VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION
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- Jean-Marie Lafontaine
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1 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Datum laatste aanpassing / Date de la dernière adaptation Dénombrement des microorganismes revivifiables dans l eau (22 C) (I-MET-065) Filtration ensemencement de milieux de culture solides lecture des géloses ISO Tous les types d eau 12/02/2013
2 Résumé des critères de performance : - Répétabilité : 0.07 log ufc/ml - Ecart type de reproductibilité : 0.05 log ufc/ml - Incertitude de mesure (reproductibilité) : 0.14 log ufc/ml La validation répond aux exigences de la procédure LAB 00 P180 Le laboratoire qui veut appliquer cette méthode doit démontrer que les critères ci-dessous soient remplis pour les combinaisons matrices/paramètres : Participation à un test interlaboratoire et obtention de résultats corrects. Obtention d une répétabilité de 0,5 log et une reproductibilité de 1,0 log. Historique de validation : Edition Révision par/date Motif de la révision Modifications 1 MC Wilem / Adaptation au nouveau template et à la nouvelle procédure de validation (P180) Adaptation au nouveau template du dossier de validation du 24/09/2009 avec annexe photos.
3 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode Méthode d analyse Techniek Technique Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par Dénombrement des microorganismes revivifiables dans l eau (22 C) (I-MET-065) Filtration ensemencement de milieux de culture solides lecture des géloses ISO Tous les types d eau Vérification MC Wilem Responsable section microbiologie LFSAGx MC Wilem Handtekeningen - Signatures: Responsable section microbiologie Date: 12/02/2013 Sé Medewerkers (Naam en functie) Collaborateurs (Nom et fonction) Periode van validatie Période de validation Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine par Collaborateurs de la section microbiologie LFSAGx A. Georges, A. Mandiki, F. Marlier, S. Petit, B. Polderman et MC Wilem Ce dossier de validation a été clôturé le 24/09/2009 Adaptation à la nouvelle procédure de validation (LAB-00-P-180) : février 2013 Handtekeningen - Signatures: A. Dubois Responsable Qualité LFSAGx Date : 19/02/2013 Sé Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
4 Samenvatting validatiegegevens Résumé des données de validation Matrices / paramètres de validation / critères Matrices : - Tous les types d eau Paramètres de validation : - Répétabilité - Reproductibilité / incertitude de mesure - Justesse ou justesse relative Critères - Répétabilité : 0.07 log ufc/ml - Ecart type de reproductibilité : 0.05 log ufc/ml - Incertitude de mesure (reproductibilité) : 0.14 log ufc/ml - Justesse : z-scores conformes aux tests interlaboratoires LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
5 VALIDATIERAPPORT RAPPORT DE VALIDATION... 1 DÉNOMBREMENT DES MICROORGANISMES REVIVIFIABLES DANS L EAU (22 C)... 1 (I-MET-065)... 1 SAMENVATTING VALIDATIEGEGEVENS RÉSUMÉ DES DONNÉES DE VALIDATION INTRODUCTION VALIDATION MATÉRIAUX UTILISÉS ORGANISATION RÉSULTATS JUSTESSE TESTS INTERLABORATOIRES CONCLUSIONS ANNEXES... 6 LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
6 1 Introduction Ce dossier de validation est une mise à jour du dossier de validation pour le dénombrement des microorganismes revivifiables dans l eau à 22 C suivant la norme ISO Le dossier de validation initial a été clôturé le 24/09/2009. Il a été adapté suite à la mise en application de la nouvelle procédure de validation LAB-00-P-180. La détermination de l incertitude de mesure y a été ajoutée. 2 Validation Cette validation a été effectuée sur base d échantillons artificiellement contaminés par une solution contenant des microorganismes revivifiables. 2.1 Matériaux utilisés - Standard CECALait (lot : GT 02/2009) - Tryptone sel (Lot : 8M0345) - Eau stérile - Gélose PCA sans dextrose (lot : 8M0085) 2.2 Organisation L échantillon pour l essai consiste en 100ml d eau stérile contaminée avec une dilution du matériau certifié. La préparation de l échantillon pour l essai est décrite dans l annexe 1. 6 personnes ont participé à cette validation : A. Georges, A. Mandiki, F. Marlier, S. Petit, B. Polderman et MC Wilem. Chaque participant a suivi le mode opératoire décrit dans la procédure «Dénombrement des microorganismes revivifiables dans l eau (22 C)» (détails de l analyse : annexe 1) 2.3 Résultats La répétabilité et l écart type de reproductibilité ont été calculés conformément à la norme ISO Les tableaux présentant les tests de Grubbs et de Cochran peuvent être trouvés dans l annexe 2. Le détail des résultats peut être consulté au laboratoire. Les résultats suivants ont été obtenus : Répétabilité : 0,07 log ufc/ml Ecart type de reproductibilité : 0,05 log ufc/ml Incertitude de mesure (2.8 x écart type de reproductibilité) : 0.14 log ufc/ml LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
7 2.4 Justesse Analyse d échantillons certifiés (échantillons à teneur garantie Senate) : Date Analyste Résultat obtenu (ufc/ml) Résultat obtenu (log ufc/ml) Résultat attendu (log ufc/ml) Limite de dispersion (log) Août ± Ecart observé entre le résultat attendu et le résultat obtenu (log ufc/ml) 3 Tests interlaboratoires Résultats des tests interlaboratoires effectués en 2009 et 2010: Organisateur Date Analyste z-scores LGC Standards Avril Juin Septembre Avril Juillet Septembre LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
8 4 Conclusions Détermination de la répétabilité, de l écart type de reproductibilité et de l incertitude de mesure : Répétabilité : 0,07 log ufc/ml Ecart type de reproductibilité : 0,05 log ufc/ml Incertitude de mesure : 0.14 log ufc/ml Etude de la justesse Pour les tests retenus, les écarts observés par rapport au résultat attendu n excèdent pas les limites de dispersion indiquées par le fournisseur. La justesse a également été prouvée par l obtention de bons résultats lors de la participation à des tests interlaboratoires. Qualification du personnel Les personnes ayant participé à cette validation sont qualifiées pour le dénombrement de la flore mésophile aérobie totale. Elles devront régulièrement participer à des analyses interlaboratoires et obtenir des résultats satisfaisants. 5 Annexes - Annexe 1 : Préparation de l échantillon pour l essai - Annexe 2 : Analyse des résultats (Tests de Grubbs et de Cochran) - Annexe 3 : Photos LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
9 Annexe 1 : Préparation des échantillons pour l essai Détermination des conditions d analyse (durée d incubation des standards avant contamination des échantillons, dilutions utiles) Matrice : Eau stérile 10h00 Mise à température ambiante d un standard CECALait Germes totaux 11h00 Dilution d-1 du standard CECALait Contamination de 100ml d eau stérile avec 1ml de la dilution du standard CECALait (=Solution-mère) Dilution d-1 de la solution-mère Pour chaque participant : Ensemencement d une boîte de PCA avec 1ml de la d-1 de la solution-mère Ensemencement d une boîte de PCA avec 0,1ml de la d-1 de la solution-mère Lecture des boîtes de PCA sans dextrose d0 : 99 ufc d-1 : 9 ufc Il a été décidé de contaminer des échantillons de 100ml d eau stérile avec 1,2ml du standard CECALait. Détails de l analyse Contamination de 100ml d eau stérile avec 1,2ml du standard CECALait. Chaque participant part de cette solution, prépare des dilutions d-1 et d-2 et ensemence des boîtes de gélose PCA sans dextrose avec 1ml de chaque dilution Incubation 72h à 22 C (incubateur 168) Lecture des boîtes LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
10 Annexe 2 : Analyse des résultats (tests de Grubbs et de Cochran) Le détail des résultats peut être consultés au laboratoire. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
11 Annexe 3 : Photos Ensemencement de la gélose PCA LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
12 Aspect des colonies sur les géloses PCA : Toutes les colonies doivent être prises en compte. LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport Modèle rapport de validation v /10
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