Anti-Tg B2K462 SYSTEM. Anti-Tg /R2 2K46

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1 SYSTEM F Anti-Tg 2K46 B2K /R2 Anti-Tg Lire attentivement cette notice avant d'utiliser le dosage et suivre scrupuleusement les instructions. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si ces instructions ne sont pas strictement respect es. 2005, 2006 Abbott Laboratories / Printed in Germany / ARCHITECT Anti-Tg Juin 2006 L gende des symboles utilis s R f rence Num ro de lot Pour diagnostic in vitro Date d'expiration Conserver entre 2 et 8 C Cupules r actionnelles Godets chantillons Produit par Fisher Scientific, 8365 Valley Pike, Middletown, VA 22645, USA pour Abbott Laboratories, Abbott Park, IL 60064, USA Consulter les instructions d'utilisation Num ro de s rie Mandataire Septum Bouchons de remplacement Lot de r actifs CD-ROM de dosages ABBOTT Max-Planck-Ring Wiesbaden Germany ABBOTT Diagnostics Division 1 Fabricant L'explication compl te des symboles utilis s pour la d nomination des composants se trouve au paragraphe "R actifs". Num ro de contr le

2 DENOMINATION ARCHITECT Anti-Tg DOMAINE D'APPLICATION ARCHITECT Anti-Tg est un dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) pour la d termination quantitative des autoanticorps de type IgG dirig s contre la thyroglobuline (anti-tg) dans le s rum et le plasma humains sur l'architect i. Le dosage ARCHITECT Anti-Tg constitue une aide pour le diagnostic des maladies thyro diennes auto-immunes. RESUME ET EXPLICATION DU TEST La thyro dite auto-immune a t d crite pour la premi re fois par Hashimoto en ; la maladie thyro dienne auto-immune associ e un goitre est appel e thyro dite d'hashimoto. En 1956, Roitt et coll. 2 ont t les premiers d montrer, l'aide d'une r action la pr cipitine, la pr sence d'anticorps anti-tg chez les patients atteints par cette maladie. Contrairement aux autoanticorps dirig s contre la thyroperoxydase (anti-tpo), les auto-anticorps dirig s contre la thyroglobuline ne semblent pas tre des agents pathog nes mais de simples indicateurs de la maladie. 3 Il a t montr qu'ils sont de nature polyclonale et galement h t rog nes par rapport aux sous-classes cha ne lourde. 4-9 La thyroglobuline est une glycoprot ine de daltons constitu e de deux sous-unit s identiques ; elle est la principale prot ine pr sente dans la thyro de. Cette prot ine fournit 40 de ses 140 r sidus de thyrosine pour l'iodation lors de la biosynth se de la thyroxine (T4) et de la triiodothyronine (T3) et est par cons quent responsable de l'accumulation d'iode par la glande thyro de. 10 Bien que les anticorps anti-tg soient pr sents en association avec les anticorps anti-tpo dans la majorit des cas de thyro dite d Hashimoto, de myxoed me primaire et de maladie de Graves, 11,12 jusqu' 1 % des cas d'hypothyro die sont associ s uniquement aux anticorps anti-tg. 13 Les anticorps anti-tg sont associ s des cas d'hypothyro die ou d'hyperthyro die l g re, et sont fr quemment pr sents chez des patients atteints par d'autres maladies auto-immunes telles que l'arthrite rhumato de, l'an mie pernicieuse et le diab te de type I Les anticorps anti-tg sont d tect s chez % des patients atteints de carcinome thyro dien. Chez ces patients, la mesure de l'antig ne Tg doit prendre en compte la probabilit de pr sence ou non de concentrations significatives d'anticorps anti-tg, car la mesure et la d tection de l'antig ne Tg peuvent tre influenc es par la pr sence d'anticorps anti-tg. 17,18 En outre, de faibles concentrations en anticorps anti-tg sont galement d cel es chez 20 % des individus asymptomatiques, en particulier chez les personnes g es et plus fr quemment chez les femmes que chez les hommes, bien que la signification clinique de ces auto-anticorps ne soit pas claire. 19,20 PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE ARCHITECT Anti-Tg est un dosage immunologique en deux tapes pour la d termination quantitative des auto-anticorps de type IgG dirig s contre la thyroglobuline (anti-tg) dans le s rum et le plasma humains, utilisant la technologie de dosage immunologique microparticulaire par chimiluminescence (CMIA) avec des protocoles de dosage flexibles, appel e Chemiflex. Dans un premier temps, l' chantillon, le diluant de dosage et les microparticules paramagn tiques recouvertes de thyroglobuline sont mis en pr sence et incub s. Les anticorps anti-tg pr sents dans l chantillon se lient aux microparticules recouvertes de thyroglobuline. Apr s lavage, le conjugu d'anticorps anti-igg humaine marqu l'acridinium est ajout dans un deuxi me temps. Apr s un deuxi me cycle d'incubation et de lavage, les solutions de pr activation et d'activation sont ajout es au m lange r actionnel. La r action chimiluminescente r sultante est mesur e en unit s relatives de lumi re (URL). Il existe une relation directe entre la quantit d'anticorps anti-tg pr sente dans l' chantillon et le nombre d'url d tect es par le syst me optique ARCHITECT i*. Pour de plus amples informations concernant l'analyseur et la technologie du dosage, se r f rer au chapitre 3 du Manuel Technique ARCHITECT. * i = dosage immunologique REACTIFS Kit de r actifs, 100 tests REMARQUE : Certains conditionnements ne sont pas disponibles dans tous les pays ; contacter votre distributeur local. Kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg (2K46) 1 ou 4 flacons (6,6 ml) de microparticules recouvertes de thyroglobuline humaine (analys e et trouv e non r active pour l'aghbs et pour les anticorps anti-vhc et anti-vih-1/vih-2) dans du tampon MES contenant un stabilisant de prot ines (ch vre). Conservateur : agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacons (5,9 ml) de conjugu d'anticorps anti-igg humaine (souris, monoclonaux) marqu l'acridinium dans du tampon MES contenant un stabilisant de prot ines (bovines). Conservateur : agents antimicrobiens. 1 ou 4 flacons (10,0 ml) de diluant de dosage dans du tampon MES contenant des prot ines (ch vre). Conservateur : agents antimicrobiens. Autres r actifs Solution de pr activation ARCHITECT i Solution de pr activation contenant 1,32 % (m/v) d'eau oxyg n e. Solution d'activation ARCHITECT i Solution d'activation contenant de l'hydroxyde de sodium 0,35 N. Tampon de lavage ARCHITECT i Tampon de lavage contenant une solution saline tamponn e au phosphate. Conservateur : agent antimicrobien. PRECAUTIONS ET RESTRICTIONS D'EMPLOI Pour diagnostic in vitro. Mesures de s curit ATTENTION : Ce produit contient des composants d'origine humaine et/ou potentiellement infectieux. Se r f rer au paragraphe "R actifs" de cette notice pour une liste d taill e. Aucune des m thodes d'analyse actuellement connues ne peut garantir de fa on absolue que les produits d'origine humaine ou provenant de micro-organismes inactiv s ne transmettront pas d'infections. En cons quence, tous les produits d'origine humaine doivent tre consid r s comme potentiellement infectieux. Il est recommand de manipuler les r actifs et les chantillons humains selon les r gles "OSHA Standard of Bloodborne Pathogens. 21 Les mat riaux contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent tre manipul s selon les r gles de bios curit de niveau 2 22 ou autres r gles de bios curit en vigueur. 23,24 La solution d'activation ARCHITECT i contient de l'hydroxyde de sodium (NaOH) et est classifi e selon les directives de la Communaut europ enne (CE) comme : irritante (Xi). Les risques particuliers (R) et les conseils de prudence (S) attribu s cette substance sont les suivants : R41 Risque de l sions oculaires graves. S25 Eviter le contact avec les yeux. S26 En cas de contact avec les yeux, laver imm diatement et abondamment avec de l'eau et consulter un sp cialiste. S35 Ne se d barrasser de ce produit et de son r cipient qu'en prenant toutes pr cautions d'usage. S36/39 Porter un v tement de protection appropri et un appareil de protection des yeux/du visage. S46 En cas d'ingestion, consulter imm diatement un m decin et lui montrer l'emballage ou l' tiquette. Pour les produits non classifi s comme dangereux par la directive europ enne 1999/45/EC (amend e), une fiche de donn es de s curit est disponible pour les professionnels sur simple demande. Pr cautions d'emploi Ne pas utiliser les kits de r actifs au-del de leur date d'expiration. Ne pas m langer les r actifs provenant d'un m me kit ou de kits de r actifs diff rents. Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Pour de plus amples informations sur l'homog n isation des microparticules, se r f rer au paragraphe "Proc dure du dosage" dans la section "Proc dure" de cette notice. 2

3 Des septums DOIVENT tre utilis s afin d'emp cher l' vaporation et la contamination des r actifs et d'assurer leur int grit. La fiabilit des r sultats du dosage ne peut pas tre garantie si les septums ne sont pas utilis s conform ment aux instructions de cette notice. Afin d' viter toute contamination, porter des gants propres lors de l'application d'un septum sur un flacon de r actif d bouch. Avant de placer le septum sur un flacon de r actif d bouch, le plier en 2 pour s'assurer que les fentes sont ouvertes. Si les fentes sont ferm es, continuer plier doucement le septum de mani re les ouvrir. Une fois qu'un septum a t plac sur un flacon de r actif ouvert, ne pas retourner le flacon afin d' viter toute fuite de r actif et de ne pas fausser les r sultats du dosage. Avec le temps, il se peut que des liquides r siduels s chent la surface du septum. Il s'agit de sels secs qui n'ont aucune incidence sur la performance du dosage. Pour de plus amples informations sur les pr cautions d'emploi lors du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au chapitre 7 du Manuel Technique ARCHITECT. Conditions de conservation Le kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg doit tre conserv entre 2 et 8 C en position verticale et peut tre utilis imm diatement apr s sa sortie du r frig rateur (2 8 C). Les r actifs sont stables jusqu' leur date d'expiration s'ils sont conserv s et manipul s selon les indications du fabricant. Le kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg peut tre conserv bord de l'architect i pendant 30 jours au maximum. Au-del de ce d lai, le kit de r actifs doit tre jet. Une recalibration peut s'av rer n cessaire afin d'obtenir une stabilit maximum des r actifs dans l'appareil. Pour de plus amples informations sur le suivi de la stabilit bord des r actifs, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Les r actifs peuvent tre conserv s l'int rieur ou l'ext rieur de l'architect i. Si les r actifs sont retir s du syst me, les conserver entre 2 et 8 C (munis de septums et de bouchons de remplacement) en position verticale. Pour les r actifs conserv s l'ext rieur de l'analyseur, il est recommand de les replacer dans leurs portoirs et emballage d'origine afin de les maintenir dans une position verticale. Si le flacon de microparticules (muni d'un septum) ne reste pas dans une position verticale pendant sa conservation au r frig rateur l'ext rieur de l'analyseur, le kit de r actifs doit tre jet. Si des r actifs sont retir s de l'analyseur, il faut initialiser une lecture du carrousel r actifs afin d'actualiser leur temps de stabilit dans l'appareil. Indications de d t rioration des r actifs Un contr le dont la valeur se situe en dehors des limites sp cifi es peut indiquer une d t rioration des r actifs ou des erreurs de technique. Les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie ne sont pas corrects et ces chantillons devront tre r analys s. Une recalibration du dosage peut tre n cessaire. Pour de plus amples informations sur le d pannage, se r f rer au chapitre 10 du Manuel Technique ARCHITECT. FONCTIONNEMENT DE L'APPAREIL Avant d'effectuer le dosage, le fichier du dosage ARCHITECT Anti-Tg doit tre install sur l'architect i partir du CD-ROM de dosages ARCHITECT i - Addition B. Pour de plus amples informations sur l'installation d'un fichier de dosage ainsi que sur la visualisation et la modification des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 2 du Manuel Technique ARCHITECT. Pour de plus amples informations sur l'impression des param tres de dosage, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Pour une explication d taill e du fonctionnement de l'analyseur, se r f rer au Manuel Technique ARCHITECT. L'unit de r sultat par d faut du dosage ARCHITECT Anti-Tg est l UI/ml*. * UI = Unit internationale (IU = International Unit) PRELEVEMENT ET PREPARATION DES ECHANTILLONS POUR L'ANALYSE Types d' chantillons utiliser Les tubes de pr l vement d chantillons suivants peuvent tre utilis s pour le dosage ARCHITECT Anti-Tg. L interf rence pour tous les types de tubes r pertori s ci-apr s tait inf rieure 10 % par rapport celle obtenue pour le s rum pr lev dans des tubes non rev tus (sans additif) : Verre Plastique S rum Aucun additif Tubes s parateurs (non rev tu) de s rum H parinate de lithium H parinate de lithium Tubes s parateurs Tubes s parateurs de de plasma avec plasma avec Plasma h parinate de lithium h parinate de lithium EDTA H parinate de sodium EDTA Aucun autre anticoagulant n'a t valid pour l'utilisation avec le dosage ARCHITECT Anti-Tg. Suivre les instructions du fabricant pour le traitement des tubes de pr l vement de s rum ou de plasma. Lors de l' valuation de s ries d' chantillons, il est recommand d'utiliser le m me type d' chantillons pendant toute l' tude. L'ARCHITECT i n'est pas configur pour d tecter le type d' chantillon utilis pour le dosage. Il revient par cons quent l'utilisateur de v rifier que les types d' chantillons corrects sont utilis s pour le dosage ARCHITECT Anti-Tg. Etats des chantillons Ne pas utiliser d' chantillons pr sentant les caract ristiques suivantes : chantillons inactiv s par la chaleur chantillons pr lev s sur des cadavres ou fluides corporels autres que le s rum ou le plasma contamination microbienne vidente Manipuler les chantillons patient avec pr caution afin d' viter toute contamination crois e. Il est recommand d'utiliser des pipettes ou des embouts usage unique. V rifier l'absence de bulles dans tous les chantillons. Si des bulles sont pr sentes, les liminer l'aide d'un b tonnet avant l'analyse. Utiliser un b tonnet neuf pour chaque chantillon afin d' viter toute contamination crois e. Les chantillons de s rum et de plasma ne doivent pas contenir de fibrine, de globules rouges ou d'autres particules en suspension. Pour les chantillons de s rum, s'assurer que le caillot s'est compl tement form avant de les centrifuger. Certains chantillons, en particulier ceux provenant de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peuvent pr senter des temps de coagulation lev s. Si l' chantillon est centrifug avant la formation compl te du caillot, la pr sence de fibrine peut entra ner des r sultats erron s. Pr paration pour l'analyse Les chantillons patient d'aspect trouble doivent tre centrifug s avant d' tre analys s. Apr s centrifugation, viter de pr lever l' chantillon au niveau de la couche lipidique (si elle est pr sente) lors du pipetage dans un godet- chantillon ou un tube secondaire. Les chantillons doivent tre homog n is s AVEC SOIN apr s d cong lation, en les passant au Vortex une vitesse FAIBLE ou en les retournant doucement, puis centrifug s avant emploi de fa on liminer les globules rouges ou les particules en suspension et obtenir des r sultats coh rents. Eviter les cycles de cong lation/d cong lation r p t s. Analyser tous les chantillons ( chantillons patient, contr les et calibrateurs) dans les 3 heures qui suivent leur chargement dans l'architect i. Pour de plus amples informations sur les conditions de conservation des chantillons dans l'appareil, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Conservation Si le dosage est effectu plus de 8 heures apr s le pr l vement, s parer le s rum ou le plasma du gel s parateur de s rum ou de plasma, des globules rouges ou du caillot. Les chantillons s par s du gel s parateur, des globules rouges ou du caillot peuvent tre conserv s jusqu' 72 heures entre 2 et 8 C. Les chantillons peuvent tre conserv s congel s une temp rature inf rieure ou gale -10 C pendant 30 jours au maximum. 3

4 Transport Lorsque des chantillons sont exp di s, il est recommand de les s parer du gel s parateur de s rum ou de plasma, des globules rouges ou du caillot. Lorsque des chantillons sont exp di s, ils doivent tre conditionn s et tiquet s conform ment la l gislation r gissant le transport des chantillons cliniques et des substances infectieuses. Les chantillons doivent tre exp di s congel s (sur carboglace). Ne pas d passer les dur es de conservation indiqu es pr c demment. PROCEDURE Mat riel fourni 2K46 Kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg Mat riel n cessaire mais non fourni Analyseur ARCHITECT i 3K51 ARCHITECT i - Version am ricaine - Addition B 3K53 ARCHITECT i - Version internationale ( l'exception des Etats-Unis) - Addition B 2K46-01 Calibrateurs ARCHITECT Anti-Tg 2K46-10 Contr les ARCHITECT Anti-Tg Pipettes ou embouts de pipettes (facultatif) Pour de plus amples informations sur le mat riel requis pour les proc dures de maintenance, se r f rer au chapitre 9 du Manuel Technique ARCHITECT. Proc dure d'analyse Avant de charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg sur l'analyseur pour la premi re fois, le flacon de microparticules doit tre homog n is afin de remettre en suspension les microparticules qui se sont d pos es pendant le transport. Retourner le flacon de microparticules 30 fois. Examiner le flacon pour s'assurer que les microparticules sont remises en suspension. S'il reste encore des microparticules coll es au flacon, continuer retourner ce dernier jusqu' ce qu'elles soient compl tement remises en suspension. Si les microparticules ne se remettent pas en suspension, NE PAS LES UTILISER. Contacter Abbott Assistance. Une fois les microparticules remises en suspension, retirer et jeter le bouchon. Retirer un septum de la pochette en portant des gants propres. Plier le septum en 2 pour s'assurer que les fentes sont ouvertes. Placer soigneusement le septum sur l'ouverture du flacon. Si n cessaire, demander une calibration. Pour de plus amples informations sur les demandes de calibration, se r f rer au chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT. Demander les analyses. Pour de plus amples informations sur les demandes d'analyse des chantillons patient et des contr les, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Charger le kit de r actifs ARCHITECT Anti-Tg sur l'architect i. V rifier que tous les r actifs requis sont pr sents. S'assurer que chaque flacon de r actif est recouvert d'un septum. Le volume minimum d' chantillon requis est calcul par le syst me et imprim sur le rapport Liste des demandes. Ne pas pr lever plus de 10 r pliques partir du m me godet- chantillon. V rifier que le volume d' chantillon ad quat est pr sent dans le godet chantillon avant d'effectuer le dosage. Echantillon prioritaire : 75 µl pour le premier dosage ARCHITECT Anti-Tg, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT Anti-Tg suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Echantillon analys en routine dans les 3 heures qui suivent le chargement dans l'appareil : 150 µl pour le premier dosage ARCHITECT Anti-Tg, plus 25 µl pour chaque dosage ARCHITECT Anti-Tg suppl mentaire effectu sur le m me godet- chantillon. Afin de minimiser les pertes par vaporation, tous les chantillons ( chantillons patient, calibrateurs et contr les) devront tre analys s dans les 3 heures qui suivent leur chargement dans l'architect i. En cas d'utilisation de tubes primaires ou aliquots, utiliser la jauge chantillon afin de s'assurer que le volume d' chantillon patient est suffisant. Pr parer les calibrateurs et les contr les. Les calibrateurs et les contr les ARCHITECT Anti-Tg doivent tre pr par s conform ment aux instructions figurant dans les notices respectives. Pour obtenir les volumes requis de calibrateurs et de contr les ARCHITECT Anti-Tg, tenir les flacons la verticale et distribuer 5 gouttes de chacun des calibrateurs ou contr les dans les godets- chantillons respectifs. Charger les chantillons. Pour de plus amples informations sur le chargement des chantillons, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. Appuyer sur la touche LANCER. Le syst me proc de aux tapes suivantes : D place l' chantillon vers le point d'aspiration. Charge une cupule r actionnelle (CR) dans la couronne r actionnelle. Aspire et distribue l' chantillon dans la CR. D place la CR d'une position et distribue le diluant de dosage et les microparticules dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute le conjugu dans la CR. Homog n ise, incube et lave le m lange r actionnel. Ajoute les solutions de pr activation et d'activation. Mesure l' mission chimiluminescente pour d terminer la quantit d'anticorps anti-tg pr sents dans l' chantillon. Evacue le contenu de la CR vers la poubelle pour d chets liquides et d charge la CR dans la poubelle pour d chets solides. Calcule le r sultat. Pour obtenir une performance optimale, il est important de suivre les proc dures de maintenance de routine d crites au chapitre 9 du Manuel Technique ARCHITECT. Si votre laboratoire requiert une maintenance plus fr quente, se conformer ces exigences. Proc dures de dilution des chantillons Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-tg est sup rieure 1 000,00 UI/ml sont annot s "> " et peuvent tre dilu s l'aide du protocole de dilution automatique ou de la proc dure de dilution manuelle. Protocole de dilution automatique Selon ce protocole, le syst me effectue une dilution au 1/10 e de l' chantillon, puis calcule automatiquement la concentration de l' chantillon avant dilution et enregistre le r sultat. Les chantillons dont la concentration en anticorps anti-tg est sup rieure ,00 UI/ml sont annot s "> " quand ils sont analys s avec le protocole de dilution automatique. Ces chantillons peuvent tre dilu s avec la proc dure de dilution manuelle. Proc dure de dilution manuelle Les dilutions manuelles doivent tre effectu es de la mani re suivante : La dilution manuelle recommand e pour le dosage anti-tg est de 1/20 e. Avant de diluer les chantillons, distribuer environ 10 gouttes de calibrateur A ARCHITECT Anti-Tg dans un tube propre utiliser dans l' tape suivante. Transf rer 190 µl de calibrateur A ARCHITECT Anti-Tg du tube pr par lors de l' tape pr c dente dans un autre tube propre et ajouter 10 µl d' chantillon patient. Saisir le facteur de dilution dans l' cran Demande de patient ou Demande de contr le. Le syst me utilisera ce facteur de dilution afin de calculer automatiquement la concentration de l' chantillon avant la dilution. Cette concentration constituera le r sultat rendu. La dilution doit tre effectu e de sorte que le r sultat de l' chantillon dilu (avant application du facteur de dilution) soit sup rieur la sensibilit du dosage (1,00 UI/ml). Pour de plus amples informations sur les demandes de dilution, se r f rer au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. 4

5 Calibration Pour la calibration du dosage ARCHITECT Anti-Tg, analyser les calibrateurs A, B, C, D, E et F en double. Un chantillon de chaque niveau de contr le ARCHITECT Anti-Tg doit ensuite tre analys afin de pouvoir valuer la calibration du dosage. S'assurer que les valeurs des contr les du dosage se situent dans les limites de concentration sp cifi es dans la notice des contr les. Les calibrateurs doivent tre charg s en position prioritaire. Plage de calibration : 0, ,0 UI/ml. Lorsque la calibration du dosage ARCHITECT Anti-Tg a t accept e et m moris e, tous les chantillons suivants peuvent tre analys s sans effectuer de nouvelle calibration, sauf si : Un kit de r actifs portant un nouveau num ro de lot est utilis. Les valeurs des contr les se situent en dehors des limites sp cifi es. Pour de plus amples informations sur la proc dure de calibration d'un dosage, se r f rer au chapitre 6 du Manuel Technique ARCHITECT. PROCEDURES DU CONTROLE DE QUALITE Le contr le de qualit recommand pour le dosage ARCHITECT Anti-Tg consiste analyser un chantillon de chaque niveau de contr le une fois toutes les 24 heures d'utilisation. Si les proc dures du contr le de qualit du laboratoire exigent une utilisation plus fr quente des contr les pour v rifier les r sultats d'analyse, se conformer ces exigences. Les valeurs des contr les ARCHITECT Anti-Tg doivent se situer dans les limites sp cifi es dans la notice des contr les. Si tel n'est pas le cas, les r sultats des chantillons analys s dans la m me s rie ne sont pas valides et ces chantillons devront tre r analys s. Une recalibration peut alors tre n cessaire. V rification des performances du dosage Pour de plus amples informations sur les protocoles de v rification des performances du dosage mentionn es dans la notice, se r f rer l'annexe B du Manuel Technique ARCHITECT. Le dosage ARCHITECT Anti-Tg appartient au groupe 1. Utiliser les calibrateurs ARCHITECT Anti-Tg la place des MasterCheck comme d crit dans l'annexe B du Manuel Technique ARCHITECT. RESULTATS Calculs Le dosage ARCHITECT Anti-Tg utilise une m thode de traitement des donn es par ajustement de la courbe logistique 4 param tres (4PLC, Y) pour cr er une courbe de calibration. Annotations La rubrique "Annotations" peut contenir des informations sur certains r sultats. Une description des annotations qui peuvent appara tre dans cette rubrique est fournie au chapitre 5 du Manuel Technique ARCHITECT. LIMITES DE LA METHODE La d termination des anticorps n est qu'un l ment dans un diagnostic crit res multiples. Lors du diagnostic d'une maladie thyro dienne, il convient d'utiliser une combinaison de diff rentes m thodes d'analyses en association avec les sympt mes cliniques. Environ 20 % des chantillons de patients asymptomatiques peuvent contenir des auto-anticorps anti-tg, ce qui refl te la pr valence dans les populations apparemment saines. La pr valence des anticorps anti-tg peut galement d pendre de l' ge, du sexe et des facteurs g ographiques de la population s lectionn e. Il se peut que la dilution de certains chantillons ne soit pas lin aire en raison de l'h t rog n it des propri t s physiochimiques des autoanticorps. Les chantillons pr lev s sur des patients auxquels ont t administr es des pr parations d'anticorps monoclonaux de souris des fins diagnostiques ou th rapeutiques peuvent contenir des anticorps humains anti-souris (HAMA). 25 De tels chantillons peuvent donner des r sultats faussement lev s ou abaiss s lorsqu'ils sont analys s avec des kits de dosage qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris. 25,26 Les r sultats de dosage qui ne concordent pas avec les autres observations cliniques peuvent n cessiter des informations compl mentaires pour tablir un diagnostic. Les anticorps h t rophiles pr sents dans le s rum humain peuvent r agir avec les immunoglobulines des r actifs, interf rant ainsi avec les dosages immunologiques in vitro. 27 La pr sence d'anticorps h t rophiles dans un chantillon patient peut conduire l'obtention de valeurs anormales. 27 Pour tablir un diagnostic, de plus amples informations peuvent tre n cessaires. VALEURS ATTENDUES Une tude a t men e avec des chantillons de s rum humain pr lev s sur une population de 234 sujets apparemment sains. Tous les chantillons ont fourni des valeurs de TSH situ es dans les limites de r f rence normales. 6 chantillons de cette population ont fourni des r sultats positifs par un dosage anti-tg disponible dans le commerce et ont t exclus de l' tude. La concentration du 97,5 me percentile de la population restante tait de 4,11 UI/ml. Sur la base de cette tude, la plage des valeurs normales a t d termin e comme tant < 4,11 UI/ml. 97,8 % (223/228) de cette population ont fourni des valeurs comprises dans la plage des valeurs normales.* Ces valeurs sont propos es titre indicatif ; chaque laboratoire devra tablir ces propres limites de normalit en fonction de la population desservie, en tenant compte de l' ge, du sexe, des facteurs g ographiques et des pratiques cliniques. CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES Reproductibilit Le dosage ARCHITECT Anti-Tg est con u de mani re fournir une reproductibilit < 10% (CV total) pour les chantillons > 4,0 IU/ml. Une tude a t men e selon les recommandations du protocole EP5-A 28 du National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Le contr le positif ARCHITECT Anti-Tg et 4 panels humains ont t analys s en double sur 3 appareils, l'aide de 3 lots de r actifs, 2 fois par jour, pendant 20 jours. Une seule courbe de calibration a t utilis e pour chaque lot de r actifs pendant toute l' tude. Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Conc. Lot de moyenne Intra-s rie Total Echantillon Appareil r actifs n (UI/ml) E.T. CV (%) E.T. CV (%) 1 A ,83 2,94 2,0 4,69 3,2 B ,99 3,13 2,1 4,53 3,0 C ,35 3,41 2,3 4,10 2,7 2 A ,19 3,81 2,5 4,22 2,8 Contr le B ,22 2,71 1,8 3,47 2,3 positif C ,63 3,46 2,4 3,90 2,7 3 A ,23 2,85 2,0 4,76 3,3 B ,41 3,14 2,1 4,15 2,8 C ,82 3,51 2,4 4,70 3,2 1 A 80 4,16 0,15 3,6 0,21 5,0 B 80 4,12 0,11 2,7 0,13 3,1 C 80 3,84 0,11 3,0 0,16 4,3 2 A 80 4,08 0,18 4,4 0,25 6,2 Panel 1 B 80 3,78 0,11 2,9 0,14 3,7 C 80 3,88 0,13 3,5 0,17 4,5 3 A 80 4,26 0,17 4,0 0,27 6,2 B 80 4,26 0,11 2,7 0,20 4,8 C 80 3,73 0,11 3,0 0,21 5,7 1 A 80 17,27 0,45 2,6 0,62 3,6 B 80 17,38 0,80 4,6 0,85 4,9 C 80 16,99 0,38 2,3 0,50 3,0 2 A 80 17,46 0,49 2,8 0,66 3,8 Panel 2 B 80 17,32 0,40 2,3 0,53 3,1 C 80 17,16 0,41 2,4 0,56 3,3 3 A 80 17,61 0,46 2,6 0,79 4,5 B 80 17,80 0,44 2,5 0,67 3,7 C 80 16,68 0,48 2,9 0,94 5,6 1 A ,42 6,17 1,7 12,25 3,3 B ,83 11,28 2,7 11,66 2,8 C ,51 13,64 3,2 17,14 4,1 2 A ,97 9,74 2,5 14,30 3,7 Panel 5 B ,17 12,54 2,8 21,81 4,9 C ,97 12,36 3,0 19,00 4,7 3 A ,42 13,69 3,5 16,96 4,3 B ,02 12,38 2,8 22,10 4,9 C ,86 13,35 3,1 21,25 4,9 1 A ,28 21,82 3,0 28,40 3,8 B ,48 25,09 3,3 28,03 3,7 C ,34 33,05 4,4 35,69 4,7 2 A ,26 23,19 3,1 25,63 3,4 Panel 6 B ,80 27,45 3,5 29,58 3,7 C ,07 23,92 3,2 28,95 3,9 3 A ,71 55,03 6,6 68,26 8,2 B ,48 30,16 3,6 51,23 6,1 C ,29 37,90 5,0 45,10 5,9 5

6 Sensibilit fonctionnelle Lors d'une tude, des panels humains, pr sentant des concentrations comprises entre 0,07 et 1,38 UI/ml, ont t analys s en double sur 1 analyseur, pendant 10 jours, l'aide de 2 lots de r actifs et de 3 calibrations, pour un total de 40 r pliques par panel. Les CV (%) totaux (combinant les composantes de la variance par r plique, s rie, jour et lot de r actifs) ont t calcul s et trac s en fonction de la concentration moyenne. Une courbe r ciproque a ensuite t trac e l'aide de ces donn es et la valeur de sensibilit fonctionnelle du dosage a t calcul e comme tant gale la concentration correspondant un coefficient de variation de 20 % de la courbe ajust e. La plus faible valeur obtenue par le dosage ARCHITECT Anti-Tg pr sentant un CV de 20 % est de 0,31 UI/ml.* Sensibilit Le dosage ARCHITECT Anti-Tg a t con u de mani re fournir une limite de d tection < 1,0 UI/ml. La limite de d tection du dosage ARCHITECT Anti-Tg, d finie comme tant gale la concentration 2 carts-types audessus du calibrateur A ARCHITECT Anti-Tg (0,0 UI/ml), a t d termin e comme tant gale 0,07 UI//ml* avec un intervalle de confiance 95 % (sur la base d une tude pour laquelle n = 48 s ries et 10 r pliques du calibrateur A et 4 r pliques du calibrateur B ont t analys es par s rie). Lin arit Selon une tude effectu e sur la base du protocole EP6-A 29 du NCCLS, le dosage ARCHITECT Anti-Tg est lin aire entre 3,0 et 1 000,0 UI/ml. 3 pools d chantillons de concentration lev e (1 000, 300 et 30 UI/ml) ont t combin s un pool de faible concentration (calibrateur A ARCHITECT Anti-Tg) afin d obtenir 9 s ries de dilutions allant jusqu 1/10 e de la concentration de d part. Toutes ces dilutions ont t analys es avec le dosage ARCHITECT Anti-Tg l aide d un seul lot de r actifs. V rification par autodilution Le protocole de dilution automatique ARCHITECT Anti-Tg fournit un pourcentage de r cup ration de 20 % des chantillons dilu s manuellement. Lors d'une tude, le protocole de dilution automatique (1/10 e ) a t compar la proc dure de dilution manuelle au 1/10 e l'aide de 6 chantillons humains dont les concentrations en anticorps anti-tg taient sup rieures celle du calibrateur E (500 UI/ml). La dilution manuelle a t effectu e l'aide du calibrateur A ARCHITECT Anti-Tg. Les r sultats de r cup ration (%) observ s sont r sum es dans le tableau suivant.* Dilution auto- Dilution manuelle % de Echantillon matique (UI/ml) (UI/ml) r cup ration** , ,50 98, , ,87 100, ,79 621,43 117, ,55 561,10 99, ,66 973,70 102, ,18 562,63 93,5 Dilution automatique (UI/ml) ** % de r cup ration = x 100 Dilution manuelle (UI/ml) Interf rence L'interf rence potentielle de taux lev s de bilirubine, d'h moglobine, de triglyc rides et de prot ines totales dans le dosage ARCHITECT Anti-Tg est < 15 % aux concentrations indiqu es. Une tude a t men e pour le dosage ARCHITECT Anti-Tg sur la base du protocole EP7-A 30 du NCCLS. Les substances potentiellement interf rentes suivantes ont t ajout es des chantillons pr sentant des taux d'anticorps anti-tg compris entre 53,41 et 320,25 UI/ml. L'interf rence moyenne observ e lors de cette tude tait comprise entre -3,8 % et +1,7 %.* Substance potentiellement Concentration de la substance interf rente potentiellement interf rente Bilirubine 20 mg/dl H moglobine mg/dl Prot ines totales (basses) 4 g/dl Prot ines totales ( lev es) 10 g/dl Triglyc rides mg/dl Evaluation d' chantillons de patients atteints de maladies auto-immunes et d' chantillons titres lev s d'igg L'interf rence potentielle d' chantillons provenant de patients atteints de maladies auto-immunes et d' chantillons titres lev s d'igg avec le dosage ARCHITECT Anti-Tg est de < 20 %. Lors d'une tude, le dosage ARCHITECT Anti-Tg a t valu en analysant des chantillons provenant de patients atteints de maladies auto-immunes diagnostiqu s et des chantillons titres lev s d'igg. Les chantillons analys s ont t surcharg s d'anticorps anti-tg et pr sentaient des concentrations comprises entre 175,58 et 235,86 UI/ml. Les valeurs du pourcentage d'interf rence absolu moyen sont r sum s dans le tableau ci-apr s.* Facteur clinique Interf rence moyenne absolue (%) Anticorps anti-nucl aires 1,2 Arthrite rhumato de 1,8 Lupus ryth mateux syst mique 2,1 Diab te sucr insulino-d pendant 3,0 Maladie de Crohn 2,5 Scl rose en plaques 3,6 Colite ulc reuse 2,6 Hyperglobulin mie (IgG lev ) 4,5 Evaluation d'autres substances potentiellement interf rentes L'interf rence potentielle des anticorps HAMA et du facteur rhumato de (FR) dans le dosage ARCHITECT Anti-Tg est < 20 %. Lors d'une tude, le dosage ARCHITECT Anti-Tg a t valu en analysant des chantillons contenant des HAMA et le FR pour une valuation suppl mentaire de la sp cificit clinique. Des chantillons positifs pour les HAMA et des chantillons positifs pour le FR ont t valu s pour d terminer le pourcentage d'interf rence avec des concentrations d'anticorps anti-tg surcharg es comprises entre 218,05 et 235,86 UI/ml. Les valeurs du pourcentage d'interf rence absolu moyen sont r sum s dans le tableau ci-apr s.* Interf rence Autres substances Nombre moyenne interf rentes d' chantillons absolue (%) Positifs pour HAMA 10 1,3 Positifs pour FR 10 1,8 Sensibilit Clinique Lors d'une tude, la sensibilit clinique a t valu e en analysant 68 chantillons de patients cliniquement diagnostiqu s comme atteints de thyro dite d'hashimoto et 85 chantillons de patients atteints de la maladie de Graves. Le diagnostic clinique a t tabli selon les crit res des laboratoires respectifs. La pr sence d'auto-anticorps dirig s contre la thyroglobuline et/ou la TPO ne constituait pas n cessairement un crit re de diagnostic de maladie de Graves et de thyro dite d'hashimoto. Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau suivant.* Thyro dite d'hashimoto Maladie de Graves n Positifs (%) n Positifs (%) 68 75, ,3 Effet crochet L effet crochet est un ph nom ne par lequel des chantillons de concentration tr s lev e peuvent fournir des r sultats erron s compris dans la plage de mesure du dosage. Pour le dosage ARCHITECT Anti-Tg, aucun effet crochet n a t observ lors de l analyse d chantillons contenant jusqu UI/ml d anticorps anti-tg. Concordance La performance du dosage ARCHITECT Anti-Tg a t compar e celle d'un autre dosage immunologique pour la d termination des anticorps anti- Tg, disponible dans le commerce. Lors de cette tude, 234 chantillons provenant de sujets apparemment sains et de patients pr sentant une maladie thyro dienne auto-immune (maladie de Graves et thyro dite d'hashimoto) ont t analys s. Une r plique de chaque chantillon a t analys e par le dosage ARCHITECT Anti-Tg, sur trois appareils, l'aide de 3 lots de r actifs. Les r sultats ont t compar s ceux obtenus avec un dosage immunologique disponible dans le commerce (dosage de comparaison). Les donn es de cette tude sont r sum es dans le tableau ci-apr s.* 6

7 Dosage de comparaison ARCHITECT Anti-Tg N gatifs Positifs N gatifs Positifs Concordance = 92,7 % Limites chantillons (ARCHITECT) = 0, ,6 UI/ml Limites chantillons (dosage de comparaison) = <1, ,0 UI/ml BIBLIOGRAPHIE 1. Hashimoto H. Zur Kenntniss der lymphomat sen Ver nderung der Schilddr se (Struma lymphomatosa). Arch Klin Chir 1912;97: Roitt IM, Doniach D, Campbell PN, et al. Auto-antibodies in Hashimoto s Disease (Lymphadenoid Goitre). Lancet 1956;6947: Tomer Y. Anti-thyroglobulin autoantibodies in autoimmune thyroid diseases: cross-reactive or pathogenic? Clin Immunol Immunopath 1997;82: Laing P. Both K and λ light chain types are present in thyroid microsomal and thyroglobulin autoantibodies. Proc Univ Otago Me. Sch. 1983;61: Nye L, Decarvalho LP, Roitt IM. An investigation of the clonality of human autoimmune thyroglobulin antibodies and their light chains. Clin Exp Immunol 1981;46: Weetman AP, Black CM, Cohen SB, et al. 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