Les risques biologiques Repérage, analyse et prévention Laboratoire des Biocontaminants LBC - CRAMIF
Généralités sur les risques biologiques & Effets sur la santé Les secteurs professionnels concernés Évaluation et prévention des risques biologiques Le Laboratoire des Biocontaminants / LBC 2
LES RISQUES BIOLOGIQUES = éventualité d un dommage survenant lors de l exposition des personnes pendant le travail à un danger d origine biologique Danger = agents biologiques et/ou des produits biologiques Bactéries Moisissures / Levures Virus Parasites Protozoaires ATNC Cultures cellulaires Micro-organismes morts Fragments de microorganismes morts Toxines fabriquées par microorganismes Débris animaux ou végétaux 3
AGENTS BIOLOGIQUES Bactéries Moisissures / Levures Virus Parasites Protozoaires ATNC Cultures cellulaires Classement selon arrêté 18 juillet 1994 modifié au 30 juin 1998. Articles R4421-3, R4421-4 du code du travail Classement selon la pathogénicité du risque infectieux (de 1 à 4) 4
PRODUITS BIOLOGIQUES Micro-organismes morts Fragments de microorganismes morts Toxines fabriquées par micro-organismes Débris animaux ou végétaux Certains produits biologiques ont des effets sur la santé 5
PRODUITS BIOLOGIQUES Ayant des effets sur la santé : Endotoxines : Constituant de la membrane externe des bactéries GramΘ Provoquent des effets sur la santé par inhalation, par injection Effets sur la santé fonction des doses d endotoxines Mycotoxines : Métabolites secondaires synthétisées par les moisissures Non volatiles mais présentes dans l environnement (poussières) Effets par ingestion documentés : toxiques, neurotoxiques, cancérigènes Effets peu connus par inhalation 6
PRODUITS BIOLOGIQUES Ayant des effets sur la santé : ß-(1-3)-D-Glucanes : constituant de la paroi cellulaire des moisissures, des bactéries et des plantes Effet irritant des voies respiratoires Peptidoglycane : Composant de paroi cellulaire des bactéries Gram + Agent causal potentiel de l inflammation pulmonaire 7
4 TYPES D EFFETS SUR LA SANTE Infections : pénétration et multiplication d un agent microbien dans l organisme. Ex. vie courante : Rhume rhinopharyngite rougeole Ex. santé au travail : Ornithose-psittacose (tableau MP n 87) - Légionellose (pas de tableau MP) Effets immuno-allergiques : réaction de l organisme à la présence d un allergène par une défense immunitaire inappropriée. Ex. vie courante : Rhume des foins, rhinite ou conjonctivite Ex. santé au travail : Rhinite et asthme professionnel (tableau MP n 66) - Asthme, rhinite, pneumopathie d hypersensibilité liés à l inhalation de moisissures (tableau MP n 66bis). Effets toxiniques : réaction de l organismes à la présence de composés aux propriétés toxiques. Les effets sont fonction de la nature des toxines (endotoxines, mycotoxines, toxines bactériennes). Ex. vie courante : Botulisme, intoxination alimentaire aux toxines de Staphylocoques, ergotisme Ex. santé au travail : Affections respiratoires consécutives à l inhalation de poussières textiles végétales (tableau MP n 90) - Syndrome pseudogrippal lié à l exposition aux endotoxines présentes dans certaines activités (assainissement déchets) (pas de tableau de MP). Cancers : multiplication désordonnée de cellules. Ex. vie courante : Papillomavirus (cancer du col de l utérus) Ingestion d aflatoxines (mycotoxine) Ex. santé au travail : Hépatite B ou C devenue chronique (tableau n 45B)
4 TYPES D EFFETS SUR LA SANTE Reconnaissance en MP : possible pour ~ 50 maladies dues à des agents biologiques, principalement pathologies infectieuses, Mais les tableaux ne couvrent pas l ensemble des risques infectieux, immunoallergiques ou toxiniques identifiés : Ex. : légionellose Ex. certains troubles respiratoires obstructifs. 7 18 19 24 28 40 45 46 53 54 55 56 68 76 77 80 86 87 88 92 96 66 66bis 90 Tableaux de MP liées à des agents ou produits biologiques Pathologies infectieuses 21 tableaux Tétanos * : infections par ou à Charbon Spirochétoses (leptospirose, maladie de Lyme) Brucelloses professionnelles Ankylostomose professionnelle * Bacilles tuberculeux et certaines mycobactéries atypiques * Virus des hépatites A, B, C, D, E Mycoses cutanées Rickettsioses (dont Fièvre Q) Poliomyélite * Amibes Rage professionnelle Tularémie * Agents infectieux ou parasitaires / milieu d hospitalisation Périonyxis et onyxis Kératoconjonctivites virales Pasteurelloses Ornithose-psittacose Rouget du porc * Streptococcus suis * Agents infectieux du groupe hantavirus Pathologies immuno-allergiques ou toxiniques 3 tableaux Rhinite et asthmes professionnels 9 Pneumopathies d'hypersensibilité Affections respiratoires / poussières textiles végétales
L EXPOSITION DES SALARIES Comment se transmettent les agents biologiques ou les composés biologiques? Chaîne de transmission RESERVOIR SORTIE TRANSMISSION PORTE ENTREE HÔTE 10
L EXPOSITION DES SALARIES RESERVOIR = la source, le lieu dans lequel s accumulent les agents biologiques. Peut être vivant ou inanimé : homme, animal, produits qui en sont issus, le sol, l eau, les objets, les vêtements RESERVOIR SORTIE TRANSMISSION PORTE ENTREE HÔTE 11
L EXPOSITION DES SALARIES TRANSMISSION Par contact Avec la peau ou les muqueuses (contact, dépôt, plaies) Par inoculation Par piqûre, coupure, morsure Par ingestion Directe Indirecte par portage à la bouche Par inhalation De particules d origine biologique en suspension dans l air = BIOAEROSOLS Norme EN13098 : 2000 Principale voie de transmission / lieux de travail RESERVOIR SORTIE TRANSMISSION PORTE ENTREE HÔTE 12
L EXPOSITION DES SALARIES HÔTE = Salarié à son poste de travail RESERVOIR SORTIE TRANSMISSION PORTE ENTREE HÔTE 13
BIOAEROSOLS : PRINCIPAUX EFFETS SUR LA SANTE Infections Respiratoires, digestives, cutanées, otites Par micro-organismes pathogènes ou opportunistes Pathologies immuno-allergiques : essentiellement respiratoires Asthme, rhinite, conjonctivite Pneumopathie d hypersensibilité (alvéolite) Par moisissures composés mycéliens - spores bactéries (actinomycètes) Pathologies non allergiques : effets toxiques Fièvre malaises maux de tête - irritations voies respiratoires - obstruction bronchique aigue Inflammation - Bronchite chronique diminution fonction respiratoire Par endotoxines et autres produits biologiques 14
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LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Nombreux salariés exposés aux risques biologiques, Cf. Enquête SUMER 2003 : 2,6 millions de salariés exposés à des risques biologiques soit ~15% des salariés. Pour SUMER 2010 : 22.2% des salariés exposés. Cf. fiche FACTS Agence européenne pour la sécurité et la santé au travail www.inrs.fr/risques/biologiques.html - Dossier thématique 16
LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Activités de soins, en contact avec des personnes ou des produits d origine humaine, 17
LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Activités en contact avec les animaux, Métiers de l agriculture : fermes d élevage, cultures de champignons, abattoirs volailles, 18
LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Agro-alimentaire et activités associées (laboratoires d analyses) : ex. production de saucissons secs, de fromages, industries de la pomme de terre, transport et stockage de produits animaux ou végétaux 19
LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Travaux en contact avec les déchets : ramassage et traitement déchets, tri Assainissement : traitement eaux usées, des boues d épuration, égouts, compostage 20
SECTEURS D ACTIVITES CONCERNES Travaux en contact avec les fibres ou poussières végétales ou animales, tissage, animaleries Bureaux, espaces confinés 21
SECTEURS D ACTIVITES CONCERNES Travaux en relation avec les installations de traitement d air : maintenance, hygiénisation des réseaux 22
SECTEURS D ACTIVITES CONCERNES Mais aussi : Opérateur de maintenance : intervention en milieu confiné humide (moisissures), sur installations souillées (endotoxines, moisissures ). Personnel de nettoyage dans tous les secteurs d activité, Archivistes, personnel administratif : présence de moisissures dans les archives, musées, Opérateurs usinage : fluides de coupe, Électriciens, géomètres : intervention en égouts, 23
Activité professionnelle Agents biologiques Exemples de maladies possibles Usines de recyclage pour papier, verre, matériaux synthétiques, d emballage Installations de compostage - Moisissures, en particulier Aspergillus fumigatus, actinomycètes - Bactéries Gram négatives, en particulier entérobactéries et entérovirus - Moisissures, en particulier Aspergillus fumigatus, actinomycètes - Bactéries sporulantes - Allergies, aspergillose, aspergillome - PHS (Pneumopathie d Hypersensibilité) - ODTS (syndrome toxique associé aux poussières organiques) - Infections telles que gastro-entérite - Allergies, aspergillose, aspergillome - PHS (Pneumopathie d Hypersensibilité) Installations de traitement des eaux d égouts - Bactéries, en particulier Gram négatives (Escherichia coli, Salmonella sp.) - Entérovirus et autres virus (par ex. virus de l hépatite A) - Salmonellose et autres infections telles que gastro-entérite, hépatite, etc. - ODTS Production d aliments Archives, musées, bibliothèques Industrie métallurgique (utilisation de fluides pour le traitement du métal) Industrie du traitement du bois - Moisissures / levures - Bactéries - Endotoxines - Enzymes - Moisissures - Endotoxines - Moisissures / Levures - Bactéries (en particulier Pseudomonas sp.) - Moisissures - Bactéries Gram négatives - Endotoxines - Allergies - ODTS - Irritations de la peau - Allergies - ODTS - Asthme bronchique - Infections pulmonaires - Infections suite à blessures - Allergies - PHS (Pneumopathie d Hypersensibilité) - ODTS Industrie du BTP (traitement de matériaux naturels : argile, paille, roseau ; rénovation de bâtiments) - Moisissures - Actinomycètes et autres bactéries - Endotoxines - Allergies - Infections - ODTS 24 Extrait de document Agence Européenne pour la Sécurité et la Santé au Travail
LES SECTEURS D ACTIVITE CONCERNES Risque transversal : nombreux secteurs d activité concernés, Expositions professionnelles multiples : risques biologiques infectieux, immuno-allergiques, toxiniques, Évaluation du risque difficile surtout hors milieux de soins. 25
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EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES BIOLOGIQUES Prendre en compte les risques biologiques, à intégrer dans la démarche globale d évaluation des risques, RESERVOIR PREVENTION Analyse des risques facilitée par l utilisation du concept de la chaîne de transmission : Objectif : interrompre la chaîne, le plus en amont possible. Etude des situations de travail Métrologie possible dans certains cas Sortie TRANSMISSION Porte d entrée SALARIE 27
Etude des situations de travail Sur le terrain, pour : RESERVOIR Identifier des sources de bioaérosols Caractériser des voies de transmission potentielles TRANSMISSION Basé sur la connaissance du process, des activités : milieu ouvert ou confiné, génération d aérosols, dispersion des aérosols l observation sur le terrain : EPI, organisation du travail, dispositifs de ventilation, conditions environnementales (T C, %HR), infrastructures les données médicales, scientifiques ou épidémiologiques 28
Etude des situations de travail SALARIE Identifier les personnes exposées Repérer les postes travail concernés les tâches effectuées Basé sur la connaissance des phases de travail : phases polluantes, opérations de maintenance l observation des différentes tâches effectuées : fréquences d exposition, nombre de personnes exposées. Configuration des postes de travail : proximité avec source de bioaérosols, moyens de prévention existants. 29
Caractérisation des expositions par des mesures Quand cela est techniquement possible : en terme de prélèvement ou d analyses On ne sait pas tout prélever ou analyser Ex. : virus, légionnelles dans l air, Quand cela est pertinent Ex. : micro-organismes pathogènes / dose infectieuse Ex. : prélèvements de surface 30
Caractérisation des expositions par des mesures Selon un objectif à définir au préalable : Définir des mesures de prévention, Mettre en place des actions correctives, Vérifier l efficacité des mesures mises en place, Selon une démarche prédéfinie : Définir une stratégie de mesurage, Établir un plan d échantillonnage, Réaliser les prélèvements de bioaérosols et effectuer analyses, Interpréter les résultats Faire des préconisations. 31
EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES BIOLOGIQUES 3 types de mesures de prévention : Agir sur la source d agents ou de produits biologiques Agir sur le mode de transmission Agir au niveau du salarié Les moyens de prévention existants : Conception des lieux ou situations de travail Techniques : ex. ventilation et assainissement de l air, confinement Organisationnels : ex. marche en avant, séparation des zones contaminées Hygiène collective (nettoyage, désinfection) ou individuelle 32
EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES BIOLOGIQUES Exemples de mesures de prévention des risques immuno-allergiques en centre de tri d ordures ménagères Agir sur la source de l infection Réservoir = déchets à trier Cas où on ne peut pas supprimer le réservoir ni agir sur son contenu - Limitation du développement des agents biologiques par des mesures d organisation du travail (augmenter la fréquence des collectes, réduire le temps de stockage des déchets ) et par un nettoyage régulier des postes. Agir sur le mode de transmission Transmission aérienne - Manutention des déchets au moyen d une chargeuse équipée d une cabine fermée, munie d un dispositif de ventilation et de filtration. - Capotage des convoyeurs et captage des poussières. - Ventilation adaptée de la cabine de tri manuel. Agir au niveau du salarié potentiellement exposé Si les mesures de ventilation ou de captage à la source ne suffisent pas à protéger les travailleurs, port d un masque de protection respiratoire. Laboratoire Extrait du des document Biocontaminants «Risque Biologique - LBC en milieu professionnel, INRS. 33
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Le Laboratoire des Biocontaminants: LBC - CRAMIF Mission : Détecter, caractériser et prévenir les risques biologiques aux postes de travail. Prestations : Assister les préventeurs à l analyse des risques biologiques en entreprise : conseil et assistance, sensibilisation, Estimer les expositions des salariés au cours de leur travail par des mesures : étude des situations de travail, prélèvements de bioaérosols, analyses des échantillons, Mener des études ciblées sur les expositions des salariés, par secteurs d activité. 35
FONCTIONNEMENT ACTUEL Personnel : Champ d intervention actuel : Prélèvements : IDF + province sur demande Analyses : tout échantillon en provenance des CARSAT ou sur demande 36
DEMARCHE GENERALE D INTERVENTION Réception de la demande de l agent de terrain (CRAMIF ou CARSAT) Etude de la demande, les objectifs Secteurs d activités, Données terrain, Données scientifiques, Objectifs recherchés Analyse des situations de travail pré-visite pour repérer la chaîne de transmission Identifier les sources d agents ou de produits biologiques Caractériser les voies de transmission Identifier les personnes exposées Caractériser les postes de travail les tâches effectuées 37
DEMARCHE GENERALE D INTERVENTION Caractérisation des expositions par des mesures Si pertinent : réalisation d une campagne de mesures Prélèvements Définir une stratégie de prélèvement : objectifs, plan de prélèvement (ambiance, individuel (GEH), polluants, techniques, nombre et durée de prélèvement, période de mesure ) Interprétation des résultats d analyse! : pas de VLEP mais des valeurs guides Recommandations pour la prévention Préconisations de mesures à mettre en place Ou suivi de l efficacité de mesures établies. 38
La métrologie : Points forts / Points faibles Apporter des données objectives sur des niveaux d exposition. Caractériser un danger : Recherche d une pollution d origine biologique Identification du polluant (bactéries, moisissures, toxines ) Repérage des sources de bioaérosols (procédés ou installations générateurs de bioaérosols) Quantifier les niveaux d exposition aux polluants biologiques Repérer les expositions critiques Identifier les opérations ou phases de travail exposantes Pas pour les risques infectieux. La présence des micro-organismes est aléatoire, variable selon de nombreux facteurs (météo, zones géographiques ). Pas de VLEP (mais des Valeurs Guides). Protocoles de prélèvements encore développement : peu de polluants biologiques testés. Pour les expositions par inhalation uniquement : prélèvements et analyses des bioaérosols, pas de matériaux, fluides ou surfaces. Peu de bibliographie sur des données d exposition (connaissances terrain) = outil pour le préventeur pour : caractériser le risque définir et prioriser les actions de prévention 39
POLLUANTS RECHERCHES Aujourd hui, certains bioaérosols : Endotoxines Bactéries cultivables Moisissures cultivables Mycotoxines : ochratoxines, fumonisines, aflatoxines Prélèvements d air uniquement Demain : D autres mycotoxines : zéaralénone, trichothécènes??? autres produits d origine biologique, selon le développement des techniques (ß-(1-3)-D-Glucans, ) Pour certains secteurs d activités où les bioaérosols ont été repérés et sont potentiellement à l origine d effets immunoallergiques ou toxiniques 40
METHODOLOGIE Protocoles : prélèvements et d analyses : INRS PRELEVEMENTS Impaction sur gélose - MAS 100 Impaction en milieu liquide - CIP10M Filtration sur cassette Filtration sur mousse ANALYSES Cultures microbiologiques Microscopie Dosages biochimiques 41
METHODOLOGIE Contraintes techniques : Air Echantillonnage Transport & conservation de l échantillon Analyses en laboratoire Résultats CONTRAINTES Préparation spécifique des supports (cassettes flores et endotoxines), Éviter la recontamination des échantillons, Transport réfrigéré pour limiter le développement des microorganismes, Analyse dans les 24H pour la microbiologie et les endotoxines, Délais de résultats / analyses microbiologiques 42
ANALYSE DES ECHANTILLONS Cultures microbiologiques Bactéries ou moisissures sur milieux nutritifs Pour dénombrer et identifier les micro-organismes Choix du milieu / T C incubation en fonction du micro-organisme recherché Valable uniquement pour les micro-organismes cultivables 43
ANALYSE DES ECHANTILLONS Microscopie Optique Pour compter, identifier ou caractériser les microorganismes 44
ANALYSE DES ECHANTILLONS Techniques biochimiques / endotoxines Pour détecter et doser les endotoxines LAL Lysat d Amoebocytes de Limules : endotoxines 45
ANALYSE DES ECHANTILLONS Techniques biochimiques / Mycotoxines Pour doser les mycotoxines A l aide de colonnes d immunoaffinité suivies d une HPLC 46
Prélèvements : Polluants / secteurs d activité Poussières Endotoxines Flores Autres Centres de tri de déchets Collecte des déchets Plateforme de compostage Station épuration, Traitement boues épuration humides, égouts, hydrocurage Actinomycètes A.fumigatus Séchage de boues d épuration Travaux en contact de fibres végétales : stockage, traitement des fibres, tissage Abattoir de volailles, travaux en contact avec fientes et/ou plumes. Stockage / transport de grains Mycotoxines IAA : traitement pommes de terre, légumes Travaux en contact avec épices, thé, café, cacao, fruits à coque - transport, stockage, mise en œuvre, transformation Mycotoxines Usinage Travaux utilisant les fluides de coupe Archives, musée Laboratoire Tableau n 1 des : Type Biocontaminants de polluants potentiellement - LBC présents par secteurs d activité 48
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