INHIBITION PLAQUETTAIRE EN
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- Danielle Adèle Lafleur
- il y a 6 ans
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1 INHIBITION PLAQUETTAIRE EN PRESENCE D UN NOUVEL AIT OU D UN AVC ISCHEMIQUE MINEUR ( PLATELET-ORIENTED INHIBITION IN NEW TIA AND MINOR ISCHEMIC STROKE) PROTOCOLE D'ÉCHANTILLONS DE SANG DE L'ÉTUDE SECONDAIRE FACULTATIVE SUR LES BIOMARQUEURS Centres à l'extérieur des États-Unis ADN et plasma
2 TABLE DES MATIÈRES I. PROTOCOLE POUR ÉCHANTILLONS D'ADN ET DE PLASMA EXIGENCES DU CENTRE POUR LE PRÉLÈVEMENT D'ÉCHANTILLONS D'ADN ET DE PLASMA TROUSSES D'ÉCHANTILLONNAGE DE L'ADN ET DU PLASMA PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS D'ADN ET DE PLASMA CENTRIFUGATION ENTREPOSAGE DES ÉCHANTILLONS D'ADN ET DE PLASMA EMBALLAGE ET EXPÉDITION DE L'ADN ET DU PLASMA - Veuillez vous reporter au Manuel de laboratoire LabCorp pour plus de précisions II. PROBLÈMES/ERREURS COURANTS... 8 III. ADRESSE DE LABCORP POUR L'EXPÉDITION D'ÉCHANTILLONS... 8 IV. ADRESSE DE LA CLINIQUE MAYO POUR L'ENTREPOSAGE DES ÉCHANTILLONS... 9 V. ANNEXES... 9 Annexe A : TUBE D'EDTA AU BOUCHON LAVANDE DE 10 ML POUR ÉCHANTILLON DE SANG Annexe B : TUBE CRYOVIAL DE 10 ML POUR LES RESTES DE CELLULES ET LA COUCHE LEUCO-PLAQUETTAIRE Annexe C : DIAGRAMME D'UN ÉCHANTILLON DE SANG APRÈS CENTRIFUGATION Annexe D : TUBE CRYOVIAL DE 2 ML POUR PLASMA Page 1
3 I. PROTOCOLE POUR ÉCHANTILLONS D'ADN ET DE PLASMA 1. EXIGENCES DU CENTRE POUR LE PRÉLÈVEMENT D'ÉCHANTILLONS D'ADN et DE PLASMA Les articles suivants sont nécessaires pour les bons traitement et entreposage des échantillons : Préféré (facultatif) - Un centrifugeur qui fonctionne à g et 4 C. Nécessaire Un centrifugeur qui fonctionne à g. Préféré (facultatif) - Un congélateur de -70 C à -90 C. Les échantillons peuvent être entreposés jusqu'à 3 mois avant l'expédition. Lors de l'expédition, les échantillons seront accompagnés de glace sèche. Nécessaire Un congélateur à -20 C, -30 C ou -40 C. Si un congélateur à - 20 C, -30 C ou -40 C est utilisé, les échantillons, accompagnés de glace sèche, doivent être envoyés dans les 4 jours qui suivent. De la glace sèche est disponible pour tous les échantillons. (Consultez votre manuel de laboratoire LabCorp pour des sources de glace sèche.) 2. TROUSSES D'ÉCHANTILLONNAGE DE L'ADN et DU PLASMA LabCorp Clinical Trials vous remettra des trousses d'échantillonnage assemblées chez LabCorp et envoyées directement aux centres dans des contenants réutilisables pour le retour des échantillons à LabCorp. Chaque trousse d'échantillonnage de l'adn et du plasma renferme les fournitures nécessaires pour le prélèvement, la préparation et l'envoi des échantillons à LabCorp Clinical Trials. (Des fournitures en vrac supplémentaires seront remises au site en guise de supplément aux trousses d'échantillonnage en cas de bris ou de dommages.) Chaque trousse d'échantillonnage de l'adn et du plasma contient les articles suivants : ARTICLE FORMULAIRES Formulaire de demande (réquisition) d'analyse laboratoire avec code à barres ] QUANTITÉ 1 FOURNITURES DE PRÉLÈVEMENT SANGUIN Prélèvement de sang : 1 a. 1- tube d'edta au bouchon lavande (vacutainer) de 10 ml avec code à barres b. 1- tube Cryovial de 10 ml pour la couche leuco-plaquettaire et les restes de cellules avec code à barres c. 6- tubes Cryovial de 2 ml pour le plasma avec codes à barres d. 1- tampon d'alcool Page 2
4 e. 1- seringue f. 1- garrot g. 1- tampon de gaze h. 1- pansement i. 1- pipette non stérile Sac à échantillons pour matières contaminées 1 FOURNITURES D'EXPÉDITION Carton de la trousse (carton d'expédition) 1 Bordereau d'expédition aérienne payé et imprimé 1 Contenant en styromousse 1 Étiquettes d'expédition pour glace sèche Multiple REMARQUE : Les centres doivent obtenir de la glace sèche pour l'expédition des échantillons. Consultez votre manuel LabCorp pour des sources de glace sèche. Le formulaire de réquisition du laboratoire (consultez votre manuel LabCorp) et les articles qui portent un code à barres et qui sont inclus dans chaque carton de trousse d'échantillonnage sont déjà imprimés et portent le même numéro de code à barres. Ne pas transférer le contenu d'une trousse d'échantillonnage à une autre. COMMANDER DES FOURNITURES 1. Pour commander de nouvelles fournitures, consultez les instructions pour commander des trousses et des fournitures qui se trouvent dans votre Manuel LabCorp. Lors de la commande de nouvelles fournitures, veuillez prévoir de 5 à 7 jours ouvrables pour l'assemblage et la livraison des fournitures. 3. PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS D'ADN et DE PLASMA Les échantillons de sang seront prélevés au moment de l'inscription à l'étude. Il est préférable que les échantillons soient prélevés au moment de la répartition aléatoire, après l'administration de la dose d'attaque au sujet. Cependant, les échantillons peuvent être prélevés dans les 12 heures qui suivent la répartition aléatoire, si c'est inévitable. Un prélèvement de sang par l'hôpital peut être utilisé si le coordinateur de l'étude n'est pas en mesure d'effectuer le prélèvement, mais le coordinateur est responsable du transport de l'échantillon de sang au laboratoire Page 3
5 aux fins de centrifugation et de l'organisation de l'emballage et de l'expédition de tous les échantillons à LabCorp. AVANT DE PRÉLEVER L'ÉCHANTILLON 1. Confirmer que le consentement éclairé pour l'étude sur les biomarqueurs a été obtenu. 2. Vérifier que vous ayez choisi la bonne trousse d'échantillonnage pour le prélèvement d'échantillons d'adn et de plasma. 3. Vérifier la date de péremption de la trousse d'échantillonnage que vous avez choisie. (Suivre les lignes directrices locales pour la destruction de trousses d'échantillonnage périmées.) 4. Vérifier le calendrier LabCorp dans votre Manuel de laboratoire LabCorp pour éviter tout jour férié local ou national. PRÉLÈVEMENT ET PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS 1. Utiliser la technique stérile standard pour la ponction veineuse. 2. En présence d'intraveineuse dans un bras, utiliser l'autre bras. En présence d'intraveineuses aux deux bras, prélever le sang d'une veine distale des intraveineuses. 3. Remplir entièrement le tube d'edta au bouchon lavande (Annexe A) qui se trouve dans la trousse d'échantillonnage. 4. Renverser doucement le tube au moins 6 à 8 fois immédiatement après le prélèvement pour empêcher la coagulation. Éviter l'exposition aux températures extrêmes. Étiqueter le tube avec le numéro d'id du sujet et le numéro de randomisation POINT (le numéro de répartition aléatoire est le numéro qui se trouve sur le flacon du médicament à l étude). REMARQUE : Veuillez utiliser un stylo à bille ou à encre indélébile pour les étiquettes des échantillons et le formulaire de réquisition du laboratoire. 5. Séparer le plasma des cellules en centrifugeant immédiatement ou dans les 30 à 60 minutes suivant le prélèvement (consultez la section sur la centrifugation de votre Manuel de laboratoire LabCorp). Veuillez garder les tubes debout avant la centrifugation. Si vous avez besoin d'une aide additionnelle pour la centrifugation, veuillez consulter votre Manuel de laboratoire LabCorp pour les coordonnées de votre moniteur de projet LabCorp. 6. Après la centrifugation, si vous n'observez pas une couche distincte entre les cellules sanguines, la couche leuco-plaquettaire et le plasma, veuillez centrifuger Page 4
6 l'échantillon à nouveau. Consulter l'annexe C pour le diagramme d'un échantillon de sang après centrifugation, avec une couche leuco-plaquettaire. 7. À l'aide de la pipette qui se trouve dans la trousse d'échantillonnage, transférer 0,7 ml de plasma du tube d'edta au bouchon lavande à chacun des 6 tubes Cryovial de 2 ml. Remplir jusqu'à la ligne de 0,7 ml dans les fioles Cryovial de 2 ml. (Annexe D) REMARQUE : Veiller à ne pas perturber la couche leuco-plaquettaire entre les cellules sanguines et le plasma. Vous devriez pouvoir observer une couche distincte entre le plasma et les cellules qui se nomme couche leuco-plaquettaire. 8. Vérifier que la couche leuco-plaquettaire ne soit pas aspirée par la pipette avec le plasma. Si une partie de la couche leuco-plaquettaire est aspirée avec le plasma, veuillez en faire note au bas du Formulaire de réquisition du laboratoire. 9. Placer les bouchons sur les tubes Cryovial de plasma. 10. Étiqueter les six tubes Cryovial de 2 ml avec le numéro d'id du sujet et le numéro de répartition aléatoire POINT (le numéro de répartition aléatoire est le numéro qui se trouve sur le flacon du médicament à l étude). REMARQUE : Veuillez utiliser un stylo à bille ou à encre indélébile pour les étiquettes des échantillons et le formulaire de réquisition du laboratoire. 11. À l'aide de la deuxième pipette qui se trouve dans la trousse d'échantillonnage, transférer tous les restes de cellules et la couche leuco-plaquettaire du tube d'edta de 10 ml au tube Cryovial de 10 ml. 12. Placer le bouchon sur le tube Cryovial de 10 ml. 13. Placer les six tubes Cryovial de plasma de 2 ml et le tube Cryovial de restes de cellules et de couche leuco-plaquettaire de 10 ml dans l'aqui-pak (porte-tubes à 6 places avec du matériel absorbant). 14. Placer l'aqui-pak dans le plus grand compartiment du sac à échantillons pour matières contaminées, puis le sceller. Placer une copie du formulaire de réquisition du laboratoire dans la pochette extérieure du sac à échantillons (garder une copie pour vos dossiers). 15. PLACER IMMÉDIATEMENT LE SAC À ÉCHANTILLONS DEBOUT DANS LE CONGÉLATEUR. 16. Les échantillons doivent demeurer au congélateur jusqu'à ce qu'ils soient CONGELÉS avant d'être expédiés. Une fois congelés, les échantillons doivent être expédiés toujours congelés sur de la glace sèche. Suivre les directives d'emballage et Page 5
7 d'expédition qui se trouvent dans le Manuel LabCorp Lab et expédier le tube Cryovial de 10 ml et les six tubes Cryovial de 2 ml ensemble sur de la glace sèche. 17. Si les restes de cellules et le plasma sont congelés dans un congélateur à -20 C, -30 C ou -40 C, les échantillons doivent être expédiés avec de la glace sèche dans les 4 jours qui suivent. Si les échantillons sont entreposés dans un congélateur de -70 C à -90 C, ils peuvent être entreposés jusqu'à trois mois avant d'être expédiés avec de la glace sèche. PROBLÈMES DE PRÉLÈVEMENT ET DE PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS Si un article de la trousse d'échantillonnage est brisé ou gaspillé, le remplacer avec un article des fournitures en vrac. Des étiquettes à codes à barres supplémentaires se trouvent dans chaque trousse d'échantillonnage. Poser une des étiquettes supplémentaires avec code à barres de façon à ce qu'elle puisse facilement être lue (p. ex. dans la longueur pour un tube). Vérifier que le code à barres de la «Date de péremption du lot» ne soit pas recouvert. Inscrire les renseignements nécessaires sur l'étiquette. 4. CENTRIFUGATION Pour préparer le plasma acellulaire, les échantillons sanguins doivent être centrifugés. Utiliser le nomogramme du Manuel de laboratoire de LabCorp Lab pour calculer la vitesse (tr/min ou tours par minute) de centrifugation de l'échantillon. Afin de calculer la vitesse, vous devez connaître le rayon (la distance entre le centre du centrifugeur utilisé et le centre du tube à centrifuger) et la FCR (force centrifuge relative, également exprimée par la lettre «g» dans cette étude, g = 1 000). La vitesse et les tr/min ne doivent être calculés qu'une fois par centrifuge. Une fois que la vitesse a été déterminée, centrifuger le tube d'edta de 10 ml à g pendant 15 minutes. Ceci séparera le plasma des cellules. Vous devriez observer une couche distincte entre le plasma et les cellules nommée couche leuco-plaquettaire. Prendre soin de ne pas perturber la couche leucoplaquettaire. Il est critique que la couche leuco-plaquettaire demeure avec les restes de cellules aux fins d'extraction de l'adn chez LabCorp. Si vous n'observez pas une couche distincte entre les cellules sanguines, la couche leuco-plaquettaire et le plasma, veuillez centrifuger l'échantillon à nouveau. REMARQUE : Si vous avez besoin d une aide additionnelle, veuillez communiquer avec votre moniteur de projet LabCorp (consultez votre Manuel de laboratoire LabCorp). Page 6
8 5. ENTREPOSAGE DES ÉCHANTILLONS D'ADN et DE PLASMA Les échantillons de restes de cellules et de plasma doivent être congelés au centre avant d'être expédiés. Il vaut mieux que les échantillons soient congelés à des températures de -70 C à -90 C, OU à -20 C, -30 C ou -40 C jusqu'au moment d'expédition. Si un congélateur à -20 C, -30 C ou -40 C est utilisé, les échantillons, accompagnés de glace sèche, doivent être envoyés dans les 4 jours qui suivent. Si un congélateur à -70 C à -90 C est utilisé, les échantillons peuvent être entreposés de nouveau jusqu'à 3 mois avant d'être expédiés avec de la glace sèche. Pendant l'entreposage au congélateur, les échantillons doivent demeurer debout dans des sacs à échantillons pour matières contaminées. REMARQUE : Les restes de cellules et le plasma extrait seront expédiés ensemble avec de la glace sèche. AVANT L'EXPÉDITION 1. Vérifier que chacun des six tubes Cryovial de 2 ml et le tube Cryovial de 10 ml soient étiquetées. 2. Vérifier que chaque étiquette de tube Cryovial de 2 ml ait été rempli avec le numéro d'id du sujet et le numéro de répartition aléatoire POINT (le numéro de répartition aléatoire est le numéro qui se trouve sur le flacon du médicament à l étude). 3. Vérifier que l'étiquette du tube Cryovial de 10 ml ait été rempli avec le numéro d'id du sujet et le numéro de répartition aléatoire POINT. 6. EMBALLAGE ET EXPÉDITION DE L'ADN et DU PLASMA - Veuillez vous reporter au Manuel de laboratoire LabCorp pour plus de précisions. 1. Rassembler les matériaux d'expédition. 2. Remplir le carton d'expédition à moitié avec de la glace sèche. 3. Placer le sac à échantillons debout sur la glace sèche et remplir l'espace restant avec de la glace sèche. REMARQUE : Des échantillons de plusieurs sujets peuvent être expédiés dans un seul carton, mais doivent rester dans leur propre sac à échantillons individuel, accompagnés des formulaires de réquisition du laboratoire correspondants. 4. Fermer et sceller le carton d'expédition. Page 7
9 5 Veuillez vous reporter au Manuel de laboratoire LabCorp pour le service de messagerie sélectionné pour votre pays et les renseignements spécifiques pour remplir le bordereau d'expédition aérienne. Veuillez remplir le bordereau d'expédition aérienne au complet; le bordereau d'expédition aérienne porte déjà le nom du centre et les coordonnées de LabCorp. 6. Conserver une copie pour vos dossiers. 7. Veuillez consulter votre Manuel de laboratoire LabCorp afin de déterminer si une étiquette de glace sèche se trouve déjà sur votre carton d'expédition ou si vous devez poser l'étiquette d'expédition avec glace sèche fournie sur le carton d'expédition. 9. Expédier les échantillons à LabCorp Clinical Trials. Communiquer avec votre personne-ressource chez LabCorp Laboratory dont les coordonnées se trouvent dans votre Manuel de laboratoire LabCorp si vous avez des questions au sujet des expéditions. RAPPEL : Les échantillons peuvent uniquement être expédiés à LabCorp Clinical Trials DU LUNDI AU JEUDI II. PROBLÈMES/ERREURS COURANTS Aspiration de la couche leuco-plaquettaire lors de l'extraction du plasma. Si vous aspirez accidentellement une partie de la couche leuco-plaquettaire dans l'une des pipettes, en faire note sur le formulaire de réquisition du laboratoire. Ceci pourrait affecter l'exactitude des niveaux de biomarqueurs. Séparation insuffisante des cellules, de la couche leuco-plaquettaire et du plasma Centrifuger l'échantillon à nouveau. Glace sèche insuffisante Ceci pourrait entraîner la fonte des échantillons et affectera l'exactitude des niveaux de biomarqueurs. III. ADRESSE DE LABCORP POUR L'EXPÉDITION D'ÉCHANTILLONS Consultez votre Manuel de laboratoire LabCorp. Page 8
10 IV. ADRESSE DE LA CLINIQUE MAYO POUR L'ENTREPOSAGE DES ÉCHANTILLONS La clinique Mayo est responsable de l'entreposage de l'adn et du plasma à long terme. V. ANNEXES NE PAS EXPÉDIER LES ÉCHANTILLONS DIRECTEMENT À LA CLINIQUE MAYO. Clinique Mayo Destinataire : Owen Ross, PhD 4500 San Pablo Road Birdsall Room 225 Jacksonville, FL Téléphone : (904) Page 9
11 Annexe A TUBE D'EDTA AU BOUCHON LAVANDE DE 10 ML POUR ÉCHANTILLON DE SANG Page 10
12 Annexe B TUBE CRYOVIAL DE 10 ML POUR LES RESTES DE CELLULES ET LA COUCHE LEUCO-PLAQUETTAIRE Code à barres préimprimé Prendre soin de ne pas recouvrir le code à barres Remplir l'étiquette préposée avec : L'ID du sujet POINT (SubjID) Le numéro de répartition aléatoire (Random#) Étiquette d'extraction d'adn préposée Code à barres préimprimé Prendre soin de ne pas recouvrir le code à barres Remplir l'étiquette préposée avec : L'ID du sujet POINT (SubjID) Le numéro de répartition aléatoire (Random#) Étiquette d'extraction d'adn préposée Page 11
13 Annexe C DIAGRAMME D'UN ÉCHANTILLON DE SANG APRÈS CENTRIFUGATION Remarque : Veiller à ne pas perturber la couche leuco-plaquettaire entre les cellules sanguines et le plasma. Page 12
14 Annexe D TUBE CRYOVIAL DE 2 ML POUR PLASMA À l'aide de la pipette qui se trouve dans la trousse d'échantillonnage, transférer 0,7 ml de plasma du tube d'edta au bouchon lavande à chacun des 6 tubes Cryovial de 2 ml pour plasma. Remplir jusqu'à la ligne de 0,7 ml dans les tubes Cryovial pour plasma. Remarque : Prendre soin de ne pas perturber la couche leuco-plaquettaire entre les cellules sanguines et le plasma. Si une partie de la couche leuco-plaquettaire est aspirée avec le plasma, le noter au bas du formulaire de réquisition du laboratoire. Consulter l'annexe C pour le diagramme d'un échantillon de sang après centrifugation, avec une couche leuco-plaquettaire. Page 13
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