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1 CATT

2 CATT - matériel Kit CATT, boîte de réactifs Antigène CATT (2,5 ml / flacon, 10 flacons) Tampon CATT (30 ml / flacon) Contrôle positif (0,5 ml / flacon) Contrôle négatif (0,5 ml / flacon) KIT CATT, accessoires Tubes capillaires héparinés Cartes plastifiées Tiges Mini-poire 1 seringue (2,5 ml) Compte-gouttes

3 CATT sur sang total - matériel Autre matériel nécessaire Gants Agitateur électrique Carte «Scores de référence» (sur demande) Papier hygiénique Coton & désinfectant Lancettes, Portoir pour micro-capillaires Echantillon à examiner Sang sur anticoagulant (sang capillaire ou sang veineux)

4 CATT Placement et vitesse de l'agitateur: S'assurer que l'agitateur est placé sur une surface horizontale Ajuster la vitesse de l agitateur à 60 rotations par minute Vérifiez périodiquement la vitesse de l'agitateur.

5 CATT Reconstitution de l antigène CATT A l aide de la seringue, ajouter 2,5 ml de tampon CATT à un flacon d antigène lyophilisé. Agiter immédiatement Placer un compte-gouttes sur le flacon. L antigène est prêt à l emploi. Avant chaque emploi, agiter la suspension. Garder l antigène à l abri du soleil et de la poussière.

6 CATT - Test de qualité Reconstituer le contrôle positif et négatif avec 0,5 ml de tampon. Placer un compte-gouttes sur chaque flacon. Déposer 1 goutte de réactif Déposer 1 goutte du contrôle négatif dans le premier cercle de la carte. Dans le deuxième cercle de la carte, déposer 1 goutte du contrôle positif. Mélanger la goutte de réactif et la goutte de contrôle Mettre la carte sur l agitateur et laisser-la tourner pendant 5 minutes. Après les 5 minutes, lire les réactions. + -

7 CATT sur sang total Prise de sang capillaire par piqûre du doigt Piquer avec une microlancette le doigt désinfecté. Essuyer la première goutte de sang. Remplir un tube capillaire hépariné sur environ ¾ de sa longueur. Incliner le tube capillaire à plusieurs reprises. Déposer le tube capillaire horizontalement dans un portoir.

8 CATT sur sang total Réaction d'agglutination Déposer 1 goutte du réactif CATT Ajouter 1 goutte de sang du capillaire Mélanger le réactif et le sang avec la tige Mettre la carte sur l agitateur et laisser-la tourner pendant 5 minutes.

9 CATT sur sang total Lecture Après les 5 minutes d agitation, lire les résultats avant d enlever la carte de l agitateur. Lire les résultats: voire la carte «Scores de référence» négatif positif

10 CATT sur dilutions - matériel Autre matériel nécessaire Gants Agitateur électrique Carte «Scores de référence» (sur demande) Papier hygiénique Pipette µl Embouts jaunes Microplaque de 96 puits (8 x 12) Echantillon à examiner Titration: sérum ou plasma

11 Préparation des dilutions Prendre une microplaque de 96 puits (8 x 12) Prélever 50 µl de tampon Déposer les 50 µl prélevés dans le premier puits d une rangée (1) Sans changer d'embout procéder ainsi pour les cinq puits suivants Au total 6 puits dans une rangée contiendront chacun 50 µl de tampon

12 Préparation des dilutions Prélever 50 µl de plasma ou sérum. Déposer ces 50 µl de plasma dans le premier puits de la rangée. Mélanger. Prélever 50 µl de la dilution dans le premier puits et déposer-les dans le deuxième puits. Mélanger. Prélever 50 µl du deuxième puits et déposer-les dans le troisième puits. Mélanger Prendre 50 µl et déposez-les dans le quatrième puits. Mélanger. Prendre 50 µl et déposez-les dans le cinquième puits. Mélanger. Prendre 50 µl pour déposer dans le dernier puits. Mélanger. Vous avez maintenant 6 puits contenant chacun les dilutions suivantes : Le premier puits: 1/2 Le 2ème puits : 1/4 Le 3ème puits: 1/8 Le 4ème puits: 1/16 Le 5ème puits: 1/32 Le 6ème puits: 1/64

13 CATT sur plasma dilué Déposer une goutte de réactif sur les 5 cercles d'une rangée. Prélever 25 µl de la dilution 1/64 et les déposer sur le cinquième cercle. Prélever 25 µl de la dilution 1/32 et les déposer sur le quatrième cercle. Prélever 25 µl de dilution 1/16 et déposer sur le 3ème cercle, puis Prélever 25 µl de dilution 1/8 et déposer sur le 2ème cercle, puis Prélever 25 µl de dilution 1/4 et déposer sur le 1er cercle. Mélanger le réactif et le plasma dilué avec la tige plastique. Mettre la carte sur l agitateur et laisser-la agiter pendant 5 minutes.

14 Lecture d'agglutination et interprétation Après les 5 minutes, lire immédiatement les réactions. Le titre du plasma correspond à la dernière dilution qui est positive / /8 ++ 1/16 + 1/32-1/64 Dans cet exemple on dit que le plasma est positif au 1/4, 1/8 et 1/16, 1/32 et négatif au 1/64. Son titre est donc de 1/32.

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