Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya

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Brian François
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Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya Amandine Guidez, Romuald Carinci, Jean Issaly, Pascal Gaborit, Emma

1 Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya Amandine Guidez, Romuald Carinci, Jean Issaly, Pascal Gaborit, Emma Ferrero, Isabelle Dusfour, Vanessa Ardillon, Sébastien Briolant & Romain Girod 4emes Journées interrégionales de veille sanitaire des Antilles-Guyane novembre 2015, Schoelcher,

2 Chikungunya et problématique de la lutte antivectorielle Chikungunya en Guyane introduction en février 2014 sur le territoire circulation sous forme épidémique jusqu en juin 2015 sur l île de Cayenne, secteur de Kourou toujours en phase épidémique seul vecteur reconnu actuellement: Aedes aegypti, omniprésent aucun vaccin ni traitement spécifique lutte antivectorielle +++ Problématique de la LAV moyens humains et financiers des opérateurs de démoustication limités nécessité d une action ciblée aux quartiers et périodes les plus à risque besoin d outils et méthodes efficaces évaluation du risque de transmission sur le terrain 2 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

3 Evaluation du risque de transmission: des limites! indicateurs densités de femelles aggressives pour l homme + longévité moyenne des populations de femelles densités de femelles épidémiologiquement dangeureuses ++ prévalence de l infection virale dans les populations de femelles densités de femelles infectantes +++ problématique capture d un nombre très important de moustiques sur le terrain (taux d infection rarement supérieurs à 1 pour 1000) maintien des moustiques en vie jusqu à leur traitement et/ou respect de la chaine du froid (fragilité de l ARN viral et détection par les techniques de biologie moléculaire). modes opératoires difficilement compatible avec les capacités logistiques des opérateurs de lutte. 3 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

4 Evaluation du risque de transmission: une alternative? alternative originale: systèmes de piégeage couplés à l utilisation de substrats sucrés Principe: - les moustiques viennent se nourrir sur le substrat sucré et déposent le virus contenu dans leur salive ou leurs feces - substrat = cartes FTA (Whatman) qui ont la propriété de préserver les acides nucléiques pendant plusieurs jours / semaines, à température ambiante. - virus détecté par méthodes de biologie moléculaire. Stratégie : exploitation du comportement d alimentation sucrée des moustiques, au cours duquel les virus sont sécrétés avec la salive ou excrétés avec les fecès. 4 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

5 Objectifs adapter ces techniques à la détection précoce de la circulation du virus du chikungunya dans les quartiers de l île de Cayenne. proposer une nouvelle méthode de surveillance pour l appréciation du risque de transmission virale optimisation dans le temps et dans l espace des actions de lutte antivectorielle 5 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

6 Méthodologie générale: deux étapes mises au point au laboratoire adaptation de pièges et essais de gorgement - validation du gorgement effectif d Ae. aegypti sur carte FTA imprégnées de miel, recherche de la concentration optimale - modification/adaptation de pièges BG-sentinels et pondoirs / hébergement de la carte FTA mise au point de la détection du CHIKV sur cartes FTA - validation de technique d extraction/purification/amplification des ARN viraux 6 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

7 Méthodologie générale: deux étapes mise à l épreuve sur le terrain déploiement des pièges sur le terrain: 6 quartiers de l île de Cayenne - suivi = 3 mois (déc fév. 2015) - relève hebdomadaire: 18 BG-sentinel + 18 pondoirs traitement des échantillons : - cartes FTA -80 C, moustiques des BG-sentinels triés, identifiés, sexés et poolés -80 C, œufs des pondoirs mis en eau et adultes émergeants - 80 C - détection CHIKV: extraction kits commerciaux (cartes FTA) ou TRIzol (moustiques), RT-PCR en temps réel adaptée de Panning et al. 7 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

8 Résultats mises au point au laboratoire adaptation des pièges et essais de gorgement - taux de gorgement satisfaisants à J0 tout autant qu à J7 après imprégnation de miel à la concentration de 1,0 g/l. - 1 prototype piège BG-sentinel modifié retenu - taux de gorgement dans les pièges de 80%, 90%, 86% et 70% respectivement à J0, J4, J6 et J7 après imprégnation. - 1 prototype pondoir retenu détection du CHIKV sur carte FTA - pas d interférence de la présence de miel sur les cartes FTA sur la détection du CHIKV 8 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

Piège BG-sentinel modifié Filet collecteur

9 Piège BG-sentinel modifié Filet collecteur Carte FTA Tube collecteur Sytsème d'aspiratio n BG-Lure 9 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

10 Piège-pondoir modifié carte FTA macération de cosses de haricots 10 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

11 Résultats mise à l épreuve sur le terrain 446 / 468 cartes FTA exploitables - pondoirs: 219 / 234 cartes FTA exploitables (93,6%) - pièges BG-sentinels: 227 / 234 cartes FTA exploitables (97,9%) 2 cartes FTA positives (relevées dans des pondoirs) 1 produit d amplification séquencé: séquence présentant 100% d identité pour le CHIKV, signant ainsi la présence du virus sur la carte FTA. œufs des pondoirs des 2 cartes FTA détectées positives mis en eau: 190 moustiques mâles et femelles émergés aucun moustique positif moustiques dont (47,8%) Ae. aegypti collectés dans les pièges BG-sentinel: Ae. aegypti femelles testées aucun moustique positif 11 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

12 Discussion mise au point deux systèmes de piégeage adaptés: un piège BG-sentinel modifié et un pondoir modifié détection effective du CHIKV sur 2 cartes FTA installées dans deux pondoirs modifiés transmission verticale pas mise en évidence pondoir modifié simple de conception et d utilisation: nombre de cartes FTA exploitables après 1 semaine d exposition sur le terrain satisfaisant pas de détection du CHIKV sur cartes FTA installées dans les pièges BG-sentinel modifiés mais aucun moustique positif pas de remise e cause de la sensibilité de la détection virale à partir des cartes FTA 12 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

13 Conclusion et perspectives Conclusions dépistage précoce du CHIKV, non pas dans les moustiques, mais dans la salive et les fecès déposés par les moustiques lors de leurs repas de jus sucré = alternative intéressante. outils et méthodes développés = détection du CHIKV sur des cartes FTA imprégnées de miel installées dans des pièges déployés sur le terrain potentiel important en vue d une utilisation en surveillance opérationnelle Perspectives études menées en LSB3 avec des cartes FTA présentées à des moustiques infectés artificiellement avec le virus : seuil de détection du virus, relation avec la transmission? application à la détection précoce de la circulation des virus de la dengue ou encore du virus Zika? 13 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,

14 Remerciements - à l ensemble des particuliers résidents dans les différents quartiers de l île de Cayenne et qui ont accueilli les équipes chargées des investigations entomologiques - aux collègues qui ont participé aux discussions initiales qui ont abouties à la mise en œuvre des ces travaux: Christophe Paupy, Patrick Mavingui, Albin Fontaine, Florence Fouque & Manuel Etienne. Ces travaux ont bénéficié : - d une subvention spécifique de l INSERM IMMI (Convention d aide à la recherche n IMMI_ du 18 juillet 2014) - de subventions de l ARS de Guyane (Conventions de prestation de santé publique n FIR/ARS/2014/91 du 18 juillet 2014 and n FIR/ARS/2015/68 du 07 août 2015) Je vous remercie pour votre attention! 14 - Guidez et al. - Utilisation de pièges couplés à des appâts sucrés pour la détection de la circulation du virus Chikungunya - JIRVS-AG - novembre 2015,