PNF-04-P CONTENTION ET MANIPULATION DES POISSONS Justification Cette procédure normalisée de fonctionnement doit être connue de toute personne (= opérateur) qui maîtrise physiquement ou chimiquement des poissons dans le cadre d études sur le terrain ou en laboratoire. Autorité Les personnes (étudiants, techniciens, biologistes, chercheurs) effectueront des contentions de poissons sous la supervision directe ou indirecte du chercheur, de l auxiliaire de recherche, du chargé de projet ou du vétérinaire. Formation préalable des opérateurs : Bonne connaissance : de l anatomie, de la physiologie et du comportement de l espèce de poisson de la composition, de l'action et des règlements associés aux produits utilisés pour la contention chimique (anesthésiologie/pharmacologie/règlements sur les produits contrôlés). de santé et sécurité : Prévention des blessures Notions de biosécurité (prévention des morsures/blessures, zoonoses, désinfection et asepsie) Si applicable (travaux sur le terrain) : formation sur les risques inhérents au travail en mer (navires, petites embarcations, hélicoptère) Si applicable : SIMDUT Principe directeur du CCPA: Le chercheur doit choisir une méthode efficace qui permet de réduire les risques de blessures physiques et de stress physiologique tout en assurant la sécurité des manipulateurs. Le degré de contention et la durée des procédures doivent être réduits au minimum. La contention doit être effectuée par un personnel ayant reçu une formation complète sur les procédures prévues de contentions et sur les méthodes de rechange (CCPA, lignes directrices sur le soin et l utilisation des animaux sauvages, no 17) Autres principes directeurs du CCPA concernant le soin et l utilisation d animaux sauvages (annexe 1) principes directeurs généraux : #1, 2, 3, 6, 10, 11 et 12 principes directeurs spécifiques à la contention des animaux sauvages : #18, 19, 22, 23, 24
Autres principes directeurs du CCPA concernant le soin et l utilisation des poissons: (annexe 1) principe directeurs généraux : # 1, 2, 3, 4, 5, 11, 22 principes directeurs spécifiques à la contention des poissons : # 73 à 80 inclusivement Méthodes de contention Contention physique dans l eau Utilisation d un filet ou d une puise Utilisation d un bassin restreint Contention physique hors de l eau Contention chimique 1) Contention physique dans l eau Ce type de contention physique consiste à immobiliser un ou des poissons à même le bassin dans lequel ils sont placés afin d effectuer des manipulations non douloureuses et de courte durée. Matériel PNF-03 : nettoyage et désinfection du matériel et le matériel qui s y rapporte PNF-02 : euthanasie des poissons et le matériel qui s y rapporte (si nécessaire). Bassin de contention aux parois lisses et sans danger d abrasion pour le poisson, adapté aux types de manipulations qui seront effectuées et équipé d un système de bullage et/ou d approvisionnement en eau continu et d un système de maintien de la température Bassin de récupération (si nécessaire) aux parois lisses et sans danger d abrasion pour le poisson et équipé d un système de bullage et/ou d approvisionnement en eau continu et d un système de maintien de la température. Bac ou autre récipient de transport aux parois lisses sans danger d abrasion pour transporter le poisson d un bassin à un autre (si nécessaire) Salinomètre, thermomètre et oxymètre Chronomètre Au besoin, trousse pour l évaluation de la qualité de l eau (taux d ammoniac) Puise ou filet sans nœud adapté à la taille des individus manipulés Gants Trousse de premiers soins
Note : Tout matériel qui entre en contact avec le poisson lors des manipulations doit avoir des surfaces lisses (ex. filet sans nœuds) et être conçu pour minimiser les risques d abrasion et de blessures. Préparation Nettoyer et désinfecter les bassins et le matériel qui seront utilisés (PNF-03) S assurer que le tout le matériel nécessaire est prêt avant de commencer les manipulations. Déterminer le nombre d individus dans le bassin de contention. Si plus d un poisson doit être manipulé en même temps on doit garder à l esprit que la densité d individus dans le bassin doit être minimale pour faciliter la contention, éviter un surcroit de stress, des blessures, de la morbidité et une détérioration de la qualité de l eau. Déterminer la quantité d eau minimale que doit contenir le bassin de contention en fonction du nombre de poissons qu il devra contenir : 1) pour assurer une bonne contention; 2) pour minimiser le stress, les risques de blessures et de morbidité et; 3) pour conserver une bonne qualité d eau. Déterminer le temps maximal acceptable de la contention en fonction de l espèce, de la taille de l individu, de son degré de stress et de sa condition physiologique. Si un bassin de récupération est utilisé pour le suivi du poisson après sa manipulation, déterminer sa capacité de support en terme de densité d individus tout en respectant le bien-être des poissons et en gardant une bonne qualité d eau. Si possible, mettre les poissons à jeun 18 à 72 heures avant les manipulations et la contention Procédure Pour prélever des poissons d un bassin d élevage, utiliser une puise sans noeud adaptée à la taille des individus. Les poissons prélevés sont immédiatement placés dans le bassin de contention ou placés dans un bac de transport si le déplacement du poisson à partir de son milieu de prélèvement (milieu naturel, bassin d élevage, etc.) jusqu au bassin de contention prend plus de 30 secondes. L eau du bac de transport provient du milieu de prélèvement ou possède des conditions similaires. En général le bac de transport contient peu d eau et pas de système de maintien de la qualité de l eau (ex. système de bullage, de maintien de température, etc.). Par conséquent, le poisson ne doit, en aucun cas, être mis en attente dans ce type de bac. Prévoir un bassin d attente pour une telle éventualité.
La contention du poisson peut être effectuée en utilisant un bassin restreint qui empêche le poisson de se déplacer La contention peut être effectuée à l aide d une puise sans noeud, remplie au tiers de sa profondeur pour minimiser les mouvements du poisson et le stress. Il peut également être contenu à l aide d un filet sans nœud. Le poisson est manipulé de façon à limiter le stress et les blessures (abrasion, perte d écaille, etc.). Le poisson doit rester en tout temps immergé dans l eau tant que les manipulations le permettent. Idéalement il est maintenu à l écart des parois pour éviter l abrasion de la peau et les mouvements brusques doivent être évités. L immobilisation du poisson dans l eau et les manipulations ne doivent pas empêcher celui-ci de respirer (ne pas empêcher le mouvement des opercules pendant les manipulations). Si le poisson est trop nerveux et qu il est impossible de le contenir sans risquer de le blesser inutilement ou de compromettre les manipulations, la contention doit être abandonnée et le poisson relâché. Une contention chimique peut être envisagée (voir plus bas). La contention ne doit pas dépasser le temps maximal établi pour l espèce et sa condition. Après la manipulation, le poisson est libéré le plus rapidement possible et remis dans un bassin de récupération ou d élevage. Selon le type de procédures effectuées et le temps que passe le poisson dans le bassin de contention la qualité de l eau doit être mesurée (température, oxygène et ammoniac) durant les manipulations afin de s assurer que ces paramètres restent stables et à un niveau acceptable pour les besoins du ou des poissons. Il en est de même pour le bassin de récupération s il y a lieu. S il y a dégradation de la qualité de l eau, l eau du bassin doit être renouvelée. Une fois la contention terminée, le poisson est remis dans son bassin d élevage ou dans un bassin de récupération et un suivi sera effectué afin de s assurer de son rétablissement et de ses chances de survie. Nettoyer et désinfecter le matériel utilisé lors des manipulations Note : Il est possible d effectuer la contention à même le bassin d élevage si les manipulations le permettent et s il est jugé qu elles ne créent pas trop de perturbations pouvant nuire aux autres individus dans le bassin. 2) Contention physique hors de l eau Ce type de contention physique consiste à immobiliser le poisson hors de l eau. Cette méthode est utilisée pour des manipulations sans douleur et de très courtes durées (moins de 30 secondes).
Matériel PNF-03 : désinfection du matériel et le matériel qui s y rapporte PNF-01 : anesthésie des poissons et le matériel qui s y rapporte (si nécessaire) PNF-02 : euthanasie des poissons et le matériel qui s y rapporte (si nécessaire) Bassin de récupération (si nécessaire) aux parois lisses et sans danger d abrasion pour le poisson et équipé d un système de bullage et/ou d approvisionnement en eau continu. Bac ou autre récipient de transport aux parois lisses et sans danger d abrasion pour le poisson (si nécessaire) Puise sans nœud adaptée à la taille des individus prélevés pour la contention Matériel et vêtements de protection Chronomètre Serviette humide Produit désinfectant (alcool, éthanol) Préparation Nettoyer et désinfecter les bassins utilisés (PNF-03). S assurer que le tout le matériel nécessaire est prêt avant de commencer les manipulations. S assurer que les paramètres de l eau (température, salinité, oxygène) des bassins utilisés sont similaires à ceux du milieu d élevage ou du milieu naturel d où le poisson à été prélevé et que ces paramètres sont stables. Déterminer la densité de poisson que peuvent contenir les bassins utilisés 1) pour minimiser le stress, les risques de blessure et de morbidité et; 2) conserver une bonne qualité d eau. Déterminer le temps maximal de la contention hors de l eau que peut supporter l individu en fonction de l espèce, de la taille et de sa condition physiologique. En général ça ne doit pas dépasser 30 secondes. Procédure Les poissons sont prélevés au fur et à mesure des manipulations. Si le transport du poisson à partir de son milieu de prélèvement (milieu naturel, bassin d élevage) jusqu au lieu de manipulation prend plus de 30 secondes, ce dernier sera placé dans un bac de transport. L eau du bac de transport provient du milieu de prélèvement ou possède des conditions similaires. En général, le bac de transport contient peu d eau et pas de système de maintien de la qualité de l eau (ex. système de bullage, de maintien de température, etc.). Par conséquent, le poisson ne doit, en
aucun cas, être mis en attente dans ce type de bac. Prévoir un bassin d attente pour une telle éventualité. Les poissons doivent être adéquatement supportés lorsqu ils sont hors de l eau et ne doivent pas être manipulés seulement par la partie caudale. Un support au niveau ventral est nécessaire. Les surfaces entrant en contact avec le poisson lorsqu il est hors de l eau doivent être nettoyées et désinfectées avant et après la manipulation d un individu. Toute surface entrant en contact avec le poisson lorsque ce dernier est hors de l eau doit être propre, lisse et humide pour minimiser l abrasion, la perte de mucus et autres blessures. Le temps de contention physique hors de l eau ne doit pas dépasser le temps maximal établi en fonction de l espèce et de la condition de l individu (maximum 30 secondes en général sauf pour les anguilles et les poissons-chats qui peuvent tolérer des périodes plus longues). Limiter au maximum la luminosité de l endroit où sont effectuées les manipulations. La peau et les branchies du poisson doivent rester humides durant les manipulations quitte à les irriguer. Si le poisson est trop nerveux et qu il est impossible de le contenir sans risquer de le blesser inutilement ou de compromettre les manipulations, ce dernier doit être remis à l eau ou une contention chimique doit être utilisée (voir plus bas). Après la manipulation, le poisson doit être placé le plus rapidement possible dans son bassin d élevage ou dans un bassin de récupération et un suivi est effectué afin de s assurer de son rétablissement et de ses chances de survie. Si le poisson ne récupère pas et montre des signes anormaux de comportement ou de morbidité, une euthanasie devra être effectuée (PNF-02). Il en est de même si le poisson a subi des blessures non prévues par la manipulation et dont les chances de guérison sont faibles. Disposer des carcasses selon le protocole PNF-05 Nettoyer et désinfecter le matériel et les bassins utilisés pour les manipulations (PNF- 03) 3) Faible dose d anesthésiant Matériel PNF-01 : anesthésie des poissons et le matériel qui s y rapporte. PNF-03 : nettoyage et désinfection du matériel et le matériel qui s y rapporte PNF-02 : euthanasie des poissons et le matériel qui s y rapporte (si nécessaire)
Préparation Déterminer le type d anesthésique qui convient le mieux pour l espèce, la taille des individus, le type et les manipulations qui seront faites par la suite. En général on utilise le MS222 Déterminer la dose d anesthésique nécessaire pour obtenir une sédation sans anesthésie complète en fonction de l espèce et de la condition des individus. Ex. Salmonidés : Échantillonnage 0,6 g/5 L de MS-222 Déterminer le temps d exposition à l anesthésique pour obtenir une sédation suffisante pour réaliser les manipulations prévues Nettoyer et désinfecter les bassins et le matériel qui sera utilisé S assurer que les paramètres de l eau dans les bassins utilisés sont similaires à ceux du milieu d où provient le poisson (milieu d élevage, milieu naturel) et que ces derniers sont stables. Procédure Appliquer le PNF-01 en appliquant les doses établies afin d obtenir un effet de sédation. Une anesthésie complète est nécessaire seulement dans le cas où il est prévu que la contention effectuée engendre de la douleur, des blessures ou un stress important. Consulter le tableau 2 du PNF anesthésie des poissons pour la description du comportement à observer selon le degré de sédation. Le poisson doit rester sous surveillance continuelle durant la contention chimique. Les étapes de la contention chimique sont chronométrées et notées pour affiner la méthode. Dès la fin des manipulations, les poissons sont immédiatement placés dans un bassin de réveil contenant de l eau saine et oxygénée jusqu à ce que les effets de l anesthésie aient disparus. Le rétablissement est effectué sous surveillance continue et si le poisson ne se rétablit pas ou montre des problèmes de comportement une fois que le temps de réveil est passé, ce dernier doit être euthanasié dans les plus brefs délais (PNF-02) si après avoir été ventilé, il ne se rétablit pas. Disposer des carcasses selon le protocole PNF- 05 Nettoyer et désinfecter le matériel ayant servi à l anesthésie Disposer de l eau contenant l anesthésique selon la réglementation en vigueur à l UQAR Approuvées par la résolution UQAR-CPA-33-67 du 17 avril 2008 Modifiée par la résolution UQAR-CPA-56-122 du 20 février 2014