réponse cellulaire: Prolifération, Différenciation, survie,apoptose

Transcription

1 Signalisation : Concept Stimuli extérieurs: Facteurs de croissance, Hormones Cytokines Interaction cellule/cellule Récepteur cellule ropagation du signal Somme des évènements moléculaires Intracellulaires induite par un ligand ou une interaction cellule/cellule réponse cellulaire: rolifération, Différenciation, survie,apoptose

2 Cytokines, facteurs de croissance et Hématopoïèse

3 Récepteurs de facteurs de croissance

4 Récepteurs de facteurs de croissance SCF, Flt3L, EGF Récepteurs de cytokines IL-7, IL-2, IL-3 etc.. Domaine Tyr kinase Tyrosine kinase Cytoplasme hosphorylation sur tyrosine (ser/thr)des protéines Transduction du signal Transcription Noyau

5 JAK JAK JAK JAK Trans autophosphorylation hosphorylation du récepteur et recrutement de protéines de signalisation JAK JAK hosphorylation des protéines et transduction du signal

6 JAK JAK SH2 TB Transduction du signal Les Domaines SH2 (Src Homology domain 2) et TB (phospho-tyrosine binding domain)reconnaissent spécifiquement les résidus phosphorylés sur tyrosine des protéines. (Séquence de 100 acides aminés environ)

7 Structures modulaires des protéines de signalisation. Tyrosine kinases Src,Yes, Fyn Lyn, Lck, Blk, Hck, Frg, Yrk SH3 SH2 Domaine Kinase Tec, Btk H SH3 SH2 Adaptateurs moléculaires IRS1/2 H TB Shc TB SH2 GRB2 SH3 SH2 SH3 Tyrosine phosphatases SH-1 SH-2 SH2 SH2 Domaine phosphatase Facteurs de transcription STAT Domaine de liaison à l ADN SH2 Domaine TA SH2: Src Homology Domain 2 SH3: Src Homology Domain 3 H: leckstrin Homology

8 JAK JAK Autres tyrosine kinases Src Stat SOS Grb2 Shc RAS RAF p 85 p110 I3-K MEK Cytoplasm Stat Stat AKT FKHR FKHR MA.K Nucleus Stat Stat FKHR Elk-1 Facteurs de transcription rolifération, survie/apoptose, différenciation

9 Activation Normale Stat Stat phosphatase p 85 p110 AKT I3-K TEN phosphatase MA.K. rolifération, survie cellulaire Régulation négative Activation anormale (cancer, leucémies (Récepteurs, tyrosine kinases mutés) Activation constitutive Stat Stat p 85 p110 I3-K MA.K. AKT Régulation négative rolifération, survie cellulaire

10 Altérations de la transduction du signal en physio-pathologie «hématopoïétique» Mutations, translocations chromosomiques Sur-expression,absence d expression Régulation négative altérée Mutations gain de fonction Mutations perte de fonction Activité constitutive de la transmission du signal Absence de transmission du signal Leucémies, cancer, Déficits immunitaires INSERM 0351

11 Translocations chromosomiques

12 Fusions TEL-JAK2 t(9 ;12)(p24 ;p13) et t(9 ;15 ;12)(p24 ;q15 ;p13) Leucémies aigues lymphoblastiques TEL B Ets JAK2 JH2 JH1 B JH1 LAL-T TEL-JAK2 B JH2 JH1 LMC B JH2 JH1 LALpré-B Kinase constitutivement activée, transformante in vitro Induit des syndromes lympho et myéloprolifératifs chez la souris Induit des Leucémies T (souris transgéniques)

13 BCR-ABL

14 Mutations ponctuelles (récepteurs membranaires)

15 Activation constitutive du récepteur rolifération, survie etc

16 Mutations des JAKs en pathologie Mutations gain de fonction (activation constitutive) JAK1 Mutations activatrices Cancer du colon JAK2 Mutation activatrice (V617F) olycythemia Vera Thrombocytémie essentielle Myélofibrose idiopathique Mutations perte de fonction (kinase inactive) JAK3 Déficit immunitaire combinée sévère (SCID)

17 Activation anormale (leucémies) (Récepteurs, tyrosine kinases mutés) Activation constitutive Stat Stat p 85 p110 I3-K MA.K. AKT Régulation négative rolifération, survie cellulaire

18 Oncogenic tyrosine kinases, Bcr-Abl, Jak2V617F, Tel-Jak2, Tel-Abl, mutated Flt3 and Kit receptors STAT5-Y- Leukemias and/or myeloproliferative diseases

19 Activation constitutive de Stat5 dans la LMC (BCR-Abl) IHC:-Y-Stat5 CML patients

20 Inhibiteurs (Glivec) Bcr-Abl STAT5 -Y- LMC Glivec 5µM - + IB:pSTAT5 IB:STAT5

21 STAT5 est requis pour la leucémogenèse induite par Bcr-Abl. Retrovirus exprimant Bcr-Abl Rétrovirus Bcr-Abl LMC like X No LMC Stat5 -/-

22 L activation constitutive de Stat5 est suffisante pour induire un syndrome myéloprolifératif chez la souris Rétrovirus exprimant une forme mutée constitutivement active de Stat5 Y S(711)F TD DBD LD SH2 TA Multi-lineage Leukemia

23

24 erspectives thérapeutiques Récepteurs, tyrosine kinases mutés Inhibiteurs pharmacologiques X X X Stat Stat p 85 p110 I3-K MA.K. AKT Arrêt de prolifération, mort des cellules Leucémiques ou cancéreuses

25 Leucémie Myéloïde Chronique Sensibilité au traitement par le Gleevec Bcr-Abl Gleevec, Imatinib mesylate (Bloque l activité kinase) STAT5 X rolifération Survie des cellules leucémiques Résistance au traitement Mutations de Bcr-Abl X Gleevec, Imatinib mesylate STAT5 X rolifération survie