Le titrage de l AgHBs: un témoin du statut du patient et de la réponse au traitement. Denis Ouzan Institut Arnault Tzanck, Saint-Laurent-du-Var

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1 Le titrage de l AgHBs: un témoin du statut du patient et de la réponse au traitement Denis Ouzan Institut Arnault Tzanck, Saint-Laurent-du-Var

2 Objectifs pédagogiques Connaitre les problèmes pratiques posés par la prescription des tests quantitatifs de l antigène HBs Connaitre l apport de ce test à la définition du porteur du virus de l hépatite B Connaitre la valeur prédictive de l évolution du taux de l antigène HBs dans la réponse au traitement, la durée de ce traitement et la perte de l antigène HBs

3 Liens d intérêt BMS Gilead Janssen MSD Roche

4 Les particules virales Particules de Dane Enveloppe contenant les protéines de surface : Ag HBs Sphérules et tubules Capside : Ag HBc Génome : ADN partiellement double brin à fois plus nombreuses

5 2 tests quantitatifs dans l hépatite B chronique : Titre de l AgHBs Enveloppe portant l Ag HBs Reflet de l activité du cccdna Charge virale Génome Reflet de la réplication virale

6 Détection de l Antigène HBs Tests qualitatifs disponibles Architect Abbott Elecsys Roche ADVIA Centaur Bayer Hepanostika Biomerieux Monolisa Biorad Diasorin Murex Tests quantitatif disponibles Architect Abbott Elecsys II Roche Diasorin Murex Coût : AG HBS PAR EIA» = B55 (14,85 euros) Degushi et al., J Virol Meth 2004, Brotherton et al, AACCAM 2006

7 Tests quantitatifs de l AgHBs 3 tests quantitatifs commercialisés : Abbott «Architect HBsAg Qualitative 2» Roche «Elecsys HBsAg II Quant» DiaSorin «Liaison XL Murex HBsAg Quant» Principe : immunoenzymatique Résultats: UI/mL AgHBs + Signal Echantillon + Réactif Conjugué Activation

8 Quantification de l AgHBs : des limites Seuils et limites de linéarité des techniques : Abbott : 0,05 UI/mL à 250 UI/mL (log 10 : 2,40) Roche : 0,05 UI/mL à 52 UI/mL (log 10 : 2,11) DiaSorin : 0,03 UI/mL à 250 UI/mL (log 10 : 2,40) Recours à une dilution devenue depuis peu automatique Variabilité des titres : 611 échantillons Multicenter Evaluation of the Elecsys Hepatitis B Surface Antigen Quantitative Assay. B. J. Zacher et al.

9 Utilisation en pratique clinique Test utilisé en complément de la charge virale Dans l hépatite B chronique : Histoire naturelle Suivi des traitements : interféron analogues nucléos(t)idiques

10 Titrage de l AgHBs et histoire naturelle Immuno-tolérance Clairance Portage inactif Ag HBs IgM anti HBc Ag HBe Ac Anti-HBe DNA HBV < 2000 UI/mL ALAT N Contamination Immuno-tolérance Clairance Mutant pré-c Ag HBs IgM anti HBc Ag HBe Ac Anti-HBe DNA HBV variable ALAT > N

11 Titrage de l AgHBs et histoire naturelle Immuno-tolérance Clairance Portage inactif Ag HBs Ag HBe Ac Anti-HBe DNA HBV < 2000 UI/mL ALAT N Contamination Immuno-tolérance Clairance Mutant pré-c Ag HBs IgM anti HBc Ag HBe Ac Anti-HBe DNA HBV variable ALAT > N Nguyen T et al; Jaroszewicz J et al, J Hepatol 2010

12 Le titrage de l AgHBs permet de distinguer les porteurs inactifs du VHB chez des malades de genotype D Prédiction du Taux de l AgHBs Taux de HBV-DNA Portage inactif <1000 UI/mL <2000 IUI/mL Population 209 Sensibilité 91% Spécificité 95% VPP 88% VPN 97% Brunetto M et al. Gastroenterology, 2010;139(2):483-90).

13 Le titrage de l AgHBs permet de distinguer les porteurs inactifs du VHB Portage inactif : Titre AgHBs < 1000 UI/mL et ADN du VHB < 2000 UI/mL

14 Le titrage de l AgHBs permet de prédire la perte de l AgHBs % Incidence de la perte spontanée de l AgHBs AgHBs < 100 UI/ml AgHBs UI/ml AgHBs > 1000 UI/ml ans Tseng et al. Gastroenterology 2011;141:

15 Décroissance de l AgHBs sous traitement AgHBe (+) AgHBe (-) Delta AgHBs (log UI/ml) Semaines Semaines ETV (n=70) Peg-IFN (n=130) Reijnders et al. J Hepatol 2011;54,449-54

16 Intérêt de la décroissance du titre de l AgHBs sous PEG-IFN pour prédire la seroconversion HBe 6 mois après le traitement Patients AgHBe positif Interféron pégylé alfa-2a : 48 semaines *AgHBe séroconversion 6mois post traitement 58% 42% 0% 54% 35% 0% < > AgHBs à S12 < > UI/ml AgHBs à S24 Liaw et al.hepatology 2011;54: Soonneveld et al.hepatology 2013; 58:

17 Prédiction précoce de la non réponse chez les malades AgHBe(-) 102 patients AgHBe- Diminution Non (53%) Oui (47%) AgHBs Diminution < 2 log (20%) > 2 log (33%) < 2 log (20%) > 2 log (27%) ADN VHB Chance de RVS * 0% 24% 25% 39% ADN VHB < copies/ml et ALAT normales 6 mois post-traitement Rijckborst et al. Hepatology 2010;52 ;

18 La décroissance du titre de l AgHBs sous Peg-IFN chez les malades AgHBe negatifs 120 patients AgHBe- traités par PEG-IFNα-2a pendant 48 sem Décroissance du taux d AgHBs 10 % J0 à S24 S24 à 48 Proportion de patients Perte de l AgHBs à 5 ans (%) Continue oui oui 51% 23% Tardive non oui 16% 11% Précoce oui non 5% 17% Pas de déclin non non 28% 0% Brunetto MR., AASLD 2009, Abstract 452

19 Hépatite B AgHBe négatif : PEG-IFNα-2a, 96 mieux que 48 semaines? Résultats 12 mois après l arrêt du PEG-IFNα-2a 30 p = 0, semaines 96 semaines Malades (%) p = 0, /51 15/52 0/51 3/52 0/51 5/52 ADN-VHB AgHBs AgHBs < UI/ml clairance < 10 UI/ml Lampertico et al. Gut. 2012; 62(2):

20 Evolution du titre de l AgHBs (UI/ml) pendant le traitement par PEG IFN chez 4 malades VHB+VHD Titrage de l AgHBs (UI/ml) 7 mois 1 an 2 ans 3 ans 4 ans 5 ans OUZAN D et al. J Hepatol.2013;58 :

21 Temps de perte de l AgHBs sous analogues Patients traités par ETV ou TDF ayant obtenu une réponse virologique (VR) 1 Décroissance moyenne de l AgHBs ( log 10 IU/mL) 0-1 ALAT basses ALAT basses ALAT élevées = activité immunitaire -2 projection AgHBe- AgHBe+ AgHBe+ Temps jusqu à perte de l AgHBs (années) Baseline VR VR+1 VR+2 ALAT élevées Zoutendijk et al. JID 2011;204(3):415-8

22 Probabilité de rechute après arrêt des analogues selon le titre de l Ag HBs en fin de traitement et la charge virale à S12 Probabilité de rechute virologique 1 0,8 HBsAg >1000 IU/ml à la fin du traitement 0,6 0,4 HBsAg IU/ml à la fin du traitement 0,2 HBsAg 100 IU/ml à la fin du traitement Un taux d HBsAg 100 IU/ml à l arret des analogues est predictif de réponse soutenue Liang Y. AP&T 2011: 34:344

23 IFN 48 semaines chez les malades AgHBe négatifs : réponse à 5 ans 25% 23% % de patients à 5 ans 20% 15% 10% 5% 17% 62% 12% 7% 0% ADN VHB < 2000UI/ml ADN VHB < 400 cp/ml Perte AgHBs Séroconversion HBs Marcellin P et al Hepatol Int.2013 ;7:88-97

24 Add-on of peg interferon to a stable nucleoside regimen led to loss of HBs Ag in chronic hepatitis HBe Ag negative patients Denis Ouzan (1), Guillaume Pénaranda (2), Hélène Joly (1), Hacène Khiri (2), Philippe Halfon (2). (1) Liver unit, Institut Arnault-Tzanck, Saint-Laurent du Var; (2) Alphabio Laboratory, Marseille, FRANCE 10 patients, AgHBe-,tous traités par analogues depuis 3 à 8 ans, ADN du VHB indétectable depuis au moins 3 ans Rajout du PEG-IFNα-2a 180 µg/sem pendant 96 semaines Ouzan D et al. J of Clin Virol :713 17

25 Evolution du titre de l AgHBs (UI/ml) pendant l ajout du PEG IFN et 6 à 18 mois plus tard Metavir Durée du TT par analogues avant IFN J0 S48 S96 S120 A2F2 ADV (6 ans) A2F3 LAM (8 ans ) A3F3 ADV (7 ans) A1F1 ADV (6 ans) A3F3 ADV+ETV (8 ans) A2F3 ETV (3 ans) A2F4 ETV+ADV (6 ans) A1F2 ADV+ETV (7 ans ) A1F1 LAM+TFV (3 ans) A2F4 LAM+ADV (8 ans)

26 Evolution du titre de l AgHBs chez les 4 patients ayant perdu l AgHBs entre 24 et 48 semaines UI/ml Analogue s + PEG-IFN 0 Baseline S48 S 120 Perte de l AgHBs chez 4 patients : Séroconversion HBs chez 2 patients

27 Evolution du taux de l AgHBs chez les 6 patients restants qui ont reçu (sauf un) 96 semaines de PegIFN Nucleosi(ti)de analogues + PEG-IFN Stop PegIFN Ouzan D. et al. J of Clin Virol. 2013; 58:

28 IFNα chez les malades contrôlés par analogues 12 malades VHB+ (Ag HBe - : 9/12) ADN VHB indétectable chez tous les malades traités par analogues Titre de l AgHBs (UI/mL) Apparition Anti-HBs ,1 0,01 Apparition Anti-HBs J0 S4 S8 S12 S16 S20 S24 S28 S32 S36 S40 S44 S48 FU S4-4,17 log - 2,90 log 2/12 malades ont eu une perte de l AgHBs Kittner J M. et al. J of Clin Virol.2012 ; 54: 93-5.

29 Interféron pégylé chez les malades traités par analogues Etude rétrospective de 9 malades AgHBe- avec ADN du VHB indétectable depuis au moins 6 mois, traités par interféron pégylé HBsAg levels (%) Evolution du taux d AgHBs chez 9 malades AgHBe Mois 0 % -30 % -50 % HBsAg levels(ui/ml) Diminution médiane du taux d AgHBs chez 5 malades AgHBetraités plus de 6 mois Mois Lampertico P, EASL 2012, Abs. 523

30 Évaluer l impact de PegIFN chez des malades AgHBecontrolés par analogues depuis au moins 1 an 30 centres Pegasys 180 µg 48 semaines Analogues 48 semaines Analogues 96 semaines Evaluer la perte AgHBs Analogues Randomisation 1 an *ADN VHB indétectable Analogues 144 semaines

31 Conclusions L Ag HBs est connu depuis plus de 40 ans, mais la possibilité de le quantifier est récente Il faut bien libeller cette prescription: dosage quantitatif de l AgHBs C est un outil supplémentaire du suivi de l hépatite B en association avec la charge virale

32 Conclusions Ce test quantitatif permet de mieux caractériser le statut du porteur inactif du virus Il permet de prédire la réponse au traitement par IFN, sa durée optimale et la perte éventuelle de l antigène HBs. Il contribue à l évaluation de nouvelles stratégies de traitements utilisant une combinaison analogue/interféron

33 Points Forts 1) La quantification de l Ag HBs est un nouveau test de suivi de l hépatite B complémentaire de la charge virale. 2) Ce test mesure le taux d enveloppes qui entourent le virus et celui plus important de la fraction libre 3) Il permet de mieux caractériser le statut du porteur inactif du virus 4) Il permet de prédire la réponse au traitement par interféron, sa durée optimale et la perte éventuelle de l antigène HBs. 5) Il contribue à l évaluation de nouvelles stratégies de traitements utilisant une combinaison analogues /interféron

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