COULTRY CLUB Paris 8 Avril 2014 Place de la CMF dans le diagnostic des déficits Immunitaires primitifs
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- Sylvaine Primeau
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1 COULTRY CLUB Paris 8 Avril 2014 Place de la CMF dans le diagnostic des déficits Immunitaires primitifs Béatrice URING-LAMBERT
2 Déficit immunitaire primitif Définition: anomalie d un ou plusieurs éléments du SI Maladie génétique rare Prévalence : 1/5000 naissance Hétérogénéité : > 200 déficits décrits > 150 gènes identifiés
3 Démarche diagnostique Examen clinique/anamnèse Biologie: Génétique: NFS: Cytopénie Dosage des Immunoglobulines G-A-M Dosage des Acs vaccinaux Phénotypage lymphocytaire T, B, NK Tests fonctionnels Diagnostic définitif, Traitement Conseil génétique
4 CMF: Phénotypage lymphocytaire Lymphocyte T: CD3+ Lymphocyte T helper: CD4+ Lymphocyte T suppresseur: CD8+ Lymphocyte B: CD19+, CD20+ Cellule NK: CD3- CD56+, CD16+ Interprétation en % et en valeurs absolues Normes en fonction de l âge Objectif: mise en évidence de l absence d une population ou d un marqueur spécifique
5 Que faire des résultats? Classification «physiopathologique» Déficits immunitaires combinés (T et B) Déficits Immunitaires humoraux (B) Déficits des cellules phagocytaires Déficits Immunitaires syndromiques Déficits de la régulation du système immunitaire Déficits de l immunité innée Déficits du complément Désordres auto-inflammatoires
6 Déficits immunitaires combinés: SCID Déficits immunitaires combinés sévères: Absence de développement des LyT NFS: Lymphopénie CMF: Lymphocytes T absents Evaluation des autres populations cellulaires Hypogammaglobulinémie
7 SCID: mécanismes T-B-NK-:mort des thymocytes/lymphocytes: ADA T-B-NK+: défaut réarrangement : RAG1, RAG 2, Artemis T-B+NK+: anomalie du TCR ou du pré-tcr ( CD45, CD3, ZAP 70) T-B+NK-: défaut signalisation cytokinique IL2Rγ: CD25 T-B+NK+: défaut signalisation cytokinique IL7Rα: CD127
8 Syndrome d Omenn: SCID atypique Clinique: Début précoce Manifestations cutanées caractéristiques, infections : Biologie: Hyperéosinophilie Hyper IgE, Hypogammaglobulinémie GAM > IL5; >IL4
9 Syndrome d Omenn: SCID atypique CMF: Lymphocytes T présents: Expansion de lymphocytes oligoclonaux, autoréactifs : T DR+, CD45 RO+, répertoire TCR Vβ restreint Lymphocytes B absents Generated by CamScanner
10 Déficits immunitaires combinés ( T et B) Entité complexe: > 20 types Déficit T primitif avec déficit humoral Lymphopénie T variable Lymphocytes B présents Clinique riche et variée Exploration complexe, complète NFS Phénotype lymphocytaire incluant les T naifs IG-GAM normales ou < Hyper IgM lié à absence de switch Sérologies vaccinales Prolifération in vitro
11 Déficits immunitaires combinés: Apport de la CMF 2 Mécanismes prédominent: concernent la coopération T/B Déficit CMH de classe II: Syndrome des lymphocytes nus Lymphopénie T CD4 Déficit en CD40L (CD154), CD40 Absence de lyb Mo: CD27+ Neutropénie Hyper IgM par absence de switch Déficit CMH classe I Lymphopénie T CD8
12 Déficits immunitaires humoraux Agammaglobulinémie de Bruton X CMF: Absence de Lymphocytes B DICV: Déficit immunitaire commun variable Syndrome hyper IgM Déficit en CD40L Déficit en CD4 associé Déficit en sous classe Déficit spécifique en Ac Déficit isolé en IgA
13 Déficit immunitaire commun variable Incidence : 1/ : DI le plus fréquent Age de début: 2 ième -3 ième décade Clinique: Infections HSMG, ADP Complications: Auto-immunes Atteinte digestive granulomateuse Biologie Hypogammaglobulinémie: IgG< 2DS Neutropénie
14 Déficit immunitaire commun variable Développement des lymphocytes B 2 phases de développement Intramedullaire Constitution du BCR Ganglionnaire/Rate B ZM B Naif folliculaire Activation antigénique BMémoire Generated by CamScanner Warnatz, Cytometry 2008
15 Déficit immunitaire commun variable Apport de la CMF Phénotypage lymphocytaire B Cellules B naïves: CD19+/ CD27-/ IgD+/IgM+ Cellules ZM : CD19+/CD27+/IgD+/IgM+ Cellules B switchées: CD19+/CD27+/IgD-/IgM- Cellules BMo IgM seul: CD19+/CD27+/IgM++/IgD- Cellules B transitionnelles: CD19+/ CD38++/IgM++ Plasmablastes: CD19+/CD38++/IgM-
16 Déficit immunitaire commun variable Apport de la CMF
17 Déficit immunitaire commun variable Apport de la CMF LyB N
18 Déficit immunitaire commun variable Apport de la CMF Phénotypage lymphocytaire T Cellules Naïves: CD45RA +/ CD45RO- Cellules Mémoires : CD45RO+/ CD45RA- Description d un sous-groupe particulier Diminution des lymphocytes TCD4 SMG Lymphopénie B Activation monocytes/macrophages liée à stimulation par TNFa
19 Déficit immunitaire commun variable Classifications Plusieurs classifications Freiburg Paris EUROclass
20 Déficit immunitaire commun variable Anomalies génétiques ICOS Famille des récepteurs du CD28 Exprimé sur les cellules T activées: après activation par PHA ou stimulation par CD3/CD28 Déficit en ICOS ou ICOS-L perturbation de la formation de centre germinatif Absence de différenciation en cellules Mémoire Absence de LyB switchés Lymphopénie B Réduction des LyB de ZM Au niveau des cellules T répartition T4/T8 normale, CD45RO/RA normale Mais réduction des LyT CD4 mémoire-like CXCR5+
21 Déficit immunitaire commun variable Anomalies génétiques TACI Famille des récepteur du TNF Exprimé sur les cellules B CD27+ Déficit en TACI Anomalie la plus fréquente des DICV Pas d anomalie de l homeostasie des lymphocytes T et B Pas de diagnostic possible en CMF
22 Déficit immunitaire commun variable Anomalies génétiques Déficit en CD19 Dépistage aisé en CMF Expression normale d autres marqueurs du lymphocyte B : CD20, CD21
23 Déficit immunitaire commun variable Anomalies génétiques BAFF-R Famille des récepteur du TNF Déficit en BAFF-R Lymphopénie B sévère Expansion des cellules transitionnelles CD19+/ CD38++/IgM++
24 Déficits de la régulation du système immunitaire Lymphohistiocytose hémophagocytaire ou syndrome hémophagocytaire Prolifération incontrôlée de lymphocytes activés et d histiocytes sécrétant de grandes quantités de cytokines inflammatoires: défaut cytotoxique des TCD8 et des NK CMF: rechercher des lymphocytes activés
25 Déficits de la régulation du système immunitaire Syndrome avec auto-immunité:alps ALPS = syndrome lymphoprolifératif avec auto-immunité Clinique: Manifestations auto-immunes: Auto-anticorps Lymphadénopathie chronique non maligne Hépatosplénomégalie avec hypersplénisme Hypergammaglobulinémie
26 Déficits de la régulation du système immunitaire Syndrome avec auto-immunité:alps Diagnostic biologique: CMF Accumulation dans le sang et les organes lymphoïdes secondaires d une population polyclonale de lymphocytes T : TCR αβ double négatifs CD4-CD8-( >5% des CD3+)
27 Déficits de la régulation du système immunitaire Syndrome avec auto-immunité:alps TCR αβ double négatifs CD4-CD8-( >5% des CD3+)
28 Déficits de la régulation du système immunitaire Mécanisme de l apoptose Fas induite Physiopathologie: Déficit de l apoptose lymphocytaire induite par Fas (CD95) 5 sous-types: Mutation hétérozygote du gène FasL : ALPS type Ib Mutation hétérozygote du gène Fas: ALPS type Ia Mutation homozygote du gène Fas : ALPS 0 Mutation du gène caspase 10 ou 8: ALPS de type IIb Mutation inconnue ou mutation somatique: ALPS de type III
29 Déficits de la régulation du système immunitaire Syndrome avec auto-immunité: IPEX Définition Syndrome IPEX: immune dysrégulation, polyendocrinopathy, entéropathy,x-linked Clinique: Eczéma, maifestations auto-immunes importantes sévères et pécoces( entéropathie, diabète, thyroïdite et cytopénie) avec des auto-anticorps Physiopathologie Déficit ( absence ou fonction) des T régulateurs Mutation gène Fox p3
30 Déficits de la régulation du système immunitaire Syndrome avec auto-immunité: CMF Détection d un marqueur nucléaire Facteur de transcription Fox P 3 Treg: CD4+/ CD25High/ CD127-
31 Déficits de l immunité innée Déficits de l adhésion leucocytaire Chimiotactisme PMN anormal (PMN++ en périphérie) Clinique: Foyer d infections sans pus, cicatrisation lente ( chute tardive du cordon ) Physiopathologie: Déficit d expression de la chaine beta de 3 intégrines: CD11a/CD18, CD11b/CD18, CD11c/CD18 Apport de la CMF: absence d expression CD11/CD18
32 Déficits de l immunité innée Déficits de l explosion oxydative Granulomatose septique chronique, XL: Déficit dans le complexe NADPH oxydase >production déficiente d H2O2 et de superoxyde par les cellules phagocytaires; formation de granulomes Apport de la CMF stimulation des cellules phagocytaires par PMA fmlp ou E. Coli qui entraine la production de H202 Conversion du colorant intracellulaire dihydrorhodamine 1,2,3 en un compose fluorescent lié à l oxydation ( classiquement : réduction du NBT)
33 Déficits de l immunité innée Déficits de l explosion oxydative
34 Merci pour votre attention
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