- Protocole : Le constituant des chromosomes.(capacité :mettre en œuvre un protocole ) Matériel nécessaire : Manipulation.
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- Claudine Normand
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1 - Protocole : Le constituant des chromosomes.(capacité :mettre en œuvre un protocole ) Matériel nécessaire : Banane ( ½ ) Sel fin Alcool à brûler (dans une tube de préférence). Liquide à vaisselle Verre de montre paille ou cure-dent Entonnoir Tube à essai gaze mortier Vert de méthyle Manipulation. 1. Dans un mortier, broyer la moitié d une banane avec une fourchette afin de casser les fibres. 2. Rajoutez 1 cuillère à café de sel fin 3. Rajoutez une cuillère à soupe de liquide vaisselle et continuez le broyage jusqu à l obtention d un mélange pâteux et homogène. 4. Ajoutez environ 5 cuillerées à soupe d eau et mélangez à nouveau. 5. Placer le gaze dans l entonnoir, puis, celui-ci dans le tube à essais. Versez le mélange (broyé) dans le gaze en faisant attention à ne pas le casser. 6. Laissez filtrer et enlevez l entonnoir lorsque vous aurez récupérez 15 à 20 ml de liquide. 7. Rajoutez un volume d alcool à brûler au moins égal à la moitié du volume liquide obtenu par filtration (10 ml). Cet alcool doit être versé très doucement le long de la paroi du tube à essais légèrement incliné. 8. En peu de temps, vous avez un anneau blanchâtre qui se place à l interface eau/alcool. C est une pelote (méduse). 9. A l aide d une paille, récoltez la méduse et déposez la dans un verre de montre contenant une goutte de vert de méthyle. Respect du protocole 1 Obtention de la méduse 2 Coloration de la méduse 1 Rangement du matériel 1
2 Coloration des cellules d'oignons au vert de méthyle (capacité :mettre en œuvre un protocole ) Protocole : temps de préparation 15 à 20minutes Matériel : verre de montre oignon vert de methyl lame,lamelle microscope Manipulation Prélever une fine membrane d'oignon, la placer dans un verre de montre avec du vert de méthyle pendant 1 minute. Puis rincer immédiatement 3 fois à l'eau. Rincer à nouveau au bout de 5 minutes. Enfin une dernière fois au bout de 5 minutes. Mettre la membrane d'oignon entre lame et lamelle avec une goutte d'eau. Puis observer au microscope.(capacité : réaliser une préapration microscopique, réaliser une observation microscopique ) Résultats Dites quel est l'élément qui est coloré par le vert de méthyle: COMPARAISON avec la méduse extraite : La méduse extraite est donc le constituant de...
3 Explication de l'extraction : Le sel permet à la fois d absorber l eau des cellules et de désolidariser l ADN de certaines protéines contenue dans les cellules. Le liquide vaisselle permet de casser les membranes cellulaires (celle qui entoure la cellule et celle qui entoure le noyau) car les cellules sont constitués d eau et les membranes cellulaires de lipide (molécules que l on trouve dans l huile). L alcool permet de compacter l ADN sous forme d une pelote. L ADN précipite car il est insoluble dans l alcool. Plus léger que l alcool, l ADN remonte doucement. Verre de montre Tube à essai entonnoir mortier Support pour tube à essai gaze
4 Le constituant des chromosomes. (protocole proposé par l école de l ADN Angers) (capacité :mettre en oeuvre un protocole ) Protocole : Matériel necessaire : tube à essai liquide vaisselle sel fin alcool à bruler cure-dent vert de methyl eau distillée Protocole d extraction: Masser les joues avec les doigts en faisant des mouvements circulaires et en salivant dans la bouche Recueillir 2 ml de salive dans un tube à essais Ajouter quelques gouttes (4 ou 5) de liquide vaisselle Mélanger délicatement en retournant le tube (éviter la mousse) Ajouter une petite demi- cuillerée à café de sel fin Mélanger délicatement en retournant le tube Ajouter de l alcool (au moins à 70 ) froid, en inclinant le tube, en quantité suffisante (remplir le tube aux ¾) Laisser reposer : l ADN précipite à l interface eau/alcool puis la méduse d ADN remonte Protocole de coloration : Récupérer la méduse d ADN dans le tube à essais (avec un cure-dent, bâtonnet ) Placer la méduse dans un verre de montre avec du vert de méthyle acétique pendant 3 min Rincer à l eau distillée Respect du protocole 1 Obtention de la méduse 2 Coloration de la méduse 1 Rangement du matériel 1
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