Laboratoire de l Environnement et de l Alimentation de la Vendée
Présentation de l activité Miel du laboratoire PAGE 2
L HUMIDITE Le réfractomètre permet de mesurer le pourcentage d humidité d un miel à l aide de son indice de réfraction. On dépose une petite quantité de miel sur le prisme puis la mesure est enregistrée. PAGE 3
LA CONDUCTIVITE ELECTRIQUE Le conductimètre permet de mesurer la conductivité électrique d un miel. On réalise une solution de miel dans une eau faiblement ionisée. La mesure s exprime en ms/cm. PAGE 4
LE ph et L ACIDITE Le titrateur automatique permet de déterminer le ph, l acidité libre et l acidité combinée d un miel. On réalise une solution de miel que l on dose successivement avec une solution basique puis une solution acide. PAGE 5
LE HMF (1/2) HMF est l abréviation pour Hydroxy-Méthyl-Furfural. Il s agit d un composé de dégradation naturelle des sucres en milieu acide. L HMF se développe avec le vieillissement du miel et ce phénomène est considérablement augmenté avec l élévation de la température. Pour le miel, il s agit donc en quelque sorte d un indice de fraîcheur. PAGE 6
LE HMF (2/2) La Méthode de Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC) est la méthode la plus précise actuellement. Le miel en solution passe dans une colonne remplie d une phase spécifique, qui sépare l HMF. Un détecteur (UV) détecte le composé en sortie de colonne et permet de calculer sa concentration. Echantillons - dans des flacons sur le passeur - prêts pour l injection. PAGE 7
L ACTIVITE DIASTASIQUE (1/2) La diastase est une enzyme qui nous renseigne sur la fraîcheur du miel. Méthode spectrophotométrique : la méthode de Phadebas l échantillon est mis en solution puis passé au bain marie en présence d un substrat qui libère des fragments solubles colorés (tablettes Phadebas). La densité optique à 620 nm de la solution est proportionnelle à l activité diastase. Passage au bain marie : PAGE 8
L ACTIVITE DIASTASIQUE (2/2) Lecture avec le spectrophotomètre : Emplacements des cuves pour la lecture de l indice diastasique : PAGE 9
LES SUCRES Les sucres représentent environ 80 % du poids frais du miel. Ces sucres sont d importance très variable : Fructose 32 à 42 % Glucose 26 à 36 % Saccharose 0 à 5 % Maltose 0 à 7 % Turanose 0 à 2 % Méthode : Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC). Le miel est mis en solution, après filtration il passe dans une colonne remplie d une phase spécifique, qui sépare chacun des sucres. Un détecteur (réfractométre) permet de détecter les sucres et de déterminer leur concentration. PAGE 10
LA COLORATION Le colorimètre est un spectrophotomètre qui mesure la couleur des miels en se référant à une échelle pré établie. PAGE 11
LA RECHERCHE DE PESTICIDE (1/2) Selon la nature des pesticides, la méthode sera : - Chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse en tandem Chromatographe en phase gazeuse Spectromètre de masse - Chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem Chromatographe liquide Spectromètre de masse PAGE 12
LA RECHERCHE DE PESTICIDE (2/2) Le but des ces analyses est de pouvoir détecter les pesticides à de très faibles doses (si possible inférieures à 1µg par kg). La recherche de pesticides dans le miel permet de savoir : - si des résidus de pesticides provenant de traitements phytosanitaires appliqués à des cultures à proximité des ruches sont présents dans le miel; - si des résidus de pesticides appliqués pour les traitements des abeilles (ex. : amitraz) au début de l hiver sont présents dans le miel récolté l année suivante. Les familles de molécules concernées sont, par exemple : - les organophosphorés, - les organochlorés, - les pyrèthrinoïdes, - les néonicotinoïdes - les phénylpyrazoles PAGE 13
Chromatogrammes Multirésidus Exemple de chromatogramme pour une analyse multirésidus Exemple de pics de pyréthrinoïdes. PAGE 14
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