Calibración avec point

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1 Guide de Calibration avec Motic Images Plus 2.0ML & Motic Images Advanced 3.2 Calibración avec point Pas 1: Après avoir activé la fenêtre de capture, sélectionner le mode auto dans l exposition. Il est possible que dans certains cas le mode exposition «auto» ne soit pas la meilleure option, si l image n est pas satisfaisante ne pas hésiter à corriger/ajuster celle-ci en mode manuel à l aide de la barre adéquate située juste en dessous. Pas 2: Faire une balance des blancs pour obtenir un meilleur rendu de couleurs. Pour cela sélectionner une zone blanche sur l image, en faisant un click droit avec la souris, et en la faisant glisser. Dans cette zone sélectionnée il ne doit y avoir aucune couleur (seulement de la lumière), cliquer sur l option «appliquer balance des blancs».

2 Pas 3: Dans le menu des options de la caméra, cliquer sur l onglet «options avancées» et cliquer ensuite sur «table de calibration». Dans cette table il apparaît par défaut certains objectifs qui apparaissent automatiquement lors de l installation du logiciel, ces objectifs ne sont pas calibrés, le mieux est tout simplement de les effacer. Pour éliminer un objectif de la table, le sélectionner et faire un click droit, il apparaît l option d éliminer, cliquer sur «éliminer». *Attention ne jamais effacer la ligne «from Host» car c est celle qui permet de faire le lien avec l autre table de calibration qui s utilise pour faire les mesures sur les images déjà capturées. Pas 4: Placer la lame de calibration sur le microscope, et faire la mise au point avec l objectif à calibrer, dans ce cas le 10X, dans notre cas le point de la préparation est celui de 600 µm, vérifier que la mise au point sur le PC soit parfaite, cliquer sur «calibration», une nouvelle fenêtre va s ouvrir, capturant automatiquement l image, maintenant cliquer sur «liste d objectifs» et sélectionner l objectif utilisé (10X), cliquer sur liste de «diamètre» et sélectionner le diamètre du point utilisé (600 µm), cliquer sur «valider».

3 Pas 5: Une nouvelle fenêtre va s ouvrir dans la section «New swing», introduire le nom du nouvel objectif que nous allons créer, dans le cas de notre exemple «10XMOTIC» et valider. Après avoir valider, il est important de rapidement faire une capture d image en cliquant sur «capturer» avant de sélectionner une autre fonction. (Cela permettra à la calibration réalisée d être transférée à la table de calibration II qui s utilise pour les mesures sur les images déjà capturées. Selon «Pas 11», cette opération nous évitera de calibrer à nouveau la table II. Pas 6: Vérifier que le point utilisé pour la calibration apparaît en totalité et en vert, cela signifie que le patron à été correctement enregistré.

4 Pas 7: Si après le processus de calibration le point calibré n apparait pas en entier en vert (voir exemple ci-dessous), la calibration est fausse ; il faut faire les corrections nécessaires Recommencer le processus de calibration du début. Pas 8: Cliquer sur table de calibration, on observe que le nouvel objectif crée apparaît dans la table «10XMOTIC». Sélectionner cet objectif et ça y est on peut insérer des échelles ou quadrillages sur l image en temps réel, (bien sur au préalablement il faut avoir sélectionné cet objectif dans la table).

5 Pas 9: Cliquer sur Echelle et ensuite sur ajuster, il s ouvre une nouvelle fenêtre sur laquelle on peut configurer selon nos besoins deux échelles. Il est possible de personnaliser ces échelles en sélectionnant la taille, la couleur, l épaisseur ainsi que la taille des lettres. (Dans notre exemple on sélectionne 600 µm qui est celui que nous avons utilisé pour calibrer l objectif de 10X) Pas 10: On peut d ores et déjà vérifier que l échelle verticale et horizontale coïncident parfaitement avec la taille du point (600 µm), c est encore un moyen de vérifier que la calibration s est réalisée correctement. *Pour déplacer les barres d échelles, placer le curseur dessus, cliquer, maintenir et faire glisser jusqu à la position souhaitée.

6 Pas 11: Maintenant suivez cette procédure afin de réaliser des mesures sur des images déjà capturées. Souvenez vous dans le «pas 5», juste après avoir calibré, il fallait capturer une image, afin que la calibration réalisée se transfert dans la table II, et ainsi éviter de re calibrer la deuxième table. Maintenant nous allons utiliser la table II. Cette image déjà calibrée est celle du point de 600 µm, cliquer sur l image et celle-ci s activera, à partir de ce moment il apparaît une nouvelle barre d option située en bas, cliquer sur «mesures» et l objectif crée au préalablement pendant la calibration «10XMOTIC» apparaît dans la liste de la table II. Cliquer sur «10XMOTIC». Pas 12: Cliquer sur l icone de mesure ligne.

7 Pas 13: Pour mesurer la longueur totale du point, cliquer maintenir et faire glisser le curseur jusqu à l extrémité de l endroit à mesurer. On peut vérifier à nouveau sur la mesure que le résultat est parfait. NB: Cette procédure d exemple de calibration devra être réalisée pour chacun des objectifs de votre microscope ou stéréo microscope. Le point de référence servant à calibrer doit toujours apparaître en totalité dans le cadre de l image. Nous vous conseillons d utiliser la lame de calibration Motic inclue de série avec nos produits digitaux, qui comporte une échelle et 4 points, utiliser ces points comme référence afin de calibrer chaque objectif comme suit : Objectif 4X point de 1500 µm. Objectif 10X point de 600 µm. Objectif 40X point de 150 µm. Objectif 100X point de 70 µm.