Journée Nutrition et Cancer CLARA NACRe 18 juin 2014

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1 Journée Nutrition et Cancer CLARA NACRe 18 juin 2014 Lauriane Bougaret, Laetitia Delort, Hermine Billard, Tiphanie Chaput, Camille LeHuédé, Ali Mojallal, Odile Damour, Marie Paule Vasson, Florence Caldefie Chézet. Equipe ECREIN UNH, UMR 1019 INRA UdA Oncostarter CLARA

2 Introduction Matériel et méthodes Résultats Conclusion

3 Introduction Cancer du sein Obésité Sécrétions adipocytaires et cancer du sein Etude GLOBOCAN, 2008; INCa, 2013 Données épidémiologiques. Au niveau mondial : Cancer le plus fréquent chez la femme 1 ère cause de décès par cancer chez la femme. En France : 2 ème incidence la plus forte en Europe 1 ère cause de décès par cancer chez la femme Incidence

4 Introduction Cancer du sein Obésité Sécrétions adipocytaires et cancer du sein Etude GLOBOCAN, 2008; INCa, 2013 Données épidémiologiques. Au niveau mondial : Cancer le plus fréquent chez la femme 1 ère cause de décès par cancer chez la femme. En France : 2 ème incidence la plus forte en Europe 1 ère cause de décès par cancer chez la femme Incidence Facteurs de risques L obésité : Accumulation excessive de masse grasse ayant un impact néfaste sur la santé (OMS) Facteur de risque convaincant après la ménopause RR= 1,05, IC 95% = 1,03 1,07 (WCRF, 2008) (ObEpi, 2012)

5 Introduction Cancer du sein Obésité Sécrétions adipocytaires et cancer du sein Obésité et cancer du sein Situation d obésité pour les femmes ménopausées 1) Augmente le risque de développer un cancer du sein après la ménopause (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 2) Augmentation du risque de récidives (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 3) Augmentation de mortalité (Chlebowski et al., 2002) «Million women study» RR de cancer 1,5 1 0,5 1,00 1,10 1,21 1, ,5 24, ,4 27,5 29,5 > 30 (Reeves et al., 2007) IMC

6 Introduction Cancer du sein Obésité Sécrétions adipocytaires et cancer du sein Obésité et cancer du sein Situation d obésité pour les femmes ménopausées 1) Augmente le risque de développer un cancer du sein après la ménopause (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 2) Augmentation du risque de récidives (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 3) Augmentation de mortalité (Chlebowski et al., 2002) Cellules mammaires Hypothèse Implication locale Implication systémique ADIPOKINES TNFα Tissu Adipeux ZAG Interleukine 6 Dubois et al., Leptin induces a proliferative response in breast cancer cells but not in normal breast cells, Nutr and cancer, 2014 Jarde et al., Involvement of adiponectin and leptin in breast cancer: clinical and in vitro studies. Endocr Relat Cancer. 2009

7 Introduction Cancer Cancer du du sein sein Sécrétions adipocytaires et et cancer cancer du du sein sein FORMATION UNIVERSITAIRE Obésité Obésité et cancer du sein Situation d obésité pour les femmes ménopausées 1) Augmente le risque de développer un cancer du sein après la ménopause (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 2) Augmentation du risque de récidives (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 3) Augmentation de mortalité (Chlebowski et al., 2002) ADIPOKINES LIEN ENTRE SURCHARGE PONDERALE ET THERAPIE??

8 Introduction Cancer Cancer du du sein sein Sécrétions adipocytaires et et cancer cancer du du sein sein FORMATION UNIVERSITAIRE Obésité Obésité et cancer du sein Situation d obésité pour les femmes ménopausées 1) Augmente le risque de développer un cancer du sein après la ménopause (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 2) Augmentation du risque de récidives (Chlebowski et al., 2002; Calle, 2003) 3) Augmentation de mortalité (Chlebowski et al., 2002) ADIPOKINES LIEN ENTRE SURCHARGE PONDERALE ET THERAPIE?? Les patientes obèses recevant une chimiothérapie auraient moins de chance de guérir que les patientes de poids normal, et présenteraient donc un taux de mortalité plus élevé. Litton Jk et al. J Clin Oncol Le changement de poids corporel (>5%) est positivement corrélé à une augmentation des risques de récidive et de mortalité. Thivat E. et al. BMC Cancer Le tamoxifène augmente le taux de leptine sérique chez les femmes ménopausées souffrant d un cancer du sein. Marttunen et al, Maturitas, 2000

9 Objectifs Évaluer les interactions entre une adipokine spécifique la leptine ou sécrétions adipocytaires et traitement anticancéreux d hormonothérapie Oncostarter CLARA

10 Objectifs Évaluer les interactions entre une adipokine spécifique la leptine ou sécrétions adipocytaires et traitement anticancéreux d hormonothérapie 80% des patientes présentent un cancer hormonodépendant Inhibiteurs d aromatase : Létrozole, Anastrozole Anti œstrogènes : Tamoxifène,Fulvestrant Œstrogènes ER Tamoxifène Réduction de la prolifération cellulaire

11 Introduction Matériel et méthodes Résultats Conclusion Impact de la Leptine sur l efficacité du traitement par le Tamoxifène

12 Introduction Matériel et méthodes Ensemencement des cellules, traitement par la leptine ±Tamoxifène J0 J1 J5 Ensemencement des cellules MCF 7, MCF10a ou 184B5 MCF 7 : cellules cancéreuses MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques 184B5 : cellules saines

13 Introduction Matériel et méthodes Ensemencement des cellules, traitement par la leptine ±Tamoxifène J0 J1 J5 Ensemencement des cellules MCF 7, MCF10a ou 184B5 MCF 7 : cellules cancéreuses MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques 184B5 : cellules saines J0 J1 J5 Leptine 10 ng/ml 100 ng/ml 1000 ng/ml Concentration plasmatique : Considine, 1996 effet endocrine Concentration dans les fluides interstitiels : Ando, 2012 effet paracrine

14 Introduction Matériel et méthodes Ensemencement des cellules, traitement par la leptine ±Tamoxifène J0 J1 J5 Ensemencement des cellules MCF 7, MCF10a ou 184B5 MCF 7 : cellules cancéreuses MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques 184B5 : cellules saines J0 J1 J5 Leptine 10 ng/ml 100 ng/ml 1000 ng/ml Tamoxifène : 3 µm DMSO (Témoin solvant)

15 Introduction Matériel et méthodes Ensemencement des cellules, traitement par la leptine ±Tamoxifène J0 J1 J5 Ensemencement des cellules MCF 7, MCF10a ou 184B5 MCF 7 : cellules cancéreuses MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques 184B5 : cellules saines J0 J1 J5 Leptine 10 ng/ml 100 ng/ml 1000 ng/ml Tamoxifène : 3 µm DMSO (Témoin solvant) La leptine augmente la prolifération des cellules mammaires cancéreuses de 15%

16 Introduction Matériel et méthodes Ensemencement des cellules, traitement par la leptine ±Tamoxifène J0 J1 J5 Ensemencement des cellules MCF 7, MCF10a ou 184B5 MCF 7 : cellules cancéreuses MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques 184B5 : cellules saines J0 J1 J5 Leptine 10 ng/ml 100 ng/ml 1000 ng/ml Tamoxifène : 3 µm DMSO (Témoin solvant) J0 J1 J5 Test de fluorescence des cellules métaboliquement actives RÉSAZURINE Fluoroskan Ascent FL

17 Introduction Matériel et méthodes Résultats 2) Leptine et Tamoxifène : Cellules MCF 7 MCF 7 MCF 7 : cellules cancéreuses Pourcentage de prolifération *** *** *** $ * Control Tx 3 µm Lep 10 ng/ml + Tx 3 µm Lep 100 ng/ml + Tx 3 µm Lep 1000 ng/ml + Tx 3 µm La leptine semble diminuer significativement l efficacité du tamoxifène * p < 0,05; *** p < 0,001 Tx 3 µm +/ Lep vs Control; $ p < 0,05 Lep 1000 ng/ml + Tx 3 µm vs Tx 3 µm (n=6, Test de Student).

18 Introduction Matériel et méthodes Résultats 2) Leptine et Tamoxifène : Cellules MCF10a MCF10a MCF 10a : cellules non cancéreuses fibrokystiques L action synergique de la leptine et du Tamoxifène majore la prolifération cellulaire Pourcentage of proliferation $ $$$ * *** *** Control Tx 3 µm Lep 10 ng/ml + Tx 3 µm Lep 100 ng/ml + Tx 3 µm Lep 1000 ng/ml + Tx 3 µm * p < 0,05; *** p < 0,001 Lep +/ Tx 3 µm vs Control; $ p < 0,05; $$$ p < 0,01 Lep 100 or 1000 ng/ml + Tx 3 µm vs Tx 3 µm (n=6, Test de Student).

19 Introduction Matériel et méthodes Résultats 2) Leptine et Tamoxifène : Cellules 184B5 184B5 184B5 : cellules saines Pourcentage of proliferation *** *** *** *** Control Tx 3 µm Lep 10 ng/ml + Tx 3 µm Lep 100 ng/ml + Tx 3 µm Lep 1000 ng/ml + Tx 3 µm 0 ***p<0,001lep+/ Tx 3 µm vs Control; $ p < 0,05; $$$ p < 0,01 Lep 100 or 1000 ng/ml + Tx 3 µm vs Tx 3 µm (n=6, Test de Student).

20 Introduction Matériel et méthodes Résultats Conclusion Impact des sécrétions adipocytaires sur l efficacité du traitement par le Tamoxifène hasc de femme d IMC = 27 (surpoids selon l OMS) hasc de femme d IMC = 20 (poids normal) INFLUENCE DES SECRETIONS ADIPOCYTAIRES hasc de femme d IMC = 30 (obésité selon l OMS) Cellules mammaires hasc : Human Adipocytes Stem Cells Collaboration avec la banque de cellules et tissus, Hôpital E. Herriot, Lyon

21 Introduction Matériel et méthodes 1) Ensemencement et Différenciation en Adipocytes Matures hasc20, hasc27 ou hasc30 Différenciation sur 18 jours AM20, AM27 ou AM30 Insert 5000 cellules / cm2 Membrane semi perméable (porosité 0,4 µm) Plaque 12 puits J0 J3 J18 Milieu DMEM/F12 supplémenté IBMX + IBMX AM20, 27 ou 30 : Adipocytes Matures issus de femmes d Indice de Masse Corporelle 20, 27 ou 30 hasc : Human Adipocytes Stem Cells Lequeux C et al. Optimization of a culture medium for the differentiation of preadipocytes into adipocytes in a monolayer. Biomed Mater Eng.2009;19(4 5):

22 Introduction Matériel et méthodes 1) Ensemencement et Différenciation en Adipocytes Matures hasc20, hasc27 ou hasc30 Différenciation sur 18 jours AM20, AM27 ou AM30 Insert 5000 cellules / cm2 Membrane semi perméable (porosité 0,4 µm) Plaque 12 puits J0 J3 J18 Milieu DMEM/F12 supplémenté IBMX + IBMX Vérification de la différenciation Coloration à l huile rouge * qrt PCR J0 J18 Obj x10, Microscope (Olympus, France); caméra (Moticam 2000), logiciel Image J Variation d expression génique en unité arbitraire * * FASn LHS PCNA * p<0,01 AM vs PA, test de Student sur séries appariées, logiciel Statview AM20, 27 ou 30 : Adipocytes Matures issus de femmes d Indice de Masse Corporelle 20, 27 ou 30 hasc : Human Adipocytes Stem Cells Lequeux C et al. Optimization of a culture medium for the differentiation of preadipocytes into adipocytes in a monolayer. Biomed Mater Eng.2009;19(4 5):

23 Introduction Matériel et méthodes 1) Ensemencement et Différenciation en Adipocytes Matures hasc20, hasc27 ou hasc30 Différenciation sur 18 jours AM20, AM27 ou AM30 Insert 5000 cellules / cm2 Membrane semi perméable (porosité 0,4 µm) Plaque 12 puits J0 J3 J18 Milieu DMEM/F12 supplémenté IBMX + IBMX qrt PCR AM30 vs AM20 R p Leptin Ob R Adiponectin CYP VEGF Mémoire métabolique des AM? AM20, 27 ou 30 : Adipocytes Matures issus de femmes d Indice de Masse Corporelle 20, 27 ou 30 hasc : Human Adipocytes Stem Cells Lequeux C et al. Optimization of a culture medium for the differentiation of preadipocytes into adipocytes in a monolayer. Biomed Mater Eng.2009;19(4 5):

24 Introduction Matériel et méthodes 2) Ensemencement cellules MCF 7 et 184B5 et traitement par le Tx CO CULTURE J18 Diff = J0 CC J1 CC J5 CC 5000 cellules / cm² Cellules mammaires AM Cellules mammaires AM20 ou AM27 ou AM30 co cultivés en présence des cellules mammaires tumorales (MCF 7) ou saines (184B5) J18 Diff = J0 CC J1 CC J5 CC Traitement à J1 Tamoxifène : 12,5 µm DMSO (Témoin solvant) J18 Diff = J0 CC J1 CC J5 CC Test de fluorescence des cellules métaboliquement actives RÉSAZURINE Fluoroskan Ascent FL

25 Introduction Matériel et méthodes Résultats Conclusion

26 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène * * DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Co culture «cellules mammaires cellules adipocytaires» 1) augmente la prolifération des cellules MCF 7, notamment en situation de surcharge pondérale 2) diminue significativement l efficacité du tamoxifène MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées).

27 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène *** DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Co culture «cellules mammaires cellules adipocytaires» 1) augmente la prolifération des cellules MCF 7, notamment en situation de surcharge pondérale 2) diminue significativement l efficacité du tamoxifène MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées).

28 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène ** ** DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Co culture «cellules mammaires cellules adipocytaires» 1) augmente la prolifération des cellules MCF 7, notamment en situation de surcharge pondérale 2) diminue significativement l efficacité du tamoxifène MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées).

29 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules 184B5 après traitement par Tamoxifène ** ** ** DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm 184B5 S 184B5 CC AM20 184B5 CC AM27 184B5 CC AM30 MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées).

30 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules 184B5 après traitement par Tamoxifène ** DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm 184B5 S 184B5 CC AM20 184B5 CC AM27 184B5 CC AM30 MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées).

31 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules MCF 7 après Traitement par Tamoxifène DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm MCF 7 S MCF 7 CC AM20 MCF 7 CC AM27 MCF 7 CC AM30 Fluorescence corrigée (UA) Prolifération des cellules 184B5 après traitement par Tamoxifène ** * * DMSO éq Tamoxifène 12,5 µm 184B5 S 184B5 CC AM20 184B5 CC AM27 184B5 CC AM30 MCF 7 ou 184B5 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées seules MCF 7 CC AM20 / 184B5 CC AM20 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 20 MCF 7 CC AM27 / 184B5 CC AM27 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 27 MCF 7 CC AM30 / 184B5 CC AM30 : Cellules MCF 7 ou 184B5 ensemencées en co culture avec des Adipocytes Matures issus de femmes d IMC 30 Moyenne ±ESM n = 3, * p<0,05, ** p<0,01 et *** p<0,001; Test de Student sur séries appariées). Les AM, en situation de surcharge pondérale et d obésité : 1) augmentent la prolifération des cellules mammaires et 2) diminuent significativement l efficacité du Tamoxifène

32 Introduction Matériel et méthodes Résultats 1) Sécrétions adipocytaires et Tamoxifène Cellules MCF * * R (quantité) 3 2 R (quantité) Analyse des Sn en cours : leptine, adiponectine, 3 Il-6, Il-8, Il-1β, TNF-α and HGF (Luminex MAP Kit) 2 MCF 7 CC AM20 + Tx MCF 7 CC AM30 + Tx 1 0 * * Leptine Ob R Era CYP Leptine Ob R Era CYP19 n = 3, * p<0,05; Avec Tx vs sans Tx Test de Student sur séries appariées. n = 3, p<0,05; Avec AM + Tx vs Tx Test de Student sur séries appariées. En cours d analyse (Cellules MCF 7 et 184B5)

33 Introduction Matériel et méthodes Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit mime les cellules normales ou tumorales au contact direct de leur microenvironnement adipocytaire Cellules souches adipocytaires (IMC20 ou 30) ( cellules/cm²) Fibroblastes ( cellules/cm²) Cellules cancéreuses mammaires (MCF7) Cellules non cancéreuses mammaires (184B5) 1 semaine 3 semaines 1 semaine Substrat dermique (collagène glycosaminoglycanechitosane) Derme équivalent adipeux Peau reconstruite adipeuse (DEAR)

34 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : Immunohistochimie Ki67 Résultats Témoin Tx ++ MCF 7 prolif Témoin + Tx +

35 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : Immunohistochimie Ki67 Résultats Témoin Tx ++ prolif Témoin + Tx + MCF 7 AM20 + Tx ++ Présence AM20 : prolif AM30 + Tx +++ Présence AM30 : prolif

36 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : qrt PCR 38 gènes : Leptine, Ob R Adiponectine, AdipoR1, AdipoR2 BAX, BCL2 BRCA1 MMP2,MMP9 MYC, PGR PPARA, PPARG STAT3, TNF Cellules traitées avec le Tx TP53, GSR, PTGS2,HMOX1 GPX1, GPX4, VEGFA, KDR, THBS1, HIF1A, CDH1, PCNA, ERBB2, AURKA, BIRC5, CCNB1, MYBL2, GRB7, BAG1, MMP11, NME1, CA9 Analyse en composante principale Cellules non traitées avec le Tx

37 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : qrt PCR 38 gènes : Leptine, Ob R Adiponectine, AdipoR1, AdipoR2 BAX,BCL2 BRCA1 MMP2,MMP9 MYC, PGR PPARA, PPARG STAT3, TNF TP53, GSR, PTGS2,HMOX1 GPX1, GPX4, VEGFA, KDR, THBS1, HIF1A, CDH1, PCNA, ERBB2, AURKA, BIRC5, CCNB1, MYBL2, GRB7, BAG1, MMP11, NME1, CA9 qrt PCR Analyse en composante principale Cellules cultivées sans microenvironnement adipocytaire Cellules cultivées avec microenvironnement adipocytaire (IMC20) Cellules cultivées avec microenvironnement adipocytaire (IMC30)

38 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : qrt PCR Analyse en composante principale Gènes de prolifération, facteurs de transcription (PCNA, Cycline D1, BAG1, BAX ) Cellules traitées avec le Tx Cellules non traitées avec le Tx Cellules cultivées avec microenvironnement adipocytaire en situation d obésité (AM30)

39 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : qrt PCR Analyse en composante principale Gènes de prolifération, facteurs de transcription (PCNA, Cycline D1, BAG1, BAX ) Cellules traitées avec le Tx Angiogenèse (VEGF, HIF ) Cellules non traitées avec le Tx

40 Introduction Matériel et méthodes Résultats Modèle de culture 3D de derme équivalent adipeux reconstruit En cours d analyse : exemple de résultats préliminaires : qrt PCR Analyse en composante principale Gènes de prolifération, facteurs de transcription (PCNA, Cycline D1, BAG1, BAX ) Angiogenèse (VEGF, HIF ) Cellules cultivées sans microenvironnement adipocytaire ou avec des AM20 Cellules cultivées avec microenvironnement adipocytaire en situation d obésité (AM30)

41 Introduction Matériel et méthodes Résultats Conclusion Obésité Excès de TA Modulation Concentrations Adipokines LEPTINE PARACRINE Augmentation des taux de mortalité et de récidive du cancer mammaire en situation d obésité Tamoxifène Cellules tumorales ENDOCRINE

42 Journée Nutrition et Cancer CLARA NACRe 18 juin 2014 Remerciements à tous les membres de mon équipe Equipe ECREIN UNH, UMR 1019 INRA UdA

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