LE MEILLEUR DE LA CROI VIROLOGIE. Marie Leoz 12 avril 2013

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1 LE MEILLEUR DE LA CROI VIROLOGIE Marie Leoz 12 avril 2013

2 Réservoirs, Persistance et Eradication Qu est-ce que le réservoir? Caractérisation des cellules réservoirs Stratégies de traitement précoce Stratégies de réactivation du provirus latent Stratégies d intensification du traitement

3 Qu est-ce que le réservoir? Plusieurs types cellulaires infectés, majoritairement LT CD4+ LT CD4+ activé Principal type cellulaire infecté en l absence d ART Forte prolifération Forte production virale Faible durée de vie LT CD4+ mémoire Peu ou pas d expression virale Durée de vie très longue Possibilité de réactivation Siliciano, abs 16

4 Qu est-ce que le réservoir? ART, Charge Virale et cellules infectées Sous ART, les virions ne peuvent plus infecter de nouvelles cellules, mais les CD4 activées infectées produisent toujours des virions La chute de la CV correspond dans un 1 er temps à la disparition des cellules CD4 activées infectées, qui est rapide (demi-vie = 1 jour!) Une deuxième phase de réduction de la charge virale, plus lente, correspond à la disparition d autres types cellulaires infectés La présence de LT CD4+ mémoires infectés quiescents empêche la clairance totale du réservoir La réactivation occasionnelle de ces cellules entraîne une production virale et une CV résiduelle Siliciano, abs 16

5 Qu est-ce que le réservoir? Réservoir passif : pas de nouvelles infections, le provirus persiste dans les cellules infectées sous forme latente VS Réservoir actif : un faible niveau d expression virale résiduelle entraîne de nouvelles infections à bas bruit Stevenson, abs 2

6 Caractérisation des cellules réservoir Les CD4 mémoires sont rares parmi les PBMCs et ne produisent pas de protéines virales du fait de la latence Difficile de les identifier! Comparaison du profil d expression de ces cellules par rapport aux mêmes populations non infectées L expression de nombreux gènes est modifiée dans les cellules infectées de façon latente Parmi eux, 33 marqueurs de surface En particulier, le récepteur de surface CD2 est surexprimé dans les cellules infectées Outil potentiel pour cibler ces cellules ou étudier leur évolution lors de l évaluation de vaccins ou traitements Iglesias-Ussel, abs 45

7 Caractérisation des cellules réservoir Buzon, abs 44: Les LT CD4+ Memory Stem Cells («cellules souches» mémoires) sont une souspopulation réservoir majeure Sous-population de LT CD4+ mémoires La moins différenciée Fort potentiel de prolifération Permettent la production de nouvelles cellules mémoires différenciées après stimulation antigénique Très susceptibles à l infection VIH TN = Naive Cells TSCM = Memory Stem Cells TCM = Central Memory Cells TEM = Effector Memory Cells Buzon, abs 44

8 Caractérisation des cellules réservoir Les LTSCM représentent une faible portion des LT CD4+ mémoires mais sont plus fréquemment infectées Leur contribution au réservoir VIH augmente sous ARV, du fait d une persistance à long terme de ces cellules comparées aux autres souspopulations de LT CD4+ mémoires Buzon, abs 44

9 Caractérisation des cellules réservoir Il n y a pas que les CD4+ mémoires dans le réservoir!!! Yukl, abs 372 : A Comparison of Methods Used to Measure Rectal HIV Levels Suggests that HIV DNA Resides in Cells Other that CD4 T Cells, Including CD45+CD13+ Cells Cellules de la lignée Granulocyte/Monocye (GM) Sans doute d autres compartiments supplémentaires car ADNCD4 + ADNGM < ADNtotal

10 Caractérisation des cellules réservoir Soriano-Sarabia, abs 46: Etude du rôle de réservoir des LTγδ et des LT CD4+ mémoire transitionnels (TTM) LT γδ = environ 1% des LT Susceptibles à l infection par le VIH malgré un profil principalement CD3+ CD4- L expression du CD4 peut être induite chez ces cellules par l IL-2 Phénotype «mémoire» : peuvent persister à très long terme Très forte proportion de cellules infectées dans ce compartiment comparé aux LT CD4+ mémoires

11 Caractérisation des cellules réservoir LT CD4+ TTM = phénotype intermédiaire entre mémoire centrale et mémoire effective Précédemment démontrés comme réservoir majeur (quantification de l ADN proviral) Sorano-Sarabia démontre le contraire! (production de virus replication-compétent)

12 Caractérisation des cellules réservoir Caractérisation du réservoir: bilan Extrêmement complexe! De nombreux compartiments non suspectés Des données contradictoires Des outils en cours de développement

13 Stratégie n 1 Empêcher réduire l établissement du réservoir??? Stratégies de traitement précoce Chez le patient en primo-infection Dans le cadre de la TME

14 Traitement précoce Ananworanich, abs 47: Traitement précoce chez des patients en phase Fiebig I à III (infection < 3 semaines)

15 Traitement précoce Réduction de l ADN viral total à un niveau proche de celui des Elite Controllers L ADN intégré devient indétectable chez 93% des patients Comme pour les ECs, les cellules T mémoires dans lesquelles on retrouve de l ADN intégré sont préférentiellement les TTM et TEM (vs TCM dans les infections chroniques habituelles) TN = Naive Cells TSCM = Memory Stem Cells TCM = Central Memory Cells TTM = Transitional Memory Cells TEM = Effector Memory Cells TTM Ananworanich, abs 47

16 Traitement précoce Luzuriaga, abstract 171LB : Traitement précoce chez des enfants nés de mère VIH (avant l âge de 2 mois) Traitement précoce Traitement plus p= (n=5) tardif (n=4) Patients avec anticorps anti-hiv et réponse spécifique LT CD8+ Patients avec CV résiduelle détectable (CV médiane en cop/ml) Nb médian de copies d ADN proviral par million de PBMCs [extrêmes] Patients présentant VIH compétent pour la réplication dans les LT CD4+ 1/5 4/4 0,048 1/5 (0) 4/4 (8) 0,048 7 [0-15] 182 [69-345] 0,014 0/5 4/4 0,002

17 Traitement précoce Persaud, abstract 48LB : Traitement à 30 heures de vie chez un bébé né de mère HIV et cure fonctionnelle (!) Enfant né à 35 semaines de gestation par voie naturelle : Test rapide de dépistage du VIH réalisé au cours du travail positif chez la mère (CV = c/ml) Pas d administration d ARV pendant la grossesse, ni au cours du travail Transfert dans les 30 heures dans un service spécialisé ARN et ADN VIH positifs (infection confirmée à J2, J7, J12 et J20) Début des ARV : ZDV/3TC/NVP à la 31 e heure jusqu à 7 jours puis ZDV/3TC/LPV/r de 7 jours à 18 mois

18 Traitement précoce Enfant perdu de vue à l âge de 18 mois : arrêt des ARV De nouveau pris en charge à 24 mois : CV indétectable sans ttt ELISA négatif ADN VIH indétectable Controverse! Mère non traitée? Faible CV Atcd inconnus Pas de dosages d ARV Bébé pdv 6 mois Encore peu de recul Arrêt des ARV depuis 8 mois Persaud, abs 48LB

19 Stratégie n 2 Réservoir établi faire sortir le loup du bois??? Stratégies de réactivation du provirus latent

20 Réactivation du provirus latent Réactiver l expression virale pour exposer les cellules infectées au système immunitaire («shock&kill») La latence du provirus est liée à différents mécanismes, dont la séquestration de facteurs cellulaires de la voie NFκB La piste des HDACi: Vorinostat (SAHA) et Romidepsine, qui inhibent les Histones Déacétylases (HDAC), régulateurs d expression génique Elliott, abs 50B

21 Réactivation du provirus latent Elliott, abs 50LB : The Safety and Effect of Multiple Doses of Vorinostat on HIV Transcription in HIV+ Patients Receiving ART Vorinostat induit une augmentation de l expression des ARNm viraux mais pas de réduction de l ADN viral dans les LT CD4+ Elliott, abs 50B

22 Réactivation du provirus latent Wei, abs 376 : Histone Deacetylase Inhibitor Romidepsin Induces HIV in CD4 T Cells from ARTsuppressed Subjects at Concentrations Achieved by Clinical Dosing Efficacité in vitro et ex vivo pour induire une augmentation Efficacité in vitro et ex vivo pour induire une augmentation de l expression des ARNm viraux Réactiver la transcription des ARNm viraux suffit-il à exprimer les protéines virales? Produire des virions?? Tuer la cellule???

23 Réactivation du provirus latent Cillo, abs 371 : Only a small Fraction of HIV-1 Proviruses in Resting CD4 T Cells Can be Induced to Produce Virions ex vivo with anti-cd3/cd28 or Vorinostat fpve= Fractional Provirus Expression (% de provirus induits par traitement ex-vivo) Ho, abs 43 : Characterization of Non- Induced HIV-1 Proviruses Dampens the Hope for HIV-1 Eradiaction La majorité des Provirus non-induits est défective (délétions, hypermutations ) Mais une fraction est intacte et compétente pour la réplication

24 Réactivation du provirus latent Qu est-ce qui bloque l induction de ces provirus compétents? Méthylation des LTR? Site d insertion? Pas d après cette étude mais encore une fois il y a controverse (abs 375) Ho, abs 43

25 Stratégie n 3 Cibler le réservoir «actif» Stratégies d intensification du traitement

26 Intensification du traitement Objectifs : Bloquer l infection de nouvelles cellules : action sur le maintien du réservoir Réduire les perturbations immunitaires et le risque cardiovasculaire causés par la présence résiduelle du virus

27 Intensification du traitement Hatano, abs 42: Increase in 2- LTR circles after RAL Intensification in HAARTsuppressed Patients with High CD4 T Cell Counts Malgré la CV indétectable, l augmentation des formes circulaires à 2 LTR lors de l intensification du traitement par inhibiteur de l intégrase confirme l existence d infections de novo

28 Intensification du traitement Pas d effet néanmoins sur: La quantification ultra-sensible de la CV Le niveau d ADN et d ARN viral dans les cellules La fonction cardio-vasculaire Le niveau d IL-6 (associé au risque cardio-vasculaire) Mais réduction du niveau de D- dimer (associé au risque cardiovasculaire, évènements thromboemboliques veineux et ostéonécrose) Hatano, abs 43

29 Intensification du traitement Katlama, abs 170aLB : Impact of IL- 7 and RAL+MVC intensification on total HIV DNA reservoir: Results from ERAMUNE 01 Combiner une stratégie de réactivation du provirus latent (IL-7) à une stratégie d intensification (inhibiteurs d entrée et d intégration) Pas de réduction de l ADN viral par millions de PBMCs (et même une augmentation dans le bras IL-7! A favorisé la prolifération des TCM, réservoir important)

30 Réservoirs, Persistance et Eradication : BILAN Les réservoirs sont complexes et en cours de caractérisation Le traitement précoce peut réduire l établissement du réservoir La réactivation du provirus latent est encore peu efficace et les causes restent à explorer L intensification du traitement permet de réduire les infections de novo mais pas encore la taille du réservoir

31 AntiRétroViraux Nouveautés sur les molécules actuelles Nouvelles molécules Les cibles thérapeutiques du futur!

32 Nouveautés sur les molécules actuelles

33 Hépatite C

34 Contexte HIV et HCV : de nombreux points communs au niveau de l histoire comme du cycle viral Schooley, abs 5

35 Contexte Genotypes 1a et 1b: Les plus répandus aux US et en Europe Plus difficiles à traiter par INF et RBV que les génotypes 2 ou 3 Schooley, abs 5

36 Contexte Schooley, abs 5

37 Contexte Facteurs d échec: Génotype viral : 1 et 4 vs 2 et 3 Génotype du patient : IL28B Schooley, abs 5

38 Contexte DAA : Direct Acting Antiviral Ciblent les protéines virales Ex d IP: Telaprevir (TVR) Schooley, abs 5

39 Contexte DAA sans IFN Différentes cibles : combinaisons possibles Avec ou sans Ribavirine? NS5A + Protéase Schooley, abs 5

40 Contexte Nouvelles molécules pan-génotypiques Schooley, abs 5

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