un exercice d équilibre

Transcription

1 un exercice d équilibre hysiologique athologique Trafic intracellulaire, Actine ADN Ras ATM Raf, I3K, Ral MAK Cdc25B S G2 Transcription, rolifération, Différenciation G1 M Contrôle du cycle, Réparation, Apoptose

2 Jullien-Flores V et al., J Cell Sci GTase Ral, signalisation et trafic intracellulaire Thèse ( ) : Université d Orsay & Institut Curie, aris Ras RalGEF GD GT Raf I3K Ral-GD i Ra l Rlip -GT Sec5 Exo84 M Ral* EGFR-GF Mirey G et al., J Biol Chem. 1999

3 Ral est impliqué dans l exocytose Exocytose de GH % GH sécrétée Granules de sécrétion + GH KCl Quantification de la GH exocytose vecteur 0 Ral* Moskalenko S et al., Nat Cell Biol Localisation de Exo84 après dépolarisation membranaire KCl 0mn 1mn 1mn Ral ancre Exo84 Moskalenko S et al., J Biol Chem Ral est impliquée dans la régulation de l exocytose

4 EGFR Modèle Endocytose (Ral, Rlip) Lysosomes Endosomes olarité cellulaire et exocytose Golgi (Ral, Sec5, Exo84) RE Effets Biologiques transcription, prolifération différenciation Noyau Voies contrôlant l endocytose des Récepteurs et modulant leur localisation Mirey G et al., Mol Cell Biol Ral participe au processus de transformation

5 Les kinases ATM et ATR ost-doctorat ( ) : MGH-Harvard Medical School, Boston, USA Signaux Senseurs Effecteurs STO p53 Transcription de gènes cibles Réparation OU Apoptose atients ATM : hypersensibles aux radiations ionisantes, développent de nombreux cancers. Modèle ATM chez la Drosophile?

6 Nouveau rôle pour ATM chez la Drosophile hénotype disque d aile WT Mutant atm up e L3 WT (OreR) atm atm Mirey G et al., Current Biology 2004 Apoptose massive et mort des mutants atm-/- La protéine ATM protège les télomères et évite l instabilité génétique

7 La phosphatase CDC25B et le cycle cellulaire ost-doctorat ( ) : Université aul Sabatier, LBCMC, Toulouse hosphorylations inhibitrices Chk Stress Activated Kinase 38/MAKA hosphorylations activatrices olo-like Kinase CK2 CDC25 CDK1 CDK1 CyclineB G2 CyclineB Mitose Rôle d autres phosphorylations de CDC25 au cours du cycle cellulaire?

8 hosphorylation de CDC25B par AuroraA Aurora-A anti Ser323 Ac anti Ser323 Control sirna Cdc25B Aurora-A sirna Ac anti Ser323 Cdc25B X Mitose Dutertre S et al., J Cell Sci hosphorylation de CDC25B par la kinase Aurora-A participe à l entrée en mitose

9 hosphorylation de CDC25B par Eg3 Eg3 Famille KIN1/AR-1/MARK (polarité, stabilité des microtubules, cycle cellulaire, signalisation) Cdc25B Anticorps anti Ser169 Mirey G et al., Cell Cycle 2004 as d effet de la phosphorylation CDC25B S169 sur le cycle cellulaire. Effet de combinatoire des sites de phosphorylation?

10 Cytosquelette d actine et dynamique membranaire Maître de Conférences ( ) : UMR 7156 CNRS-Université Louis asteur, Strasbourg Anneau contractile Cytocinèse chez S.cerevisiae atches d actine dans les cellules de mammifères syndrome de Wiskott-Aldrich WT wasp Cables d actine drubin_barnes/actassfig1.gif Thrasher et al., Structures spécifiques, fonctions spécifiques générées par le nucléateur AR2/3. Voie de signalisation conservée : WAS/Las17

11 Las17/WAS et Las seventeen binding Signal Vrp1/WI SH3 Rvs167 Las17 WAS + Actin Lsb8 Las17 WAS SH3 SH3 Lsb1-2 Lsb3-4 Complexe AR2/3 - Nucléation de l actine, olymérisation Mirey G et al., Biochem Soc Trans SH3 Bzz1/Lsb7 Endocytose en phase fluide Lsb6 Lsb5 Soulard A et al., rotoplasma 2005 Lsb3 et Lsb4 DUF500 SH3 87% identité 82% identité Etude des protéines Lsb3 et Lsb4 dans le trafic intracellulaire chez la levure

12 Lsb et trafic intracellulaire hm5- GF Nomarski CARGOS étiquetés GF hm5-gf : hosphatase vacuolaire voie biosynthétique (RE Vacuole) WT lsb3 Vacuole noyau ER Golgi hm5-gf lsb4 lsb3 lsb4 Rôle dans l internalisation des cargos Dalibard V et al., en préparation

13 Réparation des cassures double-brin de l ADN depuis septembre 2008 : UMR 5089 CNRS-Université aul Sabatier, IBS, Toulouse Equipe de Bernard Salles DSB physiologiques Recombinaison V(D)J senseurs (ATM,MRN) médiateurs (γh2ax, MDC1,53B1, chk2) effecteurs DSB pathologiques endogène Reactive Oxygen Species replication collapse exogène radiation ionisantes drogues radiomimétiques inhibiteurs de Topo. I & II apoptose réparation arrêt du cycle Recombinaison Homologue Non-homologous end-joining (NHEJ)

14 rojet de recherche Non-homologous end-joining (NHEJ) Human RS-scid syndrome Ku70 Ku80 DNA-Kcs Artemis XRCC4 DNA-Ligase IV XLF/Cernunnos? DNA-K/Artemis Reconnaissan X4/LigIV/XLF Ligation