Dépistage Prénatal Non Invasif

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1 Dépistage Prénatal Non Invasif Dr Mélanie JIMENEZ POCQUET Biologiste - Cytogéneticien L ABOcaryo+ L ABO+ - Chambray les Tours

2 Les patientes connectées

3

4

5 Les forums

6

7

8 La presse

9 Le presse

10 DPNI : pourquoi Réduire le risque de perte fœtal par la diminution des actes invasifs Dépistage plus sensible et spécifique

11 DPNI : comment Échantillons Matériel biologique recueilli sans geste invasif sur le fœtus et ses annexes Techniques Sur cellules : tri spécifique Sur ADN : séquençage haut débit

12 A partir de quel matériel biologique Cellules fœtales : rares, technique de recueil et tri compliquée, nombre augmentée si PE mais faible taux pour grossesse non pathologique Retrouvées au niveau du col Dans le sang maternel : Isolée les cellules fœtales (par Ac anti-hla) donc nécessité de connaître les typage HLA parents, coût des anticorps++ pour technique FISH ou PCR Persistance dans le sang maternel??? : Bianchi DW et al., 1996, Ann NY Acad Sci : foetal lymphocytes identified up to 27 years after a pregnancy

13 ADN fœtal circulant Identifié en % de l ADN libre (augmente si PE, aneuploïdie fœtale) Fragment 200pb Clairance très rapide (1/2 vie : 16min) Origine : syncytiotrophoblaste = examen direct des VC

14 Le génome humain Le génome humain Organisme diploïde, 23 paires de chromosomes 3,3 milliards de paires de bases gènes et présences isoformes Par individu, en moyenne : 3 à 4 millions de variations ponctuelles

15 Source de l ADN foetal source : Illumina

16 La placentation L invasion trophoblastique

17 Applications Identification de l allèle paternel : SRY RhD Maladie monogénique Applications courantes Test qualitatif

18 Techniques mises en œuvres Étude des SNP Séquençage massif parallèle PCR digitale Ce sont des techniques quantitatives

19 Séquençage massif parallèle

20 Séquençage massif parallèle

21 Analyse Alignement de séquences (fragments courts) Dénombrement / ratio OUTIL INFORMATIQUE

22 Technique Les DPNI utilisent l ADN acellulaire (cfdna) : échantillon de sang maternel : mélange de cfdna maternel et fœtal Les fragments maternels et fœtaux sont comptés et analysés. Les aneuploïdies sont détectées en comparant la quantité de matériel chromosomique à un ensemble de chromosomes de référence

23 Les limites Ce n est pas un caryotype C est l étude du syncytiotrophoblaste Ce n est pas une étude génique Ne répond qu à la question posée : Trisomie? Triploïdie (1 seul prestataire)

24 Pour qui? Pratiques actuelles : Risque > 1/250 avec MS Antécédent de grossesse avec aneuploïdie Translocation Robertsonnienne parentale (13 et 21) Grossesse géméllaire A ne pas proposer si : SAE ++ CN>95eme percentile quelque soit les MS PRELEVEMENT INVASIF A PRIVILEGIER

25 Comment prescrire À partir de 10 SA Au décours d une consultation médicale : Informations sur le test Sur ses limites Recueillir le consentement éclairé Informer du coût Fournir le CR des MS, ou les antécédents Compléter le bon de demande

26 Prélèvements - résultats Tube Streck quelque soit le prestataire Résultats seulement communiqués aux prescripteurs qui doit en avertir sa patiente Délais : 5 à 15 jours

27 A qui les adresser

28 Et ensuite Pas de risque mis en évidence : suivi de grossesse classique Risque accru d aneuploïdie : doit être confirmé : C est un test de dépistage VC LA

29 Les faux positifs / négatifs Toute la problématique de villosités choriales et les possibilités de mosaïques Jumeaux évanescent

30 Echec Problème technique Taux d ADN fœtal circulant trop faible : BMI de la patiente très élevé Selon les techniques et laboratoires de 1 à 8%

31 Au total, le DPNI MS > 1/250 CN <95 ème percentile Reste un test de dépistage Non pris en charge par l assurance maladie

32 Les problématiques sous jacentes Demande d une patiente en première intention? Evolution des pratiques échographiques? Conséquences dans nos pratiques : Diminution des prélèvements : Formation? Maintient des compétences

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