Microbioloy, Washinton, D.C. 4. National Committee for Clinical Laboratory Standards Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, Pa. 5. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbioloical and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S. Government Printin Office, Washinton, D.C. 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to bioloical aents at work (seventh individual directive within the meanin of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Kwon-Chun, K.J., and J.E. Bennett Medical mycoloy. Lea & Febier, Philadelphia. 9. Forbes, B.A., D.F. Sahm, and A.S. Weissfeld Bailey & Scott's dianostic microbioloy, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis. 10. Murray, P.R., E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover, and R.H. Yolken (ed.) Manual of clinical microbioloy, 7th ed. American Society for Microbioloy, Washinton, D.C.
5 11. Konenman, E.W., S.D. Allen, W.M. Janda, P.C. Schreckenberer, and W.C. Winn, Jr Mycoloy, p Color atlas and textbook of dianostic microbioloy, 4th ed., J.P. Lippincott Co., Philadelphia. 12. Larone, D.H Medically important funi: a uide to identification, 2nd ed. American Society for Microbioloy, Washinton, D.C. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Loo, BBL, Mycoflask and Trypticase are trademarks of Becton, Dickinson and Company BD
6 _ÉÅíçåI=aáÅâáåëçå=~åÇ=`çãé~åó T=içîÉíçå=`áêÅäÉ pé~êâëi=j~êóä~åç=onnro=rp^ UMMJSPUJUSSP _bkbu=iáãáíéç _~ó=h=n~lçi=pü~ååçå=fåçìëíêá~ä=bëí~íé pü~ååçåi=`çìåíó=`ä~êéi=fêéä~åç qéäw=prpjsnjqtjovjom c~ñw=prpjsnjqtjorjqs
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