Stratégie des examens de Laboratoire : les ectoparasitoses et les mycoses Module optionnel

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1 Stratégie des examens de Laboratoire : les ectoparasitoses et les mycoses Module optionnel Dr Nelly Contet-Audonneau Parasitologie-Mycologie CHU de Nancy n.contet-audonneau@chu-nancy.fr 1

2 Seront étudiés : les ectoparasites : les poux (pédiculose) et les sarcoptes (agents de la gale ou scabiose) Les champignons microscopiques (les dermatophytes agents de mycoses comme les teignes, le pied d athlète, les candidoses.) 2

3 1 La pédiculose due aux Insectes, cosmopolites Poux Parasites hématophages (3 à 4 repas par J), démangeaisons+++ Colonisent 3 sites différents: Poux de tête (cuir chevelu) De corps (linge) De pubis ou morpion (pubis, parfois poils de barbe, cils, sourcils) Adultes en 3 semaines. Lente éclot en 8 J 3

4 Prélèvement Recherche des lentes Adhèrent aux cheveux (ou poils) Prélever à la pince 4

5 2 - La Gale ( due à Sarcoptes scabiei var. hominis) Prurit à recrudescence nocturne, contagieux Épidémies en collectivités (longs séjours, maisons de retraite.) Sans gravité 5

6 Sarcoptes Parasite microscopique. La femelle (300µm) vit dans l épiderme, mâle et larves sur la peau La femelle pond 3 à 5 œufs par jour (150 µm) Éclosion de l oeuf en 4 jours, donne une larve Larves deviennent adultes en 2 semaines Durée de vie des femelles 2 mois 6

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9 Comment se transmet la gale? Contamination par les larves ou les adultes Gale croûteuse +++ : contamination par les squames Survie des adultes en dehors de l hôte: jusqu à 4 jours Survie des œufs en dehors de l hôte : jusqu à 10 jours 9

10 Comment se transmet la gale? Par contact cutané direct avec une personne ayant la gale (au départ pas de prurit, mais la contagiosité existe) Par l intermédiaire de la literie, de vêtements ou d objets de toilette : serviettes, gants... Personnel soignant, par les blouses 10

11 Prélèvement Gratter les vésicules jusqu à faire saigner Racler le toit des sillons Résultat : Présence de Sarcoptes Présence d oeufs Présence de déjections Le résultat peut être négatif dans la gale commune, la clinique est primordiale 11

12 3 - Les dermatophytoses Dues aux dermatophytes Kératinophiles Lésions superficielles de la peau et des phanères Épidermophyties Intertrigos Onyxis Teignes tondantes ou suppurées 12

13 Le diagnostic Le prélèvement En dehors de tout traitement Jonction partie malade partie saine Abondant 13

14 L examen direct du produit pathologique (squames) 14

15 Examen direct d un cheveu parasité par Microsporum canis 15 Stratégie DCEM2 et 3 11 Novembre

16 Principaux dermatophytes Anthropophiles Trichophyton rubrum T mentagrophytes variété interdigitale Epidermophyton floccosum T tonsurans (teignes) Zoophiles Microsporum canis T mentagrophytes Tellurique M.gypseum

17 La culture Sur milieu de Sabouraud Pousse en 1 à 4 semaines Identification par l aspect macroscopique et microscopique des cultures Grosses spores macroconidies Petites spores microconidies

18 L origine humaine du champignon ne peut être affirmée que par une culture : ici T.tonsurans 18

19 4 - Les infections à Malassezia (ou pityrosporoses) Pityriasis versicolor Dermite séborrhéique Pellicules (pityriasis capitis) Folliculite du thorax Affections dues à des levures lipophiles et kératinophiles du genre Malassezia Levures commensales de la peau Taches, desquamation, erythème Prurit 19

20 Facteurs favorisants Chaleur Humidité Peau grasse Application de corps gras Facteurs génétiques (rechutes fréquentes) 20

21 Diagnostic Clinique le plus souvent Grattage des squames (ou scotch), puis examen direct 21

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24 5 - Les candidoses (Candida) 24

25 Définition Mycoses cosmopolites dues à des levures du genre Candida Candidoses superficielles (peau, phanères et muqueuses) Candidoses systémiques (Infections disséminées : septicémies et infection d organes profonds) 25

26 Epidémiologie Agents pathogènes et habitats Candida albicans 60 % des levures impliquées chez l homme. Levure commensale du tube digestif Candida glabrata, levure commensale Candida tropicalis: nature et homme Facteurs favorisants l immunodépression Sida Leucémie aiguë Déficit immunité cellulaire, transplantation, Hodgkin, greffe de moelle 26

27 Autres facteurs favorisants Diabète Chaleur, humidité, macération, contact avec des substances sucrées, grossesse, prématuré, vieillard, pathologie buccale. Chirurgie digestive Cathéter Pose de drain 27

28 Clinique C. superficielles Digestives Génito-urinaires Cutanées et unguéales Disséminées (Systémiques) Dans 90 % des cas origine endogène Septicémies (10 à 15 % des septicémies) Puis localisations viscérales et cutanées 28

29 diagnostic 29

30 Le prélèvement Les résultats dépendent de sa qualité Prélever en dehors de tout traitement antifongique (local ou général) Peau : prélever en grattant en périphérie des lésions (peau), avec une curette ou un vaccinostyle. Recueillir les squames dans une boite de Pétri. Secrétions : prélever à l écouvillon Muqueuses : frotter les lésions pendant 30 secondes avec un écouvillon (2 écouvillons sont nécessaires, un pour l examen direct, l autre pour la culture) 30

31 Le prélèvement Ongles : couper des fragments d ongles à la pince à ongle, puis recueillir de la poudre pour faire l examen direct Scotch sur le périonyxis 31

32 Le prélèvement Sang : milieu polyvalent (bactériologie) ou mieux Milieu spécifique Mycosis (gagne 2 à 3 jours sur l isolement de la levure) Les Candida sont aérobies 32

33 Examen direct du produit pathologique 33

34 La culture Suspicion de candidose ou d infection aspergillaire (ou autre champignon filamenteux) Culture sur milieu de Sabouraud (24 heures) Et culture sur milieu chromogénique (préidentification de Candida albicans et d autres espèces) 34

35 Milieu de Sabouraud 35

36 Milieu chromogénique : préidentification de Candida albicans (vert), ici est associé à une autre levure qui est rose 36

37 Identification des levures autres que Candida albicans Etude de l assimilation des sucres : API 32 Aux (auxanogramme) Fermentation des sucres (zymogramme) 37

38 Auxanogramme 38

39 Identification des levures par test d agglutination de particules de latex porteuses d un antigène monoclonal spécifique d espèce 39

40 Test au latex : agglutination s il s agit de C. dubliniensis (espèce proche de C albicans 40

41 VITEK 2 Identification et antifongigramme des bactéries et des levures 41

42 Diagnostic sérologique Recherche des anticorps anticandida Prélèvement sur un tube sec 10 ml de sang Résultats 2 à 4 jours Techniques ELISA et hémagglutination indirecte Complétés si nécessaire par l electrosynérèse (précipitation du complexe antigène anticorps) Recherche des antigènes circulants Platelia candida (ELISA) 42

43 Réalisation automatique des dosages d anticorps en microplaques 43

44 ELISA 44

45 Hémagglutination indirecte 45

46 Electrosynérèse 46

47 Electrosynérèse après coloration mettant en évidence les complexes antigène-anticorps (arcs de précipitation 47

48 La paillasse 48

49 Résultat sérologie candida 49

50 Résultats antigène circulant 50

51 L antifongigramme et la mesure de la concentration minimale inhibitrice 51

52 Antifongigramme (disques d antifongiques) Antifongigramme 52

53 Antifongigramme avec 2 concentrations d antifongiques 53

54 CMI en microplaque 54

55 CMI en microplaque 55

56 6 - Les aspergilloses 56

57 Définition Infections cosmopolites dues aux Aspergillus, moisissures de la nature N infectent que les personnes fragilisées (champignons opportunistes) Provoquent des mycoses de la sphère ORL et pulmonaire 57

58 Épidémiologie Agents pathogènes Aspergillus fumigatus (80 % de la pathologie) Habitat des Aspergillus Nature et habitations Dégradent les végétaux morts, le bois Développement favorisé par l humidité (moisissures) 58

59 Facteurs favorisants Épidémiologie Maladies : cancers, lymphomes, Hodgkin Transplantations d organes Greffes de moelle Immunodépression cellulaire Certains médicaments (cytotoxiques, immunosuppresseurs, corticoïdes) Mode de contamination respiratoire 59

60 Clinique Aspergilloses de l appareil respiratoire Localisée: aspergillome, bronchite aspergillaire, surinfection chez la personne atteinte de mucoviscidose Diffuse: aspergillose pulmonaire invasive Kératites, onyxis, otomycose, surinfections de brûlures 60

61 Aspergillose pulmonaire invasive Très grave (asphyxie et risque hémorragique) Diagnostic par scanner Importance de la prévention et, en cas de colonisation, du traitement précoce 61

62 Diagnostic Aspergillose pulmonaire invasive: diagnostic précoce par scanner, mycologie : examen direct (lecture immédiate), culture (2 à 4 j), PCR sur le produit pathologique (problème des contaminations) Autres aspergilloses: Examen direct des liquides biologiques: présence de filaments 62

63 Culture : colonies poudreuses, vert foncé 63

64 Têtes aspergillaires 64

65 PCR panfongique 65

66 Diagnostic sérologique Recherche des anticorps antiaspergillaires Prélèvement sur un tube sec 10 ml de sang Résultats 2 à 4 jours 66

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71 Résultats : anticorps aspergillaires 71

72 Recherche des antigènes circulants 72

73 Stratégie des examens de laboratoire Synthèse Renseignements cliniques Prélèvement abondant, traité rapidement au laboratoire Examen direct (immédiat) Culture (plus lente 1 à4 j), Hémocultures sur milieu bactériologie aérobie ou mieux Mycosis Pour les candidoses et aspergilloses invasives (sérum) dosage des anticorps des antigènes circulants Sur les produits pathologiques : PCR CMI pour les Candida et Aspergillus 73