RisqueMycotoxines et Salmonellesdans le bléet les farines
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- Micheline Lépine
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1 RisqueMycotoxines et Salmonellesdans le bléet les farines
2 Le portfolio de solutions le plus large Allergène, mycotoxines, germes pathogènes, OGM, contrôle de l hygiène, flores d altération Milieux de cultures déshydratés Sonde ADN Lecteur de bandelettes portables Lecteurs automatisés Membrane de filtration ELISA Bandelettes immunochromatographiques
3 Agenda Analyse des mycotoxines dans la filière meunière Analyse rapide des Salmonelles dans la filière meunière
4 Mycotoxines dans le blé et les farines Définition: Des composants produits par les moisissures et ayant des effets nocifs pour l homme et les animaux Mycotoxines de champ : DON et Zéaralénone, (éventuellement T2 &HT2) Mycotoxines de stockage: Aflatoxines, Ochratoxine (en µg/kg) DON ZEA OTA Afla T2 & HT2 Réglementation UE B1 Totales Blé tendre brut Farine Pains, biscuits, pâtisserie, Baby food NA 15
5 Environnementaux Température Facteurs favorisants Humidité (notamment à la floraison) Dommages sur les grains (insectes, oiseaux, grêles, mécanique) Pratique sans labour Certaines rotations ou absence de rotations Sensibilité des variétés Stockage Température Humidité Reste des années précédentes Transport le développement des mycotoxines
6 Méthodes traditionnelles HPLC Bénéfices et inconvénients Précision Spécificité Largement accepté Cout de l équipement Formation importante requise Environnement laboratoire Long temps d analyse Cout des consommables
7 Point de vue de l industrie céréalière Cout équipement (HPLC, GCMS, LCMSMS> 30 k ), maintenance compliquée Méthode de référence ou laboratoire externe : trop long. Un camion ne peut pas attendre des heures ou des jours Cout des consommables ou cout laboratoire réduit le nombre d analyse Pression des autorités et clients : Faire plus d analyse avec le même budget Difficulté de garder du personnel qualifié pour ces analyses et cout de ce personnel Besoin d analyses réalisables à réception (hors conditions labos) Difficulté d utiliser des solvants toxiques Personnels très occupés, besoin de solutions en peu d étapes
8 Reveal Q+
9 RevealQ+ : Kit Bandelette Quantitatif Avantages et inconvénients Quantitatif Précision inégalée sur ce format Idéal pour analyse ponctuelle Résultats très rapides (< 10min) Peu d équipement Gamme complète Très simple, peu d étape Conservation et utilisation à température ambiante (pas besoin d incubateur) Lecteur portable Pas de solvants toxiques Peu de matrices complexes validées
10 Procédure RevealQ+ 1. Peser 10 g d échantillon broyer. 2. Ajouter la solution d extraction. 3. Secouer 3 minutes à la main ou secoueur mécanique. Alternative: mixeur pendant 1 minute.
11 Procédure RevealQ+ 4. Filtrer 5. Ajouter le diluant dans le tube de dilution 6. Ajouter le filtrat dans le tube de dilution et mélanger
12 Procédure RevealQ+ 7. Transférer 0.1 ml dans le tube d analyse 8. Déposer une bandelette neuve dans le tube d analyse te lancer le chronomètre 9. Lire le résultat avec le lecteur AccuScan
13 Résultat
14
15 Agenda Analyse des mycotoxines dans la filière meunière Analyse rapide des Salmonelles dans la filière meunière
16 Problématique Germes pathogènes à forte capacité de survie dans l environnement, peut survivre à une faible AW De nombreux hôtes (hommes, oiseaux, mammifères) Réglementation Européenne No 2073/2005 Critère : Absence dans 25g Méthode de référence : ISO 6571 : Requiert 6 milieux et 4 jours d analyse. Compléxité à lire et interpréter les colonies sur les boites
17 Sources des Salmonelles le développement des mycotoxines Au champ et stockages (source principale) Déjections d animaux Terre et impuretés Moyens de transports et Silos Au moulin (impact plus limité) Zones de rétention et humides Présences d animaux Origine humaine (Hygiène)
18 Protocole: Etapes 1 et 2 1. Réhydrater le milieu de pré-enrichissement Revive avec 200ml d eau stérile 2. Ajouter 25g de l'échantillon et incuber à 36 ± 1 C pendant 22 à 26 heures
19 Protocole: Etapes 3 et 4 3. Réhydrater le milieu d enrichissement sélectif 2xRV avec 200ml d eau stérile 4. Ajouter le milieu 2xRV à l échantillon. Incuber à 42 ± 1 C pendant 22 à 26 heures
20 Protocole: Etapes 5 et 6 5. Transférer 200µl ou 8 gouttes dans la cupule Reveal 6. Placer la bandelette Reveal, flèches orientées vers le bas, dans la cupule
21 Protocole: Lecture des résultats 2 lignes - Positif 1 ligne - Négatif Lire et enregistrer les résultats après 15 minutes
22 Merci pour votretemps. Avez-vousdes questions?
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