Procédure de mise en marche du système : pompe à BD FACSFlow, BD LSRII Mise en marche de la pompe Attention: La pompe n a pas été conçue pour remplir un réservoir vide. Si le réservoir de liquide de gaine du cytomètre est vide, le remplir manuellement avec 750 ml de BD FACSFlow avant d utiliser la pompe. Pour mieux estimer le volume, tracer un repère au crayon sur le réservoir. Attention: Il est important de suivre les étapes suivantes dans l ordre indiqué. 1. Vérifier le niveau de liquide dans le cubitainer de BD FACSFlow 2. Vérifier que le cubitainer à déchets n est pas plein 3. Dévisser légèrement le bouchon du cubitainer à déchets pour vérifier qu il n y pas de pression. Si de l air s échappe du cubitainer ou que vous détectez une surpression, remplacez immédiatement le filtre à air sur le bouchon du cubitainer 4. Revisser le bouchon du cubitainer à déchets 5. Basculer l interrupteur situé à droite sur la pompe sur «ON». Le voyant s allume. 6. Vérifier que le tuyau d alimentation du liquide de gaine (tuyau allant du cubitainer de BD FACSFlow au cytomètre) et que le filtre salin ne contiennent pas d air 7. S il y a de l air dans le tuyau ou le filtre salin, appuyer sur le bouton «PRIME» sous le voyant de remplissage de la pompe 1 pendant 2 à 3 secondes
Procédure de mise en marche du système : pompe à BD FACSFlow, BD LSRII (suite) Mise en marche du cytomètre 1. Allumer le cytomètre 2. Retirer le tube d eau distillée (mis en place la veille lors de la procédure d arrêt) 3. Si des bulles d air sont présentes dans le filtre salin, actionner le système de purge. 4. Appuyer sur le bouton PRIME pour éliminer les bulles dans la chambre d analyse (sans tube installé). Renouveler cette étape 2 fois. 1. Pipeter 3 ml d eau distillée dans un tube Falcon 12 x 75-mm. Installer le tube et le laisser 10 min en position RUN et en vitesse HIGH. Retirer ce tube. 2. Mettre le système informatique sous tension et démarrer le logiciel BD FACSDiva.
Procédure d arrêt du système 1. Préparer 3 tubes Falcon 12 x 75-mm A, B et C 2. Pipeter 3 ml de solution BD FACSClean dans le tube A 3 ml de solution BD FACSRinse dans le tube B 3 ml d Eau déionisée dans le tube C La solution de BD FACSClean est utilisée pour la décontamination d agents infectieux dans le cytomètre. La solution de BD FACSRinse contient un détergent et permet d éliminer le BD FACSClean et les débris cellulaires. L eau déionisée permet de rincer les tubulures et la Flow Cell et d éviter les dépôts de sel. 3. Mettre en place le tube A Rabattre le support de tube et le laisser 10 min en position RUN et en vitesse HIGH. 4. Dégager le support de tube et attendre la vidange complète du tube A pour le retirer. 5. Retirer le tube A. Mettre en place le tube B et laisser le support de tube dégagé. Après aspiration de 2 ml, rabattre le support de tube et laisser en position RUN pendant 10 min. 6. Retirer le tube B, mettre en place le tube C et laisser en RUN pendant 10 min. 7. Appuyer sur le bouton STANDBY, laisser en place le tube d eau (1 ml maximum). 8. Couper l alimentation du BD LSRII 9. Laisser en marche la pompe à BD FACSFlow 10. Quitter le logiciel BD FACSDiva et fermer la session Windows. 11. Eteindre la station informatique.
Technical Resources Procédure de maintenance de la ligne fluidique de BDFACSFlow 1. Pour la décontamination de la ligne fluidique, utiliser le container en inox livré avec le BD LSRII. 2. Remplir ce réservoir avec du BD FACSClean 3. Déconnecter la ligne d air (connecteur bleu) qui part du reservoir du BD LSRII ainsi que la ligne de liquide de gaine (connecteur blanc) située sur le dessus du filtre salin. 4. Connecter ces 2 tuyaux sur le container en inox.
Procédure de maintenance de la ligne fluidique de FACSFlow (suite) 5. Préparer 2 tubes Falcon 12 x 75-mm A et B 6. Pipeter 3 ml de solution BD FACSClean dans le tube A 3 ml d eau déionisée dans le tube B 7. Presser 5 fois le bouton Prime situé sur le BD LSRII afin d amorcer la gaine fluidique avec le liquide de décontamination. 7. Mettre en place le tube A, rabattre le support de tube et le laisser 20 min en position RUN et en vitesse HIGH. 8. Retirer le tube A. 9. Enlever le BD FACSClean du container en inox. Rincer le container avec de l eau déionisée puis le remplir avec de l eau déionisée. 10. Presser 5 fois le bouton Prime situé sur le BD LSRII afin d amorcer la gaine fluidique avec le liquide de rinçage. 11. Mettre en place le tube B, rabattre le support de tube et le laisser 20 min en position RUN et en vitesse HIGH. 12. Retirer le tube B 13. Vider le container en inox, le rincer 14. Rebrancher le réservoir de liquide de gaine du BD LSRII 15. Presser 5 fois le bouton Prime situé sur le BD LSRII afin d amorcer la gaine fluidique avec le BD FACSFlow.