Comment combiner flexibilité et processus économique dans un seul système LC?
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- Flavien Ledoux
- il y a 8 ans
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1 Comment combiner flexibilité et processus économique dans un seul système LC?
2 Laguna Design Contichrom Equipement de laboratoire pour purification LC supérieure
3 Quels aspects sont importants pour un système de purification? Présentation de la capacité de traitement du laboratoire flexible Contichrom (tout en un). Flexibilité Contichrom permet le développement de tous les modes de traitement en aval (paquet, SMB, CaptureSMB, multicolonne, MCSGP) avec un seul équipement et une conversion de processus facile Processus économique Le processus MCSGP augmente la pureté et le rendement de 50 % comparé au traitement par lots correspondant Contichrom permet un développement de processus automatisé rapide Evolutivité Contichrom permet la conservation du profil produit développé, des spécificités de rendement et de pureté sur du haut de gamme Contichrom est un système de chromatographie liquide préparatoire conçu pour la découverte, le développement et l amélioration de processus, off rant une grande flexibilité dans le choix de procédé. Avec Contichrom lab, tous les modes de traitement (Batch, SMB, CaptureSMB, MCSGP, multi-colonne) peuvent être effectués avec un seul logiciel d équipement et de contrôle. Le logiciel de contrôle Contichrom a été développé pour la conversion des traitements par lots en processus multi-colonnes grâce à un assistant de méthode et pour permettre le développement rapide de processus évolutifs, en omettant les étapes de contrôle approfondi. Le Contichrom ajoute une autre dimension au processus de chromatographie, puisqu il permet le développement de procédés basés sur le principe MCSGP (Multi-column Countercurrent Solvent Gradient Purification) qui est plus efficace qu un traitement par Batchs. Tous les milieux témoin (échange ionique, mode mélangé, HIC, RP, SEC, Affinité) peuvent être utilisés comme tous solvants organiques standards et tampons aqueux. 3
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5 Quels processus votre système de purification peut-il actionner? La flexibilité dans le développement du processus signifie que sur la base du défi de purification (purification challenge) le meilleur procédé est choisi en ce qui concerne la facilité, le temps d élaboration et le coût. Pour la capture d affinité avec une basse capacité de liaison dynamique ayant une large courbe d avancée, la CaptureSMB est supérieure au Batch. Pour les séparations ternaires simples, les traitements par Batchs sont la meilleure option si le produit (rouge) et les impuretés (gris) sont bien séparés. Cependant lorsque les séparations ternaires d impuretés de recouvrement sont difficiles, le processus MCSGP est supérieur. Grâce au processus MCSGP, l isolation des impuretés liées au produit pour les évaluations précliniques et toxicologiques, une tâche habituellement fastidieuse, est maintenant aisée (le troisième d en haut). Avec l équipement Contichrom tous les processus comme montrés ci-dessus peuvent être effectués. L équipement Contichrom permet tout d abord le développement d un traitement par lots simple puis le passage automatique au processus MCSGP, pour un processus supérieur et économique. 5
6 Comment la capture d affinité peutelle être plus rapide et plus rentable? Utiliser CaptureSMB, un processus cyclique à colonnes jumelles, avec un équipement Contichrom à la place d un processus à colonne simple pour les étapes de capture de Protéine A présente des avantages significatifs: Vitesses de chargement plus élevées raccourcissant le temps de transit de 50 % pour l étape de capture Grâce au traitement plus rapide, préservation de l intégrité de la protéine Utilisation optimale de la capacité de résine de la Protéine A menant à une économie de résine de 50 % Economie annuelle de résine de Protéine A dans l échelle de production de plusieurs Mio USD Conception de l équipement à colonnes jumelles simple et solide et assistant logiciel Domaines d Application Capture rapide des anticorps monoclonaux Capture de protéines aux ligands adaptés aux besoins (chimique et biologique) Capture de composés thérapeutiques à partir du plasma sanguin fractionné Capture d API à partir d extraits naturels 6
7 Comment optimiser la pureté et la productivité simultanément? Au lieu de fonctionner avec une seule colonne, le processus MCSGP fonctionne avec des colonnes jumelles grâce auxquelles les fractions latérales impures contenant le produit sont recyclées de façon interne, extrayant tout le produit et augmentant par conséquent productivité et pureté. Le mode processus MCSGP prend généralement le même temps de transit qu une étape de chromatographie par lots. Un lot dérivé d un processus MCSGP à la même «définition de Batch» que celui provenant du traitement par Batchs d une colonne normale simple. Il s agit d une quantité spécifique de matière ou d API traité dans un processus ou une série de processus de sorte qu il pourrait être homogène. Chromatographie Batch conventionnelle produit impur à rejeter Chromatographie avec recyclage interne Chromacon (MCSGP) Retraiter produit impur temps temps Coupe étroite = obtention produit + pur Produit pur plus de produit et plus pur Domaines d Application Découverte: isolation des plombs Développement processus: purification des protéines, peptides synthétiques Purification des oligonucléotides Isolation des impuretés liées au produit Purification des conjugats et protéines PEGylated Purification de petites molécules et de produits naturels 7
8 Comment isoler les impuretés de façon plus efficace? Applications dans la Découverte et l isolation des impuretés liées au produit: Le Problème: Découverte: Dans la protéomique forcée (de bas en haut), en raison de la complexité des échantillons, la séparation d interface étendue est essentielle pour atténuer le problème de souséchantillonnage du peptide, pour maximiser les identifications de protéine et pour s attaquer à la vaste gamme dynamique. Impuretés relatives: l isolation des impuretés liées au produit est une tâche généralement fastidieuse nécessitant plusieurs centaines d injections pour isoler suffisamment de matière pour des études préclinique et toxicologique. La Solution: Le processus MCSGP permet l enrichissement sélectif d une zone définie du chromatogramme (rouge). La fraction enrichie peut être isolée pour la caractérisation fonctionnelle ou directement analysée online en utilisant l analyse de spectrométrie de masse. Fractions enrichies de façon sélective 8
9 Votre système fournit-il un développement de processus automatisé? L équipement et le logiciel Contichrom ont été conçus pour être facile à utiliser. Le logiciel de contrôle aide l utilisateur à naviguer et gérer facilement l installation du processus, l exécution et les rapports. Développement de traitement rapide et automatisé Assistants avec interface utilisateur graphique pour programmation facile de la méthode Conversion automatisée du traitement par lots en MCSGP Bibliothèque étendue de méthodes prédéfinies pour toutes les opérations standards Facile à utiliser Logiciel intuitif pour le fonctionnement par lots et MCSGP Chemin d'écoulement actif en surbrillance dans l organigramme Fonction pause/continuer, même pour les opérations chromatographiques continues Evaluation et rapport intégrés Capacités d'évaluation détaillée avec rapports PDF normalisés Fonctions d'exportation de données Sécurité et traçabilité des données complètes Contrôle complet du protocole de vérification et du changement La hiérarchie de la gestion utilisateur fournit une haute sécurité opérationnelle et pour les données Bibliothèque étendue de méthodes prédéfinies pour toutes les opérations standards Assistant Lots Organigramme et chemin actif Assistant Lots à MCSGP Fenêtre principale Surveillance Système online Editeur Méthode Centre Evaluation & rapport 9
10 Comment passer à un processus supérieur? L assistant Contichrom permet de passer d un traitement par Batchs à un processus MCSGP supérieur en seulement trois étapes: Etape 1: Premièrement, un traitement par Batchs non optimisé est développé, le pic du produit est identifié et le chromatogramme du lot est stocké dans la base de données. Pour la conversion d un lot en processus MCSGP, le chromatogramme du lot respectif est récupéré. Etape 2: À l aide de l assistant du logiciel Contichrom, les limites du pic du produit (rouge) sont définies simplement en tirant les barres pour définir les extrémités. Plus les limites sont étroites, plus le produit isolé est pur. Les limites des fractions de recyclage (bleu) sont ensuite réglées en tirant un autre jeu de barres et les points de départ et de fin sont définis. Etape 3: Appuyer sur le bouton de l assistant convertira automatiquement le traitement par Batchs en processus MCSGP. Etape 1: Récupérer dans base de données le chromatogramme choisi d un Batch Etape 2: définition interactive de la gamme de produit (rouge) et des fractions de recyclage (bleu): tirer barres pour définir limites (pointillés) Etape 3: Appuyer sur le bouton pour convertir traitement par lots en MCSGP 10
11 Comment combiner multifonction et petit encombrement? Domaines d Application: Développement Processus: facilité grâce à la flexibilité dans le choix du bon processus pour effectuer un traitement donné Isolation des impuretés liées au produit: la tâche fastidieuse consistant à isoler les impuretés liées au produit pour la caractérisation préclinique/toxicologique est grandement facilitée en utilisant le mode MCSGP du Contichrom Purification préparatoire du produit: Le Contichrom est disponible en deux versions avec deux pompes différentes: Contichrom lab-10: ml/min pour jusqu à 20 g produit /jour Contichrom prep-100: ml/min pour jusqu à 200 g produit /jour Pompe échantillon Haute précision Détecteurs UV avec volume de support bas Pompes gradients précise haute pression Vannes multipositions fiables Le système de purification Contichrom nécessite moins d espace que la majorité des systèmes préparatoires HPLC. 11
12 Multifonction avec un petit encombrement Contichrom est un système de chromatographie liquide préparatoire prévu pour la sélection et le développement d un processus. À la place de longues conceptions et expériences (DoE) pour établir des conditions de départ optimisées, Contichrom offre un assistant logiciel pour convertir facilement un traitement par lots basique en un processus MCSGP supérieur, réduisant donc considérablement le temps d élaboration pour des processus solide et économique. Le logiciel Contichrom fournit des méthodes prédé finies conformes 21 CFR part 11 pour des opérations par lots standards et pour une opération et une protection des données conviviales et intuitives. Le Contichrom lab a un design modulaire où les pièces peuvent être facilement atteintes et remplacées. Il possède un affichage interactif et de nombreuses fonctionnalités comme la fonction pause/continuer. Une grande zone de mémoire tampon en haut de l instrument fournit assez d espace pour des modes de traitement continu. Les pompes de système et d échantillons sont basées sur la technologie de pompe de haute qualité KNAUER BlueShadow, ce qui assure un débit reproductible que les pressions soient basses ou élevées. Le système convient pour des pressions basse, moyenne ou forte, résiste au solvant et est biocompatible, offrant une fonctionnalité pour les purifications préparatoires des petites molécules et des macromolécules. Le système Contichrom est extensible pour commander et traiter l échelle. Lors de l amélioration le profil du produit est gardé. Le système Contichrom est particulièrement adapté pour le PAT en ligne avec QbD. 12
13 Contichrom Spécifications Techniques Composants principaux du système: Configuration système: installation 2 colonnes 1 x pompe gradient binaire à haute pression 2 x pompes isocratiques, 2 x détecteurs UV 6 x vannes 6 voies 7 ports, 2 x vannes 2 voies 6 ports 1 x dégazeur, 1x capteur ph / conductivité 1 x ordinateur / moniteur / clavier / souris 1 x logiciel d opération Contichrom 1 x interrupteur Ethernet Description vanne: commande vanne électrique affichage LED corps Peek, joint Tefzel Description capteur ph / conductivité: Conductivité ms/cm mesures ph 0 14 capteur température Pression système maximum: 100 bars Description pompe: pompe double piston biocompatible, incrustations titane joint piston actif débit: Contichrom lab-10: ml/min Contichrom prep-100: ml/min pression de sortie maximum: 100 bars capacité gradient Description détecteur UV: spectrophotomètre pour routine HPLC et autres tâches de détection de traversé gamme longueur d ondes nm source lumineuse: lampe deutérium Description dégazeur (lab-10): 4 modules dégazeur 4 canaux dégazage par perméation du gaz à travers la membrane Téflon AF amorphe en polymère fluoré Matériaux: tous biocompatibles tubing : Peek Contichrom lab-10: i.d. 0.5 mm Contichrom prep-100: i.d. 1.0 mm Collecteur de fraction (optionnel): Collecteur de fraction FOXY R1 ISCO avec vanne d aiguillage intégrée Capacité fraction de tubes, 0.2 ml 50 ml par fraction biocompatible et peut être utilisé dans les chambres froides Capacité de production du produit purifié: Contichrom lab-10: jusqu à 20 g/jour Contichrom prep-100: jusqu à 200 g/jour Opération: température ambiante compatible chambre froide (4 C) 13
14 Contichrom Caractéristiques du logiciel Description logiciel: Logiciel Contichrom (en anglais) incluant le manuel. Logiciel intégré et intuitif pour l opération et l évaluation de Batchs et la chromatographie continue. L assistant permet une programmation facile des méthodes incluant MCSGP. Un fichier compte-rendu conserve toutes les informations pour chaque expérience. L interface utilisateur graphique est facile à utiliser pour programmer des méthodes. Les utilisateurs avancés peuvent accéder aux réglages détaillés du programme. Fonctionnalité unique pause/continuer, même pour les opérations de chromatographie continue. Gestion de l utilisateur pour une sécurité opérationnelle élevée et des donnés protégées. Fournit tous les outils pour une conformité FDA 21 CFR Part 11. Groupes d utilisateurs prédéfinis Administrateurs R&D-, utilisateurs-production Gestion des droits haque groupe a des droits définis, réglés par l administrateur Les comptes des utilisateurs sont protégés par mot de passe Logging Toutes les activités utilisateur/matériel sont enregistrées avec la date, l heure et le nom de l utilisateur Signature électronique Une somme de contrôle du fichier compte-rendu & mesure est calculée et enregistrée avec les fichiers afin de créer une signature électronique 14
15 Logiciel d opération: fenêtre principale: onglet statuts et schéma fluidique Principale-Onglet schéma fluidique connexions actives en surbrillance affichage état / mesure de position vanne paramètres pompe signaux / réglages UV conductivité ph / température niveau réservoir information temps d exécution méthode en fonction méthode en fonction 15
16 Quand allez-vous profiter de tous ces avantages? N hésitez pas à nous contacter our une offre, une information et un support technique, le service après-vente, des informations sur la livraison:... our des informations générales sur Contichrom and MCSGP: Wissenschaftliche Gerätebau Dr. Ing. Herbert Knauer GmbH Hegauer Weg Berlin Allemagne Tel: Fax: contichrom@knauer.net ChromaCon AG Technoparkstrasse Zurich Suisse Tel: Tel: sales@chromacon.ch ChromaCon et Contichrom sont des marques de ChromaCon AG Tous les biens et services sont vendus selon les termes et conditions de KNAUER et ChromaCon. Copies disponibles sur demande ChromaCon AG tous droits réservés. V7710-1FR/x.x/01.14/ Printed on paper awarded the EU Ecolabel EU Ecolabel : FI/11/1
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