OV MONITOR. Précaution

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1 OV MONITOR Précaution Avertissement Utilisation Pour les Etats-Unis uniquement, la loi fédérale restreint ce produit à la vente et à la distribution par ou sur l ordre d un médecin, ou à un laboratoire clinique; et l utilisation est restreinte à, par ou sur l ordre d un médecin. La concentration en antigène CA 125, dans un échantillon donné, dosée par des tests provenant de différents fabricants peut varier à cause de différences dans les techniques de tests et la spécificité des réactifs. Les résultats rendus par le laboratoire au médecin doivent inclure l identité du test antigène CA 125 utilisé. Les valeurs obtenues avec les différentes techniques de tests ne peuvent pas être utilisées de façon interchangeable. Si, au cours d un contrôle de patient, la technique de test utilisée pour la détermination des valeurs d antigène CA 125 est changée, des tests séquentiels supplémentaires devront être effectués pour confirmer les valeurs d origine. Le test Access OV Monitor utilise une technique immunoenzymatique chimioluminescente à particules paramagnétiques pour le dosage d antigène CA 125 dans le sérum ou le plasma humain à l aide des Systèmes d Immunoanalyse Access. L utilisation de ce dispositif est recommandé pour le dosage de l antigène CA 125 afin d aider dans la prise en charge de patientes atteintes d un cancer de l ovaire. Le dosage en série de l antigène CA 125 chez les patientes doit être utilisé en conjonction avec d'autres méthodes cliniques utilisées pour la surveillance du cancer de l ovaire. Généralités L antigène CA 125 est un épitope sur une grosse glycoprotéine du type mucine (PM ~ 1000 kda) 1 qui peut se rencontrer à des concentrations élevées dans certaines tumeurs malignes de l ovaire. On ne connaît aucune fonction pour le CA 125. Le cancer de l ovaire est l un des types les plus communs des tumeurs malignes gynécologiques et la quatrième cause la plus fréquente de décès dû à un cancer chez les femmes. 2 Le cancer de l ovaire tend à être asymptomatique à son stade le plus précoce qui est plus curable et de nombreuses patientes présentent une maladie étendue au moment de sa découverte. Certains facteurs pronostiques favorables incluent un âge plus jeune, un stade plus précoce, une tumeur bien différenciée et de petit volume avant une intervention chirurgicale. 3 Les taux en antigène CA 125 n ont aucune valeur pronostique prouvée lorsqu ils sont utilisés soit pour le dépistage soit au moment du diagnostic. Toutefois, les taux en antigène CA 125 sont en corrélation avec l état de la patiente après un traitement initial. 4,5 Les taux sériques en antigène CA 125 peuvent être utilisés en tant qu'aide dans la surveillance de la réponse d une thérapie pour les patientes atteintes d un épithéliome ovarien. La présence de taux d antigène CA 125 en augmentation constante peut être corrélée avec une progression de la maladie. Des taux d antigène CA 125 constamment élevés indiquent une réponse faible à la thérapie, tandis que des taux d antigène CA 125 décroissants peuvent indiquer une réponse positive à la thérapie. 6,7,8 Les taux d antigène CA 125 sont élevés chez de nombreuses patientes atteintes d un épithéliome ovarien. Ils peuvent être également élevés dans des maladies autres que l épithéliome ovarien, y compris d autres maladies ovariennes bénignes ou malignes, telles que l endométriose, ainsi que dans le cancer du poumon et dans d autres affections non cancéreuses telles que la grossesse Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 1

2 Du point de vue historique, les taux d antigène CA 125 ont été utilisés conjointement avec une intervention chirurgicale de contrôle, mais cette procédure est moins communément utilisée de nos jours. 8,9 Un panel récent de consensus du NIH a recommandé l utilisation de dosages en série du CA 125 à la place d une intervention chirurgicale de contrôle, au moins pour ces femmes présentant une augmentation du CA 125 avant l intervention. 10,11 Le test Access OV Monitor n est pas recommandé en tant qu outil de dépistage. Une valeur située au-dessous de la valeur seuil n indique pas l absence d'un cancer de l ovaire résiduel. D'autres tests cliniquement acceptables doivent également être considérés dans la surveillance d'un cancer de l ovaire et la bonne prise en charge de la patiente. Certains individus ont des anticorps dirigés contre les protéines de souris (HAMA) qui peuvent causer des interférences dans les tests immunologiques utilisant des anticorps produits par des souris. En particulier, il a été rapporté que des échantillons de sérum provenant de patients qui ont été soumis à des procédures diagnostiques ou thérapeutiques incluant des injections d anticorps monoclonaux de souris peuvent générer des résultats erronés dans de tels tests. De plus, d autres anticorps hétérophiles peuvent être présents dans les échantillons de patients. Par conséquent, les résultats provenant de tels patients doivent être utilisés uniquement en conjonction avec les résultats provenant d autres procédures diagnostiques et avec les informations disponibles d après l évaluation clinique du patient. Principe du test Description du produit Le test Access OV Monitor est un test immunoenzymatique à deux sites (type sandwich ). Un échantillon est déposé dans une cuvette réactionnelle avec un conjugué composé d un anticorps monoclonal de souris anti-antigène CA 125 couplé à de la phosphatase alcaline et des particules paramagnétiques sensibilisées avec un second anticorps monoclonal de souris anti-antigène CA 125. L antigène CA 125 contenu dans l échantillon se lie à l anticorps monoclonal anti-antigène CA 125 immobilisé sur la phase solide, alors que l anticorps du conjugué réagit avec un site antigénique différent sur la molécule de l antigène CA 125. Après incubation dans une cuvette réactionnelle, les matériels liés à la phase solide sont maintenus dans un champ magnétique tandis que les matériels non liés sont éliminés par lavage. Puis, le substrat chimioluminescent, Lumi-Phos* 530 est ajouté à la cuvette réactionnelle et la lumière générée par la réaction est mesurée à l aide d un luminomètre. La production de lumière est directement proportionnelle à la concentration d antigène CA 125 présente dans l échantillon. La quantité d analyte présente dans l échantillon est déterminée à l aide d une courbe de calibration multi-points mise en mémoire. Pack Réactifs Access OV Monitor Code : Coffret de 100 dosages, 2 packs, 50 tests/pack Fournis prêts à l emploi. Conserver et réfrigérer entre 2 et 10 C. Les Packs doivent être réfrigérés entre 2 et 10 C pendant deux heures minimum avant d être utilisés sur l instrument. Stables jusqu à la date de péremption indiquée sur l étiquette lorsqu ils sont conservés entre 2 et 10 C. Après ouverture, un Pack est stable entre 2 et 10 C pendant 28 jours. Les signes d une détérioration possible sont la rupture de la couche d élastomère sur le Pack ou des valeurs de contrôle en dehors des intervalles de confiance. Si le pack réactifs est endommagé (c est-à-dire, rupture de la couche d élastomère), jeter le pack. Tous les antisérums sont polyclonaux sauf indication contraire. Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 2

3 R1a: Particules paramagnétiques sensibilisées avec un anticorps de chèvre anti-biotine, anticorps monoclonal de souris biotinylé anti-antigène CA 125, sérum-albumine bovine, < 0,1% d azoture de sodium et 0,1% de ProClin** 300. R1b: Conjugué anticorps monoclonal de souris anti-antigène CA 125 phosphatase alcaline (bovine), sérum-albumine bovine, < 0,1% d azoture de sodium et 0,1% de ProClin 300. R1c: Solution tamponnée de protéines (bovines, chèvre, souris), < 0,1% d azoture de sodium et 0,1% de ProClin 300. Précautions d utilisation Utilisation comme test de diagnostic in vitro. Les échantillons de patients et les produits dérivés du sang peuvent être traités en routine avec un risque minimum si la procédure décrite est respectée. Cependant, manipuler ces produits comme s ils étaient potentiellement infectieux en suivant les précautions universelles et les bonnes pratiques de laboratoire, quels que soient leur origine, leur traitement ou leur certification antérieure. Utiliser un désinfectant approprié pour la décontamination. Conserver et éliminer ces produits et leurs récipients en suivant les règlements et les procédures locales. L azoture de sodium peut réagir avec la tuyauterie en plomb ou en cuivre pour former des azotures métalliques hautement explosifs. Lors de l évacuation des liquides, déverser un volume d eau important afin de prévenir la formation de tels azotures. 12 Xi. Irritant: 0,1% ProClin 300. R 43: Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. S 28-37: Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. La fiche de sécurité est disponible sur demande. Recueil et préparation de l échantillon 1. Nature de l échantillon: sérum et plasma (hépariné). 2. Respecter les recommandations suivantes en ce qui concerne la manipulation, le traitement et la conservation des échantillons sanguins: 13 Prélever tous les échantillons sanguins en observant les précautions de routine concernant la ponction veineuse. Pour les sérums, laisser les échantillons coaguler complètement avant la centrifugation. Garder les tubes toujours bouchés. Dans les deux heures suivant la centrifugation, transférer au moins 500 μl d échantillon dépourvu de cellules dans un tube de conservation. Bien boucher le tube immédiatement. Ne pas conserver les échantillons dans des tubes bien bouchés à température ambiante (15 à 30 C) pendant plus de huit heures. Si le dosage n est pas terminé dans les huit heures qui suivent, réfrigérer les échantillons entre 2 et 8 C. Si le dosage n est pas terminé dans les 48 heures qui suivent, ou pour l expédition des échantillons, congeler à -20 C ou à une température inférieure. Ne décongeler les échantillons qu une fois. 3. Observer les recommandations suivantes lors de la préparation des échantillons: S assurer que toute fibrine résiduelle et toute matière cellulaire ont été éliminées avant l analyse. Suivre les recommandations du fabricant concernant le tube de prélèvement du sang pour la centrifugation Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 3

4 4. Chaque laboratoire doit déterminer l acceptabilité de ses propres tubes de prélèvement de sang et produits de séparation du sérum. Des variations peuvent exister pour ces produits entre les fabricants et, parfois, de lot à lot. Matériel fourni R1 Packs Réactifs Access OV Monitor Matériel nécessaire mais non fourni Observations techniques Procédure Détails de la calibration Contrôle de qualité 1. Calibrateurs: Access OV Monitor Calibrators Fournis à des concentrations de zéro et approximativement 25, 100, 500, 2000 et 5000 U/mL. Code Matériels de contrôle de qualité (QC): matériel commercial de contrôle. 3. Diluant pour échantillon: Access Sample Diluent A Flacon Code Pack Diluant Code A79783 (A utiliser avec le caractère de dilution chargé sur le système UniCel DxI.) 4. Substrat: Access Substrate Code Access, Access 2, SYNCHRON LXi: Solution de lavage: Access Wash Buffer II, Cat. No. A16792 UniCel DxI: Solution de lavage: UniCel DxI Wash Buffer II, Cat. No. A Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir une description de l installation, du démarrage, des principes de fonctionnement, des performances, des instructions de fonctionnement, des procédures de calibration, des limites fonctionnelles et des précautions, des risques, de la maintenance et du dépannage. 2. Mélanger le contenu des nouveaux packs réactifs (non ponctionnés) en les retournant doucement plusieurs fois avant de les charger sur l instrument. Ne pas retourner des packs ouverts (ponctionnés). 3. Vingt-cinq (25) μl d échantillon sont utilisés pour chaque dosage en plus des volumes morts du récipient à échantillon et du système. Utiliser vingt-cinq (25) μl d échantillon en plus des volumes morts du récipient à échantillon et du système pour chaque série de déterminations avec le caractère de dilution chargé sur le système DxI. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour connaître le volume minimal d échantillon requis. 4. L unité de mesure par défaut du système pour les résultats des échantillons est le U/mL. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des informations sur la gestion des échantillons, la configuration des tests, les demandes de tests et la consultation des résultats des tests. Une courbe de calibration active est requise pour tous les tests. Pour le test Access OV Monitor, la calibration est requise tous les 28 jours. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des informations sur la théorie de la calibration, la configuration des calibrateurs, la programmation de tests pour un calibrateur et la consultation des données de la calibration. Les matériaux du contrôle de qualité simulent les caractéristiques des échantillons de patients et sont essentiels pour le contrôle des performances analytiques des tests immunochimiques. Du fait que les échantillons peuvent être traités à tout moment dans le format accès sélectif plutôt que dans le format séries, des matériaux de contrôle de qualité doivent être inclus dans chaque période de 24 heures. 14 Inclure des matériaux de contrôle de qualité disponibles commercialement couvrant au moins deux concentrations de l analyte. L utilisation plus Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 4

5 fréquente de contrôles ou l utilisation de contrôles supplémentaires est laissée à la discrétion de l utilisateur d après les bonnes pratiques de laboratoire ou les conditions d accréditation de laboratoire et les lois en application. Suivre les instructions du fabricant en ce qui concerne la reconstitution éventuelle et la conservation. Chaque laboratoire doit établir des valeurs moyennes et des intervalles de confiance pour assurer des performances correctes. Les résultats du contrôle de qualité qui ne se situent pas dans les intervalles de confiance peuvent indiquer des résultats de test erronés. Examiner tous les résultats des tests effectués depuis le dernier contrôle de qualité validé pour cet analyte. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide afin d obtenir des informations sur la consultation des résultats du contrôle de qualité. Résultats Limites de la technique Les résultats des tests des patients sont déterminés automatiquement par le logiciel du système qui utilise un modèle mathématique courbe logistique pondérée à quatre paramètres (4PLC). La quantité d analyte présente dans l échantillon est déterminée d après la production de lumière mesurée au moyen des données de calibration en mémoire. Les résultats des tests des patients peuvent être consultés en utilisant l écran approprié. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide afin d obtenir des instructions complètes concernant la consultation des résultats. 1. Les échantillons peuvent être dosés avec précision dans un intervalle analytique défini par la limite inférieure de détection et la valeur du calibrateur le plus fort (approximativement 0,5 U/mL et 5000 U/mL). Si un échantillon contient moins que la limite inférieure de détection du test, rendre les résultats comme inférieurs à cette valeur (c.-à-d. < 0,5 U/mL). Lorsque le caractère de dilution chargé sur le système DxI est utilisé, le système rendra les résultats comme étant inférieurs à 4250 U/mL. Si un échantillon contient plus que la valeur indiquée du calibrateur le plus fort Access OV Monitor Calibrator (S5), rendre le résultat comme supérieur à cette valeur (c.-à-d. > 5000 U/mL). Ou bien, diluer un volume de l échantillon avec 9 ou 19 volumes du calibrateur Access OV Monitor Calibrator S0 (zéro) ou du diluant pour échantillon Access Sample Diluent A. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des instructions sur l entrée d une dilution d échantillon dans une programmation de test. Le système rend les résultats ajustés pour la dilution. Le caractère de dilution chargé sur le système DxI automatise le procédé de dilution, en utilisant un volume d échantillon avec 19 volumes de diluant pour échantillon Access Sample Diluent A, permettant de quantifier les échantillons jusqu à approximativement U/mL. Le système rend les résultats ajustés à la dilution. 2. Pour les tests employant des anticorps, il existe la possibilité d une interférence par des anticorps hétérophiles présents dans l échantillon du patient. Les patients qui ont été régulièrement exposés à des animaux ou qui ont reçu une immunothérapie ou qui ont subi des procédures diagnostiques utilisant des immunoglobulines ou des fragments d immunoglobulines peuvent produire des anticorps, par exemple des anticorps HAMA (anticorps humains anti-souris), qui interfèrent avec les tests immunologiques. En outre, d autres anticorps hétérophiles tels que des anticorps humains anti-chèvre peuvent être présents dans les échantillons de patients. 15,16 Ces anticorps qui interfèrent peuvent être la cause de résultats erronés. Evaluer avec précaution les résultats de patients suspectés de posséder ces anticorps. 3. Les résultats du test Access OV Monitor doivent être interprétés à la lumière du tableau clinique complet du patient, y compris: les symptômes, l anamnèse, les résultats provenant de tests supplémentaires et toute autre information appropriée. Les concentrations sériques ou plasmatiques dosées avec le test OV Monitor ne doivent pas être interprétées comme une preuve absolue de la présence ou de l absence d un cancer. Des concentrations élevées peuvent s observer dans le sérum ou le plasma de patientes atteintes de pathologies bénignes ou d autres affections non cancéreuses, ainsi que dans le cancer de l ovaire et 2010 Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 5

6 d autres maladies métastatiques. Le test Access OV Monitor ne doit pas être utilisé comme test de dépistage d un cancer. 4. Le test Access OV Monitor ne montre aucun effet crochet jusqu à U/mL. Valeurs attendues 1. Chaque laboratoire doit établir ses propres intervalles de référence pour assurer une représentation correcte des populations spécifiques. 2. La répartition des résultats du test Access OV Monitor est présentée ci-dessous. Ces résultats ont été déterminés à partir d un total de 889 échantillons de sérum provenant de femmes et hommes apparemment en bonne santé et de femmes atteintes d affections malignes et non malignes. Catégorie de sujets Nombre de sujets 0 35 U/mL 35,1 65 U/mL 65,1 100 U/mL > 100 U/mL Apparemment en bonne santé Femmes Hommes Affections malignes (y compris les patientes précédemment traitées). Ovarien Du sein Du col de l'utérus Du côlon Endométrial Oesophagien Des trompes de Fallope Gastrique / de l estomac Du poumon Pancréatique Utérin Vaginal/ de la vulve Affections non malignes (y compris les patientes précédemment traitées). Ovarien Du côlon Cystite Endométriose Gastrique / de l estomac Salpingite Fibrome utérin Grossesse Performances cliniques chez des patientes atteintes d un cancer de l ovaire Sensibilité et spécificité relatives La sensibilité et la spécificité relatives ont été calculées pour le test Access OV Monitor contre un autre test automatisé disponible commercialement. Dans cette étude, les calculs de sensibilité et de spécificité étaient basés sur la limite de référence supérieure de 35 U/mL pour les deux tests. Les analyses sont basées sur 141 échantillons provenant de 141 patientes à l origine diagnostiquées avec un cancer de l ovaire (stades I à IV) et à divers stades de la maladie. Ces patientes peuvent avoir subi une intervention chirurgicale ou été soumises à une chimiothérapie ou à des rayons durant le déroulement du traitement de la maladie. Une analyse de Wilcoxon non paramétrique des résultats démontre que les médianes des valeurs de CA 125 ne sont pas statistiquement différentes entre le test Access OV Monitor et le test CA 125 de référence avec une valeur de p = 0,9557. Basées sur les 141 patientes atteintes d un cancer de l ovaire, la sensibilité et la spécificité relatives sont respectivement de 95,8% et de 98,9%. Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 6

7 Concordance clinique (Sensibilité et Spécificité) Dans cette étude, la sensibilité et la spécificité cliniques sont basées sur la limite de référence supérieure de 35 U/mL. La sensibilité clinique est basée sur un total de 45 échantillons de sérum provenant de 45 femmes diagnostiquées à l origine avec un cancer de l ovaire (stade II à stade IV) et qui sont diagnostiquées avec une progression de la maladie à la date du prélèvement de l échantillon. Les calculs de la spécificité clinique sont basés sur un total de 63 échantillons provenant de 63 femmes diagnostiquées à l origine avec un cancer de l ovaire (stade II à stade IV) et qui sont diagnostiquées sans aucune preuve de la maladie (NED) à la date du prélèvement de l échantillon. Ces patientes peuvent avoir subi une intervention chirurgicale ou été soumises à une chimiothérapie ou à des rayons durant le déroulement du traitement de la maladie. D après ces deux populations, les sensibilité et spécificité cliniques, basées sur la limite de référence supérieure de 35 U/mL, étaient respectivement de 84,4% et de 82,5%. L état de la maladie est basé sur une ou plusieurs modalités diagnostiques cliniques. La ou les techniques utilisées pour déterminer l état de la maladie à la date du prélèvement de l échantillon comprenaient: biopsie, examen physique, rayons X, coelioscopie exploratrice, tomodensitométrie, échographie, échographie pelvienne, scintigraphie, dosages du CA 125, IRM. En addition aux études ci-dessus, des échantillons en série avec un état connu de la maladie (total de 118 échantillons) ont été prélevés chez 20 femmes (dont l âge était compris entre 27 et 84 ans) qui avaient été diagnostiquées avec un cancer de l ovaire (stades I à IV d un cancer de l ovaire). Ces sujets ont été contrôlés durant le cours de la maladie, pendant une période de 7 à 53 mois. Ci-dessous est présenté un tableau récapitulatif montrant la concordance des résultats cliniques par rapport à la valeur seuil de 35 U/mL en utilisant le test Access OV Monitor. Evaluation en série du test Access OV Monitor Nb d'observations (20 Patients/118 échantillons au total) Access OV Monitor Etat de la maladie au moment du prélèvement de l'échantillon < 35 U/mL 35 U/mL Progression* 8 41 Rémission complète** 36 7 Rémission partielle 6 10 Amélioration minimale 3 7 Concordance : Progression (Sensibilité clinique) 41/49 (83,7%) Concordance : Réponse au traitement (NED)*** (Spécificité clinique) 36/43 (83,7%) * Utilisé pour le calcul de la sensibilité clinique ** Utilisé pour le calcul de la spécificité clinique *** Pas de maladie observée (NED) Parmi les 118 échantillons avec des informations sur l état connu de la maladie, 49 échantillons ont été classés sous la rubrique Progression (ou maladie active), 43 échantillons sous la rubrique Rémission, 16 échantillons sous la rubrique Rémission partielle et 10 échantillons sous la rubrique Amélioration minimale. La sensibilité clinique (basée sur les 49 échantillons Progression) et la spécificité clinique (basée sur les 43 échantillons Rémission complète) étaient respectivement de 83,7% et de 83,7%. Pour cette population de cancer de l ovaire, des résultats identiques de sensibilité clinique et de spécificité clinique ont été obtenus avec le test Access OV Monitor et avec le test automatisé disponible commercialement présenté dans la section Sensibilité et spécificité relatives ci-dessus Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 7

8 Performances du test Comparaison des techniques La comparaison de 290 valeurs obtenues avec le test Access OV Monitor sur le Système d Immunoanalyse Access et un système de test immunologique disponible commercialement a fourni les données statistiques suivantes en utilisant les calculs de Deming: n Fourchette des observations Ordonnée à l origine Pente Coefficient de corrélation (r) ,0 1,20 0,9871 Test de dilution (Linéarité) Des dilutions multiples de trois échantillons contenant des concentrations différentes d antigène CA 125 avec le calibrateur Access OV Monitor Calibrator S0 (zéro) ont fourni les données suivantes: Echantillon 1 (ID) Dilution Concentration attendue Concentration dosée Récupération (%) A : ,4 1: ,3 1: ,4 1: ,1 Pourcentage moyen de récupération 107 Echantillon 2 (ID) Dilution Concentration attendue Concentration dosée Récupération (%) B : ,4 1: ,7 1: ,5 1: ,3 Pourcentage moyen de récupération 109 Echantillon 3 (ID) Dilution Concentration attendue Concentration dosée Récupération (%) C : ,5 1: ,1 1: ,5 1: ,1 Pourcentage moyen de récupération 109 Imprécision Ce test montre une imprécision totale inférieure à 10% sur toute la plage analytique du test. Une étude, utilisant du matériel de contrôle de qualité à base de sérum humain disponible Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 8

9 commercialement générant un total de 20 dosages, 2 répliquats par dosage, sur une période de 10 jours, a fourni les données suivantes, analysées par l analyse de la variance (ANOVA). Echantillon Moyenne globale (n=43) Intra-essai (%CV) Inter-essai (%CV) Imprécision totale (%CV) Concentration 1 23,6 1,7 6,0 6,3 Concentration 2 74,7 1,3 5,1 5,3 Concentration 3 740,9 2,1 4,4 4,8 Concentration ,8 2,4 3,3 4,1 Spécificité analytique/interférences Les échantillons contenant jusqu'à 1000 mg/dl d'hémoglobine, 20 mg/dl de bilirubine, 1800 mg/dl de triglycérides (trioléine) et des concentrations de protéines de 5,0 à 9,0 g/dl (sérumalbumine humaine) n'affectent pas la concentration de l'antigène CA 125 dosé. Le tableau suivant décrit la réactivité croisée du test avec des agents chimiothérapeutiques et d autres substances pouvant potentiellement interférer. Substance Concentration ajoutée Attendue Observée Pourcentage moyen de récupération Doxorubicine 100 μg/ml 15,0 15,4 102,7 Améthoptérine 500 μg/ml 15,0 14,9 99,3 Carboplatine 1000 μg/ml 15,0 15,2 101,3 Cyclophosphamide 1000 μg/ml 15,0 14,6 97,3 5-fluorouracil 1000 μg/ml 15,0 14,8 98,7 Cisplatine 2000 μg/ml 15,0 14,7 98,0 Melphalan 100 μg/ml 15,0 14,6 97,3 Paracétamol 200 μg/ml 15,0 15,2 101,3 Aspirine 500 μg/ml 15,0 15,0 100,0 Paclitaxel 10 ng/ml 15,0 15,1 100,7 Biotine 50 ng/ml 15,0 14,4 96,0 Vitamine D 2 1 U/mL 15,0 14,9 99,3 Sensibilité analytique La plus faible concentration détectable d antigène CA 125 distincte de zéro (Access OV Monitor Calibrator S0) avec un intervalle de confiance de 95% est de 0,5 U/mL. Cette valeur est déterminée en traitant une courbe de calibration complète de six points, des contrôles et 10 répliquats du calibrateur zéro dans plusieurs dosages. La valeur de la sensibilité analytique est calculée d après la courbe au point situé à deux écarts-types du signal ajusté à zéro du calibrateur Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 9

10 OV MONITOR CALIBRATORS Précaution Avertissement Utilisation Généralités Traçabilité Description du produit Pour les Etats-Unis uniquement, la loi fédérale restreint ce produit à la vente et à la distribution par ou sur l ordre d un médecin, ou à un laboratoire clinique; et l utilisation est restreinte à, par ou sur l ordre d un médecin. La concentration en antigène CA 125, dans un échantillon donné, dosée par des tests provenant de différents fabricants peut varier à cause de différences dans les techniques de tests et la spécificité des réactifs. Les résultats rendus par le laboratoire au médecin doivent inclure l identité du test antigène CA 125 utilisé. Les valeurs obtenues avec les différentes techniques de tests ne peuvent pas être utilisées de façon interchangeable. Si, au cours d un contrôle de patient, la technique de test utilisée pour la détermination des valeurs d antigène CA 125 est changée, des tests séquentiels supplémentaires devront être effectués pour confirmer les valeurs d origine. Les calibrateurs Access OV Monitor Calibrators sont destinés à calibrer le test Access OV Monitor pour le dosage d antigène CA 125 dans le sérum ou le plasma humain à l aide des Systèmes d Immunoanalyse Access. La calibration d un test quantitatif est le processus par lequel des échantillons de concentration connue (c est-à-dire les calibrateurs du test) sont testés comme des échantillons de patients pour mesurer la réponse. La relation mathématique entre les réponses mesurées et les concentrations connues en analyte établit la courbe de calibration. Cette relation mathématique, ou courbe de calibration, est utilisée pour convertir les mesures de RLU (unité relative de lumière) des échantillons de patients en concentrations quantitatives spécifiques de l analyte. La substance mesurée (analyte) dans les calibrateurs Access OV Monitor Calibrators peut être tracée par rapport aux calibrateurs de travail du fabricant. Le processus de traçabilité est basé sur les normes EN ISO Les valeurs attribuées ont été établies à l aide d échantillons représentatifs provenant de ce lot de calibrateurs et elles sont spécifiques des méthodologies de dosage des réactifs Access. Les valeurs attribuées par d autres méthodologies peuvent être différentes. De telles différences, si elles existent, peuvent être dues à un biais inter-méthodes. Calibrateurs Access OV Monitor Calibrators Code S0 S5, 2,5 ml/flacon Fournis prêts à l emploi. Conserver et réfrigérer entre 2 et 10 C. Mélanger doucement le contenu par retournement avant utilisation. Eviter la formation de mousse. Stables jusqu à la date de péremption indiquée sur l étiquette lorsqu ils sont conservés entre 2 et 10 C. Les signes d une détérioration possible sont des valeurs de contrôle en dehors des intervalles de confiance. Se reporter à la carte de calibration pour connaître les concentrations exactes. Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 10

11 S0: Sérum-albumine bovine (BSA) tamponnée, < 0,1% d'azoture de sodium et 0,5% de ProClin** 300. S1, S2, S3, S4, S5: Antigène CA 125 à des taux approximatifs de 25, 100, 500, 2000 et 5000 U/mL, dans de la BSA tamponnée, < 0,1% d'azoture de sodium et 0,5% de ProClin 300. Carte de calibration: 1 Précautions d utilisation Utilisation comme test de diagnostic in vitro. Les échantillons de patients et les produits dérivés du sang peuvent être traités en routine avec un risque minimum si la procédure décrite est respectée. Cependant, manipuler ces produits comme s ils étaient potentiellement infectieux en suivant les précautions universelles et les bonnes pratiques de laboratoire, quels que soient leur origine, leur traitement ou leur certification antérieure. Utiliser un désinfectant approprié pour la décontamination. Conserver et éliminer ces produits et leurs récipients en suivant les règlements et les procédures locales. Le matériel d origine humaine utilisé dans la préparation du réactif a été testé et trouvé négatif ou non réactif pour l hépatite B (Ag HBs), l hépatite C (VHC) et les virus de l immunodéficience humaine (VIH-1 et VIH-2). Du fait qu aucune méthode de test connue ne peut offrir une garantie absolue de l absence d agents infectieux, considérer les réactifs ainsi que tous les échantillons de patients comme potentiellement infectieux et les manipuler avec les précautions d usage. 17 L azoture de sodium peut réagir avec la tuyauterie en plomb ou en cuivre pour former des azotures métalliques hautement explosifs. Lors de l évacuation des liquides, déverser un volume d eau important afin de prévenir la formation de tels azotures. 12 Xi. Irritant: 0,5% ProClin 300. R 43: Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. S 28-37: Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. La fiche de sécurité est disponible sur demande. Procédure Détails de la calibration Limites de la technique Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des informations sur la théorie de la calibration, la configuration des calibrateurs, la programmation de tests pour un calibrateur et la consultation des données de la calibration. Les résultats du test Access OV Monitor sont rendus en U/mL. Les données de la calibration du test sont valides pendant 28 jours. Les calibrateurs sont traités en double. Si une contamination microbienne ou un trouble excessif apparaît dans un réactif, éliminer le flacon Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 11

12 SAMPLE DILUENT A (Flacon) A79783 (Pack Diluant) Utilisation Généralités Description du produit Le diluant pour échantillon Access Sample Diluent A est destiné à être utilisé avec les tests Access pour diluer les échantillons de patients contenant des concentrations d analyte supérieures à celle du calibrateur Access spécifique S5. La concentration en analyte contenue dans les échantillons de patients peut être supérieure à celle du calibrateur Access spécifique S5. Si une valeur quantitative est requise, il sera nécessaire de diluer les échantillons pour déterminer la concentration en analyte. Diluant pour échantillon Access Sample Diluent A Code 81908: 4 ml/flacon Fourni prêt à l emploi. Laisser le contenu reposer pendant 10 minutes à température ambiante. Mélanger doucement par retournement avant utilisation. Eviter la formation de mousse. Stable jusqu à la date de péremption indiquée sur l étiquette du flacon lorsqu il est conservé entre 2 et 10 C. Diluant: Matrice BSA tamponnée contenant un surfactant, < 0,1% d azoture de sodium, 0,5% de ProClin** 300. Code A79783: 2 Packs Diluant, 32,9 ml/pack Fournis prêts à l emploi. Conserver et réfrigérer entre 2 et 10 C. Les Packs doivent être réfrigérés entre 2 et 10 C pendant deux heures minimum avant d être utilisés sur l instrument. Stables jusqu à la date de péremption indiquée sur l étiquette lorsqu ils sont conservés entre 2 et 10 C. Stable entre 2 et 10ºC pendant 56 jours après utilisation initiale de chaque puits. Les signes d une détérioration possible sont la rupture de la couche d élastomère sur le Pack ou des valeurs de contrôle en dehors des intervalles de confiance. Si le Pack Diluant est endommagé (c est-à-dire, couche d élastomère rompue), jeter le Pack. R1a R1e: Matrice BSA tamponnée contenant un surfactant, < 0,1% d azoture de sodium, 0,5% de ProClin 300. Précautions d utilisation Utilisation comme test de diagnostic in vitro. Les échantillons de patients et les produits dérivés du sang peuvent être traités en routine avec un risque minimum si la procédure décrite est respectée. Cependant, manipuler ces produits comme s ils étaient potentiellement infectieux en suivant les précautions universelles et les bonnes pratiques de laboratoire, quels que soient leur origine, leur traitement ou leur certification antérieure. Utiliser un désinfectant approprié pour la décontamination. Conserver et éliminer ces produits et leurs récipients en suivant les règlements et les procédures locales. Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 12

13 L azoture de sodium peut réagir avec la tuyauterie en plomb ou en cuivre pour former des azotures métalliques hautement explosifs. Lors de l évacuation des liquides, déverser un volume d eau important afin de prévenir la formation de tels azotures. 12 Xi. Irritant: 0,5% ProClin 300. R 43: Peut entraîner une sensibilisation par contact avec la peau. S 28-37: Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment avec de l eau et du savon. Porter des gants appropriés. La fiche de sécurité est disponible sur demande. Procédure Limites de la technique Les échantillons peuvent être dosés avec précision dans l intervalle défini par la limite inférieure de détection et la valeur du calibrateur le plus fort du test spécifique. Si un échantillon contient plus d analyte que la valeur indiquée du calibrateur S5, diluer l échantillon en suivant les instructions de dilution indiquées dans le paragraphe Limites de la technique du Pack Réactifs de l étiquette de la trousse du test spécifique. Se reporter aux manuels des systèmes appropriés et au système d Aide pour obtenir des instructions concernant l entrée d une dilution d échantillon dans une programmation de test. Si une contamination microbienne ou un trouble excessif apparaît dans un réactif, éliminer le flacon Beckman Coulter, Inc. A83833B Access OV Monitor Page 13

14 Références 1 Davis, et al., Characterization of the CA 125 antigen associated with human eipthelial ovarian carcinomas. Cancer Res. 46: , Yancik R: Ovarian Cancer: Age Contrasts in Incidence, Histology, Disease Stagbe at Diagnosis, and Mortality. Cancer 71 (Supp2): , Omura GA, et al: Long-Term Follow-up and Prognostic Factor Analysis in Advanced Ovarian Carcinoma: The Gynecologic Oncology Group Experience. J Clin Onco, 9:7, , Mogensen O: Prognostic Value of CCA 125 in Advanced Ovarian cancer, Gynec Onco, 44(3): Schilthuis MS, et al, Serum CA 125 levels in Epithelial Ovarian Cancer: Relation with Findings at Second-Look Operations and Their Role in the Detection of Tumor Recurrence. Br J Obstet Gynecol, 94:202, Kenemans P, et al., CA 125 in Gynecologic Pathology, A Review. Eur J Obstet Gynecol and Reprod Biol, 49:115, Berek JS, et al. CA 125 Serum Levels Correlated with Second-Look Operations Among Ovarian Cancer Patients. Obstet Gynecol, 67:685, Niloff JM, et al. Predicative Value of CA 125 Antigen Levels in Second-Look Procedures for Ovarian Cancer, Am J Obstet Gynecol, 151:981, Fristsche, et al., CA 125 in Ovarian Cancer: Advances and Controversy: Clin Chem, 44: , NIH Consensus Conference, Ovarian Cancer: Screening, Treatment and Follow-Up. JAMA 273:491, Bast RC, et al. Monitoring Human Ovarian Carcinoma with a Comination of CA 125, CA 19-9, and Carcinoembryonic Antigen. Am J Obstet Gynecol, 149:553, DHHS (NIOSH) Publication No , August Current Intelligence Bulletin 13 - Explosive Azide Hazard. Available 13 Approved Guideline Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens, H18-A Clinical and Laboratory Standards Institute. 14 Cembrowski GS, Carey RN. Laboratory quality management: QC QA. ASCP Press, Chicago, IL, Kricka L. Interferences in immunoassays still a threat. Clin Chem 2000; 46: Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: HHS Publication, 4th ed., April Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Available Beckman Coulter, Access, SYNCHRON LX, UniCel et DxI sont des marques commerciales de Beckman Coulter, Inc.; Beckman Coulter, Access, SYNCHRON LX, UniCel et DxI sont enregistrés à l USPTO et au SIPO. *Lumi-Phos est une marque déposée de Lumigen, Inc., une filiale de Beckman Coulter, Inc. **ProClin est une marque déposée de Rohm and Haas Company ou de ses filiales. Fabriqué par: Beckman Coulter, Inc. 250 S. Kraemer Blvd. Brea, CA U.S.A. Beckman Coulter Ireland Inc. Mervue Business Park, Mervue, Galway, Ireland Imprimé aux Etats-Unis Fabriqué aux Etats-Unis Révision en février 2010 Access OV Monitor A83833B 2010 Beckman Coulter, Inc. Page 14