Anti-TPO B2K472 SYSTEM. Anti-TPO /R1 2K47

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1 SYSTEM F Anti-TPO 2K47 B2K /R1 Anti-TPO Lire attentivement cette notice avant d'utiliser le dosage et suivre scrupuleusement les instructions. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es Abbott / Printed in Germany / ARCHITECT Anti-TPO Juillet 2005 L gende des symboles utilis s R f rence Num ro de lot Pour diagnostic in vitro Date d'expiration Conserver entre 2 et 8 C Cupules r actionnelles Godets- chantillons Consulter les instructions d'utilisation Septum Produit par Fisher Scientific, 8365 Valley Pike, Middletown, VA 22645, USA pour Abbott Laboratories, Abbott Park, IL 60064, USA Num ro de s rie Mandataire Bouchons de remplacement Lot de r actifs CD-ROM de dosages ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany ABBOTT Diagnostics Division 1 Fabricant L'explication compl te des symboles utilis s pour la d nomination des composants se trouve au paragraphe "R actifs". Num ro de contr le

2 DENOMINATION ARCHITECT Anti-TPO DOMAINE D'APPLICATION ARCHITECT Anti-TPO est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) sur l'architect i pour la d termination quantitative des autoanticorps de type IgG dirig s contre la thyroperoxydase (anti-tpo) dans le s rum et le plasma humains. Le dosage ARCHITECT Anti-TPO constitue une aide dans le diagnostic des maladies thyro diennes. RESUME ET EXPLICATION DU TEST En 1957, Trotter et coll. 1 ont t les premiers d montrer que de nombreux patients atteints de la thyro dite d Hashimoto pr sentaient des concentrations sanguines d celables en autoanticorps dirig s contre un antig ne thyro dien distinct de celui de la thyroglobuline. Cette d couverte a t confirm e en 1958 par Roitt et Doniach 2 et l'antig ne en question a t appel antig ne microsomal thyro dien. Depuis, il a t d montr que la plupart des autoanticorps dirig s contre l'antig ne microsomal thyro dien reconnaissaient la thyroperoxydase (TPO). 3 La TPO est une enzyme glycoprot ique li e la membrane dont le poids est de 107 kd environ. In vivo, elle participe la iodation de la tyrosine permettant la synth se de T 3 et T 4. 4 La r activit autoimmune contre la TPO est pr sum e tre de nature polyclonale et h t rog ne, avec un minimum de 6 d terminants antig niques reconnus, comprenant des pitopes conformationnels et lin aires. 5,6 En outre, la proportion de chaque type (G ou M) ou sous-type (G1 G4) d'immunoglobulines ainsi que leur affinit varient largement d'un patient 7,8 Contrairement aux autoanticorps dirig s contre la thyroglobuline (anti-tg), ceux dirig s contre la TPO fixent le compl ment, 9 sont potentiellement nocifs et peuvent avoir un r le pathog ne dans la maladie thyro dienne autoimmune (destructive). 10,11 Dans la majorit des cas de thyro dite d'hashimoto, de myx d me primaire et de maladie de Graves-Basedow, les autoanticorps anti-tpo sont souvent pr sents conjointement des anticorps anti-tg. La relation existant entre les maladies thyro diennes autoimmunes et la grossesse a suscit un int r t important avec la reconnaissance des syndromes de maladies thyro diennes postpartum. 12 Les anticorps anti-tpo sont d celables dans la plupart des cas de thyro dite postpartum et il a t d montr que la pr sence d'autoanticorps en d but de grossesse tait associ e avec un risque lev d'hypothyro die asymptomatique postpartum Chez les patients pr sentant de petits goitres, il est fr quent de d celer des anticorps anti-tpo en l'absence d'autoanticorps anti-thyroglobuline ; jusqu' 64 % des cas d'hypothyro die autoimmune sont associ s la pr sence d'anticorps anti-tpo seuls. 18 En outre, les anticorps anti-tpo sont souvent d cel s chez des patients atteints d'autres maladies autoimmunes telles que l'arthrite rhumato de, la maladie d'addison et le diab te de type I De faibles concentrations de ces anticorps sont galement d celables chez 20 % des individus asymptomatiques au maximum, 22 en particulier chez les personnes g es 23 et plus fr quemment chez les femmes que chez les hommes, bien que la signification clinique de ces autoanticorps ne soit pas claire. PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT Anti-TPO est un dosage immunologique en deux tapes pour la d termination quantitative des anticorps anti-tpo dans le s rum et le plasma humains utilisant la technologie de dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) avec des protocoles de dosage flexibles, appel e Chemiflex. Dans un premier temps, l' chantillon, le diluant de dosage et les microparticules paramagn tiques recouvertes de TPO sont mis en pr sence et incub s. Les anticorps anti-tpo pr sents dans l' chantillon se lient aux microparticules recouvertes de TPO. Apr s lavage, le conjugu d'anticorps anti-igg humaine marqu l'acridinium est ajout dans un deuxi me temps. Apr s un deuxi me cycle d'incubation et de lavage, les solutions de pr activation et d'activation sont ajout es au m lange r actionnel. La r action chimiluminescente r sultante est mesur e en unit s relatives de lumi re (URL). Il existe une relation directe entre la quantit d'anticorps anti-tpo pr sents dans l' chantillon et le nombre d'url d tect es par le syst me optique ARCHITECT i*. Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la technologie du dosage, se r f rer au chapitre 3 du Manuel * i = dosage immunologique REACTIFS Kit de r actifs, 100 tests REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ; contacter votre distributeur local. Kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO (2K47) 1 ou 4 flacon(s) (6,6 ml chacun) de microparticules recouvertes de thyroperoxydase (recombinante) dans du tampon MES contenant un stabilisant de prot ines (bovines). Conservateur : agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacon(s) (5,9 ml) de conjugu d'anticorps anti-igg humaine (souris, monoclonal) marqu l'acridinium dans du tampon MES contenant un stabilisant de prot ines (bovines). Conservateur : agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacons (10,0 ml) de diluant de dosage dans du tampon MES. Conservateur : agents antimicrobiens. Autres r actifs Solution de pr activation ARCHITECT i Solution de pr activation contenant 1,32 % (m/v) d'eau oxyg n e. Solution d'activation ARCHITECT i Solution d'activation contenant de l'hydroxyde de sodium 0,35 N. Tampon de lavage ARCHITECT i Tampon de lavage contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI Pour diagnostic in vitro. Mesures de s curit ATTENTION : Ce produit n cessite la manipulation d' chantillons humains. Il est recommand de consid rer tous les composants d'origine humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon les r gles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens". 24 Les mat riaux contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre manipul s selon les r gles de s curit biologique de niveau 2 25 ou autres r gles de s curit biologique en vigueur. 26,27 Les microparticules contiennent du ferricyanure de potassium et sont classifi es selon les directives de la Communaut Europ enne (CE) comme : nocives (Xn). Les risques particuliers (R) et les conseils de prudence (S) attribu s cette substance sont les suivants : R32 Au contact d'un acide, d gage un gaz tr s toxique. S35 Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu'en prenant toutes pr cautions d'usage. S36 Porter un v tement de protection appropri. S46 En cas d'ingestion, consulter imm diatement un m decin et lui montrer l'emballage ou l' tiquette. La solution d'activation ARCHITECT i contient de l'hydroxyde de sodium (NaOH) et est classifi e selon les directives de la Communaut Europ enne (CE) comme : irritante (Xi). Les risques particuliers (R) et les conseils de prudence (S) attribu s cette substance sont les suivants : R41 Risque de l sions oculaires graves. S25 Eviter le contact avec les yeux. S26 En cas de contact avec les yeux, laver imm diatement et abondamment avec de l'eau et consulter un sp cialiste. S35 Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu'en prenant toutes pr cautions d'usage. S36/39 Porter un v tement de protection appropri et un appareil de protection des yeux/du visage. S46 En cas d'ingestion, consulter imm diatement un m decin et lui montrer l'emballage ou l' tiquette. Pour les produits non classifi s comme dangereux par la Directive Europ enne 1999/45/EC, une fiche de s curit est disponible pour les professionnels sur simple demande. Pr cautions d'emploi Ne pas utiliser les kits de r actifs au-del de leur date d'expiration. Ne pas m langer les r actifs provenant d'un m me kit ou de kits de r actifs diff rents. Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l'homog n isation des microparticules, se r f rer au paragraphe "Proc dure du dosage" dans la section "Proc dure" de cette notice. 2

3 Des septums DOIVENT tre utilis s afin d'emp cher l' vaporation et la contamination des r actifs et d'assurer leur int grit. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si les septums ne sont pas utilis s conform ment aux instructions de cette notice. Afin d' viter toute contamination, porter des gants propres lors de l'application d'un septum sur un flacon de r actif d bouch. Avant de placer le septum sur un flacon de r actif d bouch, le plier en 2 pour s'assurer que les fentes sont ouvertes. Si les fentes sont ferm es, continuer plier doucement le septum de mani re les ouvrir. Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de r actif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d' viter toute fuite de r actif et de ne pas fausser les r sultats du dosage. Avec le temps, il se peut que des liquides r siduels s chent la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune incidence sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les pr cautions d'emploi lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au chapitre 7 du Manuel Conditions de conservation Le kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO doit tre conserv entre 2 et 8 C en position verticale et peut tre utilis imm diatement apr s sa sortie du r frig rateur (2 8 C). Les r actifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont conserv s et manipul s selon les indications du fabricant. Le kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO peut tre conserv bord de l'architect i pendant 30 jours au maximum. Au-del de ce d lai, le kit de r actifs doit tre jet. Pour de plus amples informations sur le suivi de la stabilit bord des r actifs, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Les r actifs peuvent tre conserv s l'int rieur ou l'ext rieur de l'architect i. Si les r actifs sont retir s de l'analyseur, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Pour les r actifs conserv s l'ext rieur de l'analyseur, il est recommand de les laisser dans leurs portoirs et emballage d'origine afin de les maintenir dans une position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa conservation au r frig rateur l'ext rieur de l'analyseur, le kit de r actifs doit tre jet. Apr s avoir retir des r actifs de l'analyseur, il faut initialiser une lecture du carrousel r actifs afin d'actualiser leur temps de stabilit dans l'appareil. Indications de d t rioration des r actifs Un contr le dont la valeur se situe en dehors des limites sp cifi es peut indiquer une d t rioration des r actifs ou des erreurs techniques. Les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie ne sont pas valides et ces chantillons devront tre r analys s. Une recalibration du dosage peut tre n cessaire. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au chapitre 10 du Manuel FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL Avant d'effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT Anti-TPO doit tre install sur l'architect i partir du CD-ROM de dosages ARCHITECT i - Addition B. Pour de plus amples informations concernant l'installation du fichier du dosage ainsi que la visualisation et la modification des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 2 du Manuel Pour de plus amples informations sur l'impression des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Pour une explication d taill e du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Manuel L'unit de r sultat par d faut du dosage ARCHITECT Anti-TPO est la UI/ml*. * UI = Unit internationale (IU = International Unit) PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Types d' chantillons utiliser Les tubes de pr l vement d' chantillons suivants peuvent tre utilis s pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO : Verre Plastique S rum Aucun additif Tubes s parateurs de s rum (sans rev tement) H parinate de lithium H parinate de lithium Tubes s parateurs de Tubes s parateurs de Plasma plasma avec h parinate plasma avec h parinate de lithium de lithium EDTA H parinate de sodium EDTA Aucun autre anticoagulant n'a t valid pour l'utilisation avec le dosage ARCHITECT Anti-TPO. Suivre les instructions du fabricant pour le traitement des tubes de pr l vement de s rum ou de plasma. Lors de l' valuation de s ries d' chantillons, il est recommand d'utiliser le m me type d' chantillons pendant toute l' tude. L'ARCHITECT i n'est pas configur pour d tecter le type d' chantillon utilis pour le dosage. Il revient par cons quent l'utilisateur de v rifier que les types d' chantillons corrects sont utilis s pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO. Etats des chantillons Ne pas utiliser d' chantillons pr sentant les caract ristiques suivantes : chantillons inactiv s par la chaleur chantillons pr lev s sur des cadavres ou fluides corporels autres que le s rum ou le plasma contamination microbienne vidente Manipuler les chantillons patients avec pr caution afin d' viter toute contamination crois e. Il est recommand d'utiliser des pipettes ou des embouts usage unique. V rifier l'absence de bulles dans tous les chantillons. Si des bulles sont pr sentes, les liminer l'aide d'un b tonnet avant l'analyse. Utiliser un b tonnet neuf pour chaque chantillon afin d' viter toute contamination crois e. Les chantillons de s rum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, de globules rouges ou d'autres particules en suspension. Pour les chantillons de s rum, s'assurer que le caillot s'est compl tement form avant de les centrifuger. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent pr senter des temps de coagulation lev s. Si l' chantillon est centrifug avant la formation compl te du caillot, la pr sence de fibrine peut entra ner des r sultats erron s. Pr paration pour l'analyse Les chantillons patients d'aspect trouble doivent tre centrifug s avant d' tre analys s. Apr s centrifugation, viter de pr lever l' chantillon au niveau de la couche lipidique (si elle est pr sente) lors du pipetage dans un godet- chantillon ou un tube secondaire. Les chantillons doivent tre homog n is s AVEC SOIN apr s d cong lation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les retournant doucement, puis centrifug s avant emploi de fa on liminer les globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des r sultats coh rents. Eviter les cong lations et d cong lations r p t es. Analyser tous les chantillons ( chantillons de patients, contr les et calibrateurs) dans les 3 heures suivant leur chargement dans l'analyseur. Pour de plus amples informations sur les conditions de conservation des chantillons dans l'appareil, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Conservation Si le dosage est effectu plus de 8 heures apr s le pr l vement, s parer le s rum ou le plasma du gel s parateur de plasma ou de s rum, des globules rouges ou du caillot. Les chantillons s par s du gel s parateur, des globules rouges ou du caillot peuvent tre conserv s jusqu' 72 heures entre 2 et 8 C. Les chantillons peuvent tre conserv s congel s une temp rature inf rieure ou gale -10 C pendant 30 jours au maximum. Transport Lorsque des chantillons sont exp di s, il est recommand de les s parer du gel s parateur de s rum ou de plasma, des globules rouges ou du caillot. Les chantillons exp dier doivent tre conditionn s et tiquet s conform ment la l gislation r gissant le transport des chantillons cliniques et des substances infectieuses. Les chantillons doivent tre exp di s congel s (sur carboglace). Ne pas d passer les dur es de conservation indiqu es pr c demment. PROCEDURE Mat riel fourni 2K47 Kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO Mat riel n cessaire mais non fourni Analyseur ARCHITECT i 3K53 ARCHITECT i - Version internationale ( l'exception des Etats-Unis) - Addition B 2K47-01 Calibrateurs ARCHITECT Anti-TPO 2K47-10 Contr les ARCHITECT Anti-TPO 3

4 Pipettes ou embouts de pipettes (facultatif) Pour de plus amples informations sur le mat riel requis pour les proc dures de maintenance, se r f rer au chapitre 9 du Manuel Proc dure d'analyse Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Retourner le flacon de microparticules 30 fois. Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises en suspension. S'il reste encore des microparticules coll es au flacon, continuer retourner ce dernier jusqu' ce qu'elles soient compl tement remises en suspension. Si les microparticules ne se remettent pas en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter Abbott Assistance. Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants propres. Plier le septum en 2 pour s'assurer que les fentes sont ouvertes. Placer soigneusement le septum dans l'ouverture du flacon. Si n cessaire, programmer une calibration. Pour de plus amples informations sur les demandes de calibration, se r f rer au chapitre 6 du Manuel Programmer les analyses. Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des chantillons de patients et des contr les, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-TPO sur l'architect i. V rifier que tous les r actifs requis sont pr sents. S'assurer que chaque flacon de r actif est recouvert d'un septum. Le volume minimum d' chantillon requis est calcul par le syst me et imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne pas pr lever plus de 10 r pliques partir du m me godet- chantillon. V rifier que le volume d' chantillon ad quat est pr sent dans le godet chantillon avant d'effectuer le dosage. Echantillon prioritaire : 75 µl pour le premier dosage ARCHITECT Anti-TPO, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT Anti-TPO suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Echantillon analys en routine dans les 3 heures qui suivent le chargement dans l'appareil : 150 µl pour le premier dosage ARCHITECT Anti-TPO, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT Anti-TPO suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Afin de minimiser les pertes par vaporation, tous les chantillons ( chantillons de patients, calibrateurs et contr les) devront tre analys s dans les 3 heures qui suivent leur chargement dans l'architect i. En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge chantillon afin de s'assurer que le volume d' chantillon de patient est suffisant. Pr parer les calibrateurs et les contr les. Les calibrateurs et les contr les ARCHITECT Anti-TPO doivent tre pr par s conform ment aux instructions figurant dans les notices respectives. Pour obtenir les volumes requis des calibrateurs et des contr les ARCHITECT Anti-TPO, tenir les flacons la verticale et distribuer 5 gouttes de chacun des calibrateurs ou contr les dans les godets- chantillons respectifs. Charger les chantillons. Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Appuyer sur la touche LANCER. L'analyseur proc de aux tapes suivantes : D place l' chantillon vers le point d'aspiration. Charge une cupule r actionnelle (CR) dans la couronne r actionnelle. Aspire et distribue l' chantillon dans la CR. D place la CR d'une position et distribue le diluant de dosage et les microparticules dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute le conjugu dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute les solutions de pr activation et d'activation. Mesure l' mission chimiluminescente pour d terminer la quantit d'anticorps anti-tpo pr sents dans l' chantillon. Evacue le contenu de la CR vers la poubelle pour d chets liquides et d charge la CR dans la poubelle pour d chets solides. Calcule le r sultat. Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre les proc dures de maintenance de routine d crites au chapitre 9 du Manuel Si votre laboratoire requiert une maintenance plus fr quente, se conformer ces exigences. Proc dures de dilution des chantillons Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-tpo est sup rieure 1 000,00 UI/ml sont annot s "> " et peuvent tre dilu s l'aide du protocole de dilution automatique ou de la proc dure de dilution manuelle. Protocole de dilution automatique Selon ce protocole, l'analyseur effectue une dilution au 1/2 de l' chantillon, puis calcule automatiquement la concentration de l' chantillon avant dilution et enregistre le r sultat. Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-tpo est sup rieure 2 000,00 UI/ml sont annot s "> " quand ils sont analys s avec le protocole de dilution automatique. Ces chantillons peuvent tre dilu s avec la proc dure de dilution manuelle. Proc dure de dilution manuelle Les dilutions manuelles doivent tre effectu es de la mani re suivante : La dilution manuelle recommand e pour le dosage anti-tpo est de 1/20 e. Avant de diluer un chantillon, distribuer environ 10 gouttes de calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO dans un tube propre utiliser dans l' tape suivante. Transf rer 190 µl de calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO du tube pr par lors de l' tape pr c dente dans un autre tube propre et ajouter 10 µl de l' chantillon patient. Saisir le facteur de dilution dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l' chantillon avant la dilution. Cette concentration constituera le r sultat enregistr. La dilution doit tre effectu e de sorte que le r sultat de l' chantillon dilu (avant application du facteur de dilution) soit sup rieur la sensibilit du dosage (5,61 UI/ml). Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Calibration Pour la calibration du dosage ARCHITECT Anti-TPO, analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon de chaque niveau de contr le ARCHITECT Anti-TPO doit ensuite tre analys afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Les calibrateurs doivent tre charg s en position prioritaire. Plage de calibration : 0, ,00 UI/ml. Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT Anti-TPO a t accept e et m moris e, tous les chantillons suivants peuvent tre analys s sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si : Un kit de r actifs portant un nouveau num ro de lot est utilis. Les valeurs des contr les se trouvent en dehors des limites sp cifi es. Pour de plus amples informations sur la proc dure de calibration d'un dosage, se r f rer au chapitre 6 du Manuel 4

5 PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE Le contr le de qualit recommand pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO consiste analyser un chantillon de chaque niveau de contr le une fois toutes les 24 heures d'utilisation. Si les proc dures du contr le de qualit du laboratoire exigent une utilisation plus fr quente des contr les pour v rifier les r sultats d'analyse, se conformer ces exigences. Les valeurs des contr les ARCHITECT Anti-TPO doivent se situer dans les limites sp cifi es dans la notice des contr les. Si ce n'est pas le cas, les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie ne sont pas valides et ces chantillons devront tre r analys s. Une recalibration peut alors tre n cessaire. V rification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de v rification des performances du dosage mentionn es dans la notice, se r f rer l'annexe B du Manuel Le dosage ARCHITECT Anti-TPO appartient au groupe 1. Utiliser les calibrateurs ARCHITECT Anti-TPO la place des MasterChecks comme d crit dans l'annexe B du Manuel RESULTATS Calculs Le dosage ARCHITECT Anti-TPO utilise une m thode de traitement des donn es par ajustement de la courbe logistique 4 param tres (4PLC, pond ration en Y) pour cr er une courbe de calibration. Annotations La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains r sultats. Une description des annotations qui peuvent appara tre dans cette rubrique est fournie au chapitre 5 du Manuel LIMITES DE LA METHODE La d termination des anticorps ne repr sente qu'un param tre d'un processus de diagnostic crit res multiples. Dans le cadre d'un diagnostic de maladie thyro dienne, il convient d'utiliser une combinaison de diff rentes m thodes d'examens en association avec les sympt mes cliniques. Environ 20 % des chantillons asymptomatiques peuvent contenir des autoanticorps anti-tpo, ce qui refl te la pr valence dans les populations apparemment saines. La pr valence des anticorps anti-tpo peut galement d pendre de l' ge, du sexe et des facteurs g ographiques de la population s lectionn e. Il se peut que la dilution de certains chantillons ne soit pas lin aire en raison de l'h t rog n it des propri t s physiochimiques des autoanticorps. Les chantillons pr lev s sur des patients auxquels ont t administr es des pr parations d'anticorps monoclonaux de souris des fins diagnostiques ou th rapeutiques peuvent contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). 28 De tels chantillons peuvent donner des r sultats faussement lev s ou abaiss s lorsqu'ils sont test s avec des kits de dosage qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris. 28,29 Les r sultats de dosage qui ne concordent pas avec les autres observations cliniques peuvent n cessiter des informations compl mentaires pour tablir un diagnostic. Les anticorps h t rophiles pr sents dans le s rum humain peuvent r agir avec les immunoglobulines des r actifs, interf rant ainsi avec les dosages immunologiques in vitro. 30 La pr sence d'anticorps h t rophiles dans un chantillon de patient peut entra ner l'obtention de valeurs anormales. 30 Pour tablir un diagnostic, de plus amples informations peuvent tre n cessaires. VALEURS ATTENDUES Une tude a t men e avec des chantillons de s rum humain pr lev s sur une population de 236 sujets apparemment sains. Tous les chantillons ont fourni des valeurs de TSH situ es dans la plage des valeurs de r f rence. 9 chantillons de cette population ont fourni des r sultats positifs par un dosage anti-tpo disponible dans le commerce et ont t exclus de l' tude destin e d terminer la plage de r f rence. La concentration du 97,5 me percentile de la population restante tait de 5,61 UI/ml. Pour la population tudi e, la plage des valeurs normales est < 5,61 UI/ml. 97,8 % (222/227) de cette population ont fourni des valeurs comprises dans la plage de r f rence.* Cette plage de r f rence est propos e titre indicatif ; chaque laboratoire devra tablir des valeurs de r f rence appropri es aux populations de patients qu'il dessert, en tenant compte de l' ge, du sexe, des facteurs g ographiques et des pratiques cliniques. CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Reproductibilit Le dosage ARCHITECT Anti-TPO est con u de mani re fournir une reproductibilit < 10 % (CV total) pour les chantillons > 5,61 UI/ml. Une tude a t men e pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO conform ment au protocole EP5-A du National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). 31 Le contr le positif ARCHITECT Anti-TPO et 3 panels humains ont t analys s en double sur 3 appareils, l'aide de 3 lots de r actifs, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Une seule courbe de calibration a t utilis e pour chaque lot de r actifs pendant toute l' tude. Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Conc. Echan- Analy- Lot moyenne Intra-s rie Total tillon seur r actifs n (UI/ml) E.T. CV (%) E.T. CV (%) 1 A 80 74,85 2,11 2,8 2,16 2,9 B 80 74,20 1,89 2,6 2,04 2,7 C 80 74,63 2,01 2,7 2,17 2,9 2 A 80 77,42 2,11 2,7 3,25 4,2 Contr le B 80 75,32 1,92 2,5 2,54 3,4 positif C 80 74,59 1,73 2,3 2,57 3,4 3 A 80 75,41 2,13 2,8 2,52 3,3 B 80 75,48 1,90 2,5 2,13 2,8 C 80 76,66 2,42 3,2 2,87 3,7 1 A 80 1,57 0,08 4,8 0,10 6,5 B 80 1,46 0,06 3,8 0,09 5,8 C 80 1,64 0,09 5,6 0,10 6,1 Panel 1 2 A 80 1,60 0,09 5,3 0,12 7,6 B 80 1,53 0,06 3,9 0,11 7,2 C 80 1,52 0,10 6,7 0,12 7,7 3 A 80 1,47 0,08 5,3 0,11 7,8 B 80 1,47 0,07 4,7 0,13 8,5 C 80 1,52 0,14 9,5 0,15 9,8 1 A 80 20,98 0,65 3,1 0,76 3,6 B 80 21,14 0,61 2,9 0,66 3,1 C 80 21,51 0,71 3,3 0,75 3,5 2 A 80 21,27 0,61 2,9 0,98 4,6 Panel 2 B 80 21,62 0,66 3,0 0,90 4,2 C 80 20,82 0,67 3,2 0,85 4,1 3 A 80 21,00 0,73 3,5 0,86 4,1 B 80 21,77 0,60 2,7 0,84 3,8 C 80 21,24 0,70 3,3 0,89 4,2 1 A ,78 5,14 2,4 6,48 3,0 B ,79 4,73 2,1 5,82 2,6 C ,71 5,36 2,5 6,36 2,9 2 A ,32 4,41 2,0 8,61 3,9 Panel 3 B ,54 4,04 1,8 13,37 6,0 C ,73 5,76 2,6 13,18 6,0 3 A ,91 6,11 2,9 6,84 3,2 B ,46 5,15 2,3 5,67 2,5 C ,17 5,80 2,5 7,09 3,1 Sensibilit fonctionnelle Lors d'une tude, des panels humains, pr sentant des concentrations comprises entre 0,16 et 1,20 UI/ml, ont t analys s en double sur 1 analyseur, pendant 10 jours, l'aide de 2 lots de r actifs et de 3 calibrations, pour un total de 40 r pliques par panel. Les CV (%) totaux (combinant les composantes de la variance par r plique, s rie, jour et lot de r actifs) ont t calcul s et trac s en fonction de la concentration moyenne. Une courbe r ciproque a ensuite t trac e l'aide de ces donn es et la valeur de sensibilit fonctionnelle du dosage a t calcul e comme tant gale la concentration correspondant un coefficient de variation de 20 % de la courbe ajust e. La plus faible valeur obtenue par le dosage ARCHITECT Anti-TPO pr sentant un CV de 20 % est de 0,50 UI/ml.* Sensibilit analytique Le dosage ARCHITECT Anti-TPO a t con u de mani re fournir une sensibilit analytique < 1,0 UI/ml. La sensibilit analytique du dosage ARCHITECT Anti-TPO, d finie comme tant gale la concentration 2 carts-types au-dessus du calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO (0,0 UI/ml) a t d termin e comme tant gale 0,16 UI/ml * avec un intervalle de confiance 95 % (n = 48 s ries, 10 r pliques du calibrateur A et 4 r pliques du calibrateur B par s rie). 5

6 Lin arit Selon une tude effectu e sur la base du protocole EP6-A 32 du NCCLS, le dosage ARCHITECT Anti-TPO est lin aire entre 3,0 et 1 000,0 UI/ml. V rification par autodilution Le protocole de dilution automatique ARCHITECT Anti-TPO fournit un pourcentage de r cup ration allant jusqu 15 % des chantillons dilu s manuellement. Lors d'une tude, le protocole de dilution automatique (1/2) a t compar la proc dure de dilution manuelle au 1/2 l'aide de 9 chantillons humains dont les concentrations en anticorps anti-tpo taient sup rieures celle du calibrateur E (250 UI/ml). La dilution manuelle a t effectu e l'aide du calibrateur A ARCHITECT Anti-TPO. Les r sultats de r cup ration (%) observ s sont r sum es dans le tableau suivant.* Dilution auto- Dilution manuelle % de Echantillon matique (UI/ml) (UI/ml) r cup ration** 1 861,25 859,27 100, ,49 703,64 97, ,36 847,62 99, ,55 757,09 95, ,46 688,49 103, , ,18 100, ,43 931,80 101, ,77 851,72 98, ,48 998,45 96,8 **% de r cup ration = Dilution automatique (UI/ml) Dilution manuelle (UI/ml) x 100 Interf rence L'interf rence potentielle de taux lev s de bilirubine, d'h moglobine, de triglyc rides et de prot ines totales dans le dosage ARCHITECT Anti-TPO est < 15 % aux concentrations indiqu es. Une tude a t men e pour le dosage ARCHITECT Anti-TPO sur la base du protocole EP7-A 33 du NCCLS. Les substances potentiellement interf rentes suivantes ont t ajout es des chantillons pr sentant des taux d'anticorps anti-tpo compris entre 45,07 et 361,64 UI/ml. L'interf rence moyenne observ e lors de cette tude tait comprise entre -3,6 % et +3,7 %.* Substance potentiellement Concentration de la substance interf rente potentiellement interf rente Bilirubine 20 mg/dl H moglobine mg/dl Prot ines totales (taux bas) 4 g/dl Prot ines totales (taux lev ) 10 g/dl Triglyc rides mg/dl Evaluation d' chantillons provenant de patients atteints de maladies auto-immunes et d' chantillons titres lev s d'igg L'interf rence potentielle d' chantillons provenant de patients atteints de maladies auto-immunes et d' chantillons titres lev s d'igg avec le dosage ARCHITECT Anti-TPO est < 15 %. Lors d'une tude, le dosage ARCHITECT Anti-TPO a t valu en analysant des chantillons provenant de patients atteints de maladies auto-immunes diagnostiqu s et des chantillons titres lev s d'igg. Les chantillons analys s ont t surcharg s d'anticorps anti- TPO et pr sentaient des concentrations comprises entre 131,44 et 568,78 UI/ml. Les r sultats de pourcentage d'interf rence absolu moyen sont r sum s dans le tableau ci-apr s.* Facteur clinique Interf rence moyenne absolue (%) Anticorps anti-nucl aires 1,6 Arthrite rhumato de 1,6 Lupus ryth mateux syst mique 1,1 Diab te sucr insulino-d pendant 1,0 Maladie de Crohn 2,4 Scl rose en plaques 1,7 Colite ulc reuse 1,5 Hyperglobulin mie (IgG lev ) 0,9 Evaluation d'autres substances potentiellement interf rentes L'interf rence potentielle des anticorps HAMA et du facteur rhumato de (FR) dans le dosage ARCHITECT Anti-TPO est < 15 %. Lors d'une tude, le dosage ARCHITECT Anti-TPO a t valu en analysant des chantillons contenant des HAMA et le FR pour une valuation suppl mentaire de la sp cificit clinique. Des chantillons positifs pour les HAMA et des chantillons positifs pour le FR ont t valu s pour d terminer le pourcentage d'interf rence avec des concentrations d'anticorps anti-tpo surcharg es comprises entre 163,0 et 184,3 UI/ml. Les valeurs du pourcentage d'interf rence absolu moyen sont r sum s dans le tableau ci-apr s.* Autres substances Nombre % d'interf rence potentiellement d' chantillons absolu interf rentes Positif pour HAMA 10 2,1 Positif pour FR 10 1,6 SENSIBILITE CLINIQUE Lors de deux tudes, la sensibilit clinique a t valu e en analysant 139 chantillons de patients cliniquement diagnostiqu s comme atteints de thyro dite d'hashimoto et 125 chantillons de patients atteints de la maladie de Graves. Le diagnostic clinique a t tabli selon les crit res des laboratoires respectifs. La pr sence d'autoanticorps dirig s contre la thyroglobuline et/ou la TPO ne constituait pas n cessairement un crit re de diagnostic de maladie de Graves-Basedow et de thyro dite d'hashimoto. Les donn es de ces tudes sont r sum es dans le tableau suivant.* Thyro dite d'hashimoto Maladie de Graves n Positifs (%) n Positifs (%) Etude , ,0 Etude , ,0 CONCORDANCE La performance du dosage ARCHITECT Anti-TPO a t compar e celle d'un autre dosage immunologique pour la d termination des anticorps anti-tpo, disponible dans le commerce. Lors de cette tude, 500 chantillons provenant de sujets apparemment en bonne sant et de patients pr sentant une maladie thyro dienne auto-immune (maladie de Graves et thyro dite d'hashimoto) ont t analys s. Une r plique de chaque chantillon a t analys e par le dosage ARCHITECT Anti-TPO, sur trois analyseurs, l'aide de 3 lots de r actifs. Les r sultats ont t compar s ceux obtenus avec un dosage immunologique disponible dans le commerce (dosage de comparaison). Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Dosage de comparaison ARCHITECT Anti-TPO N gatifs Positifs N gatifs Positifs Concordance = 92,6 % BIBLIOGRAPHIE 1. 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